铁皮石斛组织培养与快速繁殖(简报)

以铁皮石斛种子为外植体进行组培快繁技术研究,筛选出适合各个阶段培养的培养基配方。种子萌发的培养基1/2MS+马铃薯汁15%;原球茎分化的培养基1/2MS+马铃薯汁20%+NAA 0.1 mg/L;壮苗培养基MS+香蕉汁10%+NAA 0.2 mg/L;生根培养1/2 MS+香蕉汁15%+NAA 0.5 mg/L。     

白旗兜兰种子非共生萌发与试管苗快速繁育

对我国极小种群野生植物白旗兜兰的种子非共生萌发与试管苗快速繁育开展研究,对比了不同培养基、预处理、种子成熟度及光照对种子萌发的影响。白旗兜兰种子萌发的最适条件是授粉后270 d的种子,在1/4MS+10%椰汁培养基上,用1%Na OCl溶液处理种子40 min并在播种后的前4周进行黑暗培养。最适合原球茎转化幼苗的培养基是3.0 g·L-1花宝一号+1.0 mg·L-1NAA+0.5 g·L-1活性炭+10%香蕉匀浆,而最佳幼苗生根壮苗的培养基是3.0 g·L-1花宝一号+1.0 mg·L-1NAA+1.0 mg·L-16-BA+0.5 g·L-1活性炭+10%香蕉匀浆。     

萼脊兰的组织培养和快速繁殖

1 植物名称萼脊兰[Sedirea japonica(Linden et Rchb.f.)Garay et Sweet]. 2 材料类别授粉后120 d成熟蒴果内的种子. 3 培养条件(1)无菌播种培养基:1/4MS+KT 0.5mg·L-1(单位下同)+2 g·L-1蛋白胨+10%椰乳(W/V+15 g·L-1蔗糖+1 g·L-1活性炭;(2)增殖及分化培养基:1/3MS+6-BA 5+NAA 0.5+10%椰乳+2 g·L-1蛋白胨+20 g·L-1蔗糖+3 g·L1-活性炭;(3)壮苗及生根培养基:1/2MS+IBA 0.5+NAA 0.5+2 g·L-1蛋白胨+2 g·L1-活性炭.     

中国石竹离体快繁与试管苗玻璃化研究

研究了培养基组成成分对中国石竹品种Diana F1 White组培程序中种子萌发、诱芽增殖、试管苗玻璃化及生根等重要环节的影响。结果表明:(1)种子适宜的萌发培养基为1/2MS,在此培养基中种子萌发率为83.33%,播种后30d时无菌苗高度达6.99cm,叶片数达26.7。(2)在芽诱导阶段玻璃化苗发生率最高可达53.85%。将光照强度提高至2000lx后,采用培养基MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L+琼脂8.0g/L+蔗糖8.0g/L进行诱芽培养,玻璃化苗发生率降至3.33%,外植体出芽率达到90%,单个外植体出芽数达到7.2个。(3)适宜的生根培养基为1/2MS+1.0mg/LIBA+琼脂8g/L+蔗糖40g/L,培养30d时生根率为100%,平均根条数达到24.7条,平均根长度达到4.7cm。试管苗在消毒后的腐殖土中移栽,成活率达95%。该研究结果为DianaF1试管苗的快速繁殖提供科学依据。     

爱沙木的组织培养和快速繁殖

1植物名称爱沙木(Eremophila bignoniiflora). 2材料类别无菌萌发的无根种子苗. 3培养条件种子萌发培养基:(1)MS 6-BA 1.0mg·L-1(单位下同) NAA 0.1.分化培养基:(2)MS 6-BA 2.0 NAA 0.1;(3)MS 6-BA 0.5 NAA0.1;(4)MS 6-BA 2.0 IBA 0.01;(5)MS 6-BA0.5 IBA 0.01.壮苗培养基:(6)MS.生根培养基:(7)1/2MS NAA 0.1 1%活性炭;(8)1/2MS NAA0.2 1%活性炭;(9)1/2MS IBA 0.01 1%活性炭;(10)1/2MS IBA 0.02 1%活性炭.以上除生根培养基加入20g·L-1蔗糖外均加入30 g·L-1蔗糖、7g·L-1琼脂,pH 5.6～5.8.光照12 h·d-1,光照度1 500～2000 lx,培养温度23～25℃.     

不同培养基上白芨的种子萌发与幼苗形态发生

对无菌条件下白芨种子在不同培养基上的萌发及其幼苗形态发生进行了研究.结果表明:在白芨种子萌发过程中,种胚先转绿,然后在种胚远离残余胚柄的一端突破种皮,形成原球茎.在原球茎顶端分化出叶原基,并逐渐发育成叶片.在原球茎下部表面存在透明的毛状物,推测这些毛状物与幼根根毛是同功的.白芨种子萌发最适培养基为1/2 g·L-1 +1.0 mMS NAA.添加低浓度的外源细胞分裂素(6-BA或KT)与NAA组合均严重抑制种子的萌发,种子萌发率较低,形成的圆球茎较小,原球茎分化出的小苗也较细弱.白芨生根壮苗最适培养基为1/2 g·L-1 NAA+2.0 g·L-1活性炭+1.0 mg·L-1 +1.0 mMS GA3.生根壮苗培养基中加入活性炭和GA3有利于根的生长和壮苗,且植株长势健壮.炼苗基质为腐殖土和蛭石(1∶1),成活率可达90%以上.     

铁皮石斛无菌播种产业化繁育技术研究

以铁皮石斛的蒴果为外植体,采用种子→原球茎→完整植株→移栽的途径快速成苗进行工厂化生产,对各阶段培养基进行筛选,以及其他一些影响因子进行比较研究。结果表明:人工授粉后生长60～180d的铁皮石斛种子在离体条件下均能萌发,其中授粉150～180d种子的萌发效果最好,萌发率为87.2%～94.4%,适宜的萌发培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+马铃薯汁200g/L+AC 1.0g/L;原球茎增殖的最佳培养基为MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.1mg/L+香蕉汁100g/L+AC 1.0g/L,繁殖系数约为20倍/50d;原球茎在MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+马铃薯汁200g/L+AC 1.0g/L培养基上进行分化培养,分化的同时还能进行一定的增殖;将已分化的芽苗转接到壮苗培养MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L+香蕉汁100g/L+AC 1.0g/L上培养1代后,转接到生根培养基1/2MS+NAA 0.8mg/L+无机盐A 0.2～0.5mg/L+香蕉汁100g/L+AC 1.0g/L上,培养50～70d后,生根率100%,无机盐A可以有效地控制愈伤或原球茎的形成,明显提高生根苗的数量和质量。在桂林地区,生根苗以3～5月和9～10为最佳移栽期,以通过高温处理并堆沤腐熟的松树皮为基质,移栽成活率可达90%。     

Study on technology of aseptic sowing and rapid propagation of Demdrobium officinale

以铁皮石斛的蒴果为外植体,采用种子→原球茎→完整植株→移栽的途径快速成苗进行工厂化生产,对各阶段培养基进行筛选,以及其他一些影响因子进行比较研究.结果表明:人工授粉后生长60～180 d的铁皮石斛种子在离体条件下均能萌发,其中授粉150～180 d种子的萌发效果最好,萌发率为87.2%～94.4%,适宜的萌发培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+马铃薯汁200 g/L+AC 1.0 g/L;原球茎增殖的最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+香蕉汁100 g/L+AC 1.0 g/L,繁殖系数约为20倍/50 d;原球茎在MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+马铃薯汁200 g/L+AC 1.0 g/L培养基上进行分化培养,分化的同时还能进行一定的增殖;将已分化的芽苗转接到壮苗培养MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+香蕉汁100 g/L+AC 1.0 g/L上培养1代后,转接到生根培养基1/2MS+NAA 0.8 mg/L+无机盐A 0.2～0.5 mg/L +香蕉汁100 g/L+AC 1.0 g/L上,培养50～70 d后,生根率100%,无机盐A可以有效地控制愈伤或原球茎的形成,明显提高生根苗的数量和质量.在桂林地区,生根苗以3～5月和9～10为最佳移栽期,以通过高温处理并堆沤腐熟的松树皮为基质,移栽成活率可达90%.     

多花兰种子无菌萌发及离体快繁研究

以多花兰种子为材料,研究了无机盐浓度、植物生长调节剂和光照条件对多花兰种子非共生萌发的影响,在此基础上,通过研究原球茎增殖和分化、芽苗壮苗和生根的培养基配方及培养条件,建立多花兰组培快繁技术体系.结果表明:多花兰种子萌发培养基为1/6 MS十NAA0.5 mg·L-1+6-BA 2.0 mg· L-1+马铃薯泥50g·L-1+AC 1.0g·L-1,光照度为1.25μmol·m-2·s-1,萌发率63.6％;原球茎增殖继代培养基为1/4 MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg· L1+AC 1 g·L-1+PE 200 g·L-1,繁殖倍数6.5倍/60 d,芽分化率60.2％;再生芽分化培养基为1/4 MS十6-BA2.0mg·L-1+NAA 0.2 mg· L-1+AC 1 g·L-1+PE 200g· L-1,繁殖倍数4.0倍/60 d,芽分化率85.0％;芽苗壮苗和生根培养基为1/6 MS+6-BA 3.0 mg·L-1+NAA 1.0 mg·L-1+AC 1 g·L-1+蔗糖20g·L-1 +PE 200 g·L-1和1/4 MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA1.2 mg·L-1+AC1 g·L-1十蔗糖20g·L-1+PE200g· L-1,生根率达100％,生根苗移栽成活率90％.此技术可用于多花兰种苗繁育和种质资源保护.     

细茎石斛的快速繁殖和试管开花诱导

1植物名称细茎石斛[Dendrobiummoniliforme(L.)Sw.]。2材料类别野生植株的成熟种子。3培养条件种子萌发培养基:(1)1/2MS+NAA0.5mg·L-1(单位下同);增殖分化培养基:(2)1/2MS+NAA0.4;生根壮苗培养基:(3)1/2MS+NAA0.2+6-BA2.0;试管开花预处理培养基:(4)1/2MS+TDZ0.05,(5)1/2MS+PP3330.40+ABA1.0,预处理90d;试管开花培养基:(6)MS(1/6N,2P,2K)+PP3331.0+TDZ0.1。每个处理20株,重复3次,150d内统计花芽诱导率(花芽数/植株数)和正常花开放率(正常花开放数/植株数)。以上培养基均附加4%蔗糖、10%(W/V)香蕉汁、8g·L-1琼脂、0.1g·…     

铁皮石斛腋芽的快速繁殖

目的利用组织培养技术建立铁皮石斛的高效快繁体系,克隆繁殖种苗,为野生居群的恢复提供材料。方法以铁皮石斛腋芽为外植体,研究不同浓度和配比的基本培养基、激素以及天然提取物对腋芽萌发生长,丛生芽的诱导增殖以及壮苗生根的影响,比较不同培养阶段的增殖倍数,筛选各时期的最适培养基。并对试管苗的形态学特征进行了调查。结果1/2MS+NAA 0.2 mg/L+BA 1 mg/L适合腋芽的成活生长。BA与香蕉汁组合有利于丛生芽的诱导增殖,其最适比例为1/2MS+NAA 0.5 mg/L+BA 2.0 mg/L+香蕉汁100 g/L,增殖倍数最大可达14.0,平均增殖倍数为6.4。培养基中添加100 g/L香蕉汁或200 g/L马铃薯汁均有利于壮苗生根。结论铁皮石斛通过腋芽形成丛生芽途径建立高效的快繁技术体系获得优质种苗是可行的。     

铁皮石斛快速繁殖和离体种质保存的研究

对铁皮石斛种子发芽、原球茎增殖、丛芽分化和壮苗培育进行了试验、观察和分析,研究了培养基、植物激素、光强和添加剂等对其分化和生长的影响。结果显示种子在1/2MS+蔗糖2%的培养基上,30d萌发95%以上。原球茎在1/2MS+椰子汁25%+蔗糖3%的培养基上,45~60d原球茎增殖速度可达1∶10。丛芽分化较适宜的培养基为1/2MS+BA2mg·L-1+NAA0.2mg·L-1+IBA0.1mg·L-1+蔗糖3%,45~60d芽丛增殖速度为1∶4~5。试管苗在MS+香蕉泥20%+蔗糖2%培养基上,大约60d苗快速长高,茎粗壮且根系发达。离体保存材料可采用试管丛芽和原球茎两种方式,以保持其遗传多样性。保存方法是在15℃左右条件下,保存离体材料,继代间隔期为12~18个月;也可以采用室温保存,在1/2MS+蔗糖1%培养基上,继代间隔期可延长至10~12个月。     

‘红皮’马铃薯试管苗培养和微型薯诱导

以‘红皮’马铃薯块茎上的芽为材料进行试管苗诱导、增殖及试管微型薯诱导研究。结果表明：在MS + 6-BA 0.5 mg/L +活性炭0.17% + 蔗糖20 g/L培养基中培养30 d,试管苗增殖系数达8.6;MS + 6-BA 0.5 mg/L +活性炭0.17% +蔗糖100 g/L培养基中试管微型薯诱导效果较好,30 d后诱导率达62.5%,试管薯平均直径为4.2 mm。     

不同植物生长调节剂对铁皮石斛(Dendrobium candidum)再生的影响

本实验以铁皮石斛无菌苗茎段为外植体,通过添加不同浓度的植物生长调节剂,诱导铁皮石斛愈伤组织形成与分化,建立铁皮石斛组织培养再生体系。结果表明,外植体接种5 d后,在改良MS培养基上添加2 mg/L PBU和0.05 mg/L IAA,可达到100%的愈伤诱导率。将愈伤组织接种在MS培养基上,添加0.1 mg/L NAA和0.5 mg/L 6-BA,不定芽诱导率为90.8%。适合铁皮石斛芽增殖培养基为:MS+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+100 mg/L Vc+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA。PBU浓度为0.5 mg/L,NAA浓度为0.05 mg/L时,芽苗生长情况良好,最适合用于不定芽伸长。铁皮石斛最适生根的培养基为:MS+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+100 mg/L Vc+0.5 mg/L IBA,生根率可高达94.1%。本研究成功建立了铁皮石斛高效再生体系。     

艳丽齿唇兰的组织培养(简报)

以艳丽齿唇兰种子进行离体快速繁殖体系研究。结果表明：芽诱导最佳培养基为1/2MS+6-BA 5.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+花宝1号1 g/L;增殖系数达6～8倍;生根壮苗培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+AC(活性炭) 0.5g/L,生根率达95%。将生根苗移栽入湿润但拧不出水的水苔中,盖膜保湿,成活率达90%。     

花烛苞片离体培养及植株再生(简报)

以花烛苞片为外植体进行离体再生体系研究,结果表明,改良Nitsch BA 1.0mg/L 2,4-D 0.4mg/L 蔗糖20g/L 椰汁15%(V/V)为适宜愈伤组织诱导培养基;改良Nitsch BA 0.25mg/L KT0.1mg/L 蔗糖20g/L 椰汁15%(V/V)为适宜不定芽分化培养基;适宜生根壮苗培养基:改良Nitsch BA 0.25mg/L IBA0.2mg/L 蔗糖30g/L 活性炭2g/L。愈伤组织诱导培养2个月后转入不定芽诱导培养基中,2个月后不定芽陆续发出。     

大苞鞘石斛的离体培养与快速繁殖

1植物名称大苞鞘石斛(Dendrobium wardianumWarner). 2 材料类别种子(授粉6个月). 3培养条件萌发培养基:(1)1/2MS 6-BA0.2mg·L-1(单位下同) NAA 0.2.继代增殖与分化培养基:(2)1/2MS;(3)1,2MS 6-BA 0.2 NAA 0.5:(4)1/2MS 6-BA 0.5;(5)CHB 6-BA 0.5;(6)1/2MS NAA 0.5.生根壮苗培养基:(7)CHB IBA 1.0;(8)花宝1号3g·L-1 蛋白胨2 g-L-1 IBA 1.0:(9)B5.以上萌发培养基和继代增殖与分化培养基均附加2.0%蔗糖,生根壮苗培养基附加3.0%蔗糖,椰乳均为100 mL·L-1,7.6 g·L-1琼脂固化,pH 5.4～5.6.培养温度为(23±1)℃,光照强度30～40μmol·m2·s-1,光照时间16h·d-1.     

梳唇石斛成熟胚的离体培养和植株再生

1植物名称梳唇石斛(Dendrobium strongylanthum Rchb.f.). 2材料类别成熟种子. 3培养条件以MS和1/2MS为基本培养基.(1)种子萌发培养基:MS NAA 0.2 mg·L-1(单位下同) 6-BA 0.4 马铃薯汁200g·L-1;(2)原球茎诱导增殖培养基:1/2MS 6-BA 0.5;(3)原球茎分化培养基:1/2MS 6-BA 0.5 NAA 0.5 椰子汁200g·L-1 ;(4)壮苗及生根培养基:1/2MS NAA 0.5 香蕉泥100g·L-1 .上述培养基均附加20 g·L-1 蔗糖、8 g·L-1琼脂,pH 5.5～5.8.培养温度为(24±2)℃,光照时间12 h·d-1,光照度1 000～2000 lx.     

多花猕猴桃组织培养

多花猕猴桃(Actinidia latifolia)结实率高,果大,果实中维生素 C 含量极高,且具调中下气功效,有“超级水果”之称。本实验提供的方法可在短时间内获得大量植株。一、材料及消毒将多花猕猴桃(由天津医药研究所夏光成研究员鉴定)种子从待熟果实中取出,洗去果肉,放入无菌三角烧瓶中。70%乙醇浸30秒,再用0.1升汞浸8分钟,然后无菌水冲洗5次(如图)。二、培养基及培养条件1号:KC+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖20g/L+琼脂7g/L2号:MS+BA2mg/L+NAA0.1mg/L+水解干酪素200mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L3号:MS+BA2mg/L+NAA0.5mg/L+水解干酪素200mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L     

同色兜兰的非共生萌发与快速繁殖研究

以授粉后不同发育时期的同色兜兰种子为材料,观察其形态特征和萌发过程,并探讨建立同色兜兰高效快繁体系的最佳条件。结果表明,种子发育中后期即授粉后210~240d为较适宜的采收期,授粉后210d的种子萌发率最高(达77.79%);1/4 MS和1/2MS为同色兜兰适宜的基本培养基,添加100mL/L椰乳或1g/L蛋白胨对种子萌发及原球茎生长和分化有明显的促进作用;添加1g/L活性炭对原球茎褐化有一定的抑制作用,但添加剂量不宜过大;添加香蕉汁和苹果汁对同色兜兰种子萌发和原球茎生长分化有抑制作用;暗处理对同色兜兰种子萌发无影响;分化后的原球茎在壮苗和生根培养基上培养120d即可得到4~5片叶、高3~5cm的同色兜兰健壮试管苗。