白喉和破伤风类毒素的定量测定——1.絮状试验和Lf-单位

<正> 引言 白喉和破伤风毒素、类毒素和抗毒素的絮状试验是由Ramon建立的。此法简单、快速、经济和不需要动物或精密仪器。因此,对于毒素和类毒素浓度的评价仍然很重要。 花絮状试验中,将毒素或类毒素和马抗毒素做不同的混合,然后观察其絮凝反应。如果混合物选择适当,絮状首先出现在一管或二管中,尔后出现在两边的试管中。首先出现絮状的混合物中,含有接近等价最适比例的毒素(或类毒素)和抗毒素。 现在使用的絮状试验方法有两种:最初且最常用的是Ramon试验或β-法,即定量的毒素或类毒素和变量的抗毒素混合。另一法为Dean-Webb试验或α-法,即采用定量抗毒素和变量毒素或类毒素的混合。     

双佐剂包被的破伤风类毒素马匹免疫试验

为提高破伤风免疫马匹的血浆抗体效价,应用不同佐剂配制TT抗原,进行马匹超免疫比较研究;采用FIA和植物油双佐剂包被与单佐剂包被的TT抗原,注射马匹进行超免疫,比较三组血浆的效价;结果显示,双佐剂抗原较单佐剂的免疫效果好,但可能对马匹刺激较强,有待调整注射剂量和免疫程序。     

吸附精制百日咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂稳定性的研究

将连续生产并已申报人体接种反应观察的三批吸附精制百日咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂,分别于４～８℃、１８～２２℃、３７℃贮存半年、１年、１年半和３０天,然后以小鼠法或豚鼠法对该制剂进行安全稳定性、效力稳定性以及毒性逆转等测试。其毒力安全稳定性试验表明,三批混合制剂中的精制百日咳菌苗在４～８℃贮半年、１年、１年半后、它们的ＢＷＤＵ／ｍｌ、ＬＰＵ／ｍｌ、ＨＳＵ／ｍｌ均无显著性差异（Ｐ＞０．０５）;白喉及破伤风类毒素在４～８℃贮存半年,１年、１年半以及１８～２２℃贮存半年和３７℃贮存３０天后,三批测试组的豚鼠均健存且体重增加。在效力稳定性试验中,４～８℃贮存１年和１年半后精制百日咳菌苗的效力与贮存前（分别为２６．７３ＩＵ／ｍｌ、２１．０２ＩＵ／ｍｌ、１９．１７ＩＵ／ｍｌ）无显著性差异（ｔ＝０．１１４;Ｐ＞０．０５）;白喉及破伤风类毒素４～８℃贮存长达１年半后,效力仍在２～３．２ＩＵ／ｍｌ,动物保护率仍可达８０～１００％。三批混合制剂在３７℃贮存３０天后,通过Ｓｃｈｉｃｋ毒性试验及测定ＢＷＤＵ／ｍｌ、ＬＰＵ／ｍｌ、ＨＳＵ／ｍｌ各指标显示,精制百日咳菌苗、白喉和破伤风类毒素无毒性逆转。说明该吸附精制百、白、破混合     

关于吸附精制百日咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂的现况

本文介绍了现行吸附百日咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂的现况和新一代吸附精制百日咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂人体接种反应和血清学效果观察的结果。     

关于吸附精制百日咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂配方的实验报告

本文对吸附精制百白破混合制剂的不同配方进行了实验,结果表明,新一代吸附精制百白破混合制剂最佳配方为：精制百日咳菌苗１８μｇＰＮ／ｍｌ、精制白喉类毒素为３０Ｌｆ／ｍｌ、精制破伤风类毒素为１０Ｌｆ／ｍｌ。由该配方组成的吸附精制百白破混合制剂,其中百日咳菌苗的毒性试验ＢＷＤＵ／ｍｌ、ＬＰＵ／ｍｌ、ＨＳＵ／ｍｌ三种指标均符合制检规程要求。其效力单位（ＩＵ／ｍｌ）超过规程要求一倍以上,精制白喉和破伤风类毒素的安全试验均符合规程要求,白类效力试验≥８０－１００％,破类效力试验≥０．５－４．５ＩＵ／ｍｌ。上述结果说明本文提出的配方作为新一代精制百白破混合制剂的配方是适宜和实用的。     

破伤风类毒素的发展历史、现状和新型破伤风疫苗的研究进展

简要回顾了破伤风类毒素主要的发展历程;概述了目前国内外精制破伤风类毒素的两种生产工艺各自的优缺点,并且肯定了吸附精制破伤风类毒素几十年实际应用的效果,同时指出了在大规模人群接种时可能出现为数不多的各种不良反应,以及引起不良反应的可能的原因。对国内外破伤风疫苗研究进展和主要发展方向,如亚单位疫苗和新型破伤风类毒素的研究概况和前景也作了介绍。     

人破伤风类毒素免疫血浆筛选试验中两种抗体检测方法的比较

应用酶联免疫法(ELISA)和间接血凝法(IHA)对1014份破伤风类毒素全程免疫后人血浆进行抗体水平检测,比较两者的收浆率、收浆符合率以及与动物实验的相关性。结果表明两者收浆率均达80%。ELISA法与IHA法的合格浆符合率达92%,与动物实验的相关性更好。ELISA法操作简便快速,结果判读客观明确,优于传统的IHA法,可作为人破伤风类毒素免疫血浆筛选的常规方法。     

关于破伤风类毒素副作用的研究——(二)类毒素中的培养基成分

绪言 从“破伤风类毒素接种反应的主要原因是变态反应”这一想法出发,本文探讨了培养基基础材料的变态反应原性与产毒有效成分之间的关系。在前报告中,用葡聚糖G—75凝胶过滤法所作的实验已经阐明:培养基的主要成分心肌浸液及胨具有变态反应原性;     

吸附精制百日咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂人体接种反应和血清学效果观察报告

在陕西省大荔县所辖的五个乡(镇)、二个工厂319名3～6月龄婴幼儿中进行吸附精制百日咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂人体接种反应及血清学效果观察。从人体接种反应观察结果中看出,新研制的吸附精制百、白、破混合制剂的全身反应中没有出现中、强反应,而老百、白、破混合制剂则出现中反应9例(占接种人数的8.6％)、强反应2例(占0.92％);局部反应中前者中反应1例(占0.96％),后者为10例(占9.28％);局部硬结反应中,前者没有出现中、强反应,而后者出现5例(占4.58％)。说明新研制的吸附精制百、白、破混合制剂的接种反应极为轻微,安全性上明显地优于老百、白、破混合制剂。血清学测定结果表明,吸附精制百、白、破混合制剂免疫后产生出五种抗体应答,百日咳凝集素水平≥1:320者为73％,免疫后较免疫前增长167.18倍(P相似文献   

关于破伤风类毒素呼吸道免疫的研究——佐剂的作用

引言 近几年,人们对呼吸道免疫的兴趣越来越大。这一方面是因为用这样的方法很容易实现大量人群的接种,另一方面,希望局部免疫可以通过呼吸道分泌免疫球蛋白(IgA型抗体),由此产生一道保护性屏障,以阻止微生物进入。病毒疫苗方面的研究支持这一观点(Waldman等1968;Waldman,Mann和Small 1969;Perkins等1969)。就大多数研究而论,常用死的或减毒的干燥或液体的细菌和病毒疫苗,很少涉及类菌素。     

吸附无细胞百日咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂Ⅲ期临床人体接种反应和血清学效果观察报告

吸附无细胞百、白、破混合制剂（ＤＴａｃＰ）于１９９５年６月至１９９７年９月在广东省４个市和陕西省大荔县进行了Ⅲ期临床人体接种反应和血清学效果观察,全程基础免疫婴幼儿６４９６１例,加强注射３８８６０例,总计为１０３８２１例,接种反应轻微,未发现有严重异常反应者。ＤＴａｃＰ在基免后１年和加强注射前抗ＰＴ和抗ＦＨＡ的抗体水平分别为１０１ＥＵ／ｍｌ和５１３ＥＵ／ｍｌ;加强注射后１个月,抗ＰＴ和抗ＦＨＡ的抗体水平显著增长,分别为２４３４ＥＵ／ｍｌ和３１１３ＥＵ／ｍｌ;加强免疫后１年,抗ＰＴ和抗ＦＨＡ的抗体水平均能维持在较高的抗感染水平,分别为２０１ＥＵ／ｍｌ和５８６ＥＵ／ｍｌ;ＤＴａｃＰ抗白喉和抗破伤风的抗体水平,不论是在基免后还是在加强注射后１个月或１年,其≥００１ＨＡＵ／ｍｌ的例数均为１００％,均显著超过儿童抗白喉和抗破伤风感染要求的保护水平（００１ＨＡＵ／ｍｌ）。     

应用Vero细胞检定法和家兔皮内中和法检测吸附白喉类毒素的效价

Ｖｅｒｏ细胞法测定ＤＴＰ疫苗中白喉类毒素的效价与家兔皮内中和法（简称ＮＴ法）所得结果两法之间有一种平行关系,并且有很好的相关性,ｒ＝０．９３。但Ｖｅｒｏ细胞法测得平均值低于ＮＴ法,二者之间的平均比率为０．２８７,Ｓ＝０．０８９。本试验结果与１９９５部颁规程ＮＴ法０．２５ＩＵ／ｍｌ相比,确定了Ｖｅｒｏ细胞法以０．０７ＩＵ／ｍｌ作为检定吸附ＤＴＰ效价的最低要求。     

水凝胶贴片穿皮接种破伤风和白喉疫苗的临床研究

<正>穿皮免疫接种是一种非侵袭性的而且易于使用的接种方法。作者在动物模型中使用水凝胶贴片证实了穿皮免疫接种配方制剂的有效性和安全性。作者使用抗破伤风和白喉的穿皮免疫配方制剂在人体中进行了临床研究,这种穿皮免疫接种器具是水凝胶贴片(无抗原),应用到22名健康志愿者的左臂     

应用Vero细胞检定法和家兔皮内中和法检测吸附白喉类毒素的…

Ｖｅｒｏ细胞法测定ＤＴＰ疫苗中白喉类毒素的效价与家兔皮内中和法所得结果两法之间有一种平行关系,并且有很好的相 关性,ｒ＝０．９３。但ｅｒｔｏ细胞法测得平均值低于ＮＴ法,二者之间的平均比率普０．２８７,Ｓ＝０．０８９。     

絮状单位测定与小鼠体内中和试验法检测TAT效价的比较

目的为了更好地进行生产质量控制,快速准确地测定破伤风抗毒素(TAT)效价,以统计分析絮状单位测定法(体外法)和小鼠中和试验法(体内法)测定TAT效价的相关性。方法对2010—2013年破伤风抗毒素生产过程中的原料血浆、原液的絮状单位值与小鼠中和效价进行了统计分析和比较。结果体外法和体内法检测TAT原料血浆和原液效价的相关系数分别为r血浆=0.794 3,P0.001和r原液=0.901 6,P0.001,均呈显著性正相关。结论体外法可指导或替代体内法TAT效价测定应用于生产过程中间品的质量控制。     

应用TFF微孔过滤澄清白喉、破伤风毒素培养液及超滤浓缩的试验

用ＴＦＦ微孔过滤系统对白喉、破伤风毒素培养液分别进行了两次澄清过滤试验,澄清过滤后的毒素上清液立即用ＴＦＦ超滤系统浓缩至原培养液体积的１／１０－１／２０。白喉毒素总回收率分别为８６％、７６．６％,破伤风毒素总回收率为９４．１％、９２％。澄清过滤中白喉毒素平均Ｆ１ｕｘ分别为２３．４、１４．３Ｌ／ｍ２／ｈ,破伤风毒素平均Ｆｌｕｘ为２４及２２．９Ｌ／ｍ２／ｈ。结果表明破伤风两次试验有很好的一致性,白喉毒素回收率差别不甚明显,而两次试验Ｆｌｕｘ相差较大,ＴＦＦ微孔过滤系统用于澄清白喉培养液,滤膜使用后的清洗程序仍需改良,以提高膜滤过功能的恢复。