蛋白酶活化受体1在凝血酶介导的肺癌细胞功能中的作用

目的:探讨蛋白酶活化受体1(PAR1)在凝血酶促进肺癌细胞迁移、黏附、克隆形成及胶原收缩中的作用。方法:将本实验室已构建的重组干扰载体pSilence-shPAR1和过表达载体pIRES-EGFP-PAR1分别转入人肺癌细胞PLA-801D和PLA-801C中,采用反转录PCR和实时荧光定量PCR方法检测细胞中PAR1的表达量,Transwell实验检测细胞的迁移能力,细胞黏附实验检测细胞对细胞外基质的黏附能力,克隆形成实验检测细胞的增殖能力,胶原收缩实验评价细胞对细胞外基质的重塑能力。结果:PAR1高表达(PLA-801C-pIRES-EGFP-PAR1)可明显增强PLA-801C细胞的迁移、黏附和胶原收缩能力(P<0.05,P<0.001),而PAR1被有效干扰后(PLA-801D-pSi lence-shPAR1),PLA-801D细胞的迁移、黏附和胶原收缩能力显著减弱(P<0.05,P<0.001),而且PAR1的表达量直接与PLA-801D和PLA-801C细胞的克隆形成能力呈正相关。结论:PAR1在凝血酶促进肺癌细胞的黏附、迁移增殖和细胞外基质重塑等功能中发挥着重要作用,为以PAR1为靶的抗肿瘤治疗提供了理论基础。     

人组织型基质金属蛋白酶抑制剂-1在Pichia pastoris酵母中重组表达研究

 为研究组织型基质金属蛋白酶抑制剂 (TIMPs)的分子作用机制 ,探讨了在 Pichia pastoris酵母中高效表达分泌型人组织型基质金属蛋白酶抑制剂 - 1 (TIMP- 1 )的技术路线 ,并对产物性质进行初步研究 .通过 PCR从含有 TIMP- 1基因的 p BS质粒获得了该基因的全长序列 ,构建了 p PIC9/T1表达载体 ,电击法转化酵母 ,通过表型筛选和 PCR鉴定证实了目的基因已稳定整合入 Pichiapastoris酵母基因组中 .SDS- PAGE表明表达量高达 40 mg/L培养上清 .用免疫印迹法确定了产物的正确性 ;同时 ,反向明胶酶谱法证明了重组蛋白具有抑制基质金属蛋白酶的活性 .     

胰升血糖素样肽-1及其受体与 2 型糖尿病的治疗

胰岛素对治疗 2 型糖尿病有一定效果,但长期使用会引起低血糖反应;双胍类药物降糖疗效显著,但会引起消化道不良反应 . 因此,寻找一种安全有效的药物是 2 型糖尿病治疗的当务之急 . 胰升血糖素样肽-1 作为一种胰岛素分泌促进剂和胰岛素增敏剂越来越受人们的关注,将它用于治疗糖尿病不会产生低血糖,对 1 型和 2 型糖尿病都有疗效 . 讨论胰升血糖素样肽-1及其受体的最新研究状况 .     

ADAMTS-1在酒精性心肌病大鼠心室重构中的作用研究

目的:观察含凝血酶敏感蛋白序列的解整合素-金属蛋白酶-1(ADAMTS-1)在酒精性心肌病(ACM)大鼠心室肌中的表达变化及其与心室重构的关系。方法:将50只健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组(n=20)和ACM组(n=30)。ACM组大鼠第1周每天给予10%酒精随意饮用,60%酒精灌胃1次(5 mL/kg);第2周每天给予10%酒精随意饮用,60%酒精灌胃2次(10 mL/kg);第3周~16周每天给予20%酒精随意饮用,60%酒精灌胃2次(15 mL/kg),第17周~6个月每天给予30%酒精随意饮用,60%酒精灌胃2次(15 mL/kg)。对照组大鼠采用普通水随意饮用,以同样方式给予普通水灌胃。实验开始前及6个月时超声心动图检测左心室射血分数(LVEF)、左心室舒张末期直径(LVEDD)和短轴缩短率(FS)。6个月后处死动物,光镜下观察心肌病理组织学改变;Masson染色检测心肌胶原分布及胶原容积分数(CVF);TUNEL法检测心肌细胞凋亡。免疫组化法测定心室肌中ADAMTS-1及其底物多配体蛋白聚糖-4(Syndecan-4)的蛋白含量。结果:与对照组相比,ACM组大鼠LVEF(P0.01)及FS(P0.05)明显降低,而LVEDD显著增加(P0.05);心肌细胞肥大,排列紊乱,部分心肌细胞脂肪变性;心肌纤维断裂、溶解;心肌间质血管扩张充血,胞外间隙明显增宽,纤维组织增生,炎性细胞浸润;CVF及凋亡指数显著增加(P0.01);ADAMTS-1及Syndecan-4蛋白表达显著上调(P0.05)。结论:ADAMTS-1在ACM心肌中表达明显增多,可能通过水解释放Syndecan-4,促进ECM重塑、心肌纤维化及细胞凋亡,参与ACM心室重构过程。     

白介素-1和血小板源性生长因子对血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶-1表达的影响

目的:观察白介素-1(IL-1)和血小板源性生长因子(PDGF)对血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶-1(MMP-1)表达的影响.方法:用RT-PCR法检测MMP-1的mRNA水平,用Western蛋白印迹法(Westcrr blot)检测MMP-1蛋白水平,采用电泳迁移率变动分析(EMSA)法测AP-1结合活性.结果:白介素-1(20μg/L)和PDGF(20 μg/L)联合使用使MMP-1的mRNA水平明显增高,显著增加MMP-1蛋白表达,提高AP-1结合活性.结论:白介素-1和血小板源性生长因子联合使用可刺激MMP-1生成.     

胰高血糖素样肽-1在胰腺中作用机制的研究进展

胰高血糖素样肽-1（GLP-1）是胰高血糖素原基因编码的一种激素,主要由肠道L细胞产生并分泌进入血液。GLP-1能激活胰腺、肾脏、肺、胃、心脏和脑等组织中存在的特异性G蛋白偶联受体（GPCR）。通过GLP-1受体（GLP-1R）的激活,活化腺苷酸环化酶,产生3＇,5＇-环腺苷酸,随后通过cAMP依赖性第二信使途径激活蛋白激酶A和鸟苷酸交换因子。大量围绕胰岛素产生细胞——β细胞开展的研究证明,GLP-1短期作用能够加强葡萄糖依赖性的胰岛素分泌作用,持续的GLP-1R激活也能增加胰岛素的合成,促进β细胞的增殖和新生,抑制β细胞凋亡。GLP-1在胰岛素和胰高血糖素分泌方面的独特作用引发了大量针对GLP-1受体激动剂的研究。我们对胰腺中GLP-1R激活所产生作用的机制进行简要综述。     

靶向膜型1基质金属蛋白酶反义肽的虚拟筛选与分子模拟

膜型1基质金属蛋白酶(Membrane type-1 matrix metalloproteinase,MT1-MMP,MMP14)在肿瘤的发生发展及转移中起着重要作用,是肿瘤潜在理想的药物靶标。为了获得MT1-MMP结合肽,我们首先采用生物信息学方法分析MMPs序列,获得MT1-MMP差异大且特异的序列。以此为正义肽靶标,设计反义肽库,然后通过分子对接、分子动力学模拟以及体外细胞实验等多种方法,进行靶向MT1-MMP反义肽的筛选与活性研究。多序列比对确定了位于MT1-MMP环区的特异序列AYIREGHE(简称MT1-loop),并构建1 536条反义肽。经两轮虚拟筛选,选取打分位于前五的反义肽用于后续研究。该五条反义肽与MT1-MMP存在较强的相互作用且能很好地对接于正义肽区域。进一步分析其与MMPs其他家族成员(MMP1-3,MMP7-13,MMP14HPX,MMP16)的亲和力,发现反义肽FVTFPYIR对MT1-MMP具有更强的特异性。分子动力学模拟表明,反义肽FVTFPYIR可能是通过影响受体MT1-MMP的构象稳定性,进而影响其功能活性。体外细胞实验初步确定反义肽FVTFPYIR可选择性地抑制表达MT1-MMP的人成骨肉瘤细胞MG63和乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖。本研究为抗肿瘤反义肽先导药物的研发提供了一种新的思路与途径。     

血管紧张素II 1型受体相关蛋白研究进展

血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,AngⅡ)作为肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)的关键效应因子,与血管紧张素Ⅱ1型受体(angiotensin Ⅱ type 1 receptor,AT1R)结合后,在体内发挥维持体液及电解质平衡、收缩血管、调节血压,促进心肌、肾近端小管以及血管平滑肌细胞增殖,参与肿瘤的发生发展、血管形成和转移等重要作用。最新研究发现,AT1R相关蛋白特异性作用于AT1R蛋白的碳末端,通过调节受体的内化、细胞膜的再通和受体的敏感性对其表达进行控制,发挥相应的生物学作用。本文的重点在于对AT1R相关蛋白的研究进展进行综述,阐述不同AT1R相关蛋白在RAS系统中所起的作用,为RAS系统的进一步研究提供依据。     

肝母细胞瘤组织RECK及膜型基质金属蛋白酶-1的表达及与肿瘤转移抑制关系的探讨

目的:探讨RECK蛋白、膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)在肝母细胞瘤组织中的表达及其在肿瘤转移抑制中的作用。方法:采用第二代通用型二步法监测系统(PV-6000)免疫组织化学方法检测35例肝母细胞瘤组织和15例正常肝脏组织及10例肝脏良性肿瘤组织中RECK、MT1-MMP的表达情况。结果:肝母细胞瘤组织RECK的表达水平明显降低(28.6%);MT1-MMP肝母细胞瘤组织中高表达(54.3%),并随着肿瘤浸润深度的加深、远处转移的发生而增高(p<0.05);二者表达呈负相关(p<0.05)。结论:RECK和MT1-MMP在肝母细胞瘤组织中的表达呈负相关;RECK和MT1-MMP在肝母细胞瘤的进展中起重要作用。     

恒牙牙根不同发育阶段牙髓中基质金属蛋白酶-8和I型胶原的表达

目的探讨Ⅰ型胶原及MMP-8在牙齿发育不同阶段的表达及作用。方法将人牙根不同发育阶段的牙髓分成三组,即牙根开始发育组、发育中组、根尖孔闭合组。采用SABC法对标本石蜡切片进行Ⅰ型胶原及MMP-8的免疫组化染色。结果Ⅰ型胶原与MMP-8均存在于牙髓中的成牙本质细胞、成纤维细胞、血管壁及细胞外基质中。牙根刚开始发育时染色最强,根尖孔闭合时染色最弱。Ⅰ型胶原与MMP-8的表达呈正相关关系。结论①牙本质和前期牙本质中Ⅰ型胶原主要是由成牙本质细胞分泌的,且随着牙齿发育,分泌胶原能力减弱;②MMP-8参与牙齿成熟过程;③MMP-8参与牙齿发育中Ⅰ型胶原的降解,有维持牙髓中胶原稳定的作用。     

HMGB1与冠心病关系的研究进展

高迁移率族蛋白B1(high mobility group box1protein,HMGB1)是一种高度保守的核内非组蛋白,可由致病因素引发细胞被动释放或损伤、凋亡和坏死细胞主动分泌而产生。HMGB1可以在真核细胞坏死过程中被释放到细胞外。越来越多的研究证明,HMGB1是一种重要的潜在炎性介质,通过与其特异性受体结合而发挥着重要的炎症细胞因子作用。近年来研究表明,HMGB1通过参与炎症过程而影响动脉粥样硬化斑块的进展。因此,HMGB1可能是机体冠状动脉炎性疾病的重要靶点。本文对HMGB1及其作用机制进行综述,为心血管疾病的预防和治疗提供文献依据。     

AHR,a novel acute hypoxia‐response sequence,drives reporter gene expression under hypoxia in vitro and in vivo

ADAMTS1 (a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 1) is an early immediate gene. We have previously reported that ADAMTS1 was strongly induced by hypoxia. In this study, we investigated whether ADAMTS1 promoter‐driven reporter signal is detectable by acute hypoxia. We constructed the GFP (green fluorescent protein) expression vector [AHR (acute hypoxia‐response sequence)‐GFP] under the control of ADAMTS1 promoter and compared it with the constitutive GFP‐expressing vector under the control of CMV (cytomegalovirus promoter‐GFP). We transduced AHR‐GFP and examined whether GFP signals can be detected under the acute hypoxia. When the human umbilical vein [HUVEC (human umbilical vein endothelial cells)] was transduced under normoxia, there were few GFP signals, while CMV‐GFP showed considerable GFP signals. When HUVEC was stimulated with hypoxia, GFP signals from AHR‐GFP gene were induced under hypoxic conditions. Notably, the GFP signals peaked at 3 h under hypoxia. In ischaemic hind limb model, transduced AHR‐GFP showed hypoxic induction of GFP signals. In summary, we have demonstrated that the AHR system induced the reporter gene expression by acute hypoxia, and its induction is transient. This is the first report showing the unique acute hypoxia‐activated gene expression system.     

国产雷帕霉素药物洗脱支架在冠心病介入治疗中疗效评价

目的:观察国产雷帕霉素药物洗脱支架在冠心病介入治疗中有效性及安全性。方法:2010年1月至2010年12月我院心血管内科收治并行国产雷帕霉素药物洗脱支架(Firebird支架)置入术患者124例,收治并行进口雷帕霉素药物洗脱支架(Cypher^TM支架)置入术患者167例,于不同支架置入患者中各随机选68例,命名为国产组与进口组。术后1年、5年分别随访两组,观察两组患者支架置入后在不同时间段不良心血管事件发生情况及冠脉造影复查结果。结果:两组患者不良事件比较,国产组术后1年随访结果与术后5年随访结果比较,差异无统计学意义(P0.05);进口组术后1年随访结果与术后5年随访结果比较,差异无统计学意义(P0.05);国产组术后5年随访结果与进口组术后5年随访结果比较,差异无统计学意义(P0.05)。两组患者冠脉造影复查结果比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:国产雷帕霉素药物洗脱支架在冠脉介入治疗中具有安全性和有效性,与进口雷帕霉素药物洗脱支架比较无明显差异,值得临床推广应用。     

载脂蛋白AI—CⅢ基因区域DNA多态性及单倍型与冠心病的关系

本文利用重组DNA技术,以人apoAI cDNA片段为探针,对50例正常血脂汉族个体和33例冠心病患者的载脂蛋白AⅠ—CⅢ基因区域DNA多态频率和特征进行了分析。发现中国汉族群体载脂蛋白AⅠ—CⅢ基因区域亦存在Sst-Ⅰ和Msp-Ⅰ多态位点,可产生S_2和M_22种多态片段,其等位基因频率分别为0.167和0.22,均高于高加索人但低于日本人,表明这2个多态部位的等位基因频率具有种族差异。我们还对44例正常血脂个体和27例冠心病患者进行了单倍型分析,没有发现S_1S_2M_1M_1,S_2S_2M_1M_2和S_2S_2M_1M_1基因型个体,因此,在中国汉族人群中,可能仅存在3种单倍型:S_1—M_1(0.81),S_2M_2(0.17)及S_1—M_2(0.02),而不存在S_2—M_1这种单倍型。同日本人和高加索一样,在中国汉族人群中,S_1S_2与M_1、M_2之间亦存在连锁不平衡。本研究结果表明,S_2与M_2等位基因在正常血脂的汉族人与冠心病病人之间的分布频率均没有显著差异,但冠心痛病人的S_1—M_2单倍型频率明显高于正常人,其有极显著的差异。提示S_1—M_2这种单倍型与冠心病有明显的关联,可做为一种假定的动脉粥样硬化致病基因的连锁标记,对有关个体进行连锁分析。     

通脉养心丸对冠状动脉粥样硬化性心脏病伴慢性病贫血患者铁调素水平的影响

目的:探讨通脉养心丸对冠状动脉粥样硬化性心脏病(CAD)伴慢性病贫血(ACD)患者铁调素水平的影响。方法:于2015年4月-2016年6月在上海交通大学医学院附属仁济医院(南院)接受治疗的患者中选取70例年龄≥40岁的冠状动脉粥样硬化性心脏病伴慢性病贫血患者并随机分成两组,每组各35人,分别服用通脉养心丸(II组)或未服用通脉养心丸(III组)。同时选取冠心病患者不伴有慢性病贫血40人为对照组(I组),该组患者服用通脉养心丸。观察比较三组服药8周前后的血铁调素及血红蛋白、铁蛋白水平的变化。结果:服药前,II、III组的血Hepc水平均明显高于I组(P0.05)。8周治疗后,II组患者血Hepc表达明显下降,Hb水平较治疗前显著升高(P0.05),其余两组血Hepc表达与治疗前相比差异无统计学意义(P0.05);II组、III组血Hepc水平显著高于I组(P0.05),III组的血Hepc水平显著高于II组;III组患者的Hb水平明显低于I组、II组(P0.05)。结论:通脉养心丸能降低冠状动脉粥样硬化性心脏病伴慢性病贫血患者的铁调素水平,提高该类患者的血红蛋白值,对冠状动脉粥样硬化性心脏病伴慢性病贫血患者,尤其是轻度贫血患者有一定的治疗价值。     

动态心电图与常规心电图诊断冠心病患者心律失常的效果比较

目的:分析冠心病(Coronary heart disease,CHD)心律失常(Arrhythmia)患者诊断中常规心电图(ECG)和动态心电图(DCG)两种诊断方式效果。方法:选取我院收治的CHD患者84例作为研究对象,分别使用ECG和DCG两种方式进行诊断,判断2种方法冠心病检测阳性率、心律失常检出率的情况。结果:动态组检测的阳性率为63.10%(53例),常规组为58.33%(49例),数据差异无统计学意义P0.05;8项心律失常指标中房性/室上性早搏早发、方式传导阻滞等检出率差异无统计学意义,P0.05;其余5项检出率差异显著,P0.05。结论:冠心病心律失常患者的诊断时采用动态心电图在冠心病诊断阳性率和心律失常检出率方面均有一定的优势。     

冠心病合并脑梗死患者心率变异性及心律失常的变化分析

目的：研究冠心病合并脑梗死患者的心率变异性情况,和心律失常的发生率,分析它们的变化规律,为患者疾病的治疗及预后提供更好的治疗指导。方法：研究对象为2012年2月~2012年12月我院心内科及神经内科的患者,其中Ⅰ组：冠心病合并脑梗死患者40例、Ⅱ组：单纯冠心病患者40例、Ⅲ组：单纯脑梗死患者40例、以及Ⅳ组：健康成人50例,统计全部患24 h心率变异性及心律失常发生情况,并进行对比分析。结果：Ⅰ组患者的心率变异性和心律失常发生明显高于其它组患者,差异均具有统计学意义（P〈0.05）。且心率变异性时域参数下降,心律失常发生率升高。结论：冠心病合并脑梗死患者的心率变异性和心律失常发生率增高,为避免冠心病合并脑梗死的患者突然心律失常及猝死,应积极改变治疗措施。     

瑞舒伐他汀对冠心病患者血脂水平及颈动脉粥样硬化斑块硬化程度的影响

目的:探讨瑞舒伐他汀对冠心病患者血脂水平以及颈动脉粥样硬化斑块硬化程度的影响。方法:选择2013年2月至2014年12月我院收治的132例冠心病患者作为研究对象,将其随机分为研究组(66例)和对照组(66例),研究组应用瑞舒伐他汀(rosuvastatin calcium,RC)治疗,对照组采用常规药物治疗,观察和比较两组患者的血脂水平变化情况及颈动脉粥样硬化斑块硬化(IMT)程度的改善情况。结果:两组的总胆固醇(total c holesterol,T C)、低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、甘油三酯(triglyceride,T G)水平较治疗前均有降低,高密度脂蛋白胆固醇(High density lipoprotein cholesterol,HDL-C)水平较治疗前有升高,研究组变化更显著,组间差异有统计学意义(P0.05)。两组颈动脉粥样硬化斑块硬化程度较治疗前有改善,研究组优于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。研究组与对照组治疗总有效率分别为98.5%、71.2%,差异有统计学意义(P0.05)。结论:瑞舒伐他汀能够有效降低冠心病患者的血脂水平,并能改善其颈动脉粥样硬化的程度。     

银杏叶滴丸联合瑞舒伐他汀对老年冠心病患者的临床效果

摘要 目的：研究银杏叶滴丸联合瑞舒伐他汀对老年冠心病患者的临床效果。方法：选择2017年8月～2019年12月于我院的75例老年冠心病患者,将其随机分为两组。对照组口服瑞舒伐他汀,观察组联合口服银杏叶滴丸联合瑞舒伐他汀。比较两组的左室舒张末径(Left ventricular end diastolic diameter, LVEDD)、心输出量(Cardiac output, CO)和左室射血分数(Left ventricular ejection fraction, LVEF);血清白细胞介素-2 (Interleukin-2, IL-2)、P 选择素、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor -α, TNF-α)水平。结果：观察组的有效率95.49 %,明显高于对照组71.05 %(P<0.05);治疗后,两组的纤维蛋白原、全血高切黏度、红细胞聚集指数、全血低切黏度、最大血小板聚集率和血浆黏度、LVEDD、血清IL-2、P 选择素、TNF-α水平明显降低(P<0.05),且观察组明显低于对照组,CO以及LVEF明显升高(P<0.05),且观察组上述指标的变化均优于对照组(P<0.05)。结论：银杏叶滴丸联合瑞舒伐他汀能有效抑制老年冠心病患者体内的炎性反应程度,改善血液流变学,恢复患者的心功能,值得推广。