实验猴麻疹预防和治疗方案初探

实验猴麻疹是造成断奶仔猴死亡的重要传染病之一,本文对该病的临床诊断、护理、预防和治疗方案进行了初步研究,并提出了行之有效的预防、护理及治疗措施。经临床实践证明,该方案对实验猴麻疹的治愈率可达90%以上,值得在国内实验猴生产及科研单位推广应用。     

猕猴被毛氨基酸含量的初步研究

为建立实验猕猴被毛氨基酸含量的参考数据和对猕猴饲料氨基酸配比的筛选提供实验基础数据,挑选不同生活环境的猕猴共30只,即笼养猴10只、半自然圈养(猴园)猴10只、野外猴10只,用氨基酸自动分析仪测定其被毛氨基酸的含量.分析结果表明,按不同生活环境分组,猕猴被毛的脯氨酸、缬氨酸、氨和精氨酸以及胱氨酸的含量是人工饲养猴(包括笼养猴和猴园猴)低于野外猴(P<0.01),被毛赖氨酸、组氨酸和氨基酸总量含量是野外猴高于笼养猴(P<0.05)和猴园猴(P<0.01);按性别分组,只有雄性猴的被毛苏氨酸和组氨酸的含量高于雌性猴(JP<0.05),其余氨基酸均无差异(P>0.05).因此,影响猕猴被毛大部分氨基酸含量的因素不仅是食物相应氨基酸的含量,生活环境也有很大的影响;性别因素对猕猴被毛的大部分氨基酸的含量是没有影响的.     

六六六一煤酚皂溶液治疗猴子疥螨病试验的初步观察

发病过程及临床症状 西宁市园林处人民公园原有猴子16只,1972年以前没发生过皮肤病。1973年3月25日从呼和浩特市人民公园,引进猴子5只,因检疫和隔离不严,入园后与原有猴子混群饲养一段时间后,发现所有猴子均不同程度地感染了皮肤病。1974年春,29只猴子中约有70％呈现明显的秃毛,有5只母猴严重脱毛,整天不断地抓痒,皮肤变灰白色、增厚,尤其是头部、四肢最为严重。但6只藏猴(除1只母猴外)和公猴及1只猴王临床症状不明显。 初生幼猴也感染此病,如1只感染严重的母猴于1975年3月1日生1幼猴,到7月份就     

实验猴主要细菌性感染疾病的病理特点分析

目的通过对实验猴细菌性感染疾病脏器病理改变的观察和分析,完善实验猴病理检测资料,为实验动物病理检测标准的制定提供依据。方法选取86例实验猴按5种必检细菌性感染疾病（沙门菌病;志贺菌病;结核杆菌病;小肠结肠炎耶尔森菌病;空肠弯曲菌病）病原种类分组,对脏器标本进行病理剖检,HE染色观察记录病变,建立实验猴必检细菌性疾病病理检测资料。结果病理检测结果显示：沙门菌病表现为伤寒肉芽肿,结核杆菌病表现为结核肉芽肿,小肠结肠炎耶尔森菌病表现为纵行溃疡、急性炎及化脓性肉芽肿;志贺菌病、空肠弯曲菌病表现为急性炎和表浅溃疡。结论感染5种必检细菌的实验猴分别表现出不同的病理变化,病理检测对疾病的分析诊断有重要价值,检测结果补充了实验猴细菌性疾病病理检测资料,为制定实验动物病理检测指南提供了相关依据。     

猕猴菌痢的诊断及防治

细菌性痢疾是猕猴最常见的一种急性传染病。任何季节均可发生,但以夏秋两季为多,特别在新买来的猴群常见本病流行。例如,1963年在新运来的122只猕猴中发生菌痢的有34只,占总头数的27.86％,在疾病流行期间,我们曾将病猴粪便进行细菌学检查,发现多数病猴是由福氏痢疾杆菌引起,也有个别病猴分离出志贺氏痢疾杆菌。     

同批次细胞基质收获甲肝和麻疹病毒制备联合疫苗的方法

采用同一批次细胞基质收获甲肝和麻疹病毒.应用甲肝L-A-1株和麻疹D3T11株,间隔3周先后感染同一批次人胚肺二倍体细胞2BS株,待两种病毒同时达到增殖高峰期时收获病毒液(以下简称HAM).对HAM分别进行病毒滴定、特异性检查、猴体安全性和免疫效果试验.结果显示,HAM的甲肝和麻疹病毒滴度与同批单价甲肝和麻疹疫苗病毒滴度,差异均无显著意义.该方法用于制备甲肝-麻疹联合疫苗,省时省力,操作简便,并可显著降低疫苗生产成本.     

SHIV-KB9感染中国恒河猴动物模型的建立

目的为了进一步确证SHIV-KB9感染中国恒河猴的病毒浓度范围,测试动物对病毒的适应性,明确该动物模型的可重复性。方法实验前采集猴血清并进行血清学检查。选出4只无SIV、STLV、SRV/D和B病毒感染的恒河猴,分别用10倍系列稀释的病毒液静脉感染实验猴,使用流氏细胞术、血常规、病毒分离、DNA-PCR和RT-PCR等方法确定实验猴是否被感染,以及感染后恒河猴体内病毒复制和免疫细胞损伤情况。结果实验猴的血浆病毒载量、病毒分离结果、CD4＋/CD8＋比值和CD4＋T细胞数等证实,4.8×105 copies/mL以上浓度的SHIV-KB9病毒液能成功感染中国恒河猴。结论本研究进一步明确了SHIV-KB9感染中国恒河猴的有效病毒浓度范围,确定了SHIV-KB9病毒感染中国恒河猴的病毒学、免疫学的测定指标,成功的建立了SHIV-KB9/中国恒河猴动物模型。     

人工饲养恒河猴、食蟹猴的繁殖性能初报

目的探索北京地区人工饲养恒河猴与食蟹猴的繁殖性能,为温带地区猕猴的人工饲养和繁殖方式提供借鉴。方法对军事医学科学院实验动物中心饲养的317只恒河猴繁殖群（30只雄猴,287只雌猴）和78只食蟹猴繁殖群（8只雄猴,70只雌猴）近两年的繁殖性状进行观察和统计分析。结果恒河猴母猴妊娠率、繁殖率和成活率分别为60.73%、54.45%和96.89%。食蟹猴母猴妊娠率、繁殖率和成活率分别为79.86%、56.12%和75.00%。结论食蟹猴和恒河猴可以成功的在温带地区饲养和繁殖,但人工饲养食蟹猴的妊娠率与产仔率较恒河猴高,而仔猴成活率则低于恒河猴。     

中国恒河猴Mamu-A*01基因筛查及其对抗原肽p11C的特异性CTL反应

目的 筛查中国恒河猴Mamu-A*01基因,比较中国恒河猴和印度恒河猴的Mamu-A*01基因序列和功能是否相同.方法 PCR方法检测128只中国恒河猴,用特异性引物扩增Mamu-A*01基因,将PCR扩增后的产物克隆测序后与印度恒河猴的Mamu-A*01基因进行同源比对;酶联免疫斑点检测 (ELISPOT) 方法分别检测5只Mamu-A*01基因阳性和5只阴性恒河猴针对SIV、SHIV抗原肽p11C的特异性CTL反应.结果 共筛查出5 只Mamu-A*01基因阳性恒河猴 (3.91%),经测序分析后与印度恒河猴的同源性可达99.1 %.这5只均为SIV/SHIV感染恒河猴,其中四只SIV感染的猴的ELISPOT结果显示针对p11C的高频CTL反应,斑点数在500-1400/106 PBMCs之间,而另1只SHIV感染的恒河猴及5只阴性猴没有斑点出现.结论 中国恒河猴含有Mamu-A*01基因,基因频率有区域性差异,中国恒河猴的Mamu-A*01可提呈特异性抗原肽p11C.     

强直性脊柱炎食蟹猴膝关节及肠道组织病理变化分析

目的 强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis, AS)是一种免疫介导的累及中轴关节、周围关节和肠道的慢性疾病,但外周膝关节和肠道的病因病机未明。本研究旨在研究AS食蟹猴膝关节和肠道主要病理变化及机制。方法 通过组织形态学分析及免疫组化实验,研究AS外周膝关节及肠道组织的关键特征并初步分析其发病机制。结果 AS食蟹猴外周膝关节病理特征在早期主要表现为关节表面软骨侵蚀、软骨下骨暴露、关节表面呈锯齿状;晚期主要表现为软骨表层肥大软骨细胞异位增生,通过软骨成骨和纤维成骨形成骨赘,软骨基本丢失。软骨和血管中MMP-3的表达上调,引起软骨破坏并刺激血管增生。AS食蟹猴小肠绒毛严重萎缩且隐窝增生明显,空肠和回肠的黏膜肠腺中可见大量γδT细胞。结论 本研究通过对AS食蟹猴膝关节和肠道的病理分析,获得了该自发模型膝关节与肠道组织的关键特征,并提出可能的发病机制。为探讨AS的骨骼病变与外周疾病间的潜在关联,以及AS的治疗提供新的见解。     

Nested-PCR检测恒河猴泡沫病毒

目的用nested-PCR检测恒河猴泡沫病毒SFV的前病毒形式。方法从SFV-1的pol区域选择两对引物分别对原代猴肾细胞（rhesus monkey kidney,RMK）及猴外周血淋巴细胞（peripheral blood lymphocytes,PBLs）进行体外扩增,扩增产物经1.0%的琼脂糖凝胶电泳,证实其特异性。阳性对照使用具有典型泡沫样病变的RMK377细胞株的前病毒DNA,阳性对照的PCR扩增产物经测序证实,阴性对照为恒河猴的SRV-1cDNA。结果nested-PCR能快速灵敏的直接从猴外周血淋巴细胞检出SFV的前病毒形式,与RMK细胞培养结果基本相一致。结论本实验所建立的检测SFV的nested-PCR法能快速准确的检测猴群中的SFV的带毒情况,对于提高实验猴的质量具有重要意义。     

猴泡沫病毒（SFV）RT-nestedPCR检测方法的建立及初步应用

目的建立实验猴群及相关生物制品猴泡沫病毒（SFV）的PCR检测方法。方法选择SFV-1、SFV-3、SFVCPZ前病毒序列的pol基因同源性较高的区域设计嵌套引物对SFV-1毒种进行RT-nestedPCR扩增并克隆测序,以确定其准确性,通过验证方法的特异性和敏感性,初步应用该方法对恒河猴外周血淋巴细胞（PBLs）,常用猴肾传代细胞及猴源性生物制品进行检测。结果经RT-nestedPCR扩增出的片断与SFV-1 cDNA序列同源性达到99%,对10只恒河猴的检测结果为5只阳性,5只阴性,对常用猴肾传代细胞及脊髓灰质炎疫苗的检测结果均为阴性。结论所建立的SFV RT-nestedPCR检测方法能准确的检测出恒河猴SFV的感染情况,对控制实验猴群的质量具有重要意义。该方法可用于检测猴源性生物制品中SFV的污染情况,为保证生物制品应用的安全性提供一定依据。     

Species preference by infant macaques with controlled social experience

In Experiment 1, infant Japanese monkeys and rhesus monkeys were artificially reared in pairs with conspecific or heterospecific monkeys. Preferences of these monkeys for a variety of pictures of Japanese monkeys and rhesus monkeys were repeatedly tested during the first 1 or 2 years of life. The duration of lever-pressing responses to see those pictures was a measure of the preference. All monkeys, Japanese or rhesus, preferred pictures of rhesus monkeys to pictures of Japanese monkeys, without regard to their social experiences. Experiment 2, with an adult Japanese monkey as the subject, and Experiment 3, with different pictures as stimuli, suggested that this preference was not a consequence of any bias in the pictures used. In Experiment 4, a Japanese monkey reared by a rhesus foster mother and rhesus monkeys reared by Japanese monkey mothers received the same preference test. The Japanese monkey infant preferred to see pictures of rhesus monkeys. However, rhesus infants did not show clear species preferences. These results suggest that infants of both Japanese and rhesus monkeys have a native tendency to prefer to see physical characteristics of rhesus monkeys over Japanese monkeys.     

人工饲养条件下死亡恒河猴肺脏病理改变分析

目的观察人工饲养条件下实验恒河猴肺脏病理改变,探讨实验猴呼吸系统疾病分布规律和病理改变特点,丰富实验猴自发病变基本研究资料。方法对1998～2008年云南地区饲养的自然死亡的155只恒河猴（年龄2～20岁）的肺脏进行病理检查,按年龄分为幼年组、成年组、老年组,并对观察结果进行统计学分析。结果实验猴肺脏主要病变有大叶性肺炎、支气管肺炎、间质性肺炎、肺气肿、支气管扩张症、胸膜炎、肺肉芽肿性炎等12种,出现率最高的为支气管肺炎（18.71%）和大叶性肺炎（16.74%）。恒河猴肺脏病变在不同年龄阶段均有发生,老年猴组肺脏病变发生率最高,疾病类型和发生率在不同年组中分布不相同,统计学分析显示：支气管炎病变成年组发病率明显高于幼年组;肺气肿病变老年组明显高于成年组和幼年组,（P〈0.05）。结论人工饲养条件下死亡实验猴肺脏病变检出率较高,实验猴肺脏病变在不同年龄阶段存在差异,实验猴肺脏病理改变结果丰富了实验猴的基本研究资料,对实验猴的质量控制和相关动物实验有重要价值。     

猕猴结核分枝杆菌PCR检测方法的建立与初步应用

目的建立猕猴结核分枝杆菌PCR快速检测方法。方法根据GenBank中报道的人型结核分枝杆菌标准株H37RV全基因序列,针对其中致病性结核分枝杆菌所特有的保守区域ESAT-6设计一对引物进行TouchdownPCR反应,利用此方法对100份野生来源猕猴全血标本进行检测,并与传统的PPD实验和咽拭子抗酸染色实验结果作比对。结果抽取33份野生来源猕猴的外周血,提取DNA进行扩增,扩增片段经纯化、回收克隆测序后用BLAST软件进行同源性对比,与GenBank中报道的序列基本相同,检测标本中有4份（4／33）为阳性,其中3份（3／33）标本与结核菌素试验和咽拭子抗酸染色试验结果相符合。结论建立了从猴全血中直接检测猴结核分枝杆菌DNA的TouchdownPCR方法,具有敏感性和特异性高,且简便的优点。     

Possible influence of measles virus infection of cynomolgus monkeys on the outcome of the neurovirulence test for oral poliovirus vaccine.

Macaque monkeys are susceptible to measles infection which triggers temporary immuno-depression similar to the well known phenomenon in humans. It is known that feral monkeys become infected with measles virus when they are exposed to humans. Since Macaca mulatta and M. fascicularis are species used to assay the neurovirulence of oral poliovirus vaccine, the immunodepression caused by measles infection of the test monkeys could significantly alter the results of the neurovirulence test. The serum titers of measles-neutralizing antibodies were studied in over 1500 monkeys used for neurovirulence tests. A high proportion of the feral monkeys had measles antibodies (51-100%); in contrast, none of 493 M. fascicularis monkeys which had been bred in a primate colony under strict isolation measures was found positive for measles antibodies. An increase in the prevalence of measles in the population of Ontario and Quebec provinces was accompanied with an increase in the proportion of measles-positive monkey and their serum antibody titers were found higher. It was observed that monkeys used in tests that had been performed during high measles prevalence presented with a poliomyelitis of more pronounced severity clinically and histologically. The analysis of 29 tests conducted on type 1 vaccines over several years showed a positive correlation (correlation coefficient = 0.5141, P less than 0.0022) between severity of poliomyelitis and the presence of measles serum antibodies in test monkeys (some animals seroconverted during the test). A similar observation, when type 3 Sabin vaccines were tested in M. fascicularis, was recently reported from another laboratory in Ontario.     

猕猴巨细胞病毒(RhCMV)nested PCR检测方法的建立与初步应用

目的建立猴巨细胞(RhCMV)病毒的nested PCR检测方法,并初步应用。方法根据GenBank中报道的RhCMV全基因序列,针对其中的保守区域Rh85设计两对引物进行nested PCR反应,利用此方法对20份猕猴全血标本进行检测,将检测到的猕猴阳性标本扩增片段进行克隆测序。结果利用保守区域Rh85设计的引物可对人HCMV阳性对照进行扩增。用此方法检测的20份猕猴全血标本,出现2例阳性。其中一例扩增片段经纯化、回收克隆测序后用BLAST软件进行同源性对比,与GenBank中报道的RhCMV序列基本相同。结论建立了从猴全血中直接检测猴RhCMV病毒DNA的敏感、特异的nested PCR方法。     

一株恒河猴克罗诺杆菌（阪崎肠杆菌）的分离鉴定及序列分析

目的对恒河猴粪便中分离到的一株克罗诺杆菌进行鉴定,为实验恒河猴疾病检测、鉴别诊断和治疗提供参考依据j方法通过细菌培养特性、菌落形态观察及微生物鉴定系统（ID32E）生化试验进行菌落鉴定;并进行抗生素敏感试验和小白鼠致病性试验;用PCR方法扩增分离菌株的23SrRNA基因并测序,并将其与GenBank上参考菌株23SrRNA基因核苷酸序列进行同源性分析。结果经细菌形态学和生化鉴定该细菌为克罗诺杆菌,23SrRNA基因序列与GenBank中分离自婴幼儿配方奶粉中的阪崎克罗诺杆菌（CP004091）同源性为98％。药敏试验表明该菌对甲硝哒唑耐药,对其他15种抗生素敏感。致病性试验证明该分离菌株对小白鼠有强致病性。结论该株从恒河猴中分离到的克罗诺杆菌具有较强的致病性,对实验恒河猴饲养及相关研究人员有潜在的危害,因此,在恒河猴饲养及研究过程中应引起重视。头孢、庆大霉素和诺氟沙星等药物可作为治疗恒河猴克罗诺杆菌感染的临床用药。