感染病毒的小麦全蚀菌的超微结构

将感染病毒的小麦全蚀菌山东烟台株培养 20天的菌体细胞,进行超微结构的研究。于电镜下观察到球状病毒颗粒,平均直径23—30nm,多是无规则松散的分布于胞质中;或紧密聚集于液泡、线粒体周围;或排列成线状;或7—8个颗粒排列成环状。病毒仅分布于细胞质中,细胞核、脂肪体内均未见病毒颗粒。病毒浓度在较老的菌体内有增加的趋势。全蚀菌的菌丝细胞壁有三层,外层电子致密内含纤维状物,内层电子较为透明,中层为一电子致密度很深的狭窄夹层。壁的厚度不均,外缘不规则;在菌丝体产生隔膜的早期阶段,于隔膜附近有1—3个外被膜结构的沃罗宁体 Woronin body,隔膜形成的后期,见电子致密物质沉积在核膜孔上,形成中的隔膜顶端为尖状突起向基部逐渐增宽略成金字塔形。     

来源不同V-C组不同的小麦全蚀病菌病毒的特性

从地理位置不同,V—C组不同的13株小麦全蚀病菌中分离到直径23—36纳米的病毒。聚丙烯酰胺凝脉电泳表明这些菌株中的病毒dsRNA的组分及分子量不同。泰安株病毒有分子量为3.45,2.95,1.60,1.52,1.30,1.25,1.15,1.00,<1.00×10~6的9个dsRNA,而浙江、湖北菌株仅有一个组分、分子量为3×10~6。多数病毒衣壳多肽的的分子量为66×10~3—73×10~3。泰安菌株与烟台菌株病毒抗血清除与张家口菌株、青海菌株无反应外与其它菌株病毒均有反应,但在免疫双扩散中抗血清的滴定度不同。     

用核酸斑点杂交法比较油桐尺蠖核型多角体病毒与某些昆虫杆状病毒的同源性

有关核型多角体病毒基因同源性的研究报道不多,结果也不甚一致。目前,国内外普遍用SDS-PAGE法分析昆虫杆状病毒结构多肽,以限制性内切酶谱法测定基因组大小,借此区分来自不同宿主的病毒株,和基因组密切相关     

栗疫菌低毒力dsRNA与真菌病毒dsRNA的序列同源性

以我国栗疫菌［Ｃｒｙｐｈｏｎｅｃｔｒｉａ（＝Ｅｎｄｏｔｈｉａ）ｐａｒａｓｉｔｉｃａ］低毒力菌株ＥｐＣ１４０（广西）的［γ─￣３２Ｐ］ＡＴＰ末端标记ｄｓＲＮＡ作探针,与５种真菌病毒ｄｓＲＮＡ进行分子杂交。探针可与紫孢侧耳病毒（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓｓｅｐｉｄｕｓｖｉｕｓ）和小麦全蚀菌病毒（Ｇａｅｕｍａｎ─ｎｏｍｙｃｅｓｇｒａｍｉｎｉｓ·ｖｉｒｕｓ）的ｄｓＲＮＡ杂交,但不能与黑曲霉病毒（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒｖｉｒｕｓ）、产黄青霉病毒（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｃｈｒｙｓｏｇｅｎｕｍｖｉｒｕｓ）和稻瘟菌病毒（Ｐｙｒｉｃｕｌａｒｉａｏｒｙｚａｅｖｉｒｕｓ）的ｄｓＲＮＡ杂交。当以低毒力菌株ＥｐＣ３２（云南）作探针时,结果相同。     

一种中国发生的真菌传小麦花叶病毒RNA－13＇末端核苷酸序列分析

以采自河南的真菌传小麦花叶病毒（ＦＷＭＶ－Ｃ）为材料,抽提病毒ＲＮＡ,合成互补ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）。对杂交筛选所得ｃＤＮＡ克隆进行亚克隆及序列分析,结果表明,亚克隆ｐＧＳＩ含有一个长度为８９１个核苷酸的不完整开放阅读框架（ＯＲＦ）和长度为２５８个核苷酸的３＇末端非编码区（ＮＴＲ）,并带有Ｐｏｌｙ（Ａ）尾序。此段序列与大麦黄花叶病毒（ＢａＹＭＶ）及法国报道的一种小麦梭条花叶病毒（ＷＳＳＭＶ－Ｆ）的ＲＮＡ－１３＇末端分别具有６７．６％和６９．９％的同源性。由所测序列编码区（１－８９１ｎｔ）可推导产生２９６个氢基酸,并与ＷＳＳＭＶ－Ｆ及ＢａＹＭＶ外壳蛋白氨基酸序列分别具有７５．９％和７１％的同源性。此结果表明,ＦＷＭＶ－Ｃ为另外一种不同于ＷＳＳＭＶ－Ｆ的大麦黄花叶病毒组（Ｂａｙｍｏｖｉｒｕｓ）病毒,所测基因组片段应为ＲＮＡ－１３＇末端序列,其中可能包括了病毒全长外壳蛋白编码区域。     

栗菌低毒力dsRNA与协菌病毒dsRNA的序列同源性

以我国栗疫菌（Ｃｒｙｐｈｏｎｅｃｔｒｉａ（＝Ｅｎｄｏｔｈｉａ）ｐａｒａｓｉｔｉｃａ）低毒力菌株ＥｐＣ１４０（广西）的（γ－＾３２Ｐ）ＡＴＰ末端标记ｄｓＲＮＡ作探针,与５种真菌病毒ｄｓＲＮＡ进行分子杂交。探针可与紫孢侧耳病毒（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ ｓａｐｉｄｕｓ ｖｉｒｕｓ）和小麦全蚀菌病毒（Ｇａｅｕｍａｎ－ｎｏｍｙｃｅｓ ｇｒａｍｉｎｉｓ．ｖｉｒｕｓ）的ｄｓＲＮＡ杂交,但不能与黑曲霉病毒（Ｐｙｒｉｃ     

葡萄孢菌真菌病毒研究进展(综述)

分析寄生于葡萄孢中真菌病毒的种类及其对寄主真菌的影响,描述其中5种病毒的形态及基因组结构,根据葡萄孢真菌病毒的研究现状提出未来研究方向,为葡萄孢真菌病毒的深入研究和利用提供参考。     

两株蓖麻蚕核型多角体病毒DNA同源性的研究

两株不同来源的蓖麻蚕核型多角体病毒(ArscsNPV和ArNPV)经提纯后,使用SDS—苯酚抽提病毒核酸,并使用限制性内切酶EcoRI,BamHI酶解后,用分子杂交方法与缺口平移标记的ArscsNPV-DNA探针杂交,分析了两株蓖麻蚕NPV病毒核酸的同源性。EcoRI酶解的ArNPV-DNA产生8个片段,其中5个片段能与ArscsNPV-DNA探针杂交。BamHI酶解ArNPV-DNA产生7个片段,其中6个片段能与ArscsNPV-DNA探针杂交。结果表明:两株蓖麻蚕NPV之间病毒核酸具有很高的同源性。使用斑点杂交方法分析了ArscsNPV与ArNPV,柞蚕NPV及家蚕NPV之间的核酸同源性,结果表明:ArscsNPV与ArNPV,柞蚕NPV具有同源性。而与家蚕NPV无核酸同源性。     

我国和欧美洲栗疫菌低毒株dsRNA同源性比较

在发现我国栗疫苗(Cryphonectria parasitica=Endothia parasitica)含dsRNA低毒力菌株基础上,分别以国内菌株EpC140和EpC32、欧洲低毒株Ep713的dsRNA为探针,同欧洲、美洲及亚洲低毒力菌株dsRNA进行分子杂交,结果表明亚洲株同欧洲株之间有序列同源性,同美洲株之间无序列同源性.     

检测烟草中烟草花叶病毒的RNA斑点杂交法

用普通烟草花叶病毒OM株3′-端约2kb的cDNA为探针,探索了用RNA斑点杂交法对烟草组织中烟草花叶病毒RNA进行检测的条件。这些条件包括用分子杂交法观察云南烟区和上海烟草上分到的烟草花叶病毒与OM株的同源性,从烟草组织中提取烟草花叶病毒的几种方法的比较,使RNA有效地固定在硝酸纤维素滤膜上的方法,烟草组织中是否有干扰RNA固定和杂交的物质,斑点杂交方法检测烟草花叶病毒的特异性、灵敏度等。     

禾谷多粘菌( Polymyxa graminis )侵染及传毒体系的研究

在人工气候箱内,以小麦为寄 主建立了专性寄生禾谷多粘菌（Ｐｏｌｙｍｙｘａ ｇｒａｍｉｎｉｓ）的侵染体系,ｇｒａｍｉｎｉｓ能够快速大量繁殖,生活史缩短为１３￣１５ｄ。简化了单孢子堆分离以及病根表面消毒等分离纯化方法,对接种的菌源材料、寄主苗龄、温度、ｐＨ值及营养液成分等影响因素进行了测定,优化完善了Ｐ．ｇｒａｍｉｎｉｓ的砂培条件。建立了针对小麦黄花叶病毒（ｗｈｅａ４ｔ ｙｅｌｌｏｗ ｍｏｓａｉｃ ｖ     

土壤微生物PCR及分子杂交检测

ＰＣＲ技术在环境微生物的检测方面已得到越来越广泛的应用,Ｓｔｅｆａｎ等［１］利用ＰＣＲ技术检测土壤中的转基因细菌,后来用于检测土壤中不可培养的微生物［２］,跟踪环境中的特定细菌或ＤＮＡ［３］,揭示土壤生态系统的基因多样性［４］等。利用ＰＣＲ技术来检测…     

鼻咽癌Epstein-Barr病毒的原位分子杂交研究

应用Epstein-Barr病毒编码的小RNA－1（Epstein-Barr virus encoded small RNA-1,EBER-1)分子探针进行原位分子杂交,检测沈阳地区鼻咽癌的Epstein-Barr病毒存在状况及意义。结果发现：EBER－1杂交信号定位于鼻咽癌的癌细胞核,在正常的鼻咽粘膜上皮细胞、间质细胞、粘液腺及淋巴细胞均为阴性。在53例鼻咽癌病例中,37例阳性,阳性率为69.8%。EBER－1的阳性表达与鼻咽癌的分化程度呈负相关,与患的生存期未见明显关系。提示：应用EBER－1分子探针可进行回顾性研究：EB病毒的存在与鼻咽癌的分化程度成负相关。     

原位杂交检测石蜡包埋组织中丙型肝炎病毒RNA

为了提高ＨＣＶＲＮＡ的原位杂交检出率,我们应用地高辛标记ＨＣＶ５＇非编码区ｃＤＮＡ作探针,采用原位分子杂交法对９６Ｎ肝硬变,１０２例肝细胞肝癌进行了ＨＣＶＲＮＡ检测,并结合不同年份标本中ＨＣＶＲＮＡ的检出率,探讨ＨＣＶＲＮＡ在肝脏的分布及其丢失问题．结果显示ＨＣＶＲＮＡ定位于肝细胞和肝癌细胞胞浆内,肝脏其它细胞未见明确阳性杂交信号。ＨＣＶＲＮＡ杂交阳性细胞呈灶状和弥漫分布,正常对照、替代、空白对照为阴性,在不同年份肝硬变及肝细胞肝癌中两两比较表明新近包埋蜡块组织较陈旧蜡块组织ＨＣＶ　ＲＮＡ检出率明显高。本文结果证实ＨＣＶＲＮＡ存在于肝细胞和癌细胞的胞浆内,未见肝内其它细胞阳性,还发现ＨＣＶＲＮＡ在肝硬变、肝细胞癌中的检出率随保存时间的延长,其阳性检出率明显降低,表明ＨＣＶＲＮＡ在蜡块中存在明显的降解,应尽可能选用近期标本、为临床分析ＨＣＶ感染,ＨＣＶ与肝硬变、肝细胞肝癌的关系提供更客观的数据。