假蜜环菌液体深层发酵条件的研究

对该真菌菌丝体的液体深层培养条件进行了探讨为进一步工业化发酵提供参考数据。方法：在基本培养基的基础上分别改变碳源、氮源、无机元素和C／N比对该菌的液体深层发酵情况,包括测量各培养条件下耗糖情况、绘制生长曲线,观察菌体的生长形态等等。结果：假蜜环菌的菌丝产量在第6d可达到最大值,其后会逐渐降低,并伴有溶菌的现象发生。在培养初期加入微量钴元素有利于刺激糖代谢提高菌体对糖的利用率,其作用主要是缩短延滞期。进入指数生长期后连续补加碳源有利于菌体迅速生长。优化后培养基组成为：葡萄糖l％和蔗糖1％为碳源,以酵母浸膏l％为氮源,KH2PO4 0．1％,MgSO4 0．05％Z,元素钴适量。液体深层发酵培养6d后菌丝生长状态已达到最佳,在此条件下搅拌发酵培养可收获20mg/ml(干重)的菌丝体。     

蜜环菌胞外多糖的发酵条件研究

蜜环菌是天麻的共生菌 ,有研究证明 ,蜜环菌的菌丝及发酵液有与天麻相类似的药理作用 ,为此 ,我们进行了蜜环菌深层发酵产胞外多糖条件的研究。研究结果表明 :菌丝生长和多糖产生的最适初始pH为 5.0左右 ;消泡剂用量在一定范围内增加 ,有利于菌丝的生长 ,但增加消泡剂用量会不利于多糖的产生 ;接种量大 ,菌丝得率高 ,但接种量为1 0 %时的多糖得率最高 ;装液量试验证明 ,通气量大 ,有利于菌丝的生长和多糖的产生 ;机械搅拌对菌丝的生长和多糖的产生都不利 ;生长动态试验证明 ,蜜环菌可在 6d内完成液体     

伞形多孔菌菌核(猪苓)共生蜜环菌培养特性的比较研究

蜜环菌能为药用真菌伞形多孔菌菌核(猪苓)的生长提供营养,其自身也是一种重要的食药用真菌。筛选优良的蜜环菌菌株既可用于猪苓的栽培生产,也可为蜜环菌的进一步开发提供参考。本研究将从野生猪苓中分离得到的47株蜜环菌菌株划分形态型,选取12个代表性菌株进行液体培养,研究菌丝体多糖含量,以及发酵液中的羧甲基纤维素酶(CMC酶)、木聚糖酶、漆酶的活性变化。结果显示,蜜环菌菌株M8-3生长较快,生物量累积最高,3种关键酶的活性也较高,为较优质菌株,可用于猪苓的栽培实验;菌株M3和M8-3菌丝体多糖含量较高,可作为蜜环菌开发利用的候选菌株。     

中国北方地区蜜环菌生物种的初步研究

对采自北京东灵山地区,黑龙江带岭地区,以及帽儿山地区不同寄主上的１５个蜜环菌子实体进行了极性测试和生物种测定。     

蜜环菌发光条件的研究

对蜜环菌发光的条件进行了研究,结果表明：氧气是蜜环菌发光的必要条件;蜜环菌发光还需要适当的温度,37℃为发光的最适温度,45℃以上的温度会使蜜环菌丧失发光的能力;1％的乙醇浓度能够促进蜜环菌的发光,10％以上的乙醇浓度就会使密环菌的发光减弱乃至丧失;蜜环菌的发光可能是由荧光酶引起的。     

中国北方地区蜜环菌生物种的初步研究

对采自北京东灵山地区、黑龙江带岭地区、以及帽儿山地区不同寄主上的１５个蜜环菌子实体进行了极性测试和生物种测定。配对培养结果表明１５个子实体中共存在着四个生物种,分别命名为ＣｈＢＳＩ、ＣｈＢＳＩ、ＣｈＢＳⅢ和ＣｈＢＳⅣ。除生物种ＣｈＢＳⅢ的极性不清楚外,其它生物种都是四极性异宗配合的真菌。东灵山菌株中的两个生物种是ＣｈＢＳⅡ和ＣｈＢＳⅣ,带岭菌株中的两个生物种是ＣｈＢＳＩ和ＣｈＢＳⅢ,帽儿山菌株是生物种ＣｈＢＳⅠ。经过中国生物种与欧洲生物种的配对培养,发现生物种ＣｈＢＳⅣ与Ａｒｍｉｌａｒｉａｇａｌｉｃａ融合。     

蜜环菌多糖的生物合成与发酵条件的相关性

培养基的碳、氮源,ＰＨ值直接影响蜜环菌多糖的生物合成,泥炭水解液的添加量占培养基的１０％～３９％（Ｖ／Ｖ）时,对蜜环菌多糖的生物合成有促进作用。液体振范培养时,蜜环菌生长形成球形菌丝体,菌丝生物量３．４５ｇ／Ｌ,菌丝多糖（精糖）得率为０．２８４％,而静置液体培养有利于菌索形成,菌素生物量１４．０５ｇ／Ｌ,菌索多糖（精糖）得率为０．５１５％,胞外多糖的得率分别为２９．４％和８．３％     

蜜环菌菌索生物学特性的研究

为提高榛蘑人工栽培中出菇的稳定性,对蜜环菌菌索的生物学特性进行了研究,通过在不同生长时间、环境温度、培养基质的条件下对蜜环菌菌索进行培养。试验发现,菌索会由具有活性的黄色菌索逐渐角质化变成黑色丝状菌索,为保持蜜环菌菌索的活性状态,最佳培养条件:培养时间应控制在15²3 d,最佳培养温度为恒温25℃,最佳培养基配方为PDA+麦麸+锯末。     

中国蜜环菌和新生物种

在调查研究蜜环菌生物种的过程中,先后在东北、华北、华中和西南地区,发现了四个新的中国蜜环菌的生物种,ＣＢＳ Ｆ、ＣＢＳ Ｇ、ＣＢＳ Ｈ和ＣＢＳ Ｉ。研究表明,ＣＢＳ Ｇ属于典型的同宗配合种,其余三个为异宗配合。ＣＢＳ Ｈ与ＣＢＳ Ｃ之间存在部分互交可育,比例高达１７．８％,在同一个国家的两个种之间出现如此高的互交可育比例还是首次报道。上述三个生物种同欧美的已知蜜环菌种均互交不育,为亚洲特有种。ＣＢ     

野生和人工培养的蜜环菌菌索营养成分比较

对野生和人工培养的蜜环菌菌索主要营养成分及氨基酸含量进行了测定和比较。结果表明：人工培养的蜜环菌菌索蛋白质、脂肪、多糖含量均高于野生菌索,二者的氨基酸组成相似,但人工培养的菌索氨基酸总量高于野生菌索。     

蜜环菌成熟菌索的超微结构

用光学和电子显徽镜研究了生长在木材上的蜜环菌成熟菌索的超微结构。拟薄壁组织中有线粒体、内质网、核、液泡、质膜体、核糖体和典型的桶孔隔膜等。在菌索腔中疏松组织由薄壁菌丝、厚壁菌丝和非细胞衬质物质所组成,这些菌丝除了无隔孔帽的隔孔器和分散的核仁以外,见不到其它普通的细胞器,其最明显的特征是质壁分离和质膜断裂而卷曲,似乎是处在脱水状态。一旦它们进入新的寄主,一些普通细胞器就可出现。所以,可认为这些菌丝是处于休眠状态。对蜜环菌菌索的结构和功能的关系也进行了讨论。     

深层液体培养法生产沼泽红假单胞菌

根据沼泽红假单胞菌 (Rhodopseudomonaspalustris)在好氧黑暗条件下也可生长的特性 ,采用液体深层培养方法 ,在通气式发酵罐中进行大规模生产。对培养基中的碳源、氮源、生长因子和微量元素进行了优化 ,用正交试验确定了主要培养基成分的添加量和接种量。在 10 0 0mL三角瓶和 2 5L全自动通气式发酵罐上进行了放大试验 ,在适宜工艺条件下培养 2 4h ,菌体浓度可达 6 0亿 /mL。     

中国蜜环菌的新生物种

在调查研究蜜环菌生物种的过程中,先后在东北、华北、华中和西南地区,发现了四个新的中国蜜环菌生物种,CBS F、CBS G、CBS H和CBS I。研究表明,CBS G属于典型的同宗配合种,其余三个为异宗配合。CBS H与CBS C之间存在部分互交可育,比例高达17.8%,在同一个国家的两个种之间出现如此高的互交可育比例还是首次报道。上述三个生物种同欧美的已知蜜环菌种均互交不育,为亚洲特有种。CBS I为无菌环的假蜜环菌A.tabescens (Scop. ) Emel,它与欧洲的假蜜环菌互交可育,属于同种。但同中国其它各生物种互交不育。同时讨论了蜜环菌生物种的群体观点。     

假蜜环菌液体种子培养条件的优化及其应用研究

目前国内多采用固体菌种进行假蜜环菌的发酵生产。在假蜜环菌液体种子的培养及培养条件优化等方面进行了探讨,优化条件为:玉米淀粉为较适宜碳源;酵母浸出粉为较适宜氮源;添加KH2PO4、吐温-80对菌丝生长有一定的促进作用。正交试验结果显示,适合假蜜环菌菌丝体生长的培养基配方为玉米淀粉30 g/L,酵母浸出粉3g/L,KH2PO41.5 g/L。此外,还探讨了液体种子与传统的固体种子对固体发酵产物的影响,结果表明,接种液体种子能提高固体发酵的主要代谢产物的产量。该实验为改善假蜜环菌现行的生产工艺提供参考。     

蜜环菌的化学成分

蜜环菌Armillariella mellea(Vahl.exFr.)Karst是一种与传统中药天麻（Gastrodia elata Blume)共生的药用真菌,从蜜环菌子实体中分离并鉴定了3个化合物,利用波谱（MS,NMR和IR）和化学方法分别鉴定为1个新C－18植物鞘氨醇型神经酰胺（2S,3S,4R）－2－（十六碳酰氨基）－十八碳烷－1,3,4－三醇（1）,2个已知甾醇麦角甾醇过氧化物（ergosterol peroxide)及Ergosta-5,7-dien-3β-ol,这2个甾醇系从该属真菌中首次发现。