沈阳地区MRSA血浆凝固酶流行型别监测分析

为了掌握MRSA在沈阳地区流行病学特点 ,采用血浆凝固抑制试验检测 87株MRSA血浆凝固酶型别。结果显示 ,87株MRSA中血浆凝固酶Ⅱ型有 47株 (5 4% ) ,Ⅳ型 2 4株 (2 7.5 % ) ,Ⅶ型 7株 ,Ⅲ型 7株。按菌株来源分析 ,门诊患者MRSA血浆凝固酶型别分布散乱 ,而病房医护人员和住院患者的MRSA血浆凝固酶型别以Ⅱ型居多 ,Ⅳ型次之 ,有明显的偏重集中现象。可见 ,沈阳地区城市大医院MRSA感染蔓延较为严重 ,流行的主要血浆凝固酶型别为Ⅱ和Ⅳ型     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分型及流行现状

【目的】研究杭州地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的基因型别,探讨MRSA菌株流行变化趋势及进化特点,为该地区MRSA的进一步防治提供科学依据。【方法】对86株MRSA进行葡萄球菌盒式染色体SCCmec基因、spa基因分型,并开展多位点序列分型(Multi-locus sequence typing,MLST),与国际上MRSA的流行型别进行比较,分析进化关系。【结果】86株MRSA共发现13个spa型(以t311型为主,占48.8%;其次为t6418型,占11.6%);MLST分型共发现9个ST型(以ST5为主,占59.3%;其次为ST239,占16.3%),经e BURST软件分析它们属于4个群(Group 1、Group 6、Group 8、Group 12)和8种克隆复合体(CC1、CC5、CC630、CC20、CC59、CC88、CC239、CC573);SCCmec基因分型以SCCmecⅡ型为主,占61.6%;其次为SCCmec III型,占22%;5株社区相关性MRSA(SCCmec-Ⅳ型)。其中第一流行克隆型为SCCmec-Ⅱ-ST5-t311-CC5(占47.7%)、其次为SCCmec-III-ST239-t030/t037-CC239(占12.8%)。【结论】SCCmec-Ⅱ-ST5-t311为杭州地区当前流行菌株;CA-MRSA菌株的出现,提示MRSA菌株有由医院向社区播散的趋势;此外,对新发展了单位点变体的菌株(SCCmec-Ⅰ-ST1921-t164-CC20和SCCmec-Ⅳ-ST965-t062-CC5),应加强重视。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的两种新SCCmec型别及其抗药性研究

为探明本地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)的耐药性、流行病学分布状况及携带的葡萄球菌染色体mec盒(SCCmec)型别,用K-B琼脂扩散法、E-test和多位点PCR,对临床分离的金黄色葡萄球菌菌株进行了SCCmec分型及耐药性测定。结果发现了两种新的SCCmec型别,新1型含Ⅱ型的mecA上游特异性位点B和位于mecA内的M位点以及Ⅲ型的下游位点F,缺乏Ⅱ型上游位点C和下游位点D、G;新2型含Ⅰ、Ⅱ型的上游特异性位点A、B和两个Ⅲ型的下游位点F、H,同样缺乏位点C、D、G,可能分别为原有Ⅱ型和Ⅰ、Ⅱ型与Ⅲ型的基因重组株;且携带有新SCCmec型别的MRSA菌株,其流行病学分布特点及抗药性也与国外已报导的菌株不同,多分自门诊病人,且耐药性高,抗药谱广,值得引起高度重视和关注。     

深圳住院患儿MRSA的分子分型和耐药性

目的 了解深圳住院患儿耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA）分子型别及其抗生素的耐药情况,为深圳地区和我国其他地区儿童MRSA感染的监控提供实验依据,为研究该地区儿童MRSA菌株的耐药机制提供依据。方法 收集2014年1月至2015年10月深圳市儿童医院临床分离的社区获得性MRSA（community-acquired,CA-MRSA）、院内获得性MRSA（hospital-acquired,HA-MRSA）共129株,应用SCCmec、spa、MLST等方法进行分子分型及追溯同源性。结果 129株MRSA SCCmec分型中只有SCCmecⅤ型、SCCmecⅣ和未分出型别（non-typeableNT型）,spa分型中t437是最主要型别,MLST分型ST59为最主要型别。两类MRSA对非β-内酰胺酶抗生素如红霉素、克林霉素耐药高达70%以上。结论 深圳住院患儿MRSA中的ST59-SCCmecⅣ-t437为主要流行克隆。CA-MRSA与HA-MRSA在分子分型上无差异性。MRSA对部分非β-内酰胺酶抗生素高度耐药,暂无耐万古霉素MRSA菌株。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子流行病学研究

了解我院患者耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的分子流行病学特点,为临床抗感染治疗提供依据。收集2007年1月~2008年9月我院分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌共54株,采用PCR进行SCCmec基因分型、葡萄球菌A蛋白（SPA）分型,并检测杀白细胞毒素（PVL）基因,同时应用脉冲场凝胶电泳（PFGE）进行同源性分析。54株MRSA菌株SCCmec基因分型为SCCmecⅡ型17株,SCCmecⅢ型33株,SCCmecⅣ型2株,SCCmecⅤ型2株;SPA基因分型将28株归属为t030,9株为t002,8株为t037,5株为t570,2株为t437,t163和t796各1株;PVL毒素检测只有2株SCCmecⅣ型菌株阳性;PFGE证实院内MRSA感染主要为2种克隆株传播,同时还有其他型别出现。本院MRSA流行传播的SCCmec基因型主要以Ⅲ型占优势,同时发现有携带PVL毒素的CA-MRSA分离株流行,应引起密切关注。     

黄柏等中草药对MRSA的抑菌作用及其对质粒的消除作用

研究黄柏等10种中草药对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的抑菌作用及黄柏和甘草对MRSA的质粒消除作用。采用牛津杯法测定中草药对耐药性金黄色葡萄球菌的抑菌作用;逐个检出法测定黄柏和甘草对临床分离的MRSA多重耐药菌株的质粒消除作用。结果显示,在10种中草药中,黄柏和甘草对MRSA的抑制作用最好,其对MRSA的最低抑菌浓度(MIC)均是1 mg/mL,且抑菌效果在一定浓度范围内随药液浓度的增大而增强。黄柏和甘草对MRSA的质粒有消除作用,药物作用48 h后,黄柏和甘草对MRSA的质粒消除率分别为17%和12.2%。结果表明,黄柏和甘草对MRSA有显著抑制作用,且对MRSA的质粒有消除作用。     

奶牛源MRSA肠毒素基因、耐药基因及分子分型分析

为了解宁夏地区奶牛源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的肠毒素基因和耐药基因分布及其分子流行病学特征,本研究通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)技术对前期分离于宁夏地区的9株奶牛源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)进行了18种肠毒素基因和16种耐药基因的检测,同时采用脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis, PFGE)、正向重复序列(direct-repeat unit, dru)和辅助基因调节因子(accessory gene regulator, agr)分子分型技术对MRSA菌株进行分型研究。结果显示所有MRSA菌株均携带经典型肠毒素基因和新型肠毒素基因,共检出12种肠毒素基因,其中selk基因的检出率最高,达到了100%,未检出see、selj、selo、selp、ser和selu基因;11种耐药基因被检出,其中norA、gyrA、grlA和blaZ 4种基因的检出率均达到了100%,未检出tet (O)、optrA、Lin (A)、fexA和cfr基因。PFGE分型结果显示受试菌株间亲缘关系较近;dru分型检出dt11v和dt10a两种型,其中以dt11v(77.8%, 7/9)为主;agr分型主要为agr-Ⅰ型(88.9%, 8/9),agr-Ⅱ型仅有1株。研究表明宁夏地区奶牛源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)中的肠毒素基因和耐药基因分布广泛,菌株间亲缘关系较近,agr-Ⅰ-dt11v为MRSA菌株中的流行基因型。这为以后宁夏地区奶牛源MRSA的产毒性、耐药性和分子流行病学特征的进一步研究提供理论依据。     

海南快生根瘤菌蛋白,多位点酶及质粒电泳

在本室以前的研究中,海南快生根瘤菌具有分类上的多型性。其一部分归于已知各根瘤菌种,另有一部分菌株构成独立的表观群及相应的ＤＮＡ同源群（亚群Ⅱ和Ⅳ）。本文采用不同的电泳方法,分析了海南快生根瘤菌和已知根瘤菌种的代表共５５个菌株的全细胞蛋白、酯酶、过氧化物酶及质粒组成。结果表明：同一亚群的菌株间有相似的蛋白图谱,种群之间有较明显的差异,根瘤菌中普遍存在酯酶,酶带的数量和迁移率具有菌株专一性,更适合于苗株的鉴别。过氧化物酶只在部分菌株中观察到,亚群Ⅱ与亚群Ⅳ的菌株均显示一条酶带,但二者之间的相对迁移率有明显差别。质粒电泳中,大多数海南快生菌中存在着大质粒,分子量范围是２０－４０００Ｋｂ,同一亚群中的不同菌株间具有一定相似性,这些结果为海南快生型根瘤菌的分类提供了一些辅助证据。     

头孢西丁耐药肺炎克雷伯菌AmpC基因和ESBLs检测及耐药性分析

目的了解深圳地区头孢西丁耐药肺炎克雷伯菌头孢菌素酶(AmpC酶)基因型分布、产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及其耐药特点。方法收集深圳地区三家大型综合医院临床标本分离对头孢西丁耐药的肺炎克雷伯菌73株。用碱裂解法提取菌株的质粒,采用多重PCR扩增AmpC基因,应用DNA测序确定其基因型。并对所有菌株进行ESBLs表型确证试验;用K-B法对其进行药物敏感试验。结果 48株(65.8%)AmpC基因扩增阳性,经DNA测序显示,其中46株为DHA-1型,1株为CMY-2型,1株同时产DHA-1和CMY-2型;73株肺炎克雷伯菌中49株ESBLs阳性,其中36株AmpC基因和ESBLs均为阳性。AmpC和(或)ESBLs阳性菌株对多数药物的耐药率高于AmpC和ESBLs均阴性者。结论本地区头孢西丁耐药肺炎克雷伯菌质粒AmpC酶检出率高,基因型主要为DHA-1,同时产AmpC酶和ESBLs菌株较常见。     

232株金黄色葡萄球菌的临床分布特征及耐药性分析

目的了解金黄色葡萄球菌(金葡菌)临床分离株的感染分布特点及耐药现状,以便为临床感染治疗及预防提供帮助。方法收集南昌大学第二附属医院2007年1月至2009年12月临床分离的非重复金葡菌232株。常规方法进行菌株分离,血浆凝固酶、金葡菌单克隆抗体及Vitek-32型仪进行菌株鉴定,纸片扩散法测定菌株对抗菌药物的敏感性,头孢西丁法检测耐甲氧西林金葡菌(MRSA),WHONET5.5软件分析数据。结果下呼吸道标本中分离的金葡菌最多,占44.0%,其次是脓液(20.3%)和血液(18.1%)。232株金葡菌中共检测到MRSA 131株(56.6%),金葡菌对青霉素的耐药率最高(90.0%),对庆大霉素、左氧氟沙星、克林霉素、红霉素和四环素的耐药率均50.0%;耐药率在10.0%~50.0%的有阿米卡星、复方磺胺甲噁唑和夫西地酸;对替考拉宁耐药率非常低(1.3%);未出现耐万古霉素的菌株。结论下呼吸道及皮肤软组织是金葡菌的主要感染部位;金葡菌对临床常用抗菌药物的耐药率近3年来趋于稳定,糖肽类抗菌药物对其仍有非常强的抗菌活性。