pH值及Na^＋诱导α—辅肌动蛋白构象变化

用ＦＴＩＲ研究了不同浓度ＮａＣｌ溶液中α－辅肌动蛋白二级结构的变化,实验结果发现,在不同ＮａＣｌ浓度下,α－辅肌动蛋白至少具三种不同的构象,低盐（３０－９０ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ）中盐（１５０ｍｍｏｌ／Ｌ－２５０ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ）与高盐（３００－５００ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ）构象。在低盐溶液中,α－辅肌动蛋白含有较高比例的α－螺旋结构（３３－３４％）,随着溶液中钠盐浓度的升高部分α－螺旋结构转变为     

树舌多糖CF2a溶液中构象行为的研究

根据刚果红实验,不同ＮａＣｌ浓度中分子量测定,不同ＮａＯＨ浓度,不同ｐＨ下［ａ］ｄ,ＣＤ谱及ηＳＤ／Ｃ的变化,推测ＣＦ２ａ在纯水中为三股螺旋,在稀盐溶液２中为单股螺旋,在ＤＭＳＯ－Ｈ２Ｏ体系中,体积分数φＨ２Ｏ降至０．２后三股螺旋解离为单股螺旋。在ＤＭＳＯ中单股螺旋随脲浓度增加转为无序结构,脲,酸,碱等影响氢键因素对ＣＦ２ａ水溶液之［ａ］Ｄ,ηＳＤ／Ｃ均有显著影响,表明维持ＣＦ２ａ在溶液中有序构象     

α-辅肌动蛋白与棕榈酸和甘油二脂的相互作用

为了探讨α－ 辅肌动蛋白与甘油二酯（ＤＧ）／ 棕榈油酸（ＰＡ） 的作用机制,利用荧光能量转移、酶切及ＦＴＩＲ 等方法研究了α－ 辅肌动蛋白与ＤＧ／ＰＡ 的作用特性及其构象变化。结果表明,α－ 辅肌动蛋白与外源ＰＡ 有较弱的结合, 且它们的结合具有较强的协同性; 高浓度的ＤＧ 对α－ 辅肌动蛋白与ＰＡ 的结合有一定促进作用。此外,与ＰＡ 结合后α－ 辅肌动蛋白酶切图谱发生了较大变化,其中央区两端的酶切位点受到较强的保护;ＤＧ 可以进一步延长α－ 辅肌动蛋白酶切的保护作用。ＦＴＩＲ 研究表明与ＰＡ 和ＤＧ／ＰＡ 脂质体结合后,α－ 辅肌动蛋白二级结构发生较大变化：结合ＰＡ 后,α－ 辅肌动蛋白部分α－ 螺旋结构转变为β－ 折叠结构;而ＤＧ 可进一步诱导β－ 转角结构的上升     

两相分配法制备玉米根质膜及其纯度鉴定

用ＤｅｘｔｒａｎＴ５００,ＰＥＧ３３５０两相体系制备玉米根质膜．首先在高盐浓度（２２ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ）下选用五种不同的聚合物浓度（５．８％、６．０％、６．２％、６．３％、６．４％,Ｗ／Ｗ）,研究了玉米根质膜在两相体系中的分配情况,在此基础上进一步研究了Ｎａ－Ｃｌ浓度（２、４、５、１１、２２ｍｍｏｌ／Ｌ）对玉米根质膜的纯度及得率的影响．结果表明,制备玉米根质膜选用６．２％（Ｗ／Ｗ）聚合物浓度,７．５ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ的两相体系比较合适．标志酶鉴定及低ｐＨ值磷钨酸染色电镜检测均表明获得了高纯度密实的正向型的质膜囊泡,质膜标志酶ＶＯ３－４－ＡＴＰａｓｅ的活性潜势达８８．９％．     

蚯蚓体内一种纤溶酶原激活剂(e-PA)对ATEE的降解

赤子爱胜蚓（Ｅｉｓｅｎｉａｆｅｔｉｄａ）体内的一种纤溶酶原激活剂（ｅ－ＰＡ）能够降解人工合成底物Ｎ－乙酰－Ｌ－酪氨酸乙酯（ＡＴＥＥ）,该降解反应的最适ｐＨ为８．５,而且在０．２ｍｏｌ／ＬＮａ２ＨＰＯ４中的活性要强于在０．０５ｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ８．５）中．分别测定了ｅ－ＰＡ的大小亚基及全酶在０．２ｍｏｌ／ＬＮａ２ＨＰＯ４与０．０５ｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ８．５）两种体系中的Ｋｍ和Ｋｃａｔ．结果表明,在０．２ｍｏｌ／ＬＮａ２ＨＰＯ４中,全酶的ＡＴＥＥ活性远远高于大小亚基单独的ＡＴＥＥ活性,而在０．０５ｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ８．５）中则没有这种现象．从蛋白质结构的角度对这一结果作了解释．用不同抑制剂和ｅ－ＰＡ作用,结果表明,ｐｅｐｓｔａｔｉｎ,Ｅ－６４和ＥＤＴＡ对ｅ－ＰＡ的ＡＴＥＥ活性都有不同程度的抑制,这一点与ｅ－ＰＡ的ＢＡＥＥ活性不同．     

胆碱脱氨酶光谱性质的研究

胆碱脱氢酶（ＣＤＨ）蛋白南部分内源荧光发射峰在３３５ｎｍ,并不受底物的影响,但底物可改变辅基ＦＡＤ部分的内源荧光光谱。应用ＦＴＩＲ技术研究了增溶ＣＤＨ的二级结构,其结果如下：５３．４％α螺旋,２４．５％β－片层,１３．９％３１０－螺旋及０．５％β回折。在ＣＤＨ处于非底物结合状态时,分子内部结构表现为α－螺旋以及β－片怪优势构象,呈现出球状蛋白样的空间结构特征,在与底物作用过程中,３１０－螺旋的比例     

钾抑制盐生植物生长的生理基础研究

盐生植物碱蓬中亚滨藜和补血草幼苗用不同浓度ＫＣｌ和等渗的ＮａＣｌ处理,结果表明,１００－５００和１００－４００ｍｍｏｌ／ＬＫＣｌ对它们的有面士重和净光合率产生明显抑制作用,证明Ｋ＾＋可抑制盐生植物生长并与光合速率降低有关。１００－４００ｍｍｏｌ／ＬＫＣｌ降低幼苗Ｎａ＾＋而增大Ｋ＾＋含量,对细胞渗透势和渗透调节能力基本不起作用,证明Ｋ＾＋抑制生长与植物体渗透调节物质Ｎａ＾＋不足以及高浓度的Ｋ＾＋对细     

胆碱脱氢酶光谱性质的研究

胆碱脱氢酶（ＣＤＨ）蛋白质部分内源荧光发射峰在３３５ｎｍ,并不受底物的影响,但底物可改变辅基ＦＡＤ部分的内源荧光光谱。应用ＦＴＩＲ技术研究了增溶ＣＤＨ的二级结构,其结果如下：５３．４％α－螺旋,２４．５％β－片层,１３．９％３１０－螺旋及０．５％β－回折。在ＣＤＨ处于非底物结合状态时,分子内部结构表现为α－螺旋以及β－片层优势构象,呈现出球状蛋白样的空间结构特征。在与底物作用过程中,３１０－螺旋的比例逐渐上升至４２％左右,与此同时α－螺旋结构则降低到３５％。提示了底物诱导ＣＤＨ分子内部发生了蛋白分子的重新折叠。     

尖吻蝮蛇毒出血毒素DaHT—3的红外光谱测定

目的观察蛇毒出血毒素结构的变化对功能的影响。方法利用傅利叶变换红外光谱仪对尖吻蝮蛇毒出血毒素（ＤａＨＴ－３）在溶液中酰胺Ｉ带吸收光谱的研究,探测了此出血毒素在溶液中的自然构象和加入ＥＤＴＡ螯合剂除去金属离子后构象的变化。结果此出血毒素在水溶液中的自然构象分别是：α－螺旋为３１．８％、β－折叠为５６．１％、转角为１２．１％;而在去除金属离子情况下α－螺旋和β－折叠减少,转角和无规卷曲增加,即加入螯合剂后其α－螺旋、β－折叠、转角和无规卷曲分别变为１１％、２６．４％、４６．２％和１６．５％。由于结构的变化,它的出血活性和蛋白水解酶活性均被丧失。结论金属离子,特别是锌离子在维系蛇毒出血蛋白酶分子中的二级结构中起着很重要的作用。     

FD耐热逆转录酶的部分酶学性质研究

ＦＤ耐热逆转录酶（ＦＤ－ＴＲＴ）来自一株栖热杆菌菌株．通过ＲＴ－ＰＣＲ方法,论文对ＦＤ－ＴＲＴ的部分酶学性质进行了研究．ＦＤ耐热逆转录酶能耐受９５℃的高温,最适反应温度在６５～７５℃左右,这时ＲＮＡ的高级结构能解开,可以提高逆转录反应的效率;同时引物和ＲＮＡ模板识别的专一性强,可大大提高逆转录的特异性．实验表明ＦＤ－ＴＲＴ逆转录反应的最适条件为：２５ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ８．８,１５ｍｍｏｌ／Ｌ（ＮＨ４）２ＳＯ４,１００μｇ／ｍｌ明胶,５００μｍｏｌ／ＬｄＮＴＰｓ,２５ｐｍｏｌ逆转录引物,１ｍｍｏｌ／ＬＭｎＣｌ２,２ＵＦＤ耐热逆转录酶,反应在６５～７０℃下进行．在上述条件下,用ＲＴ－ＰＣＲ可检出少于５ｐｇ外周血总ＲＮＡ中特异的α珠蛋白ｍＲＮＡ．     

盐胁迫对不同抗盐性小麦叶片荧光诱导动力学的影响

以不同抗盐性小麦为材料,研究了ＮａＣｌ胁迫对叶片叶绿素ａ荧光诱导动力学的影响。指出１５０ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ使小麦幼苗生长降低,叶绿素含量下降,同时使光系统Ⅱ的潜在光化学活性和原初光能转化率降低,使光反应受到抑制。     

NaCl、Na_2SO_4和Na_2CO_3胁迫对小麦叶片自由基含量及质膜透性的比较研究

分别用浓度为２５ｍｍｏｌ／Ｌ、５０ｍｍｏｌ／Ｌ、１００ｍｍｏｌ／Ｌ和２００ｍｍｏｌ／Ｌ的ＮａＣｌ、Ｎａ２ＳＯ４和Ｎａ２ＣＯ３的营养液培养小麦４ｄ,较之不含盐的营养液,其自由基含量上升,产生速率增加,叶片质膜透性增加。不同盐的影响也不同,在低浓度时,ＮａＣｌ的影响大于Ｎａ２ＳＯ４,高浓度时,ＮａＣｌ影响小于Ｎａ２ＳＯ４,Ｎａ２ＣＯ３的影响最为显著。实验结果也表现出小麦叶片自由基含量和质膜透性呈现较好的相关性。因此可认为,盐胁迫促使自由基含量增加,自由基通过过氧化作用影响质膜透性,从而影响植物的生长。     

高浓度钾抑制杜氏盐藻生长的生理机制

在含１ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ的杜氏盐藻（Ｄｕｎａｌｉｅｌａｓａｌｉｎａ（Ｄｕｎａｌ）Ｔｅｏｄ．）培养液中加入５０ｍｍｏｌ／Ｌ以上的ＫＣｌ可观察到Ｋ＋对杜氏盐藻生长有明显的抑制作用,而当ＫＣｌ达１００ｍｍｏｌ／Ｌ时,杜氏盐藻的生长被完全抑制。另一方面,当培养液中缺乏Ｋ＋时,杜氏盐藻的生长也被显著抑制。在正常培养条件下,伴随着杜氏盐藻的生长,培养液的ｐＨ由８左右升高至１０左右,而高浓度Ｋ＋则显著抑制杜氏盐藻培养液ｐＨ的升高;而在培养液ｐＨ为７．０至１０．０的范围内,不同ｐＨ对杜氏盐藻的生长无明显影响。将杜氏盐藻在高浓度Ｋ＋条件下预处理１２ｈ以上,杜氏盐藻的光合放氧速率显著下降,光合速率下降的程度与Ｋ＋浓度的高低和预处理的时间长短呈正相关。高浓度Ｋ＋处理也引起杜氏盐藻叶绿素含量的显著下降。对经高浓度Ｋ＋预处理的杜氏盐藻的光合放氧速率与培养液中ｐＨ变化同时进行测定的结果表明,Ｋ＋抑制杜氏盐藻光合速率的同时也显著抑制了光照条件引起的培养液ｐＨ的上升。实验结果表明,Ｋ＋抑制杜氏盐藻光合作用以及抑制杜氏盐藻生长与Ｋ＋影响跨盐藻质膜的质子运输之间可能存在一定关系。     

湖南尖吻蝮蛇毒出血毒素的圆二色性和化学修饰

用远紫外ＣＤ谱研究了湖南产尖吻蝮蛇毒的两个出血毒素（ＤａＨＴ－１、ＤａＨＴ－２）的溶液构象,计算得ＤａＨＴ－１的α螺旋、β折叠、无规卷曲的含量分别为３６．９％、３５．５％、２７．６％;ＤａＨＴ－２的α螺旋、β折叠、无规卷曲分别为２３．４％、３１．３％、４５．３％。随ｐＨ的增大或减小,峰位蓝移,酸性条件下的变化比碱性条件下的变化大。构象单元含量计算表明：α螺旋减少,无规卷曲增多,β折叠基本未变。温度和ｐＨ对ＣＤ谱的影响相似,５０℃时峰位蓝移,α螺旋减少,无规卷曲增多．ＥＤＴＡ对ＣＤ谱影响显著,０．０２ｍｏｌ／ＬＥＤＴＡ便导致两个出血毒素呈极度的无序状态。ＥＤＴＡ完全抑制,半胱氨酸部分抑制,胰蛋白酶不影响它们的出血活性。     

左手螺旋Z—DNA的研究：V 环境因子对Oligo—d（G—C）6构象的影响

脱氧寡聚核苷酸ｄ（Ｇ－Ｃ）６是迄今所报道的同类脱氧多聚核苷酸中能形成左手螺旋ＤＮＡ（Ｚ－ＤＮＡ）的最短序列。环境因子如ＰＨ,温度和离子的类别与浓度对ｄ（Ｇ－Ｃ）６在溶液中的Ｚ－构象的形成和Ｂ－、Ｚ－构象的相对稳定性有着明显的影响。在合适的条件,ｄ（Ｇ－Ｃ）６在溶液中可呈现Ｂ－构象区,Ｚ－构象相对稳定区和Ｂ－、Ｚ－构象跃迁过渡区。     

苜蓿悬浮细胞对盐胁迫的瓜和适应

苜蓿悬浮细胞能够适应２２０ｍｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌ及其以下盐浓度的胁迫,适应细胞中游离脯氨酸、还原糖和Ｎａ＾＋积累增加。４４０ｍｍｏｌ／ＮａＣｌ对细胞生长明显抑制。细胞对盐胁迫的反应和适应中ＰＭ－ＡＴＰａｓｅ和ＴＭ－ＡＴＰａｓｅ起到重要作用,在适应细胞中两者的活力都明显增加。ＰＭ－ＡＴＰａｓｅ活力的增加可受ＣＨＸ的明显抑制。     

眼镜王蛇蛇毒神经毒素CM—11二级结构单元的判定

眼镜王蛇毒液抽提物ＣＭ－１１为含７２个残基的长链神经毒素,对其进行了ＤＱＦ－ＣＯＳＹ,ＴＯＣＳＹ和ＮＯＥＳＹ等一系列２Ｄ－ＮＭＲ谱测定,通过系统地分析各种ＮＯＥ信息,化学位移的分布等数据推测了蛋白质有规律二级结构,最后利用ＭＣＤ主链引导法确定它的二级结构,其中有三段反平行β折叠股（Ｉ２０～Ｗ２６,Ｒ３７～Ａ４３和Ｖ５３～Ｓ５９）,一段α螺旋构象（Ｗ３０～Ｇ３５）和四个可能的转角（Ｐ７～Ｋ１０,Ｃ１     

锂对小鼠高增殖潜能集落形成细胞和粒巨噬系祖细胞体外增殖的影响

本文观察了锂对ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠骨髓高增殖潜能集落形成细胞（ＨＰＰ－ＣＦＣ）和粒巨噬系祖细胞ＣＦＵ－ＧＭ体外增殖的影响。ＨＰＰ－ＣＦＣ集落由ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＷＥＨＩ３条件培养液（ＷＥＨＩ３－ＣＭ,含有ＩＬ－３）及Ｌ９２９条件培养液（Ｌ９２９－ＣＭ,含有Ｍ－ＣＳＦ）所支持,而ＣＦＵ－ＧＭ由ＷＥＨＩ３－ＣＭ所支持。结果显示,ＬｉＣｌ浓度在０．４－２ｍｍｏｌ／Ｌ时呈现剂量依赖性抑制ＨＰＰ－ＣＦＣ增殖;而在０．４－１ｍｍｏｌ／Ｌ的浓度范围内,则对ＣＦＵ－ＧＭ的增殖起剂量依赖性促进作用。这些结果提示ＬｉＣｌ对ＨＰＰ－ＣＦＣ和ＣＦＵ－ＧＭ的作用不同,可能锂有诱导ＨＰＰ－ＣＦＣ向成熟细胞分化的作用     

盐度和CO2倍增环境下碱蓬幼苗呼吸酶活性的变化

研究了生长在正常大气ＣＯ２和ＣＯ２倍增环境中的盐生植物碱蓬（Ｓｕａｅｄａｓａｌｓａ）幼苗呼吸酶活性对ＫＣｌ和ＮａＣｌ的反应．结果表明,在ＣＯ２倍增（７００μｌ·Ｌ－１）和正常大气ＣＯ２（３５０μｌ·Ｌ－１）下,３００ｍｍｏｌ·Ｌ－１ＫＣｌ和ＮａＣｌ均能抑制琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）和苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ）活性,而异柠檬酸脱氢酶（ＩＤＨ）活性为ＮａＣｌ抑制、ＫＣｌ促进;ＮａＣｌ和ＫＣｌ明显抑制细胞色素氧化酶（ＣＯ）和光呼吸中乙醇酸氧化酶（ＧＯ）、羟基丙酮酸还原酶（ＨＰＲ）活性;并指出在ＫＣｌ胁迫下,ＣＯ２使三羧酸循环（ＴＣＡＣ）的运行变慢,ＮａＣｌ胁迫下使其加快,ＴＣＡＣ运行限速步骤与ＭＤＨ无关,ＣＯ为盐对呼吸代谢影响的重要位点．另外,Ｋ＋、Ｎａ＋对蛋白表达的影响有差异,ＣＯ２可使盐胁迫下的碱蓬幼苗蛋白表达降低．     

NMR法研究天花粉蛋白TDK肽片段的溶液构象

用ＨＮＭＲ法测定ＴＤＫ肽在Ｈ２Ｏ（ＨＯＤＫ）,５０％六氟丙醇（ＦＰＤＫ）和２ｍｏｌ／ＬＧｕ．ＨＣｌ（ＧＵＤＫ）溶液构象。在ＨＯＤＫ和ＦＰＤＫ中,ＴＤＫ肽的两段序列Ａｓｐ０－Ｉｌｅ４,Ｓｅｒ９－Ｉｌｉ１７分别具有较稳定的α－螺旋含量;而ＧＵＤＫ的ＳＡＬＳ序列仍能检测到有序残存结构。并假设ＳＡＬＳ序列是肽链形成二级结构的原始核心。