近交系剑尾鱼的遗传生化标记研究

目的通过研究对RR-B、RW-H、BY-F三个近交系和非选育剑尾鱼的研究比较,建立近交系剑尾鱼的遗传生化标记检测技术。方法依照国标GB／T14927.1-2008的遗传操作规程优化实验条件,对三个近交品系及非选育群剑尾鱼的不同组织的6个遗传生化位点进行研究,以得到其遗传生化图谱。结果在6个生化位点中,同一品系剑尾鱼同工酶存在组织特异性,多数同工酶在肝中活性较强。同一生化位点在不同品系间存在差异。RR-B系在葡萄糖磷酸异构酶（Gpi）、6-磷酸葡萄糖脱氢酶（Gpd）位点表现出特异性条带,RW-H系在过氧化氢酶（Ce）位点表现出特异性条带。同一生化位点在各品系内表现较为一致,而在非选育剑尾鱼中在上述三个生化位点表现出多态性。在酯酶（ES）、碱性磷酸酶（AKP）、乳酸脱氢酶（LDH）位点,各品系谱带不易区分其差异。结论建立了剑尾鱼近交系生化标记检测技术,可望用于近交系剑尾鱼的遗传质量监测。     

Tw近交系小鼠的遗传鉴定和罕见基因分析

目的通过等位基因酶的生化多态性可以发现小鼠DNA的序列多态性,为人类疾病基因鉴定和动物实验的研究提供丰富的动物基因库,为科研工作提供宝贵资源。方法应用国产生化标记检测试剂盒,采用遗传生化检测方法,对天津市卫生防病中心自主培育的近交系小鼠进行Akp-1(碱性磷酸酶-1)等二十五个生化位点标记基因检测。结果经检测发现TW(Tianjin wild)小鼠在Amy1(淀粉酶-1),Es2(酯酶-2),Es3(酯酶-3),Es10(酯酶-10),Gpd1(葡萄糖磷酸脱氢酶-1),Hbb(血红蛋白β链),Np1(核苷酸磷酸化酶-1),Pgm2(磷酸葡萄糖变位酶-2)共八个生化位点发现罕见基因。结论检测国内新品系的遗传生化基因位点,发现罕见基因型。     

封闭群斑马鱼的STR遗传检测技术

目的以AB、LF、ST（本地短尾,short tail）三个封闭群斑马鱼的基因组DNA为主要研究对象,采用STR（short tandem repeat）引物扩增方法分析不同种群在核酸水平的异同。方法利用5对斑马鱼STR引物和3对剑尾鱼STR引物,优化PCR条件,对不同种群斑马鱼DNA进行扩增。结果Z24、Z9384、Z10508、Z20046这4对引物可扩增出稳定条带。除Z24的3对STR引物在群内和群间均表现出多态性。对扩增不同带型进行统计分析,Z20046群间差异显著（P〈0.01）,Z9384有群间差异（P〈0.05）,Z10508扩增结果无统计学差异（P〉0.05）。结论鉴于该方法操作简便,通过进一步研究,可为封闭群斑马鱼的遗传质量评价打下基础。     

亮叶水青冈（Fagus lucida）种群遗传多样性初步研究

本文利用凝胶电泳法研究亮叶水青冈（Ｆａｇｕｓｌｕｃｉｄａ）种内遗传多样性。所测定的酶系统包括：过氧化物酶（ＰＸ１和ＰＸ２）、磷酸葡萄糖脱氢酶（ＰＧＤ）、谷氨酸草酰乙酸转氨酶（ＧＯＴ１和ＧＯＴ２）、异柠檬酸脱氢酶（ＩＤＨ）、甲基荼醌还原酶（ＭＮＲ）、葡萄糖磷酸变位酶（ＰＧＭ１和ＰＧＭ２）,苹果酸脱氨酶（ＭＤＨ２）、酸性磷酸酶（ＡＣＰ）和磷酸果糖升构酶（ＰＧＩ）９种酶系统１１个基因位点。测定和分析了亮叶水青冈２地理种群的等位基因频率,固定指致,基因多祥性和遗传距离,为进一步研究水青冈的遗传变异和种内种间关系提供了科学依据。     

鸡生化基因位点检测方法的建立及在SPF鸡群中的应用

目的建立鸡生化标记检测方法,用于SPF鸡群的遗传学检测。方法参照国家标准《实验动物近交系小鼠、大鼠生化标记检测方法》,应用乙酸纤维素板,建立SPF鸡生化标记位点的检测方法。结果共有7种同工酶可以用于鸡的生化检测,其中血红蛋白-β链(Hbb)的检测组织为溶血素,转铁蛋白酶(Trf)的检测组织为肺脏,碳酸酐酶-2(Car2)的检测组织为肝脏或溶血素,异柠檬酸脱氢酶-1(Idh1)、苹果酸酶-1(Mod1)、碱性磷酸酶-1(Akp1)检测组织为肾脏,酯酶-1(Es1)检测组织为血清。结论建立了鸡生化标记检测方法,并对BWEL-SPF鸡群和Line-22鸡群进行了分析,发现都存在多态性。     

利用大肠杆菌表达系统进行葡萄糖－6－磷酸脱氢酶（G－6－PD）的生化鉴定

利用大肠杆菌表达系统进行葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ－６－ＰＤ）的生化鉴定卢义钦（湖南医科大学生化教研室,长沙４１００７８）关键词葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ－６－ＰＤ）,大肠杆菌,表达葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）缺乏症在各民族人群中均有发现,据估...     

21个野生,培育及地方猪种免疫及生化遗传标记基因位点的遗传分化研究

分析了亚,欧,美,非２１个野生,培育及地方猪种４个免疫遗传标记基因位点（Ｅ,Ｆ,Ｇ,Ｌ系统）和３人生化遗传标记基因位点（Ｃｐ,Ａｍ和Ｔｆ）的遗传多态性,认为Ｅ＾ａｅｇ,Ｆ＾ａ,Ｔｆ＾ｃ基因在亚洲猪种与欧美猪种间存在显著差异,是亚洲猪种３个重要的遗传标记基因,根据Ｆ＾ａ基因频率在亚,欧,美,非猪种的变化规律分析了其基因流向特点,证明欧美猪的育种过程中利用了中国地方猪种的血缘,计算了所测猪种间的Ｎｅｉ     

四川南江两种水青冈种群遗传多样性初步研究

利用凝胶电泳法研究米心水青冈（Ｆａｇｕｓｅｎｇｌｅｒｉａｎａ）和巴山水青冈（Ｆ．ｐａｓｈａｎｉｃａ）２个种４个种群的遗传多样性。所测定的酶系统包括：过氧化物酶（ＰＸ１和ＰＸ２）,磷酸葡萄糖脱氢酶（ＰＧＤ）,酸性磷酸化酶（ＡＣＰ）,超氧物歧化酶（ＳＯＤ）,谷氨酸草酰乙酸转氨酶（ＧＯＴ１和ＧＯＴ２）,异柠檬酸脱氢酶（ＩＤＨ）,磷酸果糖异构酶（ＰＧＩ）,甲基萘醌还原酶（ＭＮＲ）,葡萄糖磷酸变位酶（ＰＧＭ１和ＰＧＭ２）和苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ２）１０种酶系统。测定和分析了水青冈等位基因频率、遗传多样性、固定指数、Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｉｎｂｅｒｇ平衡和遗传距离指标,为进一步研究水青冈属各种间的亲缘关系和进化提供了科学依据     

利用双重PCR技术研究长爪沙鼠的微卫星结构

目的为了建立快速检测长爪沙鼠群体遗传多样性的方法及获得Z：ZCLA长爪沙鼠封闭群现用微卫星位点的结构。方法利用17个微卫星位点（9个来自长爪沙鼠,8个来自大小鼠）进行了PCR反应体系及反应条件的优化,组合了6组双重PCR及两个复合式点样,用上述8个组合对普通级Z：ZCLA长爪沙鼠封闭群43、444、5三个世代核心群各100只种鼠进行遗传检测。结果三个世代的300只种鼠的检测结果表明,9个长爪沙鼠位点均为微卫星,其中7个位点为完全型的微卫星,1个为复合型,1个为不完全型,多态性主要表现在核心序列的重复;来自大小鼠的8个微卫星位点,有7个在Z：ZCLA长爪沙鼠核心群中得到有效扩增,只有3个位点在三个世代中均有出现,对测序结果分析后发现,其核心序列均为小卫星。结论来自长爪沙鼠的位点,无论结构还是遗传方式均符合微卫星遗传标记的特点,可用作检测长爪沙鼠的群体遗传多样性。     

柚品种的等位酶变异研究

研究了柚的48个品种的等位酶变异,利用等位酶分析技术对柚的酯酶（EST）,6－磷酸葡萄糖异的酶（PGI）,6－磷酸葡萄糖变位酶（PGM）,莽草酸脱氢酶（SKD）,超氧化物歧化酶（SOD）共5个酶系统的10个等位酶基因座进行了分析,除PGI－1,PGI－2两个基因座外,其它8个均为多态性基因座;10个等位酶基因座共观察到的等位基因25个,平均每个基因座的有效等位基因数目为1．55,基因多样度0．2805,柚的品种间具有较为丰富的等位酶标记遗传多样性,但柚类种质资源群体总的遗传多样性水平偏低。柚的较低的有效等位基因数目与基因多样度可能由于人工选择及资源流失造成。     

Sibp：KM小鼠的生长繁殖及其若干生物学特性研究

本文按国际上远交群小鼠的遗传监测和控制的要求,对Ｓｉｂｐ：ＫＭ小鼠进行育种繁殖、遗传背景和生物学特性等多方面的研究。统计分析该小鼠繁殖性能,绘制了生长曲线。测定２４个生化标志基因位点,其中１１个位点呈多态型,平均杂合率为０．２０９。该小鼠下颌骨形态分析的部分判别函数值（占４４％）超过均值±２ＳＤ,呈弥散分布。该小鼠Ｈ－２组织相容合体,具有１０种Ｉ类私有抗原,１７种表现型。此外还测定该小鼠形态数据、部分血液学数据和整体分析,为Ｓｉｂｐ：ＫＭ小鼠推广应用提供技术数据。     

茄子耐盐种质资源遗传多样性的SRAP和ISSR分析

利用SRAP和ISSR分子标记,研究了14份耐盐茄子种质资源的遗传多样性,结果表明,2种标记均能揭示材料间较高的遗传多样性,其中ISSR标记多态性略高于SRAP标记。在SRAP分析中,每对引物组合可扩增出8-15条DNA片段,平均为12．12条：26对SRAP引物组合共扩增出315条DNA片段,其中263条具有多态性,多态性比率为83．49％;材料间遗传相似系数变化范围为0．212～0．923,平均值为0．755。在ISSR分析中,每个引物可获得5～16条DNA片段,平均为10．87条;15个ISSR引物共扩增出163条DNA片段,其中141条具有多态性,多态性比率为86．50％;材料间遗传相似系数变幅为0．333-0．957,平均值为0．736。聚类分析表明,2种标记都能将供试材料完全区分开来,聚类结果具有一定的相似性,但也存在明显差异。Mantel相关分析表明,SRAP分析与ISSR分析的相关性达到极显著性水平（r=0．904,P〈0．01）。     

基于 DArT 标记的三疣梭子蟹地理种群遗传多样性分析

三疣梭子蟹是中国重要的水产养殖动物。目前,其养殖业的蟹苗主要还是依靠野生资源,但种质（生长速度、肌肉品质和抗病性）退化现象严重,因此迫切需要了解个体、种群和物种遗传多样性。报道了一种检测三疣梭子蟹多样性芯片技术（diversityarraystechnology,DART）。DArT技术采用芯片可同时检测数百个基因座,即使没有基因组DNA序列信息也可以分析遗传多态性。采用了风tL／TaqI复杂性降低方法,多态性效率为12．5％。利用多样性芯片杂交获得313个DArT标记。这些DArT标记用于点制多态性富集芯片,DArT标记具有较高的多态性信息含量（polymorphisminformationcontent,PIC）。最后根据0／1矩阵获得UPGMA系统进化树,结果表明样品间的遗传多样性与文献报道一致。芯片质量检测中包括赋值重复性为99．1％,同一样品不同个体间的差异不显著,其差异介于0．7％～1．6％。研究表明,DArT技术具有高通量和低成本的显著特点,该技术可为三疣梭子蟹资源保护和良种选育提供支持。     

西藏小型猪H-FABP基因的PCR-RFLP研究

目的研究西藏小型猪心脏脂肪酸结合蛋白（H-FABP）基因5’-上游区和第二内含子内的遗传变异。方法应用PCR-RFLP技术测定30头西藏小型猪H-FABP的基因型。结果（1）在5’-上游区的Hinf I-RFLP位点上,西藏小型猪表现出多态性,等位基因h的频率为0．80;（2）在在第二内含子内的Hae Ⅲ-RFLP位点上,西藏小型猪均为DD纯合子;（3）在第二内含子内的Hinf I＊-RFLP位点上,除一头猪表现为bb基因型外,其余猪都表现为BB基因型,等位基因B的频率为0．97;（4）除Hae Ⅲ-RFLP位点外,在其余位点上西藏小型猪均处于Hardy-weinberg不平衡状态。（5）在Hinf I-RFLP中,西藏小型猪表现为中度多态性（0．25〈PIC〈0．5）,而在其他位点的RFLP中表现为低度多态（PIC〈0．25）。结论可以利用西藏小型猪H-FABP基因5’-上游区的多态遗传标记来分析其与肌内脂肪的关系。     

杏鲍菇菌种遗传多态性的ISSR分析

采用ISSR(Inter-simple Sequence Repeat)分子标记技术并应用NTSYSpc 2.10e生物软件对20株杏鲍菇菌种进行遗传聚类分析。结果表明,从22条引物中筛选出11条扩增条带清晰、多态性好的ISSR引物,共获得74个ISSR标记位点,51个多态性位点,多态比率为68.92%,产物片段大小在100~5 000 bp之间。聚类分析发现,遗传相似系数在0.828时,20株杏鲍菇菌种分为4个类群,当遗传相似系数达到0.896时,分为12个类群,杏528寿与其他菌种的亲缘系数最远,具有独立的遗传体系。     

不同脂肪高脂日粮诱发胰岛素抵抗综合征大鼠模型的比较

目的分析猪油、豆油、氢化椰子油、乳脂四种不同脂肪的高脂日粮分别诱发胰岛素抵抗综合征（IRS）大鼠的血液生化指标差异,为此类模型的建立及实验研究提供参考。方法雄性SD大鼠随机分为5组,对照组给予普通日粮,高脂组给予脂肪热量比相同的高脂日粮。喂养6周,每两周测定空腹血糖、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c）、总胆固醇（TC）、胰岛素,根据胰岛素敏感性指数（ISI）=ln1/（FPG×FINS）评定大鼠的胰岛素敏感性。结果6周后,猪油组、乳脂组、豆油组血清胰岛素均显著高于对照组（P〈0.05）;乳脂组血清TG显著高于其它高脂组（P〈0.05）;高脂组血清HDL-c均显著低于对照组（P〈0.05）并以豆油组下降幅度最大;猪油组、乳脂组ISI显著低于对照组（P〈0.05）;而各组间血清总胆固醇、血糖及体重无明显差异（P〉0.05）。结论4种高脂日粮诱发IRS大鼠模型的综合效果依次为乳脂、猪油、豆油、氢化椰子油。     

应用微卫星标记研究Dunkin Hartley豚鼠封闭群的遗传背景

目的检测我国现有Dunkin Hartley豚鼠封闭的遗传背景,分析评估其遗传多样性水平和遗传分离情况,为建立标准化的豚鼠封闭群监测方法提供基础资料。方法应用筛选获得的8个微卫星位点,从一个数量为1000的豚鼠封闭群中随机选择72个个体,通过PCR扩增和聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,进行等位基因检测。并根据检测结果分析评估了该豚鼠封闭群的遗传现状。结果共检测到28个等位基因,每个座位的等位基因数为2～5个,有效等位基因数为1.5191～3.4422,平均2.3093。平均期望杂合度为0.5294。各位点多态信息含量在0.3154～0.6545之间,平均值为0.4687。有5个位点显著偏离Hardy-Weinberg平衡。结论豚鼠封闭群的遗传多态性处于中等水平,遗传平衡检测结果提示种群的繁殖过程未能实现完全随机交配,近交现象一定程度上存在。本研究的结果将为豚鼠封闭群遗传监测方法和标准的建立提供基础。