氧代赖氨酸抗真菌作用机制的初步研究

氧代赖氨酸对致病真菌类秃发念珠菌的ＭＩＣ为０．８－３．１μｇ／ｍｌ,而两性霉素Ｂ为１．６－３．１μｇ／ｍｌ．氧代赖氨酸高于赖氨酸１０倍浓度,无明显抑制白含珠菌对Ｌｙｓｉｎｅ的吸收。Ｏｘａｌｙｓｉｎｅ０．４ｍｍｏｌ／Ｌ对白色念珠菌细胞膜透性,如胞内物于ＵＶ２６０ｎｍ下的吸收物质外泄无明显影响。放射性前体物渗入试验结果指出,Ｏｘａｌｙｓｉｎｅ０．４ｍｍｏｌ／Ｌ弱抑制（＾１４Ｃ）－Ｍｅｔｈｉｏｎｉｎ和（     

小鼠腺病毒单克隆抗体的研制及初步应用

应用杂交瘤技术获得４株分泌抗小鼠腺病毒（ＭｕｒｉｎｅＡｄｅｎｏｖｉｒｕｓＭＡｄ）单克隆抗体细胞株,并对其特性进行分析。经鉴定,它们所分泌的抗体类型均为ＩｇＭ,腹水效价为１０－３～１０－６。相对亲和力分别为０．１μｇ／ｍｌ（Ａ９）、０．６５μｇ／ｍｌ（Ｂｌ）、１２．５μｇ／ｍｌ（Ｇ４）和２３μｇ／ｍｌ（Ｄ４）。与其他１０种鼠源性病毒均无交叉反应,表明ＭｃＡｂ具有良好的特异性。单抗标记ＦＩＴＣ后用于人用鼠源性单抗制品及各种传代细胞和原代细胞中ＭＡｄ检测,获得良好的实验结果。     

灵芝多糖对人脐血LAK细胞活性的影响

本文研究了灵芝多糖（ＧＬＰ）对人脐血ＬＡＫ（ＣＢ—ＬＡＫ）细胞活性的影响,结果发现,单独ＧＬＰ能刺激人脐血单个核细胞（ＣＢＭＣ）增殖,但不能诱导ＬＡＫ活性,当与５０ｕ／ｍｌｒＩＬ—２伍用时,可增殖ＣＢ—ＬＡＫ细胞诱导活性,不同剂量ＧＬＰ（０．５—１００μｇ／ｍｌ）影响作用不同,以１０μｇ／ｍｌ浓度最好．在不同浓度ｒＩＬ—２（１０—１００ｕ／ｍｌ）诱导ＣＢ—ＬＡＫ细胞过程中加入ＧＬＰ（１０μｇ／ｍｌ）,可明显提高细胞增殖能力,减少ｒＩＬ—２用量。ＧＬＰ亦能促进效应阶段ＣＢ—ＬＡＫ细胞对Ｒａｊｉ肿瘤靶细胞的杀伤作用（Ｐ＜０．００１）。由此看出,ＧＬＰ具有增强ＣＢ—ＬＡＫ细胞活性的作用,是一很好的生物反应调节剂（ＢＲＭ）,有必要进行深入的研究。     

喹诺酮类药物抗乙型肝炎病毒体外实验研究

本文以２．２．１５细胞株为模型,以ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶＤＮＡ、细胞存活率为观察指标,综合评价了喹诺酮类药物吡哌酸（ＰｉｐｅｍｉｄｉｃＡｃｉｄ）、氟哌酸（Ｎｏｒｆｌｏｘａｃｉｎ）、环丙氟哌酸（Ｃｉｐｒｏｆｌｏｓｘａｃｉｎ）、氟嗪酸（Ｏｆｌｏｘａｃｉｎ）体外抗ＨＢＶ效果。结果表明：吡哌酸、氟哌酸、环丙氟哌酸、氟嗪酸对ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ５０％抑制浓度（ＩＤ＿（５０））分别为１１μｇ／ｍｌ、６４μｇ／ｍｌ、９３μｇ／ｍｌ、１０５μｇ／ｍｌ和１９９μｇ／ｍｌ、１１１μｇ／ｍｌ、２４μｇ／ｍｌ、２１７μｇ／ｍｌ,细胞存活率为５０％时的药物浓度（ＣＤ＿（５０））分别为２１９μｇ／ｍｌ、９０μｇ／ｍｌ、１８１μｇ／ｍｌ、１６９μｇ／ｍｌ,在所选定的用药浓度范围内不同程度抑制培养上清液及细胞内ＨＢＶＤＮＡ及其复制中间体的产生。尤其对超螺旋结构ＤＮＡ（ｓｃＤＮＡ）有不完全抑制作用。     

海南省潜伏香蕉果实的炭疽菌对特克多的抗药性

对来自海南省１３个地区的６７个Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ ｍｕｓａｅ（Ｂｅｒｋ．＆Ｃｕｒｔ．）Ａｒｘ菌株进行抗药性检测,所测菌株均表现出敏感,即未产生特克多抗药性。室内采用高浓度特克多和９０－９５％致死剂量紫外光进行抗性诱导,获得的抗性菌株均能在１０００μｇ／ｍｌ。特克多的ＰＤＡ培养基上生长,但ＥＣ５０值相差很大,最高达１３０μｇ／ｍｌ,而最低为０．８７μｇ／ｍｌ。抗性菌株对多菌灵和甲基托布津均     

含硫多肽类抗生素那西肽的菌种诱变及产量提高

那西肽（Ｎｏｓｉｈｅｐｔｉｄｅ）产生菌Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ａｃｔｕｏｓｕｓ Ｚ１１,经ＮＴＧ处理和对Ｃｕ＾２＋,Ｍｎ＾２＋耐受选育,获得突变株Ｚ１５,其可耐受Ｃｕ＾２＋为３００μｇ／ｍｌ,耐Ｍｎ＾２＋１０００μｇ／ｍｌ,产生那西肽可达１５００μｇ／ｍｌ是Ｚ１１活力的１．６倍。     

细菌转化黑色素的抗流感病毒作用

采用敏感的ＭＴＴ法测定了嗜麦芽假单胞菌转化黑色素的抗流感病毒作用。测定结果表明：纯化的黑色素毒性极低,对ＭＤＣＫ细胞的无毒界限为０．２ｍｇ／ｍｌ,远高于其有效的作用浓度;１０～２０μｇ／ｍｌ的黑色素能有效抑制流感病毒（血凝效价１∶３２）致细胞病变。病毒感染７２ｈ后用ＭＴＴ法测定,其宿主ＭＤＣＫ细胞保护百分率达９５％以上;此外,加黑色素后的ＭＤＣＫ细胞,抗流感病毒感染的能力优于目前抗病毒的有效药物病毒唑,前者的最佳作用浓度（２０μｇ／ｍｌ）比后者（１００μｇ／ｍｌ）低５倍。可以认为嗜麦芽假单胞菌转化黑色素具有毒性低、抗流感病毒能力强的特点     

HPLC法检测红豆杉细胞培养物中的紫杉醇

在对紫杉醇和干扰紫杉醇测定的６种常见紫杉烷进行色谱化分离的基础上,建立了红豆杉细胞培养物中紫杉醇的高效相色谱检测方法。样品经提取后,在Ｋｒｏｍａｓｉｌ Ｃ１８柱上以乙腈：水为流动相进行梯度洗脱,于２２７ｎｍ处进行检测。紫杉醇在０．２μｇ／ｍｌ－２０μｇ／ｍｌ浓度范围内线性关系良好,经测定检测限为０．１μｇ／ｍｌ,检测精密度为３．４％,回收率为８８．４％。     

PIC-BE诱导K562/ADM细胞凋亡及逆转其MDR的研究

β榄香烯吗素（ＰＩＣ－ＢＥ）是抗癌新药β榄香烯的水溶性衍生物．采用人红白血病的多药耐药性（ＭＤＲ）细胞株Ｋ５６２／ＡＤＭ作为实验模型,观察ＰＩＣ－ＢＥ对Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞的生长抑制和凋亡诱导作用,并进而研究其对该细胞ＭＤＲ的可能影响．结果显示：（１）Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞对ＡＤＭ具有明显的抗性,与Ｋ５６２细胞相比,抗性倍数约为４０倍,而两者对ＰＩＣ－ＢＥ的ＩＣ５０接近,无显著差异;（２）ＰＩＣ－ＢＥ（１０．０～３０．０μｇ／ｍｌ）对Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞具有明显的生长抑制和凋亡诱导作用,两种作用的强度在一定的范围内均具药物浓度和作用时间依赖性;（３）低毒剂量ＰＩＣ－ＢＥ（１０．０μｇ／ｍｌ）与ＡＤＭ（４．０μｇ／ｍｌ）联合应用,可显著增强ＡＤＭ对该细胞的生长抑制和凋亡诱导作用,升高细胞内ＡＤＭ的浓度,降低该细胞对ＡＤＭ的ＩＣ５０,使该细胞对ＡＤＭ的抗性有数倍逆转．上述结果提示,ＰＩＣ－ＢＥ不仅是一种有效的广谱抗肿瘤剂,而且也是一种有效的ＭＤＲ逆转剂     

脐带血清在骨髓造血祖细胞培养中的效应

目的：探讨人脐带清（ＣＢＳ）在骨髓造血祖细胞培养中的效应。方法：用人骨髓细胞进行ＣＦＵ、ＧＭ、ＶＦＵ－Ｅ、ＢＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－ＧＥＭＭ培养。结果：ＣＢＳ能直接刺激骨髓细胞ＣＥＵ－ＧＭ的形成。与血型相同害无关。四人份以上的混合ＣＢＳ（ＭＣＢＳ）,刺激活性高且稳定。１０％ＭＣＢＳ相当于６５．６μｇ／Ｌ ＧＭ－ＣＳＦ、０．２３、０．３、０。．４６ｋＵ／Ｌ ＥｐＯ对ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－Ｅ、ＢＦＵ－Ｅ、Ｃ     

乙肝疫苗快速阻断HBV母婴传播的研究

为获得更快速的免疫应答,用３０μｇ／ｍｌ乙肝血源疫苗以０、２、６周免疫程序对６８名ＨＢｓＡｇ阳性母亲婴儿作了阻断ＨＢＶ母婴传播免疫效果的观察,并和常规的０、１、６月接种方案的结果进行了比较。结果表明ＨＢＩＧ合并乙肝疫苗或单用疫苗组产生抗─ＨＢｓ（＞１０ｍＩＵ／ｍｌ）血清转换率于Ｔ６Ｍ、Ｔ１２Ｍ时分别为９１．８９％,和８３．８７％;８１．０８％和８３．８７％。短程和常规免疫方案婴儿所产生的保护性抗─ＨＢＳ动态比较,表明以０、２、６周免疫后的Ｔ６ｗ、Ｔ６ｍ时的抗─ＨＢｓ有效率分别为１９．３５％和８３．８７％,明显高于０、１、６月免疫者同期抗体水平（Ｐ＜０．０１）。至Ｔ１２Ｍ时两组的阳转率无显著性差异,说明０、２、６周免疫方案能早期诱导出保护性抗─ＨＢｓ免疫应答。     

高密度发酵生产突变型重组人肿瘤坏死因子rhTNFα-DK2的研究

通过对发酵基质和发酵关键参数的优化,确定了发酵培养基的磷酸盐浓度为０．１５Ｍ,甘油浓度为１．２ｍｌ／Ｌ,补料中甘油浓度为２０ｍｌ／Ｌ,发酵过程中溶解氧控制在３０％～６０％,ｐＨ控制在６．８５左右。在５Ｌ在ＮＢＳ－Ｂｉｏｆｌｏ３０００型自动控制发酵罐中采取加速补料的补料分批培养,重组大肠杆菌ＹＫ５３７／ｐＳＢ－ＴＫ经１０ｈ３０°Ｃ培养和５ｈ４２°Ｃ诱导培养,最终密度达到６０ＯＤ６００,ｒｈＴＮＦα－ＤＫ２的表达量占菌体总蛋白的５０％以上,每升发酵液纯化可得到近２ｇ的ｒｈＴＮＦα－ＤＫ２。     

酪氨酸-铜体系电化学氧化行为的研究

在ｐＨ值３．９４的Ｂ－Ｒ缓冲溶液中,酪氨酸－铜络合物在玻碳电极出现氧化峰。用新极谱法测定,酪氨酸浓度在０．３μｇ／ｍｌ－３μｇ／ｍｌ范围内与氧化峰的２．５次微分值呈线性,检测下限０．２μｇ／ｍｌ。直接用于氨基酸药物样品的测定结果满意,并对酪氨酸－铜络合物的电化学氧化行为进行了研究。     

电脉冲法转化苏云金芽孢杆菌BMB171的研究

研究了用电脉冲法转化苏云金芽孢杆菌受体菌ＢＭＢ１７１的优化条件以及由转化导入的几类ｃｒｙ基因在ＢＭＢ１７１中的表达效果。结果表明,采用ＳＧ溶液作电脉冲缓冲液,用１０．ｏｋＶ／ｃｍ的脉冲场强和１次电脉冲（４．６ｍｓ）以及采用对数前期（ＯＤ_６５０ｎｍ为０．２～０．３）收获的受体菌,可以达到最高转化频率,其中用ｐＨＴ３１０１电转化 ＢＭＢ１７１的最高频率达 ８×１０７转化子／μｇ ＤＮＡ。转化频率随质粒ｐＨＴ３１０１浓度的增加,在５４．６９ｐｇ／ｍＬ至３．５０μｇ／ｍＬ范围内     

云南红豆杉细胞的悬浮培养

在云南经豆杉细胞悬浮培养中,适宜的增减基为Ｂ５,接种量为０．５－０．８ｇ干重细胞／１００ｍｌ培养基,２,４－Ｄ浓度为１．０ｍｇ／Ｌ;培养细胞的生长周期约３０ｄ;增减基中较高浓度的蔗糖（４０ｇ／Ｌ）可提高紫杉醇含量;添加的椰子汁（ＣＭ）、酪蛋白氨基酸（ＣＡ）和水解乳蛋白（ＬＨ）３种有机添加剂均能提高培养细胞中紫杉醇的含量,但只有ＣＭ和ＣＡ能促进细胞的生长。于Ｂ５培养基中添国不同浓度的ＮＨ４ＮＯ３对培     

大叶紫花苜蓿愈伤组织原生质体再生植株

大叶紫花苜蓿下胚轴诱导的愈伤组织在继代培养基上生长快速,易于分散。继代第１２ｄ的愈伤组织原生质体的得率为６．５×１０７／ｇ鲜重。原生质体培养基为ＳＨ基本培养基,含有１．０ｍｇ／Ｌ２,４－０、０．５ｍｇ／ＬＢＡ、２．０ｇ／ＬＣＨ、２％蔗糖、６％葡萄糖、５ｍｍｏｌ／ＬＭＥＳ,培养密度为１．０×１０５／ｍＬ。培养至第１２ｄ时的原生质体再生细胞植板率为３．７％。由原生质体形成的小愈伤组织在含２．０ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ的ＭＳ固体培养基上大量增殖。增殖的愈伤组织转移至２．０ｍｇ／Ｌ２－ｉｐ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ的Ｂ５培养基上,形成体细胞胚并发育成完整植株。     

中麻黄悬浮培养体系的建立

本文用中麻黄无菌苗为外植体,其切段培养在附加２ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ和０．５ｍｇ／Ｌ　６　ＢＡ的ＭＳ培养基上,全部脱分化形成白色疏松愈伤组织。愈伤组织继代培养于ＭＳ＋０．５ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ＋０．２ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．２ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ＋４％蔗糖的培养某上。以继代培养愈伤组织为材料进行悬浮培养,培养基为附加０．２ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ＋０．１ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ＋２％蔗糖的ＭＳ液体培养基,得到分散性好,细胞形状接近圆形,细胞大小均一,细胞团多由２－３０个细胞组成的悬浮培养体系。第三代悬浮培养细胞增长率为０．３５ｇ·ｆｗ／２０ｍｌ·ｄ,细胞有丝分裂指数为１１．２％。条件培养和高密度接种可缩短延迟期,条件培养不能提高分裂指数,１ｇ／１０ｍｌ接种密度可使分裂指数提高至２１．２％。     

康氏木霉B－7纤维素酶的产生条件及酶学性质研究

野生型康氏木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｋｏｎｉｎｇｉ）８５４－Ｂ２经多种理化诱变因子及空间微重力辐射等因素的处理,选育到１株高活力纤维素酶变异株Ｂ－７。其固体培养物的纤维素酶,以滤纸为底物酶活力为３４μ／ｇ,以羧甲基纤维素（ＣＭＣ）为底物酶力为１４７２μ／ｇ。与野生菌８５４－Ｂ２相比,产酶活力水平分别提高５倍和７倍多。酶在滤纸上作用的最适条件为ｐＨ４．５—５．０,温度５５—６０°Ｃ;２５°Ｃ,保温２４ｈ,ｐＨ稳定范围为ｐＨ４．０—６．５;７０°Ｃ保温３０分钟,剩余酶活力３４．４％。     

MTT法测定眼镜蛇毒细胞毒素的抗癌活性

目的测定眼镜蛇毒细胞毒素（Ｃｏｂｒａｖｅｎｏｍｃｙｔｏｔｏｘｉｎ,ＣＶ－ＣＴＸ）对体外培养的人癌细胞的杀伤作用。方法溴化二苯四偶氮盐（ＭＴＴ）比色法。结果ＣＶ－ＣＴＸ对ＳＧＣ－７９０１,Ｂｅｌ－７４０２,Ｋ５６２和Ｕ９３７４种人癌细胞有很强的杀伤作用,量效关系明显,ＩＣ５０分别为４．１０,２．０８,０．２９和０．１７μｇ／ｍｌ。结论ＭＴＴ法检测ＣＶ－ＣＴＸ的抗癌活性,操作简便、快速和准确。     

乙型肝炎血源疫苗皮内接种4年效果观察

为了解乙型肝炎血源疫苗皮内接种的持久效果,选ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｓ和抗－ＨＢｃ均（－）的９～１１岁儿童１０３名,随机分成４组,分别皮内接种１μｇ×４和３μｇ×４（均按０,１,２,５月程序）和肌肉接种１０μｇ×３和３０μｇ×３（各按０,１,２月程序）。首针后４８月时,１μｇ、３μｇ、１０μｇ和３０μｇ组抗－ＨＢｓ≥１０ｍＩＵ／ｍＩ者各为６９．２％,８０．０％、９２．３％和８１．８％;ＧＭＴ则为１４．５,７９．０,４４．８和７０．９ｍＩＵ／ｍｌ,３μｇ×４皮内免疫的近期和远期效果与肌肉组３０μｇ×３相似,宜于某些人群采用