细胞信号转导分子在TNF—α诱导c—jun基因表达中的作用

前期研究表明ｐ３８丝裂原活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）通过磷酸化心肌细胞增强因子２（ｍｙｏｃｙｔｅ ｅｎｈａｎｃｅｒ ｆａｃｔｏｒ２,ＭＥＦ２）转录因子家族成员调节ｃ－Ｊｕｎ蛋白表达。ｃ－ｊｕｎ的启动子区存在ＭＥＦ２位点,ＭＥＦ２转录因子家族成员以同源或异源二聚体形式与其结合。研究了ｐ３８和ＢＭＫ１（ｂｉｇ ＭＡＰ ｋｉｎａｓｅ１）在ＴＮＦ－α诱导ｃ－ｊｕｎ基因表达中的调控作用。ｐ３８上调ＭＥＦ２Ａ的转     

鸡AChRγ亚基基因远端E盒子与myogenin的相互作用

业已证明,鸡ｎＡｃｈＲγ亚基基因５连接区,－５０９／－３０２,－３２４／＋３６片段可独立激活异源启动子ＳＶ４０的转录活性,γ基因近端两个Ｅ盒子（ＣＡＮＮＴＧ）与生肌调节因子（ｍｙｏｇｅｎｉｎ）的相互作用及转录激活分析表明,近端两个Ｅ盒子是γ启动子活性必不可少的,但却是不充分的,利用胶阻滞和ＤＮａｓｅＩ足级试验观察了鸡ｎＡｃｈＲγ基因远端Ｅ盒子与ＧＳＴ－ｍｙｏｇｅｎｉｎ融合蛋白的相互作用,胶阻滞试验     

鸡AChRγ亚基基因远上游增强子样作用依赖生肌因子

先前曾报告鸡ＡＣｈＲγ亚基基因５＇连接区－５３８／－２８８片段（含一对Ｅ盒子）与生肌调节因子（ｍｙｏｇｅｎｉｎ）的相互作用,为进一步观察ＤＮＡ－ｍｙｏｇｅｎｉｎ相互作用对γ基因转录激活功能的影响,利用瞬时表达体系研究了鸡ｎＡＣｈＲγ亚基基因５＇端－５３８／－２８８片段调控机能。ＣＡＴ分析表明：γ基因－５３８／－２８８片段可显著激活ｔｋ启动子在分化的Ｃ２Ｃ１２肌细胞中的转录活性,但不能激活在未分化Ｃ２Ｃ１２肌细胞中的转录活性。这种组织特异性转录激活作用与距离无关,因而是一个典型的增强子;－５３８／－２８８片段的增强子样作用既依赖于两毗邻Ｅ盒子的完整性,又依赖于ｍｙｏｇｅｎｉｎ等生肌调节因子的存在。强化表达ｍｙｏｇｅｎｉｎ可激活ｐＢＬＣＡＴ２－γ（－５３８／－４３３）和ｐＢＬＣＡＴ２－γ（－４３２／－２８８）（各含一个Ｅ盒子）在分化肌细胞中的表达,究竟是克隆片段中的独立Ｅ盒子对这种表达起贡献还是出现在克隆位点附近的反向Ｅ盒子（ＧＴＣＧＡＣ）或ｔｋ启动子中的另一个Ｅ盆子起作用？尚不十分清楚。     

cAMP反应序列结合蛋白及其家族与转录调节

ｃＡＭＰ反应序列结合蛋白（ｃＡＭＰ－ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｅｌｅｍｅｎｔｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ,ＣＲＥＢ）经磷酸化激活后,可参与ｃＡＭＰ诱导的多种靶基因的转录调控。新近研究表明,ＣＲＥＢ的转录调节作用可能是通过ＣＲＥＢ结合蛋白（ＣＲＥＢ－ｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ,ＣＢＰ）实现的。在神经系统中,ＣＲＥＢ可能介导神经递质诱导的基因表达,并能通过放大神经营养因子的信号,参与神经细胞增殖、分化、存活等生物效应。     

鸡AChRγ亚基基因远端E盒子与myogenin的相互作用

业已证明,鸡ｎＡｃｈＲγ亚基基因５＇连接区,－５０９／－３０２,－３２４／＋３６片段可独立激活异源启动子ＳＶ４０的转录活性;γ基因近端两个Ｅ盒子（ＣＡＮＮＴＧ）与生肌调节因子（ｍｙｏｇｅｎｉｎ）的相互作用及转录激活分析表明,近端两个Ｅ盒于是γ启动子活性必不可少的,但却是不充分的。利用胶阻滞和ＤＮａｓｅⅠ足纹试验观察了鸡ｎＡｃｂＲγ基因远端Ｅ盒子与ＧＳＴ－ｍｙｏｇｅｎｉｎ融合蛋白的相互作用。胶阻滞试验证明,－５３８／－２８８片段可与ｍｙｏｇｅｎｉｎ相互结合,引起（３２）￣ｐ标记的ＤＮＡ片段在ＰＡＧＥ中迁移率减慢,这种胶阻滞现象可被含Ｅ盒子的未标记片段消除,并被抗鸡ｍｙｏｇｅｎｉｎ单克隆抗体或抗血清所改变。ＤＮａｓｅⅠ足纹试验证明,ｍｙｏｇｅｎｉｎ系通过γ基因转录起始点上游－４２９／－４２４及－４６３／－４５８两个Ｅ盒子与γ基因５＇连接区－５３８／－２８８相互作用。     

鸡AchRγ亚基基因远上游增强子样作用依赖生肌因子

先前曾报告鸡ＡＣｈＲγ亚基基因５连接区－５３８／－２８８片段（含一对Ｅ盒子）与生肌调节因子（ｍｙｏｇｅｎｉｎ）的相互作用,为进一步观察ＤＮＡ－ｍｙｏｇｅｎｉｎ相互作用对γ基因转录激活功能的影响,利用瞬时表达体系研究了鸡ｎＡＣｈＲγ亚基基因５端－５３８／－２８８片段调控机能,ＣＡＴ分析表明：γ基因－５３８／－２８８片段可显著激活ｔｋ启动子在分化的Ｃ２Ｃ１２肌细胞中的转录活性,但不能激活在未分化Ｃ２Ｃ     

去甲肾上腺素对棕色脂肪组织募集反应的调节作用

去甲肾上腺素（ＮＡ）可引起棕色脂肪组织（ＢＡＴ）的产热作用,也是ＢＡＴ募集反应主要的调节物质。ＢＡＴ中存在的肾上腺素受体（ＡＲ）至少包括α１,α２,β１和β２四型。ＢＡＴ的产热作用主要由β３－ＡＲ介导;其细胞增殖和细胞分化分别由β１－ＡＲ和β３－ＡＲ介导。与ＢＡＴ募集有关的几种转录因子的表达也受ＮＡ的调控,例如ｃ－ｆｏｓ和非成熟细胞Ｃ／ＥＢＰα基因的表达受β－和α１－ＡＲ的调节;Ｃ／ＥＢＰβ和成熟     

真核生物mRNA的帽结构与由结合蛋白

帽结构是所有ＲＮＡ聚合酶Ⅱ转录产物的特征性结构,它在ｍＲＮＡ的功能和代谢的很多方面起作用。在这些过程中还离不开相关蛋白质对它的识别和粘附,作为它行使功能的媒介,这些蛋白南就称为帽结合蛋白（Ｃａｐ－Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｐｒｏｔｅｉｎ,ＣＢＰ）。该文主要讨论了帽结构与胞质中的ＣＢＰ－ｅＩＦ４Ｅ（ｅｕｋａｒｙｏｔｉｃ ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ ４Ｅ,真核核起始因子４Ｅ）的相互作用在ｍＲＢＮＡ指导的     

膜去极化与cAMP在胰岛细胞株HIT中诱导CBP片段的转录活性

为了研究 Ｃ Ｂ Ｐ在胰岛 Ｈ Ｉ Ｔ 细胞中调节基因转录的机制,将不同的 Ｃ Ｂ Ｐ片段瞬时转染到细胞中,观察其转录活性．实验表明,在胰岛 Ｈ Ｉ Ｔ 细胞中,膜去极化及 ｃ Ａ Ｍ Ｐ 均可诱导 Ｃ Ｂ Ｐ３０（ Ｃ Ｒ Ｅ Ｂ结合功能区）转录活性增强,并有协同效应． Ｐ Ｋ Ｃ对 Ｃ Ｂ Ｐ３０ 的转录活性无影响;与 Ｃ Ｒ Ｅ Ｂ有更强结合力的 Ｃ Ｂ Ｐ Ｋ Ｉ Ｘ Ｓ／ Ｂ（氨基酸序列短于 Ｃ Ｂ Ｐ３０ 的 Ｃ Ｒ Ｅ Ｂ结合功能区）其基本转录活性及膜去极化、ｃ Ａ Ｍ Ｐ诱导下的转录活性均比 Ｃ Ｂ Ｐ３０ 更强．反义 Ｃ Ｒ Ｅ Ｂ 的过度表达可降低 ｃ Ａ Ｍ Ｐ诱导的 Ｃ Ｂ Ｐ的转录活性．提示在胰岛 Ｈ Ｉ Ｔ 细胞中,膜去极化及 ｃ Ａ Ｍ Ｐ对共转录因子 Ｃ Ｂ Ｐ转录活性的调节作用通过 Ｃ Ｒ Ｅ Ｂ介导．     

M－CAT盒在鸡AchR γ－亚基基因转录激活中的作用

原代培养鸡胚肌细胞瞬时转染结合氯霉素乙酰基转移酶水平测试表明：鸡ＡＣｈＲγ－亚基基因缺失近起始点一对Ｅ盒（ＣＡＮＮＴＧ）的－２０４／－５０片段与含Ｅ盒的－２０４／＋３６片段一样,均可独立激活ｔｋ启动子的转录活性,证明了该片段的增强子样作用,利用鸡胚肌肉核抽提物与－２０４／－５０片段进行胶阻滞分析,检出了明显的迁移位移条带的发生;迁移条带不仅可被未标记的－２０４／－５０片段消除,而且还可被含Ｍ－ＣＡＴ盒（ＣＡＴＴＣＣＴ）的２３ｂｐ寡核苷酸竞争阻断,说明胶阻滞分析中出现的迁移条带系由核内因子特异结合－２０４／－５０片段中的Ｍ－ＣＡＴ序列所致,上述结果证明,Ｍ－ＣＡＴ盒对鸡ＡＣｈＲγ－亚基基因－２０４／－５０片段的转录激活功能起作用。