庆丰霉素的研究 Ⅵ.庆丰霉素的深层发酵

本研究的目的是探索庆丰霉素深层发酵的适宜条件。结果指出:庆丰霉素深层发酵的最适培养基成份为:玉米淀粉4％,糊精0.3％,黄豆饼粉2.0％,花生饼粉2.5％,硝酸钾0.2％,氯化钠0.3％,碳酸钙0.4％。适量的花生饼粉和硝酸钾对庆丰霉素的产生均有明显的促进作用,最适发酵温度为33℃。用庆丰链霉菌M15菌株进行摇瓶及发酵罐发酵,庆丰霉素的效价均达4500～5000微克/毫升。 铁对庆丰霉素产生有抑制作用,培养基中加入葡萄糖表现出葡萄糖效应。 对花生饼粉及硝酸钾促进庆丰霉素合成和铁及葡萄糖抑制庆丰霉素合成的可能作用机理进行了讨论。     

关于利用Malaprade反应测定庆丰霉素化学效价的试验——兼与安徽省白湖农场试验站商榷

本期发表了两篇有关庆丰霉素效价测定方法的文章。1975年本刊曾发表过安徽省白湖农场试验站测定庆丰霉素效价的报告(见本刊2卷1期32页)。安康地区植保植检站根据两年的实验结果,对上述报告提出了不同看法。我们刊出此文,对开展学术讨论或有助益,亦可供进行这类工作的同志参考。四川省科委庆丰霉素协作组介绍了另一种方法,可供农业基层单位参考选用。     

庆丰霉素的“土坑发酵”生产

庆丰霉素“土坑发酵”生产法是用固体种子代替二级液体种子,用土坑发酵代替温室瓶罐发酵或曲盘发酵,从而能有效地扩大生产规模,节约设备、投资、燃料和劳力。产品抗菌素效价7000单位左右。此法也适用于春雷霉素、灰黄霉紊等的士法生产。     

吉它霉素含量测定中相关关系的分析及应用探讨

目的：研究吉它霉素含量测定中的相关关系及其应用。方法：对药厂一年内吉它霉素含量测定结果进行归纳、整理。运用数理统计方法确定并验证其相关关系。结果：吉它霉素主组分总量与生物效价之间存在着相关关系,当主组分总量在区间(70．5～81．0)内,测得生物效价比较稳定且接近真实效价。根据经验数值,建立回归方程：y=19．17x 60(n=10,r=0．874)。结论：吉它霉素主组分总量与生物效价之间有显著线性相关关系,适用于估计效价和质量控制。     

链霉菌原生质体种间融合重组的研究Ⅱ．RVA18——链霉菌原生质体种间融合重组子的一个新代谢产物

RvAl8是链霉菌原生质体种间融合(亲株为庆丰链霉菌和吸水链霉菌井冈变种)得到的一株原养型重组子所产生的一个新的代谢产物,它存在于细胞内,是一个酸性非水溶性的化合物,能溶于甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯和环已烷等,微溶于氯仿。它对革蓝氏阳性细菌和一些植物病原真菌有较强的制菌作用,能引起纹枯病菌的异常分枝。用柱层析和液相色谱相结合的方法提纯后的纯品经紫外、红外、高效液相、核磁共振、质谱等分析证明它是一个理化和生物性质均不同于=亲株产物一一井冈霉素和庆丰霉素的新代谢产物。并将RvAlB的理化、生物性质和二亲株产物井冈霉素及庆丰霉素作了比较。     

SQP1质粒上庆丰霉素生物合成基因的变异和重组

通过原生质体形成与再生手段可以获得庆丰链霉菌SQPI质粒上庆丰霉素生物合成基因发生突变的菌株(Qmrq-)。这些突变株,每两个为一对在斜面上混合培养,使之发生杂交,在所得到的子代菌落中,能检出相当数量回复了庆丰霉素生物合成能力的菌落。推测这些菌落的出现是庆丰霉素合成基因不同突变位点发生遗传重组的结果。     

茴香醛比色法测定发酵液中海南霉素效价

海南霉素在加热条件下能与茴香醛浓硫酸浓液反应产生深蓝色物质,在一定浓度范围内海南霉素效价与颜色深浅程度呈线性关系。所以比色法可以测定发酵液中海南霉素效价。此法快速,简便,重现性好。     

硫酸西梭霉素微生物检定法研究

以短小芽孢杆菌为检定菌,比较了培养基原料对抑菌圈的影响,进行了检定菌的分离和敏感活性测定,标准曲线的可倍限率检测;一剂量和二剂量法的可靠性试验;样品效价测定和统计分析,确认我们建立的硫酸西梭霉素的生测方法是准确、可行的。＊ｐ＜０．００１）,试品间和偏离平行不显著（＊ｐ＞０．０５）,可倍限率小于５％,本实验成立。按ｎ次实验结果合并计算,处理２＃、３＃两批样品的实验结果,见表４。经统计分析,２＃样品标定效价为６２９ｕｇ／ｍｇ,可倍限率４．１９％。３＃样品标定效价５７９ｕｇ／ｍｇ,可倍限率３．７１％。３结论３．１硫酸西梭霉素生物效价测定,美国药典［１］以表皮葡萄球菌作检定菌。我们用短小芽孢杆菌作检定菌,抑菌圈清晰,菌液易于保藏,测定结果准确,复现性强。因此,短小芽孢杆菌可作为硫酸西梭霉素的检定菌,培养时间１４～１６小时,培养温度３５～３７℃。３．２采用标准曲线法和二剂量法进行生物效价测定。前者标准品溶液校正点为５ｕｇ／ｍｌ,后者标准品溶液浓度分别为１０ｕｇ／ｍｌ,５ｕｇ／ｍｌ,剂距比２：１。３．３试验结果表明,培养基的原料直接影响检定菌的生长和样品扩散,从而影响抑菌圈的大小和清晰程度。蛋白陈和琼脂的质量尤为重量。?     

琼脂块法的应用初报

改变或采用新的方法已成为微生物选育工作成败的重要关键。日本梅泽滨夫快速选育出春日霉素高产菌株时,曾采用琼脂块法。该法优点是单菌落琼脂块可直接在平板上进行生物效价测定;至于诱变则仍可采用传统法处理孢子。内疗素是刺孢吸水链霉菌(Strep.hygrospinosvs)的次级代谢产物。用强     

纸层析法测定庆丰霉素

我们通过试验,找到了一种测定庆丰霉素的纸层析法,此法简易、快速、较准确。现介绍如下。一、试剂层析溶剂:正丁醇:冰乙酸:蒸馏水=2.8:1:1。显色剂:0.3克茚三酮,5毫升吡啶用95%的乙醇定容为100毫升配成。春雷霉素溶液(作定量标准用):贮备液为2毫克/毫升,用时以蒸馏水稀释为500微克/毫升。贮备液可在冰箱中保存三个月。     

微生物比浊法测定妥布霉素地塞米松眼膏的效价

目的:分析微生物比浊法在测定妥布霉素地塞米松眼膏的效价。方法:分别使用三种方式测定妥布霉素地塞米松眼膏的含量,分别是微生物比浊法、管碟法以及高效相色谱法。结果:妥布霉素效价测定的线性区间在0.4至1.0U·mL-1之间,RDS为0.96%。结论:微生物比浊法的操作相对便捷,测量的结果也更为准确,能够广泛使用在产品的质量控制操作上。     

西梭霉素产生菌斜面孢子培养条件研究

采用正交法设计斜面培养基,对西梭霉素产生菌的孢子生长所需要的碳源、氮源、生长因子、无机盐等作全面考察,确定了最佳斜面配方,其生物效价比原配方提高２６％。并考察了斜面孢子培养时间,冰箱保藏时间对孢子量和生物效价的影响。     

庆丰霉素抗菌素对几种害虫的毒效试验简报

<正> 用抗菌素防治病虫害已有较长的历史,但用庆丰霉素抗菌素防治病虫害则是近几年研究成功的新农药。我们用它的溶液对菜粉蝶Pierisrapae(Linnaeus)、萝卜蚜Lipaphis erysimi(Kaltenbach)、二化螟Chilo suppressalis Walker及稻苞虫Parnara guttata Bremer et Grey进行毒效试验,发现对某些害虫有一定毒力,现简介如下。 对萝卜蚜的试验效果 共进行了二次试验:第一次,在甘蓝地进行。分别用庆丰霉素80、100、300、500ppm和清水对照处理(下同),喷药一次。浓度300ppm时,蚜虫下降率仅53.88％,毒力低。第二次,在萝卜地进行。分别     

用庆丰霉素防治蚜虫

我们从1978年开始,利用庆丰霉素防治蚜虫。现将结果报道如下。材料和方法     

抗菌素对于数种害虫的毒效试验

本工作收集了三十多种抗菌素(其中农用的14种)对蜡螟、粘虫、棉铃虫、桃蚜进行了毒效试验。结果表明同一抗菌素对不同昆虫的效果不同:在蜡螟中以放线菌酮、庆丰霉素、灭瘟素、土霉素、春雷霉素等毒效较高;对于粘虫和棉铃虫,只有灭瘟素效力较好;但在桃蚜中则灭瘟素的效果不及庆丰霉素。对于抗菌素引起昆虫死亡的原因进行了检查和讨论。     

井冈霉素效价测定的两种方法

井冈霉素经离子交换层析分离可得到Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四个组份,经理化鉴定,其中H、Ⅲ两个组份分别为Valdamycin A、B。目前主要采用稀释法和比色法测定井冈霉素的效价。现分述如下。     

庆丰霉素的研究I．产生菌的分类鉴定

本文研究了庆丰霉素产生菌的生物学特性及其所产生抗菌素的制菌谱,并和资料报道的相近似的已知种作了比较,认为这是一个属于链霉菌金色类群的新种,定名为庆丰链霉菌 (Streptomyces qingfengmyceticus n. sp. SAALMSIPP.)。     

链霉菌原生质体种间融合——产抗生素的耐温型重组子的选育

以庆丰链霉菌(SM^r,42℃不能生长,产庆丰霉索,可抑制细菌生长)与吸水链霉菌井冈变种(sM5,42℃生长良好,产井冈霉素,不抑制细菌生长)为亲株,在42％PEGl000诱导下进行原生质体融合,在含SM 100μg／ml,42℃培养的再生平板上直接选择耐温型融合子,融台率为1O^-5—1O^－4左右,经分离传代后可得到稳定的耐温型的单倍体重组子,即可在42℃生长,并且有链霉素抗性和抑制细菌生长的活性。初步测定了四个重组子产生的抗菌物质的性质,都与亲株产生的庆丰霉素、井冈霉素不同,其中F1－38,F1－16和IFM3－32三个重组子的抗生素在波长274mm处有一个紫外吸收小峰,而重组子F6-6有二个活性部分,其一在紫外线下呈荧光,另一则具有酸碱指示剂特性。     

一种妥布拉霉素产生菌初筛方法的建立

从金黄色葡萄球菌１００１出发,选育到一株对妥布拉霉素和卡那霉素耐药而对阿泊拉霉素敏感的突变株１００１－１１。以金黄色葡萄球菌１００１－１１和对上述三种抗生素均敏感的枯草杆菌６３５０１为测定菌,建立了一种能同时检测妥布拉霉素产生菌菌落琼脂柱总效价和组分相对含量的初筛方法。     

庆丰霉素的研究III.庆丰霉素的固体发酵生产

为适应我国广大农村生产和应用庆丰霉紊的需要,我们研究了庆丰霉素的固体发酵生产法。本文报道固体发酵的生产流程、发酵条件及产品处理等a以米糠、麸皮、玉米粉和砻糠为原料,利用蘑菇瓶发酵,产量一般在1万单位／克千料。此外,还对生产中常出现的问题进行了讨论。