三甲基苯基磷酸酯对神经毒性酯酶的抑制及其酶促动力学分析

以可使人和敏感动物产生迟发性神经毒性的有机磷化合物三甲基苯基磷酸酯（TOCP）为测试药物,研究其在体外对成年产卵来航母鸡不同神经组织神经毒性酯酶（NTE）活性抑制的敏感性及其抑制的动力学．结果表明,外周神经NTE对于TOCP的抑制比中枢神经NTE敏感得多．TOCP对鸡脑、脊髓和坐骨神经中NTE抑制的I50值．分别为：1．9323、2．3950和0．0035mmol／L．NTE酶促动力学研究显示,鸡脑NTE催化分解底物戊酸苯酯（PV）的Vmax为62．10nmol·min-1·mg-1,Km为0．92mmol／L．TOCP对鸡脑NTE的抑制属竞争性抑制类型,并有"底物抑制"现象．     

三甲基苯基磷酸酯对神经毒性酯酶的抑制及其酶促动力学分析

以可使人和敏感动物产生迟发性神经毒性的有机磷化合物三甲基苯基磷酸酯（ＴＯＣＰ）为测试药物,研究其在体外对成年产卵来航母鸡不同神经组织神经毒性酯酶（ＮＴＥ）活性抑制敏感性及其抑制的动力学,结果表明,外周神经ＮＴＥ对于ＴＯＣＰ的抑制比中枢神经ＮＴＥ敏感得多,ＴＯＣＰ对鸡脑、脊髓和坐骨神经中ＮＴＥ抑制的Ｉ５０值分别为：１．９３２３、２．３９５０和０．００３５ｍｍｏｌ／Ｌ、ＮＴＥ酶促动力学研究显示,鸡脑Ｎ     

甲胺磷诱发母鸡迟发性神经毒性模型

以成年鸡为实验动物,对甲胺磷原药诱发鸡的迟发性神经毒性进行了研究。检测了甲胺磷对鸡脑神经病靶标酯酶（NTE）的体外抑制情况以及急性中毒后期鸡神经组织NTE活性变化。毒性试验发现,甲胺磷对京白母鸡（Gallus domestics）的毒性主要表现为急性中毒,未见有明显的迟发性神经毒性症状。结果表明,本实验未能通过经口及经皮两种染毒途径在母鸡上建立甲胺磷诱发的迟发性神经毒性模型。     

解毒酶基因cDNA克隆和高效表达

昆虫抗药性的一个重要机制是其产生的解毒酶可以将大剂量的农药脱去毒性[1] 。酯酶活性升高是库蚊对有机磷杀虫剂抗性的主要机制 ,与酯酶Ｂ1有关的抗性最高[2 ,3] 。酯酶与有机磷杀虫剂有非常强的结合力 ,可以迅速与之形成强结合体[4 ] 。酯酶的解毒作用具有很高的手性专一性 ,在有机磷化合物 ,特别是高毒的有机磷化合物的解毒作用中非常重要[1] 。高效表达解毒酶基因 ,将昆虫解毒酶用于人畜解毒的目的研究还未见报道。本文报道在大肠杆菌中高效表达昆虫解毒酶 ,并将产物用于实验动物有机磷中毒的解毒研究 ,为昆虫抗性相关基因的开发利用提…     

有机磷化合物诱导的迟发性神经毒性的研究

很多有机磷化合物了易使人和动物产生急性事毒性,还能引发一种迟发性毒性,即“有机磷化合物诱导的迟发性多发性神经病”。本文综述了有关ＯＰＩＤＰ的症状学,病理学和生物化学的研究及其进展。     

口服三邻甲苯基磷酸酯对成年母鸡卵壳腺ATP酶及血清β—葡萄糖醛酸酶 …

本研究测定了成年来航母鸡口服ＴＯＣＰ（７５０ｍｇ／ｋｇ）引起的迟发性神经毒性,卵壳腺钙ＡＴＰ酶及钙镁ＡＴＰ酶的活性。在为期１０天的试验中,染毒鸡在给药后的第８－１０天出现迟发性神经毒性症状：表现为轻度步态失调,而对照鸡自至至终未见有此类症状表现。     

神经病靶标酯酶的特性

神经病靶标酯酶(NTE)是在研究有机磷引起的迟发性神经病的过程中被发现的。研究表明,NTE是一种主要存在于神经元内质网上的跨膜蛋白,其本质是具有磷脂酶B催化功能的磷脂酶,在细胞内调节磷脂酰胆碱的代谢。NTE是哺乳动物胚胎发育所必需的蛋白质,脑特异性缺失NTE会导致神经退行性症状的出现。NTE作为有机磷的作用位点,在不同的生物中可能通过不同的机制引发不同的毒性症状。     

神经病靶标酯酶

某些有机磷酸酯 (ｏｒｇａｎｏｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｅｓｔｅｒｓ ,ＯＰｓ)可使人及其他敏感动物患一种迟发性神经病 ,即有机磷诱导的迟发性多神经病(ｏｒｇａｎｏｐｈｏｐｈｏｒｕｓｅｓｔｅｒ ｉｎｄｕｃｅｄｄｅｌａｙｅｄｐｏｌｙｎｅｕ ｒｏｐａｔｈｙ,ＯＰＩＤＰ) ,这种病以步态失调、下肢麻痹以及脊髓与外周神经轴突变性为基本特征 ,症状出现前一般有 1～ 3周的潜伏期。一般认为 ,ＯＰＩＤＰ是由于神经毒性ＯＰｓ共价修饰神经病靶标酯酶 (ｎｅｕｒｏｐａｔｈｙｔａｒｇｅｔｅｓｔｅｒａｓｅ ,ＮＴＥ)引起 ,ＮＴＥ的催化活性被抑制和…     

敌百虫对鸡诱导迟发性神经毒性的研究

通过敌百虫对成年来航母鸡的毒性试验发现，敌百虫对成年母鸡的毒性机理为急性中毒，未见有迟发性神经毒性作用。     

库蚊羧酸酯酶研究进展

在昆虫对有机磷杀虫剂抗性的研究中 ,羧酸酯酶 (ｃａｒｂｏｘｙｌｅｓｔｅｒａｓｅｓ)的过量产生是库蚊对有机磷杀虫剂 (ＯＰ)产生抗性的主要机制。羧酸酯酶能够与进入昆虫体内的有机磷杀虫剂快速结合 ,将杀虫剂在到达靶标作用位点前阻隔或降解 ,使其无法发挥原有的杀伤效用。1 .羧酸酯酶的命名库蚊中羧酸酯酶的命名一般根据其水解α 和 β 乙酸萘酯的先后顺序和电泳迁移率不同而定 ;在淀粉电泳中 ,当等量α 乙酸萘酯(α ＮＡ)和 β 乙酸萘酯 (β ＮＡ)同时存在时 ,优先水解α ＮＡ呈蓝色的为酯酶Ａ ,优先水解 β ＮＡ呈红色的为酯酶Ｂ[1] …     

有机磷对抗拟除虫菊酯家蝇的毒力

测定敏感、抗溴氰菊酯(Del-R)、抗氯菊酯(2Cl-R)的家蝇品系对有机磷杀虫剂敌敌畏、辛硫磷及马拉硫磷的LD₅₀,α-乙酸萘酯（α-NA）酯酶动力学,酯酶的活性和酯酶的抑制作用。Del-R和2Cl-R的家蝇品系对三种有机磷杀虫剂的抗性倍数为0.966～7.190倍,均为低抗水平。三个家蝇品系的羧酸酯酶活性水平与抑制中浓度存在正相关性,说明羧酸酯酶在抗拟除虫菊酯家蝇对有机磷杀虫剂的抗性中起一定的作用。     

松墨天牛幼虫体内神经毒性酯酶和乙酰胆碱酯酶对甲胺磷敏感性的比较

松墨天牛Monochamus alternatus Hope是传播松材线虫Bursaphelenchus xylophilus Nickle的主要媒介昆虫,在其化学防治中经常使用有机磷杀虫剂,而这类杀虫剂有些可通过作用于神经毒性酯酶（neurotoxic esterase, NTE）使敏感的脊椎动物产生迟发性神经毒性。为了深入理解有机磷杀虫剂对害虫毒杀作用机理,增强对昆虫体内NTE活性的了解,我们在松墨天牛中开展了相关的研究。通过差异测定法和经典的乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase, AChE）活性测定方法,分别测定了松墨天牛幼虫体内NTE和AChE的活性。结果发现,在松墨天牛体内存在NTE活性,其头部的NTE活力为2.80±0.30 nmol·min^-1·mg^-1,比脂肪体高出了近10倍,但仍较鸟类等脊椎动物为低。体内实验显示,松墨天牛体内NTE可被甲胺磷所抑制; 但在体外实验条件下,甲胺磷对来自松墨天牛头部的NTE活性并没有产生明显抑制作用,而此浓度下的甲胺磷对AChE表现出较高水平的抑制作用。表明松墨天牛体内NTE和AChE对甲胺磷的敏感性完全不同。     

口服三邻甲苯基磷酸酯对成年母鸡卵壳腺ATP酶及血清β—葡萄糖醛酸酶活性影响

本研究测定了成年来航母鸡口服ＴＯＣＰ（７５０ｍｇ／ｋｇ）引起的迟发性神经毒性、卵壳腺钙ＡＴＰ酶及钙镁ＡＴＰ酶的活性。在为期１０天的试验中,染毒鸡在给药后的第８～１０天出现迟发性神经毒性症状：表现为轻度步态失调,而对照鸡则自始至终未见有此类症状表现。染毒后７～１０天取样,试验鸡的卵壳腺钙ＡＴＰ酶及钙镁ＡＴＰ酶活性与对照相比无明显变化（Ｐ＞００５）,血清β葡萄糖醛酸酶活性两组间亦无明显差异（Ｐ＞００５）,以上结果表明,虽然ＴＯＣＰ可诱导成年母鸡产生迟发性神经毒性,并影响其产蛋性能,导致产包括软壳蛋在内的异常蛋,但其发生机理可能与卵壳腺的钙ＡＴＰ酶活性无直接关联,至少在接触药物７～１０天范围尚监测不到药物对卵壳腺钙ＡＴＰ酶及钙镁ＡＴＰ酶活性的影响。此外,在上述取样时间点,亦未见有血清β葡萄糖醛酸酶活性的改变,提示ＯＰＩＤＰ的发生机制不涉及β葡萄糖醛酸酶。     

溶血卵磷脂对小鼠及鸡脑突触体内钙离子浓度的升高作用

鸡是有机磷引起的迟发性神经病(OPIDN)的最常用的动物模型,OPIDN的发生被认为与神经病靶酯酶(NTE)的抑制有关。本研究比较了NTE的生理性底物溶血卵磷脂(LPC)对鸡和小鼠脑突触体内钙离子浓度的影响。LPC能够浓度依赖性地引起小鼠和鸡脑突触体内游离钙浓度升高,且在两种动物来源的突触体上的反应趋势和幅度基本相同。去掉突触体悬液中Ca2 后,同样在LPC的作用下,突触体内钙浓度不但没有升高反而明显下降,这在两种来源的突触体上的结果相同。L型钙通道阻断剂维尔帕米和非特异性钙通道阻断剂氯化镉均对LPC引起的小鼠和鸡脑突触体内钙升高都没有阻断作用。这些结果表明,LPC主要通过其对膜的破坏作用引起小鼠和鸡脑突触体内的游离钙浓度升高,且在小鼠和鸡脑突触体内钙离子浓度升高的幅度和机制方面没有种属差异。本研究的结果表明:鸡和小鼠在OPIDN中的症状差异并非由于LPC介导突触体内钙超载的强度不同所导致。     

对氧磷酶及其生理功能的研究进展

对氧磷酶是酯酶的一种,可能和人类的某些心血管疾病,如动脉粥样硬化的发生有关,研究证实,对氧磷酶还具有对抗细菌内毒素的毒性及降解有机磷化合物类神经毒剂的作用。     

有机磷药剂对棉铃虫羧酸酯酶的抑制作用

该文分别以。A-乙酸萘酯和β-乙酸萘酯为底物比较了22种常用有机磷药剂对棉铃虫 Helicoverpa armigera羧酸酯酶的抑制作用。结果表明,棉铃虫羧酸酯酶对底物空间构型比较敏感,敌敌畏、对氧磷、地亚农、喹硫磷、马拉氧磷、异稻瘟净、增效磷、杀螟松抑制棉铃虫羧酸酯酶的能力较强。有机磷药剂抑制棉铃虫羧酸酯酶能力与其化学结构显著相关,氧化型的有机磷抑制能力明显强于硫代型的有机磷;乙氧基取代的有机磷抑制能力明显强于甲氧基取代的有机磷。     

氧化胁迫在硝基苯致小鼠神经毒性中的作用

目的:探讨氧化胁迫在硝基苯致小鼠神经毒性中的作用。方法:用不同剂量的硝基苯对小鼠进行灌胃染毒,每天1次,共30d;用碱性羟胺比色法测定小鼠脑乙酰胆碱酯酶活性,用试剂盒检测脑抗氧化功能。结果:试验组小鼠的中毒症状随着染毒剂量的增加和时间的延长而越来越明显;乙酰胆碱酯酶活性降低;与对照组相比,脑各项抗氧化指标均表现出显著或极显著差异。结论:氧化胁迫在硝基苯发挥神经毒性过程中起重要作用。     

有机磷农药降解酶及其基因工程研究进展

有机磷农药是国内外使用最广泛的农药之一,为农业丰收做出了很大贡献。但是,有机磷农药具有抑制人体乙酰胆碱酯酶的功能,对人存在着程度不同的毒性。有机磷农药降解酶可降解有机磷农药分子,破坏有机磷农药的磷酯键而使其脱毒。综述了有机磷农药降解酶及其特性,以及相关基因的分离克隆和基因工程研究进展。     

草甸棕壤水稻田磷酸酶活性及对施肥措施的响应

1　引　　言土壤有机磷是一种重要的土壤磷素资源 .我国大部分土壤中有机磷占土壤全磷的 2 0 %～ 50 % ,但在森林和草原植被下的土壤可占到 50 %～ 80 % [9].土壤磷酸酶活性直接影响到有机磷库的利用 ,即磷酸酶活性是衡量土壤肥力 ,尤其是土壤有效磷水平的一个重要参考指标[15 ].土壤磷酸酶(Phosphatases)是催化含磷有机酯和酐水解的一类酶的总称 ,其活性高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性 .其中 ,磷酸单酯酶 (酸性、中性、碱性磷酸酶 )活性一直是土壤磷酸酶研究的重点[18].由于土壤中有机磷化合物的复杂性 ,除了磷酸单…     

扩散性抑制对脑缺血后海马迟发性神经元死亡的影响

目的为了研究阻断大鼠局灶性脑缺血诱导的扩散性抑制对同侧海马迟发性神经元死亡的影响。方法颈内动脉插线法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,采用电生理学方法记录扩散性抑制波,尼氏染色和TUNEL染色检测海马迟发性神经元死亡;观察阻断局灶性脑缺血再灌注诱导的扩散性抑制对海马迟发性神经元死亡的影响。结果不给予SD阻断剂,大脑中动脉缺血模型有39%的动物出现海马迟发性神经元死亡;用MK-801阻断扩散性抑制后仅10%的动物出现海马迟发性神经元死亡,机率明显减小。结论局灶性脑缺血引起的海马迟发性神经元死亡可能与扩散性抑制由缺血区不断向远隔部位播散有关。