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1.
蛋白激酶Cα过表达导致正常人胚肺成纤维细胞生长失调的研究 总被引:6,自引:0,他引:6
采用自行构建的过表达PKCα亚类的正常人胚肺细胞模型,观察到细胞生长加速,血清依赖性明显下降,细胞形态发生变化,单层培养丧失接触抑制性,出现岛状生长,与对照组细胞相比,贴壁依赖性下降,在软琼脂中能形成小集落,细胞中微丝发生部分解聚,进一步检测观察到细胞中与转化密切相关的ras癌基因表达明显增强,抑癌基因p53表达下降。首次表明在正常人胚肺细胞中PKCα的过表达直接导致细胞增殖加速,并可诱导出现部分 相似文献
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以人胃癌细胞BGC-823为模型,研究了毛喉萜(forskolin)对胃癌细胞中蛋白激酶C活性及其亚类基因表达的作用,同时也观察了毛喉萜对癌基因c-jun及抑癌基因p53表达的影响.结果表明,2×10~(-5)mol/L毛喉萜处理BGC-823细胞72h,细胞质、膜和细胞核PKC活性下降,PKC亚类β,γ基因表达被抑制,癌基因c-jun的表达也明显降低,而抑癌基因p53表达升高,上述变化可能是毛喉萜抑制胃癌细胞增殖等生理效应的重要分子事件。 相似文献
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毛喉萜(forskolin)对人胄癌细胞BGC-823增殖有明显抑制作用,具药物剂量和作用时间之依赖性。剂量为2×10~(-5)mol/L之毛喉萜使胃癌细胞在软琼脂中形成集落的能力显著降低;癌基因c-Ha-ras之表达明显被抑制,细胞核中与ras基因上游调控区2.5kb片段结合的三种蛋白结合能力下降。联系到以同样浓度药物处理胃癌细胞72h,细胞质、膜与细胞核中蛋白激酶C(PKC)活性均下降的现象,可能PKC活性下降与Ha-ras基因上游片段2.5kb结合蛋白之结合能力下降存在相关性,PKC可能通过影响DNA结合蛋白的磷酸化作用,导致了Ha-ras基因表达之被阻抑。而ras基因表达下降可能是毛喉萜抑制胃癌细胞增殖的一个重要分子事件。 相似文献
4.
目的:研究维甲酸对人成骨肉瘤MG-63细胞增殖和相关基因表达的影响,以探索其对成骨肉瘤细胞的生物学效应.方法:以1μmol/L维甲酸处理人成骨肉瘤MG-63细胞,生长曲线测定,流式细胞仪分析、光镜观察和免疫细胞化学检测等研究维甲酸对MG-63细胞的生长曲线、细胞周期和相关癌基因、抑癌基因表达的影响,并对其作用机理进行初步分析.结果:维甲酸处理7天后,MG-63细胞生长抑制率达到42.2%,G0/G1期比例达到61.8%,细胞形态铺展,排列趋于规则,癌基因c-myc、c-fos的表达降低.而抑癌基因Rb、p27表达上调.结论:1μmol/L维甲酸可以有效抑制细胞的增殖活动,改变细胞恶性形态特征,下调癌基因c-myc、c-fos和上调抑癌基因Rb、p27的表达,从而对人成骨肉瘤细胞分化具有诱导作用. 相似文献
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二酰甘油-蛋白激酶C信使系统在LA90细胞转化中的作用 总被引:2,自引:0,他引:2
以LA90细胞(RSV温度敏感突变株LA90转化的小鼠成纤维细胞〕为模型,研究了二酰甘油(DG)-蛋白激酶C(PKC)信使系统在细胞转化中的作用。通过免疫沉淀法观察到LA90细胞在允许温度(33℃)时具有很高的pp60v-src激酶活性,远高于非允许温度(39℃),当从39℃转至33℃10分钟,激酶活性就已显著升高。同时运用3H-甘油掺入并结合板层析分离方法和酶活性测定,发现LA90细胞中DG含量和PKC活性在33℃条件下高于39℃,当由39℃转至33℃10分钟,细胞内DG含量和PKC活性均明显增加。我们进一步探讨了PKC活性与癌基因v-ser、p53基因表达的相关性,实验表明,PKC的激活剂TPA可刺激39℃条件下的LA90细胞中v-sre和p53基因表达,PKC选择性抑制剂H7可抑制33℃条件下LA90细胞中v-erc和p53基因表达。看来,pp60v-src可通过刺激磷脂酰肌醇(PI)代谢激活DG-PKC(diacylglycerol-proteinkinaseC)信使系统,后者通过某种途径调控v-src和p53等癌基因之表达。因此DG-PKC信使系统可能是pp60v-src转化细胞及被转化细胞维持转 相似文献
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细支气管肺泡细胞增生和细支气管肺泡细胞癌内生长因子和蛋白激酶C的表达 总被引:4,自引:0,他引:4
表皮生长因子(EGF)、转化生长因子-α(TGFα)、表皮生长因子受体(EGFR)和蛋白激酶C(PKC)与细胞生长、增殖分化调节和细胞癌变有密切关系。作者用免疫组织化学方法检测了细支气管肺泡细胞增生(BAH)和细支气管肺泡细胞癌(BAC)的EGF、TGFα、EGFR和PKC表达。结果表明:BAC中的EGF、TGFα阳性率和阳性强度以及EGFR、PKC阳性强度均明显高于BAH。BAH的重度不典型增生病例,其EGF、TGFα、EGFR和PKC均呈高表达。TGFα、EGFR和PKC三者在BAC和BAH中的表达存在明显相关性。提示:TGFα及其受体EGFR和PKC是细支气管肺泡细胞增生、恶性转化和肺泡癌细胞失控生长的重要因素。 相似文献
7.
本文通过基因转染技术将大鼠蛋白激酶C(PKC)βⅠ亚类cDNA全长片段导入人胚肺成纤维细胞(2 BS)中,首次建立了一个稳定地过表达PKC βⅠ类的2 BS细胞模型。经实验证明在过表达PKC βⅠ亚类的细胞中PKC活性是对照细胞的三倍左右,表现出细胞增殖加速,进一步观察到与增殖有关的原癌基因c-myc的表达也明显加强。本文首次报道了PKC βⅠ在人胚肺细胞2 BS中加速生长与c-myc基因表达之密切相关性。这可能是PKC βⅠ作用于2 BS细胞生长加速的分子机理之一。 相似文献
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目的:研究维甲酸对SK-N-SH细胞的增殖和相关基因表达的影响.方法:通过苔盼蓝排除法绘制细胞生长曲线、流式细胞技术测定细胞周期、HE染色光镜观察细胞形态改变以及SABC免疫细胞化学梁色法观察维甲酸对SK-N-SH相关癌基因、抑癌基因表达的影响.结果:1μmol/LRA处理后,SK-N-SH细胞的增殖活动受到明显的抑制,处理第7天抑制率达36.16%;周期测定显示处理后出现明显的G0/G1期阻滞,由对照组的49.7%增加至62.7%,增加了26.2%;免疫细胞化学染色结果显示,处理后细胞癌基因c-myc、c-fos的表达较对照组明显降低,而抑癌基因p53、p27的表达则有所加强.结论:维甲酸能有效抑制SK-N-SH细胞的增殖活动,其对细胞的增殖抑制作用与RA下调c-myc、c-fos等癌基因以及上调p53、p27等抑癌基因的表达有关. 相似文献
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间隙连接蛋白Cx43在人胚肺和肺癌细胞表达的研究 总被引:7,自引:0,他引:7
细胞与细胞之间通过细胞膜上的间隙连接通道交换小分子和离子进行细胞间通讯,对细胞增殖分化调控和机体内环境稳定有重要作用。用间隙连接蛋白Cx43cDNA探针Northern印迹杂交,Cx43抗体免疫荧光染色和罗氏黄荧光染料传输方法检查,正常人胚肺细胞的Cx43在mRNA和蛋白水平有高表达,Cx43蛋白免疫荧光分布在间隙连接的部位,细胞间隙连接通讯功能明显。与正常相反,人肺癌PG系细胞Ck43无论在mRNA或蛋白质水平都无表达,细胞通讯功能缺陷。结果表明Cx43在培养的人胚肺细胞有功能性表达。人肺癌PG细胞通讯功能缺陷与Cx43基因转录抑制有关。对Cx基因的抑癌基因性质进行讨论。 相似文献
11.
新的抑癌基因TSLC1属于免疫球蛋白超家族,位于人染色体11q23.2。TSLC1编码的蛋白质参与细胞间黏附、细胞运动、信号转导及免疫调节。研究显示,TSLC1在多种肿瘤中表达异常,它对肿瘤的影响主要表现为抑制瘤细胞增殖及诱导凋亡、改变瘤细胞的生长特性及基因表达,和抑制上皮间质转化。TSLC1的缺失与启动子甲基化关系密切,但其发挥抑癌作用的分子机制及信号转导途径尚有待研究。 相似文献
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运用cDNA代表性差异分析法(cDNA representational difference analysis,cDNA RDA),以正常人鼻咽上皮细胞及鼻咽癌HNE1细胞作为比较的样品来源,分离了四个在鼻咽癌中缺失的cDNA片段.以此四个片段作探针,分别进行DNA杂交、RNA杂交,结果显示,这些差异性的cDNA序列确实来自正常人鼻咽上皮且只在其中表达和/或在鼻咽癌HNE1中表达降低,并在鼻咽癌病人中存在不同程度的缺失.序列分析结果表明这些差异性表达的基因为具有相当抑癌基因功能的已知基因和可能与鼻咽癌相关的抑癌基因的新基因.从而说明cDNA RDA是一种高效、敏感、假阳性低的克隆抑癌基因的有效方法. 相似文献
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PKCγ过表达诱导C3H10T1/2细胞生长失控的初探 总被引:1,自引:0,他引:1
通过DNA重组构建蛋白激酶Cγ(PKCγ)亚类的重组质粒并经基因转染技术和DNA印迹、蛋白质印迹与PKC活性分析,获得了过表达PKCγ的C3H10T1/2细胞——NCP4.NCP4细胞生长速率提高,流式细胞光度术检测表明,NCP4细胞G1期百分率下降,S期和G2+M期百分率升高,与对照组细胞相比,血清依赖性明显下降,贴壁依赖性降低,在软琼脂中形成小集落,出现部分转化表型.进一步检测,首次观察到NCP4细胞中癌基因c-sis表达明显增强,这可能是NCP4细胞血清依赖性下降的分子机理之一.实验表明,在正常C3H10T1/2细胞中PKCγ的过表达可直接导致细胞增殖加速并可诱导出现部分转化特征. 相似文献
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研究了PKCα、β1和β2亚型对多药耐药基因mdr1转录的调控作用.以mdr1基因上游调控序列驱动的虫荧光素酶报告基因表达载体和PKC基因表达载体共同转染COS7细胞后,测定虫荧光素酶报告基因表达水平.实验结果表明,PKCα、β1及β2对mdr1基因的转录有下调作用,PMA可进一步加强这一作用;在此转染体系中,PKC抑制剂staurosporine也可抑制mdr1基因的转录,但在只转染mdrluc的细胞中,staurosporine对mdr1的转录则没有影响,提示staurosporine仅在PKC过量表达的细胞中抑制mdr1基因的转录. 相似文献
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3~H-TdR放射性转化细胞(TC3H/10)经1×10~(-5)mol/L Foskolin处理24 h后,TGFα、c-myc、c-K-ras基因的mRNA表达下降,TGFβ、c-fos基因表达无明显变化。非转化细胞(NC3H/10)经相同条件处理,TGFα、TGFβ、c-myc及c-K-ras基因表达无显著改变。提示:Forskolin介导的转化细胞的生长抑制作用与TGFa、cmyc、c-K-ras基因的转录表达下降有关。 相似文献
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生长因子,癌基因与动脉平滑肌细胞增殖 总被引:18,自引:0,他引:18
动脉平滑肌细胞增殖及转化在动脉粥样硬化的形成过程中发挥重要作用。生长因子和癌基因是影响平滑肌细胞增殖的主要因素。本文介绍平滑肌细胞来源的生长因子和sis,fos,myc等癌基因表达与平滑肌细胞增殖的密切关系以及它们相互作用的分子与细胞的可能机制。 相似文献
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MAPK对胰岛素介导的人血管平滑肌细胞PKCα的影响 总被引:7,自引:0,他引:7
目的:在胰岛素的干预下,观察MAPK反义寡核苷酸(ODNs)对人血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及PKCα表达的影响。方法:3HTdR掺入法检测VSMC增殖,逆转录PCR、免疫组织化学法检测PKCα表达。结果:反义ODNs 处理的细胞可显著抑制胰岛素诱导的VSMC的DNA合成,ODNs 的上述作用与降低VSMC内PKCα基因表达有关。结论:胰岛素刺激人VSMC增殖可被MAPK反义寡核苷酸所抑制,可能存在有关胰岛素PKCMAPK激活途径 相似文献
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DNA和RNA肿瘤病毒可以通过整合基因、病毒自身携带的癌基因及病毒的致癌蛋白 细胞内源怀癌基因或抑癌基因相互作用,顺式或反式激活癌基因,致使基因过度表达,产生细胞转化和组织癌变。本文阐述病毒基因及其产物对细胞癌基因的顺式激作用与反式激活作用,进而深入了解病毒诱导癌基因转录的分子机制。 相似文献