小型猪心肌梗死介入治疗后无复流动物模型的制备

目的制备猪急性心肌梗死冠状动脉介入治疗（AMI—PCI）后无复流（no—reflow）动物模型。方法五指山小型猪26头,行左、右冠状动脉造影和左心室造影,记录有创血流动力学参数,通过球囊闭塞、微血栓注入造成左前降支无复流,监测体表和冠脉内心电图变化。结果制模共有21头猪成活,19头达到AMI—PCI后无复流动物模型标准,即TIMI血流≤2级,校正的TIMI血流记帧法（CTFC）≥36．2帧,制模成功率73．1％。无复流模型建立成功后心率增快,血压下降,心肌耗氧量增加,左心室舒张期末压和肺毛细血管楔压升高,较闭塞前均具有统计学差异（P〈0．05）。实验过程中,体表心电图和冠状动脉内心电图均出现类似人AMI再灌注的心电图演变规律。结论选择性冠状动脉前降支急性闭塞、再灌注、微血栓注入制备的无复流小型猪动物模型是可行的。     

猪冠状动脉前降支结扎位点和左室功能的线性回归

目的探讨猪冠状动脉前降支(LAD)结扎百分位点和心梗体积、左室射血分数的关系,以期指导研究者能够根据急性心肌梗死模型的心功能要求选择合适的LAD结扎百分位点。方法将47只小型猪开胸结扎心脏LAD中远段约30%~75%的不同百分位点,分别于术前、术后1 h心脏超声检查左室射血分数(LVEF),术后3 d进行常规冠状动脉造影,4周处死测量前降支结扎位点和梗死体积,最后用简单直线回归模型分析LAD结扎百分位点和心梗体积、左室射血分数回归方程和相关系数。结果47例动物手术过程中死亡8只,剩余39只存活动物冠状动脉造影均显示LAD中远段结扎部位处完全闭塞,表明手术成功。LAD结扎百分位点和术后1 h LVEF、术后1 hLVEF下降值、梗死心肌体积均明显相关(相关系数r分别为0.87、0.78和0.90,P均<0.001),其回归方程分别为:术后LVEF(%)=65.88-0.55x结扎百分位点;术后LVEF下降值(%)=0.12 0.59x结扎百分位点;心肌梗死体积(%)=0.53x结扎百分位点-5.43。结论猪LAD结扎百分位点和术后左室功能、梗死心肌体积均存在显著的相关性,可根据实验目的和对心功能的要求选择合适的结扎百分位点。     

小型猪急性心肌梗死后心力衰竭模型的构建

目的应用选择性冠状动脉前降支(LAD)球囊闭塞结合微血栓微球混悬液灌注方法造成心肌缺血坏死,探索建立稳定存活的小型猪急性心肌梗死(AMI)后心力衰竭(HF)动物模型。方法选择中国五指山小型猪18头,行冠脉造影后沿血管送球囊至LAD中段,依次扩张球囊阻断前向血流1、2、5 min,每次间隔60 s,然后扩张球囊堵闭血流120 min。再以4F导管超选LAD,行微血栓微球混悬液分次注入,间隔10 min重复注射,TIMI心肌灌注分级(TMPG)2级和左室舒张末压(LVEDP)15 mm Hg时停止注射,同时监测心电图及应用漂浮导管监测有创血流动力学参数。并行pigtail导管测量(LVEDP)的变化,待LVEDP稳定在15~18 mm Hg之间后结扎血管,并加压包扎。监测心肌坏死标志物(cTnI和CK-MB)变化。分别于制模前,制模后第1天、7天、14天行心脏超声检查,制模第14天复查有创血流动力学检查,并行心脏病理检查,认定和评价模型的成功率、稳定性和可重复性。结果制模14 d后共有15头小型猪成活,心电图、心肌坏死标记物、病理检查均符合AMI病理生理过程。其中14头小型猪达到动物模型标准【肺毛细血管楔压(PCWP)18 mmHg和心输出量(CO)下降30%以上】,模型成功率为77.78%。制模后第14天PCWP明显升高(P0.01),CO平均下降50.76%;左室射血分数(LVEF)明显降低(P0.01)。病理检查显示心肌梗死面积占左心室面积的25.4%~34.9%。结论球囊闭塞结合微血栓微球混悬液灌注构建小型猪急性心肌梗死后心力衰竭模型具有闭胸、高成功率、稳定和重复性好等优点,较药物、冠状动脉结扎和起搏诱导的心力衰竭模型更接近临床病理生理学特点。     

猪急性心肌梗死模型发生心室颤动的相关因素分析

目的探讨猪冠状动脉前降支(LAD)结扎后发生室颤的特点及其相关因素,以期提高猪急性心肌梗死模型的成活率。方法57只小型猪开胸结扎心脏LAD不同位点,对室颤和体重、性别、术前心率、术前左室射血分数(LVEF)、开胸径路(旁正中/肋间)、手术时间、结扎百分位点、术后心率、术后发生室早或短阵室速等因素进行单因素相关分析和Logistic回归分析,进而对室颤的发生时间、室颤前心电图特点等进行评价。结果57例动物手术过程发生室颤18例,死亡11例。室颤均发生在结扎冠脉后35 min内,高峰时间为结扎冠脉后5 min和20 min;心率快于160 bpm或慢于60 bpm时容易诱发室颤。与非室颤组动物比较,室颤组动物的结扎位点高,术后最快心率>60 bpm的动物较多,短阵室速发生率高(P<0.01)。Logistic回归分析显示结扎位点过高是急性心肌梗死后发生室颤唯一的独立危险因素。结论结扎位点过高是猪急性心肌梗死后发生室颤的最重要危险因素;冠脉结扎后30 min内应该严密心电监护,特别注意结扎冠脉后5 min和20 min二个时间点、>160 bpm或<60 bpm二种心率、以及短阵室速等先兆事件。     

冠脉结扎和介入两种方法制备犬心肌梗死模型的比较

目的观察开胸结扎冠状动脉与闭胸明胶海绵栓塞法制备急性心肌梗死（AMI）动物模型的特点。方法分别经开胸结扎犬冠状动脉左前降支主干及闭胸冠脉栓塞的方法阻断冠脉血流;采用单级肢体导联和胸导联方式,在阻断前后监测心电图波形变化;造模72h后取心肌组织行病理切片染色。结果经心电图和病理验证,两种方法均可成功制备犬心梗模型,开胸冠脉结扎犬死亡率较高,而冠脉栓塞成活率高。结论相较开胸冠脉结扎法,闭胸栓塞法制备心梗模型对动物损伤小,成活率高,具推广价值。     

心电图计分法定量评价糖尿病小型猪心肌梗死面积

目的探讨简便的Wagner心电图QRS评分结果与糖尿病小型猪急性心肌梗死面积的相关性。方法巴马小型猪12只,随机分为糖尿病组（n=6）和正常组（n=6）。一次性静脉注射STZ（150mg／kg）的方法建立小型猪糖尿病模型,分别在给药前、给药后1周、2周和3周,采集血液,监测血糖,空腹血糖持续增高（FBG≥7．0retool／L）者认为建模成功;其次,定位结扎糖尿病组和正常对照组小型猪冠脉左前降支第1和第2对角支之间部位,并在缺血10rain、30min、1h、48h后查心电图,行QRS心电图计分;然后利用心肌组织Evan’sblue和TTC染色计算梗死心肌体积;分析QRS心电图计分与心肌梗死体积的相关性。结果所有动物急性心肌缺血病理变化明显,48h后都有病理性Q波形成,糖尿病组QRS评分明显较对照组高（6．9±2．4VS．4．1±1．8,P〈0．05）;病理染色结果显示其梗死面积明显比对照组大（29．2±5．1％vs．15．3±3．4％,P〈0．05）,二者相关系数为0．92。结论糖尿病心肌急性缺血更容易导致心肌组织坏死,梗死面积明显比对照组大;心电图检测判断心梗面积与病理情况下心梗面积相关性良好。     

介入法建立猪急性心肌梗死再灌注模型及其效果评价

目的:用介入法行球囊堵闭猪冠状动脉左前降支(LAD)建立急性心肌梗死再灌注动物模型并评价其效果。方法:选用小型雄性家猪11只。麻醉后经股动脉或颈总动脉置入经皮腔内冠状动脉成形术(PTCA)球囊至冠状动脉LAD远端,堵闭血流60 min。术中持续静脉滴注胺碘酮。60min后负压撤除球囊及鞘管。行超声心动图、磁共振成像(MRI)评价心肌梗死模型建立情况,并行病理分析。结果:2只猪死于心肌梗死模型制备,存活的9只猪经超声心动图、MRI检测显示梗死部位均为左心室前壁、心尖区,部分模型累及室间隔,左室下壁,并有室壁瘤、室速等心肌梗死常见并发症的发生。结论:运用介入法经PTCA球囊LAD可成功建立猪急性心肌梗死模型。这种模型重复性强,可控性好,模型的梗死部位基本一致,易于术后评价。     

经胸腔镜建立巴马小型猪冠状动脉狭窄模型

目的探讨一种高效、稳定的经胸腔镜构建不同程度冠状动脉狭窄动物模型的方法。方法 20头巴马小型猪,在胸腔镜直视下手术丝线永久性环扎左前降支近端,从而造成前降支不同程度的狭窄。术后进行定量冠状动脉造影检查评价狭窄程度。结果 20头小型猪中18头手术顺利完成,2头术中出现室颤,除颤成功后分别于术后8 h和48 h死亡。术后行定量冠状动脉造影显示7头小型猪狭窄程度不超过50%,6头狭窄程度在50%到70%,5头狭窄程度在70%以上,即时手术成功率100%,建模成功率90%。结论完全胸腔镜下应用丝线环扎法可成功地制作不同程度的冠脉狭窄动物模型。     

小型猪慢性胰腺炎模型的建立

目的建立小型猪慢性胰腺炎（CP）模型。方法西双版纳小型猪28头,随机分两组,6头为正常对照．22头经剖腹行胰管不全结扎。术后2～12周处死取出胰腺,同时取出正常组胰腺行组织学检查,进行病理分期,观察分期与喂养周数间关系。结果胰管结扎的22头小猪存活18头,15头胰腺体尾部形成CP,成功率68．2％。CP严重程度随胰管结扎后喂养周数增加而增加（r=0．39,P〈0．05）。结论小型猪胰管部分结扎能形成CP．其严重程度与胰管结扎后喂养周数间呈部分相关关系。     

血管内皮生长因子对猪心肌侧枝血管生成的作用

为检测血管内皮生长因子165（VEGF165)能否促进冠状动脉侧枝血管形成,实验在成功制作小型猪慢性心肌缺血模型后,将以复制缺陷复组腺病毒为载体的人VEGF165互补脱氧核糖核酸[(cDNA)Ad-VEGF165]直接注入左回旋支（LCX）分布的缺血心肌内,以心电图门控单光子发射计算机断层摄影和离体太动脉造影检测冠状动脉侧枝形成,心肌灌注和功能变化,结果显示,与对照组和自身给预Ad-VEGF165前比较,给予Ad-VEGF165四周后心肌缺血面积（P＜0．01）和最大缺血程度（P＜0．01）明显减小,左心室射血分数（P＜0．01）TCX区局部心室壁运动（P＜0．05）明显改善,治疗组侧枝血管生成明显多于对照组（P＜0．05）,表明Ad-VEGF165能诱导心肌侧肢血管形成并改善心肌灌注与运动功能。     

心导管介入冠状动脉封堵兔急性心肌梗死模型的建立

目的应用心导管介入方法封堵冠状动脉制备兔急性心肌梗死模型。方法选择雄性新西兰兔,先行冠状动脉造影,利用导引钢丝将微导管置于左前降支远端,将高分子栓塞剂与碘油混合配制成封闭胶,经微导管注入血管,造成急性心肌梗死。术前、术中和术后l周记录心电图变化。实验终点切取心肌组织标本分别行苏木素一伊红（H．E）染色、氯化硝基四氮唑蓝（NBT）染色、免疫组化染色。结果造模动物20只,存活16只。冠脉造影显示封闭胶持续滞留于左前降支远端,提示血管完全堵塞。心电图提示存在动态变化,ST段抬高,病理性Q波逐渐形成。心脏大体观测提示左心室前侧壁呈灰白色为梗死区。E染色提示梗死区局部纤维组织增生、疤痕形成、钙盐沉积,缺血区肌束变性、炎症细胞浸润,符合典型心肌梗死的病理变化。NBT染色后测定梗死面积为28．32％±5．21％。免疫组化染色提示缺血区CD34阳性面积和血管新生密度明显高于梗死区及正常组织区（P〈0．05）。结论通过心导管介入方法制备兔急性心肌梗死模型成功,避免了开胸损伤对实验结果的影响,更符合临床急性心肌梗死的病理特点。     

大鼠心肌梗死模型构建和评价方法的改良

目的 优化和改良大鼠心肌梗死模型的构建和评价方法,提高模型的可靠性和稳定性.方法 取雄性SD大鼠结扎左冠状动脉前降支建立心肌梗死模型,在模型的构建过程中从麻醉、插气管、保温、手术操作、术后护理等环节进行优化和改进,并观察不同的麻醉方法和术后时间对心肌梗死程度的影响,用不同的染色方式进行心肌梗死模型的评价.结果 对比大鼠心肌梗死模型构建过程中各组大鼠麻醉时间、术后恢复以及心肌梗死面积的结果,戊巴比妥钠是更合适的麻醉药;结扎手术后时间对模型心肌梗死范围无明显影响（P＆gt;0.05）,但心肌缺血危险区面积随术后时间的延长明显减少（P〈0.01）;TTC与依文思蓝双重染色相对TTC染色能明显观察到心肌缺血危险区和梗死区范围.结论 优化和改进后的大鼠心肌梗死模型,提高了动物福利,制备和评价方法更加客观准确.     

小鼠心梗模型的建立与无创评价

目的建立小鼠的心肌梗死模型,提高动物存活率,并使用心脏超声进行无创心功能评价。方法昆明雄性小鼠20只,气管插管后由左侧第4肋间进胸,结扎冠状动脉左前降支建立小鼠心肌梗死模型,在模型建立的前1 d和术后1 d、1周分别使用心脏超声检测左室收缩末直径、舒张末直径、缩短分数和射血分数,并于术后第8天进行病理检查。结果小鼠心肌梗死模型建立过程中早期死亡率10%（2/20）,术后1周内死亡率15%（3/20）,经过超声评价,造模成功率为75%（15/20）。小鼠心功能明显下降,射血分数由手术前的（92.1±3.45）%下降到术后1周的（49.8±14.20）%,缩短分数由手术前的（61.4±2.85）%下降到（26.1±9.01）%;心室明显扩大,左室收缩末直径由（13.9±1.98）μm扩大到（36.5±7.37）μm,舒张末直径由（35.9±3.12）μm扩大到（48.9±6.05）μm。病理学检查见明显瘢痕形成。结论通过结扎冠状动脉左前降支的方法建立了小鼠心肌梗死模型并可以使用超声心动图评价这一模型。     

CD4^＋T细胞在大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用

目的通过大鼠心肌缺血再灌注损伤的动物模型,分析CD4^＋T细胞在心肌组织损伤中的作用。方法结扎大鼠冠状动脉左前降支45min,随后恢复再灌的方法,制作缺血再灌损伤的动物模型,随机分为再灌注0、2、6、9、12h组及相应的对照组。II导联心电图及TTC确定模型,组织病理学观察心肌细胞的损伤情况,免疫荧光染色计数浸润的炎性细胞,半定量PCR进一步验证各型T细胞的表达。结果心肌的梗死面积与心肌缺血再灌时间成正相关,至观察结束未出现峰值;组织中浸润的中型粒细胞和T细胞分别在2h和12h有峰值出现,但CD4^＋T/CD3^＋T的比率几乎保持不变;观察所见CD4^＋T细胞是组织中存在最多的T细胞。结论大鼠缺血再灌注损伤中,心肌组织中浸润的CD4^＋T细胞作为主要的效应细胞,参与了持续稳定的心肌损伤过程。     

Reverse regulation of hepatic ceruloplasmin production in rat model of myocardial ischemia

BackgroundCeruloplasmin (Cp) is a major copper-binding protein produced in the liver and delivers copper to extrahepatic organs. Patients with myocardial infarction are often featured by an elevation of serum copper concentrations due to copper efflux from ischemic hearts. The present study was undertaken to test the hypothesis that serum copper elevation leads to up-regulation of hepatic Cp in myocardial infarction.MethodsAdult male Sprague-Dawley rats were subjected to left anterior descending (LAD) coronary artery ligation to induce myocardial infarction. Serum copper and Cp levels, as well as changes in hepatic Cp and copper-transporting P-type ATPase (Atp7b), were determined from blood and liver samples collected on day 1, 4, or 7 after the operation.ResultsSerum copper concentrations were significantly increased on day 4 after LAD ligation, accompanied by an increase in serum Cp levels and activities. Concomitantly, the protein levels of Cp and copper exporter, Atp7b, were also significantly increased in the liver. Furthermore, inhibiting the increase of serum copper by a copper chelator, triethylenetetramine (TETA), effectively abolished the elevated Cp activity after LAD ligation.ConclusionThese results indicate that serum Cp elevation in response to myocardial ischemia most likely resulted from the increased hepatic Cp production, which in turn was more responsive to serum copper elevation than inflammatory response following myocardial ischemia.     

大鼠急性心肌梗死模型的制备及对肌钙蛋白T的影响

目的探讨建立大鼠急性心肌梗死（AMI）模型的方法,研究心肌梗死大鼠血浆中肌钙蛋白T（cTn-T）的动态变化。方法大鼠经结扎左冠状动脉前降支造成心肌梗死,建立稳定的心肌梗死模型;分别在结扎后31 h、48 h、69 h、168 h检测cTn-T含量和计算心肌梗死重量指数。结果成功制备心肌梗死大鼠模型,并对常规技术进行改进,降低动物死亡率。大鼠左冠状动脉结扎31 h、48 h模型组与假手术组cTn-T含量差异极显著（P〈0.001）;各时间点心肌梗死重量指数比较,差异极显著（P〈0.001）。cTn-T值与梗死重量指数呈显著性正相关（r=0.90,P〈0.01）。结论结合大鼠心肌梗死程度进一步佐证了模型制备较成功。cTn-T表现出特异性和敏感性,并在31 h最接近达峰时间,有早期诊断心肌梗死的价值,也可作为判断AMI时心肌梗死程度和预后的参考指标。