军曹鱼营养需求与饲料研究进展

目前, 养殖鱼类已成为满足人类对水产品需求的主要来源。军曹鱼(Rachycentron canadum)具有生长速度快、肉质细嫩鲜美、营养价值高等特点, 已成为我国南方重要的海水网箱养殖鱼类。然而, 目前饲养军曹鱼仍主要依靠冰鲜杂鱼, 特别是大规格鱼的养殖, 这严重制约其养殖业的健康发展, 研发适合不同生长阶段需要的配合饲料非常必要。文章重点总结了军曹鱼对蛋白质、脂肪、氨基酸、脂肪酸、微量营养素等的需求, 饲料中鱼粉和鱼油替代研究, 饲料添加剂应用及其饲料产业发展现状, 以期为军曹鱼营养需求和配合饲料开发的深入研究提供参考。     

剑尾鱼近交系遗传纯度的RAPD分析

目的　分析近交系剑尾鱼 (Xiphophorushelleri)的遗传纯度 ,以指导剑尾鱼实验动物化的培育工作。方法　应用经过筛选的 2 9条随机引物对剑尾鱼的第 19代近交系 12尾剑尾鱼个体基因组DNA进行RAPD扩增 ,计算近交系个体间的相似系数及遗传距离。结果　筛选的 2 9条引物共扩增出 30 6条带 ,扩增片段的大小在 0 2 - 3kb之间。其中多态性带 2 9条 ,多态性带频率在 0～ 5 0 0 0 %之间 ,平均为 9 48%。近交系剑尾鱼不同个体拥有相同条带的比率较高。计算得到近交系的平均相似系数 (S)为 0 9839(0 973～ 0 997) ,平均等位基因频率 ( q)为 0 8731,最低平均杂合率 ( H)为 0 12 6 9。 结论　剑尾鱼第 19代近交系有较高的遗传纯合度。     

水生实验动物剑尾鱼的DNA指纹图谱构建

目的剑尾鱼是由原良种委员会审定并由农业部公布的水生实验动物,在遗传学研究、水环境污染监测、细菌性疾病研究方面显示出较好的应用前景。为了对剑尾鱼选育系进行种质资源监测、区分选育系与非选育以及鉴定近交系纯度,本研究采用微卫星DNA进行水生实验动物剑尾鱼的指纹图谱构建。方法根据相关报道设计合成了50对微卫星引物,对几个剑尾鱼品系的种质资源进行检测,筛选品系间差异性引物;确立剑尾鱼核心引物,用EXCEL散点图绘制DNA指纹图谱模式图;并将数字化指纹数据输入珠江水产研究所鱼类种质鉴定软件V1.0,形成剑尾鱼标准化指纹图谱鉴定数据库。结果共获得剑尾鱼品系间特异标记5个可用于剑尾鱼近交系鉴定,确立46个微卫星标记为核心引物,构建剑尾鱼选育系RR-B系、RW-H系和非选育的野生品种的DNA指纹图谱。结论本研究筛选出的微卫星标记与构建的指纹图谱,可用于剑尾鱼3个品种间的品种鉴定、纯度检测及遗传监测。     

剑尾鱼线粒体细胞色素b基因的序列分析

目的　克隆和测定剑尾鱼 (Xiphophorushelleri)线粒体细胞色素b基因 (cytb)的全序列。方法　提取剑尾鱼肝脏的总DNA。设计合成特异引物进行PCR扩增。扩增产物经琼脂糖电泳检测、纯化后克隆到pGEM Teasyvectorsystem中的T载体上 ,筛选转化子 ,提取质粒 ,酶切鉴定。挑取重组质粒pGEM T xhcytb 11进行序列测定。结果　获得了剑尾鱼线粒体cytb基因的全序列 ,共 114 0bp。结论　用BLAST与GenBank中的线粒体DNA序列进行比较 ,显示剑尾鱼与其他鱼类的cytb基因具有较高的同源性 ;根据剑尾鱼与其他 13种鱼的cytb基因序列同源性所建立的进化树 ,与传统的分类地位基本吻合     

鲟营养需求与饲料研究进展

鲟(Sturgeons)是我国重要的经济养殖鱼类之一,最近几年,我国鲟养殖总产量一直高居世界第一。目前除了一部分开口饲料从国外进口外,鲟其他生长阶段的饲料均采用国产鲟饲料。但国产饲料质量参差不齐,造成鲟生长速度差异较大,甚至导致鱼体抗病力下降。文章对其能量、蛋白质、脂肪、碳水化合物、矿物盐类、维生素需求量,以及蛋白源、脂肪源和添加剂的研究进展进行了综述,以期为鲟营养需求的深入研究和配合饲料的合理配制提供参考依据。幼鲟对蛋白质的适宜需求量约为36%—40%,赖氨酸和蛋氨酸需求量分别为2.80%和1.13%,蛋能比为18—22 mg/kJ,脂肪的需求量约为11.1%—35.7%,碳水化合物约为11%—35%,磷为0.50%—0.87%;鲟能较好地利用动植物蛋白原料和植物油,一些功能性添加剂有促生长和提高免疫的功效,关于维生素和矿物盐需求的研究还不够全面。     

不同粒径微塑料对剑尾鱼肠道消化、抗氧化及免疫酶活性影响

研究表明,微塑料对生物体具有不利影响。本研究以剑尾鱼Xiphophorus helleri为实验对象,将其暴露于不同粒径（0、1μm、5μm、1μm与5μm按颗粒数1∶1混合粒径）、不同浓度（0、1×10⁶粒/L、1×10⁷粒/L）聚苯乙烯微塑料水环境72 h后,测定其消化酶、抗氧化酶及免疫酶活性。与对照组相比,各暴露组肠道淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶活性均显著升高（P<0.05）,超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性显著下降（P<0.05）,过氧化氢酶活性显著升高（P<0.05）,丙二醛和溶菌酶活性显著升高（P<0.05）。微塑料急性暴露会干扰剑尾鱼对食物的消化吸收,并影响其肠道抗氧化酶和免疫酶的活性。     

实验用鱼遗传质量控制及标准化

在遗传学及其他生命科学研究领域, 实验用鱼已成为一类应用越来越广的实验动物, 但是尚缺少标准化的质量控制标准和监管。在我国, 实验动物实行严格的许可证制度和质量监督制度。实验用鱼遗传质量控制标准是实验用鱼质量控制的基础。为了规范实验用鱼的遗传质量, 避免实验用鱼种质退化、遗传漂移, 导致实验结果误差, 开展了本标准的研究。依据《实验动物管理条例》, 参考国内外实验用鱼遗传学相关的研究成果, 结合我国实验用鱼生产和使用的实际情况, 在全面收集、分析实验数据和广泛征询专家意见的基础上, 以实验用斑马鱼和剑尾鱼遗传质量控制为规范对象, 研究制定了实验用鱼遗传质量控制标准, 供科研工作者参考、讨论。本标准对实验用斑马鱼和剑尾鱼的遗传分类及命名原则、实验用鱼的繁殖方法、近交系和封闭群的遗传质量监测进行了规范。新标准将为实验用鱼的使用和管理提供理论支撑。     

不同饲料营养对池塘养殖长吻(鱼危)生长性能和鱼肉品质的影响

研究通过90d的投喂实验研究不同配方饲料对池塘养殖长吻(鱼危)(Leiocassis longirostris Günther)生长性 能和鱼肉品质的影响.实验使用5种饲料 (Cont:对照、HP:高蛋白、HC:高糖、HL:高脂和HE:高能). 结果发现:HC组鱼体生长最差,而HP组特定生长率(SGR)和饲料效率(FE)都最高.鱼体水分和脂肪含量变 化趋势相反,HL组最低,HE组略高,HP组最高.鱼体脂肪主要分布于内脏,在HL和HE组显著增高,导致 出肉率(yield)显著降低,氧化产物丙二醛(MDA)增多.投喂实验结束时,鱼体背部黄度(B~*)HC组最高,HE组 其次,HP组最低,腹部红度(a~*)HE组最高,HL组次之,HP组最低.新鲜肉色各处理无差异,冰冻3d后,鱼 肉L~*和白度(△E)HE组最高,HL,组其次,Cont组最低;鱼肉a~*Cont组最高,HL组其次,HP组最低.新鲜鱼 肉硬度、胶黏性均为HP组最高,Cont组其次,HE组最低,其他肉质指标均无显著差异:结果表明:饲料营 养中脂肪是影响肉质最明显的因素,饲料脂肪通过控制鱼体成分影响鱼体体色、肉质,以及冰冻储存产生的 MDA;冰冻储存显著降低鱼肉品质,冰冻后鱼肉硬度、胶黏性、咀嚼性和系水力都明显降低,黏附性明显增 大,该指标的变化是肉质降低的表现.     

剑尾鱼P-糖蛋白基因全长cDNA克隆、分析及组织分布

P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)为ABC转运体超家族的主要成员,分布于细胞膜,依赖ATP供能,可将细胞内的亲脂性毒物或药物逆浓度泵出胞外,在机体解毒上具重要功能。研究采用RT-PCR和RACE法对剑尾鱼P-gp基因进行克隆并获得了全长cDNA序列4301 bp,该基因编码1286个氨基酸残基,估算编码蛋白的分子质量为141.64 kD。生物信息学分析表明,剑尾鱼P-gp不含信号肽序列,具ATP转运家族蛋白的典型结构域,包括2个疏水性的跨膜区(Transmembrane domains, TMD)和2个位于细胞浆内的核苷酸结合区(Nucleotide-binding domains, NBD),为全转运子,每个跨膜区都有6个跨膜α螺旋,而每个NBD包含1个ABC转运体家族标记序列;跨膜性质预测结果显示该蛋白属膜蛋白,具P-gp的典型特征。序列同源性分析发现,不同进化地位动物P-gp存在高度同源性,显示P-gp在系统进化上高度保守。P-gp在剑尾鱼肝脏、肾脏、脑等不同组织均有表达,其中以肝脏的相对表达量最高,是P-gp检测的代表组织。QRT-PCR实验表明,苯并(a)芘胁迫可明显诱导P-gp mRNA的表达。剑尾鱼P-gp的表达水平或可作为一个生物标记物指标,应用于环境持久性有机污染物的监测研究中。     

我国部分地区妇幼保健机构儿童营养保健工作现状和需求调查分析

目的：了解各级妇幼保健机构在儿童营养保健方面的现状和需求,为研究和制定基层医疗机构儿童营养改善策略提供依据。 方法：在北京市和广西省各选取省、市、县及乡镇4个级别的8个妇幼保健机构,对专业技术人员进行问卷调查和专题小组讨论。 结果：各级妇幼机构的儿保医师,尤其是基层的儿保医师,对于儿童营养保健的制度、规范以及营养知识的掌握都存在一定的不足,对相关的营养知识有较强的需求。 结论：依据儿童营养保健的现状和医师的需求可制定用于基层医疗机构的儿童营养改善指南,以提高基层医师的儿童营养保健水平。     

模型动物斑马鱼及其特定病原净化

虽然斑马鱼等实验用鱼已经成为生命科学研究的一类重要模型动物,但对于在集约化人工养殖过程中实验鱼的疾病却研究很少。实验用斑马鱼严重的健康问题使其在研究中常出现大面积甚至毁灭性的死亡。常见的感染也可以危及很多实验室的鱼群。因此,培育健康的实验用鱼群,建立必要的质量控制标准已经势在必行。本文收集和分析了大量相关的资料,为我国实验用鱼疾病的控制以及标准化研究和培育SPF斑马鱼提供帮助。     

斑马鱼资源的开发保藏与国家斑马鱼资源中心

斑马鱼是一种新兴的脊椎模式动物。在过去的30年中,斑马鱼已被广泛应用于生命科学、健康科学、环境农业等诸多科研领域。为了满足不同的科研需要,研究人员开发和利用各种技术创建了大量的斑马鱼基因突变和转基因品系,这些品系已成为开展相关科学研究的宝贵资源。为了更好地保藏和利用这些资源,在全球范围内建设有多个规模不一的斑马鱼资源库。2012年,我国的国家斑马鱼资源中心（http：//zfish.cn）在中国科学院水生生物研究所正式成立。本文将重点介绍全球斑马鱼资源的开发和保藏情况,以及我国国家斑马鱼资源中心的最新建设进展。     

斑马鱼脾显微与超微结构

应用光学显微镜和透射电镜对斑马鱼(Daniorerio)脾的显微与超微结构进行了观察。光镜结果表明,斑马鱼的脾主要由脾髓和网状组织两部分构成,脾髓分布于整个脾,分为白髓和红髓,但界限不明显,呈混合分布。红髓染色相对较浅,占脾实质的大部分区域,主要由密集的红细胞构成,可见脾窦结构,脾索结构不明显。白髓染色较深,主要由密集的淋巴细胞构成,淋巴细胞的胞核染色较深,呈深紫色。经Gordon-Sweet银染显示网状纤维后,可清晰观察到脾小结,从而可清晰区分红髓与白髓,脾小结与哺乳动物的类似,主要是由密集的淋巴细胞构成。酸性磷酸酶染色可见斑马鱼脾内有大量吞噬性细胞存在。电镜结果显示,红髓分布有不同类型的红细胞、血小板和浆细胞,白髓分布有淋巴细胞、巨噬细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞、浆细胞和网状细胞,淋巴细胞胞质内含有多泡体,这可能与淋巴细胞发挥免疫功能有着密切联系。斑马鱼脾与大多数硬骨鱼相似,未观察到椭球这一特殊结构。     

Nutritional Requirements of the Nematophagous Fungus Hirsutella rhossiliensis

Six natural media were examined for growth and sporulation of six isolates of the nematophagous fungus Hirsutella rhossiliensis , using solid and/or liquid culture. Twenty carbohydrates, 19 nitrogen (N) compounds, and nine vitamins were also tested for their effects on growth, sporulation, and spore germination of a further three isolates (ATCC46487, OWVT-1 and JA16-1). Variations in nutritional requirements existed among the fungal isolates. In general, V-8 juice agar (VA), cornmeal agar and potato dextrose agar were good media for growth, and malt extract agar, VA and yeast dextrose agar were good for sporulation of all six isolates. Glycogen was the best and sucrose, inulin, D- ( + ) - trehalose and soluble starch were also good carbon (C) sources for growth and spore germination of the three isolates ATCC46487, OWVT-1 and JA16-1 in both liquid and solid culture. None of the isolates utilized D- ( + )xylose as a C source. L- sorbose, D- ribose, citric acid and D- fructose were poor for growth of all isolates. The best C source for sporulation was D- ( + )-trehalose for ATCC46487, D- sorbitol for OWVT-1 and D- ( + )-cellobiose for JA16-1. Casein was the best N source for growth of ATCC46487 and OWVT-1, while peptone was best for JA16-1. L- asparagine, L- proline, and peptone were also good for growth of all three isolates. L - cystine was not utilized by H. rhossiliensis and DL- methionine inhibited growth of all isolates. Spore germination of all isolates was well supported by most N compounds examined but was inhibited by L- cystine. No significant difference in sporulation of ATCC46487 was observed among the N sources. DL- threonine was the best N source for spore production by OWVT-1 and L- phenylalanine was best for JA16-1. Vitamins generally enhanced fungal growth and sporulation, with thiamine having the greatest influence. Excluding some vitamins individually from the medium containing all other test vitamins sometimes increased growth and/or sporulation of certain isolates.     

The Nutritional Status and Eating Habits of Shift Workers: A Chronobiological Approach

The eating habits of workers may vary according to the season of the year and corresponding work schedule. A study aiming at verifying the changes in their diet in summer and winter, as well as the nutritional status of those who work fixed shifts, was conducted. The distribution during the 24 h in the quantity of calories and macronutrients ingested and the circadian rhythm of calories consumed were also analyzed. The study was conducted on 28 workers subject to three fixed work (morning, afternoon, and night) shifts at a transport company in the city of São Paulo, Brazil. The mean age of the workers was 32.8 (SD ± 5.3) yrs. Their food intake was ascertained by the use of a 3-day dietary record, and their nutritional status was evaluated by their body mass index (BMI), both in winter and summer. Two-way ANOVA (shift and season) showed food consumption—measured in calories/24 h—was significantly higher in winter than summer (F_(1.25) = 11.7; p < 0.001). No statistically significant differences were found among shifts (F_(2.25) = 0.85; p < 0.44), and the interaction effect between shift and season was also not significant (F_(2.25) = 0.15; p < 0.86). No seasonal difference in BMI was detected (Kruskal-Wallis test). Cosinor analyses showed circadian rhythmicity in calories consumed by morning (p < 0.01) as well as afternoon shift workers (p < 0.001), both in the winter and summer. Circadian rhythmicity in calories consumed by night workers was found only in summer (p < 0.01). The changes observed in the workers’ eating habits from one season to another and during the 24 h period show the need for further studies to help develop educational programs to improve the nutrition of shift employees taking into consideration shift schedule and season of the year when work is performed.     

斑马鱼心肌特异性启动子的克隆及其功能鉴定*

目的:探讨心室肌球蛋白重链(vmhc)基因启动子的心肌组织特异性.方法:利用PCR技术从斑马鱼基因组中克隆了vmhc编码区5’上游大小为1952bp的调控区域,应用酶切连接方法将vmhc启动子插入pGEFP-N1质粒,成功构建pEGFP-vmhc重组载体.再应用高保真DNA聚合酶PCR扩增包含vmhc启动子序列,增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因序列及3'UTR序列的基因片段,经过纯化后通过显微注射将vmhc-EGFP基因片段导入斑马鱼受精卵中.结果:注射后的斑马鱼心脏中出现绿色荧光,而其他部位无荧光出现.结论:vmhc启动子能够正确有效地驱动外源基因在斑马鱼心脏中特异表达,适合应用于心血管疾病的基因功能研究,基因靶向治疗等.     

Regular Care and Maintenance of a Zebrafish (Danio rerio) Laboratory: An Introduction

This protocol describes regular care and maintenance of a zebrafish laboratory. Zebrafish are now gaining popularity in genetics, pharmacological and behavioural research. As a vertebrate, zebrafish share considerable genetic sequence similarity with humans and are being used as an animal model for various human disease conditions. The advantages of zebrafish in comparison to other common vertebrate models include high fecundity, low maintenance cost, transparent embryos, and rapid development. Due to the spur of interest in zebrafish research, the need to establish and maintain a productive zebrafish housing facility is also increasing. Although literature is available for the maintenance of a zebrafish laboratory, a concise video protocol is lacking. This video illustrates the protocol for regular housing, feeding, breeding and raising of zebrafish larvae. This process will help researchers to understand the natural behaviour and optimal conditions of zebrafish husbandry and hence troubleshoot experimental issues that originate from the fish husbandry conditions. This protocol will be of immense help to researchers planning to establish a zebrafish laboratory, and also to graduate students who are intending to use zebrafish as an animal model.     

氯丙嗪在斑马鱼胚胎和早期幼鱼发育过程中的神经毒性作用

目的 采用模式动物斑马鱼作为研究对象,观察氯丙嗪（chlorpromazine,CPZ）暴露对胚胎和幼鱼早期神经发育的影响.方法 在一般毒性评价的基础上,通过整体胚胎细胞凋亡检测和脑组织病理学检查,了解CPZ对神经发育的器质性改变;采用神经行为学方法,包括幼鱼触动逃避反应、自发运动以及惊恐逃避反射等,研究氯丙嗪暴露所致的神经发育功能性障碍.结果斑马鱼胚胎受精后6 h（6 hpf）～72 hpf暴露于CPZ（≥5 mg/L）可引起胚胎和幼鱼死亡、致畸和幼鱼孵化延迟,并呈浓度和时间依赖性;采用吖啶橙染色检测36 hpf整体胚胎凋亡细胞,发现凋亡细胞主要集中在胚胎中脑、后脑、丘脑以及中后脑连接区、脊索和尾部等处;脑组织病理学检测发现,7dpf幼鱼颅腔增大、脑体积减小、脑细胞缩小且细胞间隙增宽.6～72 hpf CPZ（≥0.0625 mg/L）暴露后,幼鱼神经行为学研究发现,CPZ（≥0.125 mg/L）可引起3dpf幼鱼触觉运动能力下降;CPZ（≥0 5 mg/L）可浓度依赖性地抑制幼鱼自发运动,并出现僵直不动、震颤或快速刻板式转圈运动等行为改变;光惊恐实验中,暗环境下各暴露组幼鱼对突发强光刺激均表现为惊跳逃避,并且暗-光交替期运动加速度变化与对照组无显著差异;在撤除光源后,1mg/L和2 mg/L暴露组幼鱼暗适应时程缩短,而0.125 mg/L和0.25 mg/L暴露组暗适应时程延长,提示CPZ对外界刺激引发的幼鱼活跃游动有抑制和促进双重毒性作用.结论 CPZ暴露对斑马鱼胚胎和幼鱼具有明显的神经发育毒性作用.模式动物斑马鱼作为一种高通量筛选模型在外源性化合物神经发育毒性评价中具有较好的应用前景.