绞股蓝多糖体外抗氧化活性研究

研究绞股蓝多糖的单糖组成及抗氧化活性.采用气相色谱(GC)分析绞股蓝多糖的单糖组成,通过体外抗氧化评价体系研究绞股蓝粗多糖(GPMPP)和精制多糖(GPMP)的总还原力、清除DPPH自由基、羟自由基的活性以及抗脂质过氧化作用.结果显示,绞股蓝多糖由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,物质的量比为1.39∶3.76∶1.00∶1.64∶4.98∶5.88.绞股蓝多糖具有较好的还原能力,对DPPH自由基和·OH具有较强的清除能力,并且对小鼠肝匀浆自发性脂质过氧化和Fe2+-H2O2诱导的小鼠肝匀浆脂质过氧化具有较好的抑制作用.以上结果表明,绞股蓝多糖具有明显的抗氧化活性.     

朱砂七粗多糖的提取及生物活性的研究

首次从朱砂七中提取粗多糖(PCCP),研究了PCCP对.OH自由基、O2-.自由基和DPPH.自由基的清除能力以及抗脂质过氧化能力,选用人肝癌细胞HepG2,经MTT染色法研究其体外抗肿瘤活性。结果显示,PC-CP的浓度在8.48 mg/mL时,对.OH、O2-.和DPPH.的清除率分别达到了52.3%、54.7%和38.3%;PCCP的浓度在8.48 mg/mL时,对脂质过氧化的抑制率达到了62.0%;PCCP的浓度在277.78μg/mL时,对人肝癌细胞HepG2的抑制率达到了42.6%,表明PCCP具有一定的体外抗氧化能力和体外抗肿瘤活性。     

Rhizobium sp. N613胞外多糖的抗氧化活性

以铁氰化钾和铁离子为检测系统测定了Rhizobium sp.N613胞外多糖(REPS)对氧化物的还原力;H2O2和Fe2+为羟自由基生成系统检测了REPS对羟自由基的清除作用;邻苯三酚自氧化法检测了REPS对超氧阴离子的清除作用;并体外检测了REPS对H2O2引起的氧化溶血现象的抑制作用及对小鼠肝组织脂质过氧化损伤的保护作用。结果显示,REPS对氧化物具有明显的还原力,其对羟自由基的清除作用达到35.46%(多糖浓度为2mg/mL),对超氧阴离子的清除作用达到36.84%(多糖浓度为0.78mg/mL),对H2O2引起的氧化溶血现象的抑制作用达到43.84%(多糖浓度为1.14mg/mL),对小鼠肝组织脂质过氧化的保护作用达到34.46%(多糖浓度为1.14mg/mL),表明REPS具有良好的抗氧化作用,有着重要的应用价值。     

4种地衣提取物抗氧化和抗肿瘤活性研究

本研究初步评估了4种药用地衣(太白茶、金刷把、黑石耳、红石耳)不同溶剂提取物的抗氧化活性及其粗多糖的抗肿瘤活性。通过测定清除DPPH自由基、羟基自由基和还原能力,对4种地衣不同溶剂提取物进行体外抗氧化活性评价,结果表明,金刷把和黑石耳的甲醇提取相清除DPPH自由基能力高于其它溶剂提取相,其IC50值(半抑制浓度)分别为0.7847 mg/mL和0.5595 mg/mL;黑石耳甲醇提取相(IC50=0.5747 mg/mL)清除羟基自由基能力优于阳性对照物Vc(IC50=0.6126 mg/mL);黑石耳氯仿提取相、金刷把乙酸乙酯提取相和太白茶甲醇提取相清除羟基自由基能力与Vc相当;4种地衣甲醇提取相还原能力均较强,且与其浓度呈较好的量效关系。利用MTT法分析4种地衣多糖对HeLa、A375和Hep G2细胞体外生长增殖的抑制作用,结果显示黑石耳粗多糖对Hep G2细胞的抑制作用较为突出(IC50=0.2567 mg/mL),而金刷把抑制HeLa细胞的生长增殖作用最强,其IC50值为0.4332 mg/mL。     

南瓜醇提物的体外抗氧化活性(英文)

采用化学体系模拟法体外测定南瓜醇提物((pumpkin ethanol extract,PEE)对1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH·)、超氧阴离子自由基(O2)和羟自由基(·OH)的清除能力,总还原力,对β-胡萝卜素/亚油酸自氧化体系的总抗氧化能力以及脂质过氧化的抑制能力.结果显示PEE对DPPH·、02-和·OH均有较强的清除能力,IC50值分别为18.8 mg/mL、29.0 ms/mL和44.9μg/mL,有显著的还原力和总抗氧化力,对脂质过氧化有一定的抑制作用.PEE的体外抗氧化活性均有良好的量效关系.上述结果为南瓜作为抗氧化的保健食品或功能食品开发利用提供了依据.     

胡桃楸提取液对肿瘤细胞细胞周期的影响

目的考察胡桃楸提取液对Hela和K562细胞周期的影响。方法用流式细胞仪分析胡桃楸提取液对Hela、K562细胞细胞周期的影响。结果胡桃楸提取物体外作用于Hela细胞可引起细胞周期在S期的停滞,这种效果随药物浓度和作用时间的增加而增加,胡桃楸提取物体外作用于K562细胞,可引起细胞周期在G1期的停滞,随药物浓度的增加而增加。结论胡桃楸提取液对Hela细胞的生长抑制作用可能通过S期阻滞实现,对K562细胞抑制作用可能通过G1期阻滞实现。     

超声波提取的当归多糖化学修饰及其抗氧化活性研究

采用超声波辅助法从当归中提取水溶性当归粗多糖(ASP),经过4种化学修饰分别得到硫酸化当归多糖(S-ASP)、磷酸化当归多糖(P-ASP)、乙酰化当归多糖(Ac-ASP)、羧甲基化当归多糖(C-ASP)。通过红外光谱对化学修饰前后ASP的结构进行表征,并进行抗氧化活性和清除自由基能力的测定,以获得一种抗氧化活性较强的当归多糖。结果显示:经化学修饰后的ASP分别具有相应的特征吸收峰,表明当归多糖的4种化学修饰均已成功;经化学修饰的4种当归多糖总还原能力均弱于未修饰多糖,且清除羟基自由基(·OH)的能力无明显变化,但清除1,1-二苯基-2-苦苯肼(DPPH·)自由基和抑制Fe2+诱发的脂质过氧化反应的能力有所增强,其中P-ASP清除超氧阴离子(O2·-)自由基的能力最强;Ac-ASP抑制Fe2+诱发的脂质过氧化反应的能力最强,且均呈现出一定的量效关系。本实验结果为当归多糖的进一步研究与开发利用提供了一定的科学依据。     

冬葵果多糖的抗氧化作用研究

研究冬葵果多糖(Fructus Malvae polysaccharides,FMP)对氧自由基的清除作用及对脂质过氧化的抑制作用。采用分光光度法测定FMP清除Fenton体系产生的羟自由基(.OH)、邻苯三酚自氧化体系产生的超氧阴离子自由基(O2-.)的能力及评价对Fe(Ⅱ)-H2O2体系(.OH)诱导的脂质过氧化终产物丙二醛(MDA)的抑制作用。结果显示,在化学模拟体系中,冬葵果多糖对.OH具有很强的清除作用,与VC比较达到显著水平(P<0.01),对O2-.的清除能力与VC相当。在体外,多糖浓度达到1.72 mg/mL可明显降低MDA的含量,与空白液比较达到显著水平(P<0.01)。以上结果表明,FMP具有明显的抗氧化活性。     

平菇菌粗多糖的抗氧化活性研究

采用深层发酵技术生产平菇粗多糖,时其清除DPPH自由基、羟自由基的能力、铁离子螯合能力以及还原力进行了比较分析。结果表明：菌丝体粗多糖和发酵液粗多糖均具有较强的抗氧化能力,但2种多糖的抗氧化能力存在差异;茵丝体粗多糖清除DPPH自由基的能力较强,其EC。。值为2．20mg／mL;发酵液粗多糖清除羟自由基的能力、铁离子螯合能力以及还原力较强,其EC50值分别为0．72mg／mL、3．32mg／mL和7．91mg／mL。在一定的浓度范围内,多糖的浓度增加,其抗氧化能力也随之增强,呈量效依赖关系。     

DADS 上调K562 细胞p21WAF1 表达对细胞生长阻抑和凋亡 的实验研究

目的:探讨二烯丙基二硫(DADS)对体外培养的人白血病细胞系K562细胞生长阻抑和凋亡作用及机制。方法:采用MTT分析法检测细胞活性、流式细胞术分析细胞周期及凋亡率、免疫组化检测p21WAF1基因表达。结果:1).DADS在10mg/L～80 mg/L范围内,对K562细胞的抑制作用呈剂量-时间依赖效应;2).不同浓度DADS作用于K562细胞24h后,细胞周期发生了变化:DADS可以将K562细胞阻滞于G2/M期;3).DADS浓度在10mg/L～80mg/L时作用K562细胞24h后,凋亡率逐渐升高,有显著的统计学意义(P<0.05或P<0.01);4).用浓度分别为0mg/L,20mg/L,40mg/L,80mg/L处理K562细胞24h后,p21WAF1蛋白表达上调,有统计学意义(P<0.05或P<0.01),溶媒组和阴性对照组无差别(P>0.05)。结论:DADS有抑制K562细胞增殖和促进K562细胞凋亡的作用。其作用的可能机制与上调细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p21WAF1表达,从而诱使k562细胞阻滞于G2/M期有关。     

滑菇原生质体制备研究

通过对滑菇原生质体最佳制备条件的研究表明:利用OS培养基、1.5%溶壁酶将培养13 d的滑菇菌丝在0.6 mol/L甘露醇、pH 6.5、25℃条件下酶解5 h,原生质体产量最高,可达4.85×106个/mL。     

胞外漆酶同工酶谱及其在食用菌育种中的应用——Ⅰ.黑木耳及光帽鳞伞不同菌株的鉴别

利用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦圆盘电泳,分析比较了黑木耳(Auricularia auricula)16个菌株和光帽鳞伞(Pholiota nameko)9个菌株的胞外漆酶同工酶酶谱。经多批次重复,得到了所有菌株的恒定酶谱。依照这些酶谱及各酶带等电点(pI)值的不同,确立了它们的漆酶标志位点相似系谱。16株黑木耳被区分成4种类型9个组。9株光帽鳞伞被分成两种类型3个组,但各组内之菌株间仍有异同。试验结果表明,把漆酶同工酶谱应用于菌株鉴别将是一种有意义的方法。     

滑菇多糖wPNP-a1的制备及结构分析

利用传统热水浸提法提取滑菇粗多糖(wPNP),进而用季铵盐沉淀法和Sephadex G-150凝胶色谱柱层析对wPNP进行纯化,得滑菇多糖wPNP-a1.以高效液相色谱(HPLC)、傅里叶变换红外光谱(FIR)、气相色谱(GC)、核磁共振(NMR)、环境扫描电子显微镜(ESEM)和原子力显微镜(AMF)等方法分析wPNP-a1的结构,结果表明,滑菇多糖wPNP-a1的分子量为419310 Da,具有一般类多糖的特征吸收峰,糖苷键为β-型,不含乙酰基,由木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖组成,其摩尔比为3.91∶2.77∶1.91∶1;wPNP-a1的分子间排斥力较大,分子间吸引力较小,在云母表面呈直链状分布,链宽23 nm左右,链高0.7～0.8 nm.     

双歧杆菌对食管癌细胞增殖的抑制作用及细胞周期的影响

目的探讨青春双歧杆菌对食管癌EC109细胞的增殖抑制作用及对细胞周期的影响。方法用MTT比色法测定EC109细胞活性,用流式细胞仪测定EC109细胞周期。结果青春双歧杆菌对EC109细胞具有显著的增殖抑制作用,并呈剂量和时间依赖性;经青春双歧杆菌处理后,EC109细胞周期发生变化：细胞分裂阻滞于G1期。结论青春双歧杆菌可通过影响细胞周期抑制食管癌EC109细胞的生长。     

川芎粗多糖抗氧化和细胞毒活性研究

通过川芎粗多糖(LCP)对DPPH离子、超氧阴离子、.OH、总抗氧化能力、螯合能力、还原性和脂质过氧化能力的抗氧化效果和对肝癌细胞HepG2的抑制作用研究。结果显示:LCP具有较强的还原力,对超氧阴离子自由基、脂质过氧化产物有良好的抑制作用,其对肝癌细胞HepG2也具有一定的抑制作用。LCP有望作为天然抗氧化剂及功能性食品得到开发与应用。     

条斑紫菜多糖PY-D2对4种人肿瘤细胞株生长的影响

目的:研究条斑紫菜多糖体外抗肿瘤的生物学活性。方法:应用生化技术分离和纯化条斑紫菜多糖,获得条斑紫菜多糖的2个组分,分别为PY-D1和PY-D2;在体外培养条件下分别用不同浓度的条斑紫菜多糖PY-D2处理4种人肿瘤细胞,通过MTT法观察条斑紫菜多糖PY-D2对4种人肿瘤细胞生长的影响;采用流式细胞仪检测肿瘤细胞的细胞周期变化。结果:条斑紫菜多糖PY-D2诱导HO-8910、MCF-7、K562和7721肿瘤细胞72h后,对其生长有明显的抑制作用,呈剂量依赖效应,500mg/LPY-D2的抑制率分别为21.2%、23.6%、19.8%和21%(P<0.001)。流式细胞仪检测表明PY-D2可以阻滞肿瘤细胞的细胞周期于G0/G1期或G2/M期。结论:条斑紫菜多糖PY-D2具有抑制肿瘤细胞HO-8910、MCF-7、K562和7721生长的作用,其有关的分子生物学作用机理值得进一步研究。     

动物源杂合肽P18对白血病K562细胞的致死作用研究

通过其致死白血病K562细胞过程,对动物源杂合肽P18的分子结构与功能进行了研究.MTT实验表明P18显著致死K562细胞;Western blot实验和流式细胞分析提示P18导致 K562细胞坏死,而非依赖于caspases的传统凋亡;荧光探针标记后,观察到P18显著增加K562细胞的膜通透性;圆二(CD)图谱分析,在模拟细胞膜环境的溶液中,P18分子出现α-螺旋.综上所述,P18肽分子可能在细胞膜微环境的介导下产生α-螺旋,产生或暴露了肽分子的破膜结构,导致膜通透性显著增加,最终导致K562细胞的坏死.     

Apoptosis induced by 3,7-dinitrodibenzobromonium salts in K562 cells

We evaluated the inhibitory effect of 3,7-dini-trodibenzobromonium salts (cBr) on the proliferation of human chronic myelogenous leukemia K562 cell by trypan blue exclusion test and MTT colorimetric assay.The degree of DNA damage in K562 cells treated with cBr,was detected by isotopic tracer method (3H-TdR).The morphological changes of these K562 cells were examined by fluorescence and electron microscopy.Biochemical characteristics of K562 cells were detected by flow cytome-try and 3H-thymidine incorporation assay.Findings indi-cated that cBr could significantly inhibit cell proliferation and result in DNA damage of K562 cells,cBr is a new type of immunostimulant and can induce cell apoptosis.     

Antioxidant properties and protective effects of a standardized extract of Hypericum perforatum on hydrogen peroxide-induced oxidative damage in PC12 cells

Free radical scavenging and antioxidant activities of a standardized extract of Hypericum perforatum (SHP) were examined for inhibition of lipid peroxidation, for hydroxyl radical scavenging activity and interaction with 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl stable free radical (DPPH). Concentrations between 1 and 50 microg/ml of SHP effectively inhibited lipid peroxidation of rat brain cortex mitochondria induced by Fe2+/ascorbate or NADPH system. The results showed that SHP scavenged DPPH radical in a dose-dependent manner and also presented inhibitory effects on the activity of xanthine oxidase. In contrast, hydroxyl radical scavenging occurs at high doses. The protective effect of the standardized extract against H2O2-induced oxidative damage on the pheochromocytoma cell line PC 12 was investigated by measuring cell viability via 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT), lactate dehydrogenase (LDH) assays, caspase-3-enzyme activity and accumulation of reactive oxygen species [2',7'-dichlorofluorescin (DCF) assay]. Following 8-h cell exposure to H2O2 (300 microM), a marked reduction in cell survival was observed, which was significantly prevented by SHP (pre-incubated for 24 h) at 1-100 microg/ml. In a separate experiment, different concentrations of the standardized extract (0.1-100 microg/ml) also attenuated the increase in caspase-3 activity and suppressed the H2O2 -induced reactive oxygen species generation. Taken together, these results suggest that SHP shows relevant antioxidant activity both in vitro and in a cell system, by means of inhibiting free radical generation and lipid peroxidation.