捕获循环肿瘤细胞的纳米系统

循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)是引起癌症转移的重要因素.检测CTCs对于癌症早期诊断、治疗监控和预后判定具有重要意义.由于癌症患者血液中CTCs数量稀少,CTCs检测困难,研究具有高CTCs捕获效率与捕获纯度的CTCs捕获系统是近年来研究的热点.纳米系统因为具有比表面积大、易于...     

综述——基于纳米材料的生物检测与医学诊断技术：循环肿瘤细胞富集和检测的纳米技术

循环肿瘤细胞(CTC)是肿瘤转移过程中在血液循环系统中存活的肿瘤细胞,该细胞的生成被认为是肿瘤发生转移的必要前提．CTC的存在与否及数量多少是肿瘤预后判断、疗效监控和肿瘤转移评估的一个重要检测指标．近年来,纳米材料、纳米结构表面以及可操控微量液体的微流控技术广泛应用于CTC的富集和检测,本文对CTC富集、检测纳米技术的最新进展进行综述,希望能够为肿瘤的诊断和治疗提供帮助．     

纳米技术在循环肿瘤细胞捕获及检测中的应用

恶性肿瘤是威胁人类健康和导致死亡的主要原因之一.循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)从原发位肿瘤组织脱落是引起远处转移的重要原因,因此,CTCs的捕获和检测对癌症研究和临床治疗实践具有重要意义.而CTCs是稀有细胞,从复杂的血样中捕获及检测CTCs是当前急需解决的难题之一,纳米材...     

肺癌循环肿瘤细胞的单细胞EGFR基因突变检测

循环肿瘤细胞（Circulating tumor cells,CTCs）是从肿瘤原发病灶脱落并侵入外周血循环的肿瘤细胞。由于CTCs存在较大的异质性,其与癌症发展转移密切相关,但目前尚缺乏有效的CTCs单细胞异质性检测方法。鉴于此,本文发展了在单细胞层面对CTCs进行基因突变的检测方法并用于单个肺癌CTC的EGFR（Epidermal growth factor receptor）基因突变检测。首先用集成式微流控系统完成血液中稀有CTCs的捕获,接着将CTCs释放入含有多个微孔的微阵列芯片中,得到含有单个CTC的微孔,通过显微操作将单个CTC转入PCR管内完成单细胞基因组的放大,并进行单细胞的EGFR基因突变检测。以非小细胞肺癌细胞系A549、NCI-H1650和NCI-H1975为样本,通过芯片与毛细管修饰、引物扩增条件（复性温度、循环次数）的优化,结果显示在复性温度59℃、30个循环次数的条件下,引物扩增效果最优。利用该方法成功地对非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer, NSCLC）患者的血液样本进行了测试。从患者2 mL血液中获取5个CTCs,分别对其EGFR基因的第18、19、20、21外显子进行测序,发现该患者CTCs均为EGFR野生型。研究结果证明此检测方法可以灵敏地用于单个CTC基因突变的检测,在临床研究上具有重要的指导意义。     

微流控芯片技术在循环肿瘤细胞分离中的研究进展

循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)是指从原发肿瘤或转移灶脱落、发生上皮-间质转化进入患者外周血血液循环的恶性肿瘤细胞.CTCs在肿瘤研究和临床诊断上的作用逐渐得到认可,外周血中CTCs存在与否以及数量多少不但可以用于肿瘤的早期诊断,还可以用于评估肿瘤预后、监测肿瘤的转移和复发.微流控芯片作为一个高通量、小型化的细胞实验平台,已被应用于CTCs的分选当中.本文综述了用于CTCs捕获的微流控芯片系统的最新研究进展,着重介绍各类芯片的捕获原理、芯片结构和捕获效率,最后对微流控芯片技术在CTCs分选中的应用前景进行了展望.     

肺癌患者外周血中循环肿瘤细胞的快速分离与体外培养

循环肿瘤细胞(circulating tumor cells, CTCs)是从肿瘤病灶脱落并进入外周血液循环的处于游离状态的肿瘤细胞,代表了肿瘤病灶的分子特征,可用于对肿瘤的“液体活检”。但外周血中CTCs数目极为稀少,使得后续针对CTCs的分子与功能分析面临巨大挑战。鉴于此,本文建立了一种基于微流控芯片和免疫磁珠的能够快速从肺癌患者的外周血中分离CTCs的方法。该方法直接针对全血进行一步分离,可避免血液样本预处理及富集等过程对细胞造成的损伤,从而有效地保护CTCs的活性(>90%)。分离得到的CTCs可富集在小体积中(80 μL),实现高密度的细胞培养,完成体外扩增,扩增后的CTCs可以被进一步冻存、复苏及再次增殖培养,表明已经对患者血液中的CTCs成功建系。本文进一步对CTCs进行了基因突变(EGFR、KRAS、PIK3CA、TP53和BRAF)检测及荧光标记葡萄糖类似物(2-NBDG)摄取的功能分析,证明CTCs存在较大异质性。本研究成功实现了对外周血中稀少的CTCs进行体外培养,并对CTCs进行了基因、蛋白、功能等各个层面的分析,这对于肿瘤精准医疗具有重要的临床意义。     

循环肿瘤细胞识别技术研究现状

循环肿瘤细胞(CTCs)对恶性肿瘤传播转移有重要影响,因此CTCs识别技术的出现与不断进步有着重要的临床意义,准确可靠的CTCs识别技术将为尽早确诊肿瘤、指导个性化治疗方案、诊断微小残留病变以及评估抗癌药物的敏感性提供强有力的工具。本文针对核酸检测法、免疫细胞化学术、流式细胞术和基于表征特性图像识别技术等CTC识别技术的发展情况进行了综述总结,比较各种技术的优缺点,对现阶段该领域存在的问题进行了讨论,并对CTCs识别的技术发展方向作了进一步的展望,为学者们提供更广的研究思路。     

循环肿瘤细胞检测装置

美国加州大学洛杉矶分校（UCLA）的研究人员研发出一种新型的纳米柱硅片,可捕捉从肿瘤脱落到血液中的癌细胞——循环肿瘤细胞（CTCs）。这一装置可帮助医生快速有效地进行癌症的检测和诊断,进行预后判断,并提高治疗监测的有效性。     

循环表皮细胞的检测

事实上,很早以前——早在1869年——科学家就发现癌症细胞可以在血液中消失。20世纪50年代中期,一些研究者认为这些所谓的循环肿瘤细胞（CTC）可以帮助临床学家更早的捕获癌症或者检测治疗的效果。一些研究人员更专业的倾向于称之为循环表皮细胞——而不一定是循环肿瘤细胞本身——然而CTC的称谓仍然广泛使用。抛开这些术语不管,     

乳腺癌患者循环肿瘤细胞检测的研究进展

血行播散是乳腺癌转移的重要途径,检测腋窝淋巴结已经不能完全准确判断乳腺癌患者是否存在转移。肿瘤细胞进入外周血是肿瘤远处转移的前提,对乳腺癌患者循环肿瘤细胞的检测将有助于判断预后,指导治疗,监测治疗效果。简要综述了乳腺癌循环肿瘤细胞及其检测方法的研究进展。     

肝细胞癌循环肿瘤细胞标志物及检测方法研究进展

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)在中国是一种高发病率和高死亡率的恶性肿瘤。肿瘤切除、肝移植是治疗该病最有效的手段,但术后的高复发率和高转移率是影响患者预后的重要因素。外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells, CTCs)是导致肝细胞癌术后复发和转移的必要因子。综述了CTCs的标记物——磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3、转铁蛋白受体、甲胎蛋白、α-L岩藻糖苷酶、上皮细胞粘附因子、高尔基蛋白73和异常凝血酶原等,以及利用这些标记物检测CTCs的特异性和灵敏度,以期为肝细胞癌转移的早期检测、术后的复发、预后评估和选择治疗方案等提供依据。     

以微小RNA作为新型标志物检测循环肿瘤细胞及其临床意义

循环肿瘤细胞（circulating tumor cell,CTC）是随血液循环一起转运的实体肿瘤细胞,与实体肿瘤的发展、转移、复发和预后等关系密切。然而,CTC数量的稀少使有效检测CTC具有较大的挑战性。微小RNA（microRNA,miRNA）作为一类新发现的基因表达调控分子,在肿瘤的发生、发展、转归等过程中起着重要的作用。CTC关联性miRNA的研究为CTC的检测和肿瘤的诊治开创了新思路。该文介绍了CTC的临床意义和主要分析方法,在CTC关联性miRNA与肿瘤诊断、治疗和预后等方面总结了这类新型肿瘤细胞标志物的研究进展。     

Biomolecular Surfaces for the Capture and Reprogramming of Circulating Tumor Cells

Circulating Tumor Cells(CTC)have the potential to be used clinically as a diagnostic tool and a treatment tool in the fieldof oncology.As a diagnostic tool,CTC may be used to indicate the presence of a tumor before it is large enough to cause noticeablesymptoms.As a treatment tool,CTC isolated from patients may be used to test the efficacy of chemotherapy options topersonalize patient treatment.One way for tumors to spread is through metastasis via the circulatory system.CTC are able toexploit the natural leukocyte recruitment process that is initially mediated by rolling on transient selectin bonds.Our capturedevices take advantage of this naturally occurring recruitment step to isolate CTC from whole blood by flowing samples throughselectin and antibody-coated microtubes.Whole blood was spiked with a known concentration of labeled cancer cells and thenperfused through pre-coated microtubes.Microtubes were then rinsed to remove unbound cells and the number of labeled cellscaptured on the lumen was assessed.CTC were successfully captured from whole blood at a clinically relevant level on the orderof 10 cells per mL.Combination tubes with selectin and antibody coated surface exhibited higher capture rate than tubes coatedwith selectin alone or antibody alone.Additionally,CTC capture was demonstrated with the KG 1 a hematopoietic cell line andthe DU 145 epithelial cell line.Thus,the in vivo process of selectin-mediated CTC recruitment to distant vessel walls can be usedin vitro to target CTC to a tube lumen.The biomolecular coatings can also be used to capture CTC of hematopoietic andepithelial tumor origin and is demonstrated to sensitivities down to the order of 10 CTC per mL.In a related study aimed at reducing the blood borne metastatic cancer load,we have shown that cells captured to a surfacecan be neutralized by a receptor-mediated biochemical signal.In the proposed method we have shown that using a combinedselectin and TRAIL(TNF Related Apoptosis Inducing Ligand or Apo 2L)functionalized surface we are abl     

Potentiated DNA Damage Response in Circulating Breast Tumor Cells Confers Resistance to Chemotherapy

Circulating tumor cells (CTCs) are seeds for cancer metastasis and are predictive of poor prognosis in breast cancer patients. Whether CTCs and primary tumor cells (PTCs) respond to chemotherapy differently is not known. Here, we show that CTCs of breast cancer are more resistant to chemotherapy than PTCs because of potentiated DNA repair. Surprisingly, the chemoresistance of CTCs was recapitulated in PTCs when they were detached from the extracellular matrix. Detachment of PTCs increased the levels of reactive oxygen species and partially activated the DNA damage checkpoint, converting PTCs to a CTC-like state. Inhibition of checkpoint kinases Chk1 and Chk2 in CTCs reduces the basal checkpoint response and sensitizes CTCs to DNA damage in vitro and in mouse xenografts. Our results suggest that DNA damage checkpoint inhibitors may benefit the chemotherapy of breast cancer patients by suppressing the chemoresistance of CTCs and reducing the risk of cancer metastasis.     

循环肿瘤DNA的检测技术及在癌症诊疗中的应用价值

循环肿瘤DNA（ctDNA）来源于肿瘤,能很好地反映肿瘤的基因信息,并且会随着肿瘤的进展发生相应的改变。近年来,ctDNA独特的能力备受人们关注并被广泛研究,本文在总结ctDNA的来源、性质和样品处理的基础上,对ctDNA的检测技术及在癌症诊疗中的应用进行综述,阐述了ctDNA标准物质在二代测序中的作用及重要性,并指出ctDNA样品的收集、存储、定量检测以及数据分析等各个流程中建立统一标准及规范的迫切性。     

宫颈癌患者外周血循环肿瘤细胞检测的意义

目的:通过分析宫颈癌患者的临床资料与循环肿瘤细胞(CTC)之间的关系,评估其在宫颈癌患者诊疗过程中的临床意义。方法:回顾性分析我院2017年3月至2018年6月行机器人辅助下宫颈癌根治术的病例共82例,术前术后分别行CTC检测,分析CTC阳性率及CTC水平与临床参数的相关性。结果:不同病理类型、分化程度、脉管侵犯、淋巴转移及临床分期宫颈癌患者术前及术后CTC阳性率及CTC水平比较差异均无统计学意义(P0.05)。当宫颈癌浸润深度≥5 mm时,CTC的阳性率及CTC水平明显升高,CTC阳性率的差异仅在术前有统计学意义(P0.05);而CTC水平的差异在术前及术后均有统计学意义(P0.05)。结论:CTC的阳性表达及水平与肿瘤的浸润深度密切相关。检测宫颈癌患者CTC水平可为宫颈癌的诊治及预后评估提供重要参考价值。     

循环肿瘤DNA的检测及研究现状

中国癌症发病率与世界水平相持平,死亡率要高于世界水平。虽然更多先进的技术已经运用到癌症治疗领域,但是癌症的死亡率依然居高不下。癌症之所以难克服,是因为肿瘤细胞具有异质性。“液体活检”技术的出现,使无创性治疗方法开始应用到肿瘤治疗领域,循环肿瘤DNA(circulating tumor DNA,ctDNA)则是“液体活检”中的一种重要素材。血液中游离的DNA被称为cfDNA(Cell free DNA),含有突变的cfDNA就被称作ctDNA。ctDNA所含有的突变一般是单个碱基替换所造成的,只有癌细胞才会有这种情况的发生,这使得ctDNA具有极高的特异性,可作为高灵敏的生物标记物。由于ctDNA存在于血液中,其无创性价值重大。