脑膜炎奈瑟菌疫苗研制进展

由脑膜炎奈瑟菌引起的流行性脑脊髓膜炎是一种对人类危害严重的传染性疾病,曾在全球引起多次大流行,所以关于其预防引起了全世界的高度重视。目前应用和研究的脑膜炎奈瑟菌疫苗主要有荚膜多糖疫苗、多糖与蛋白结合疫苗、B群改良疫苗、去毒脂多糖结合疫苗等,本文就以上疫苗的研制情况进行综述。     

培养基质量对脑膜炎奈瑟菌培养结果的影响

通过对A群C群流脑多糖疫苗生产用培养基质量指标与培养脑膜炎奈瑟菌菌数之间的关系进行分析,发现不同型别的脑膜炎奈瑟菌在相同的培养基和培养条件下具有不同的培养结果,对培养基总氮含量、氨氮含量、氯化钠含量进行检测分析,在一定范围内并未发现与培养菌数之间明显的关系,但这些质量指标作为培养基制备过程的质量控制,保证不同批次培养基始终保持相对稳定、可控的质量,具有十分重要的意义。     

百日咳鲍特菌与脑膜炎奈瑟菌

1．百日咳鲍特菌 即百日咳杆菌,属鲍特菌属,人类是百日咳鲍特菌唯一的宿主,百日咳鲍特菌主要侵犯婴幼儿呼吸道。感染早期有轻度咳嗽,1～2周后出现阵发性痉挛性咳嗽,可持续数周,随后进入恢复期,全病程可达几个月。该病的主要威胁是肺部继发感染、癫痫发作、脑病和死亡。据世界卫生组织报告,百日咳每年在全球造成2亿～4亿人感染,20万～40万人死亡,     

脑膜炎奈瑟菌荚膜多糖合成及相关基因的研究进展

脑膜炎奈瑟菌(Neisseria meningitides,Nm)是流行性脑脊髓膜炎的主要致病菌,荚膜多糖(Capsular polysaccharides,CPS)是该菌主要的致病因子。近年来,随着基因组学与分子生物学的不断发展,CPS合成相关基因越来越受到关注。重点对Nm CPS的合成及相关基因作用作一综述。     

酵母浸出粉在奈瑟脑膜炎双球菌培养中的比较观察

目的探索A群,C群奈瑟脑膜炎双球菌(简称流脑)多糖疫苗生产中奈瑟脑膜炎双球菌培养的最适培养基。方法在培养基配制中用增减酵母浸出粉的方法制备相应的培养基,8h收菌,通过菌体的收获量并参考多糖量来确定较好的培养基配比。结果不同培养基用于A群、C群奈瑟脑膜炎菌培养8h后均有收获,其中2号培养基(酵母浸出粉)培养的菌体的浓度明显高于1号和3号培养基,它们之间有显著性差异(P<0.05)此种培养基能提高奈瑟脑膜炎双球菌的产量。结论添加酵母浸出粉的培养基可作为A群、C群奈瑟脑膜炎双球菌培养的最适培养基。     

基于基因组序列的脑膜炎奈瑟菌分型方法

[目的]建立并评估1种适宜的脑膜炎奈瑟菌(Neisseria meningitidis,Nm)基因组分子分型方法.[方法]本研究以125株代表性Nm菌株的基因组序列为对象,建立了基于核心基因SNP的基因组分型方法,并与pubMLST网站公布的MLST和cgMLST分型方法进行比较.[结果]基于核心基因SNP的基因组分型...     

新生儿血培养检出潘多拉菌一例

潘多拉菌是一种革兰阴性非发酵菌,隶属伯克霍尔德菌属。国内潘多拉菌感染鲜有临床报道。本实验室在1例新生儿血培养中检出一株革兰阴性杆菌,经生化、药敏试验及16S rRNA基因测序等方法鉴定,确定是潘多拉菌属。     

脑膜炎奈瑟氏菌外膜蛋白NhhA的克隆表达及免疫学分析

通过克隆脑膜炎奈瑟氏菌NhhA基因GNA0992于原核表达载体pET 20b,在大肠杆菌BL21（DE3）中实现了可溶性表达,表达量约占菌体蛋白总量的20%。经初步纯化后免疫小鼠,对其免疫原性进行了初步分析。结果显示,经3次腹腔免疫,血清IgG滴度达到23186,同时杀菌力实验显示NhhA能诱导针对B群脑膜炎奈瑟氏菌的补体依赖的杀菌反应。证明了NhhA是一种良好的抗原,为疫苗开发的蛋白靶标筛选工作奠定了基础。     

PCR结合酶切-序列比对法鉴定B群脑膜炎奈瑟菌菌株

目的用PCR结合酶切-序列比对法对B群脑膜炎奈瑟菌菌株进行鉴定。方法用玻片凝集法对不同来源的15株B群脑膜炎奈瑟菌菌株进行初步检定,再用PCR结合酶切-序列比对法对上述15株菌株进行进一步鉴定,即用PCR结合酶切法扩增菌株的唾液酸转移酶sia D基因并对PCR产物进行酶切后,用BLAST软件将PCR产物测序结果与Gene Bank中原始sia D序列比对。结果 15株菌株玻片凝集结果均为阳性;15株菌株的PCR产物片段大小均为460 bp;TaqⅠ酶切后,13株菌株的酶切产物片段大小仍为460 bp,其PCR产物测序比对结果与B群脑膜炎奈瑟菌原始sia D序列同源性均达到99%;其余2株酶切产物片段大小约200 bp,与C群脑膜炎奈瑟菌sia D原始基因序列同源性分别为98%和99%。结论 15株菌株经PCR结合酶切-序列比对法鉴定,13株为B群脑膜炎奈瑟菌菌株,2株为C群脑膜炎奈瑟菌菌株;该方法可准确鉴定B群脑膜炎奈瑟菌菌株。     

我国脑膜炎奈瑟氏菌不同血清群菌株DNA G Cmo1％含量的测定

本文采用热变性温度法Tm测定了我国自行分离和建立的脑膜炎奈瑟氏菌10个血清群菌株的DNAG Cmol％,其含量范围在50.3～52.4之间。结果表明10个血清群菌株的DNAG Cmol％含量符合脑膜炎奈瑟氏菌种的特性。数据的建立为进一步脑膜炎奈瑟氏菌的标准化提供了可靠的依据。     

中山地区正常人群鼻咽部脑膜炎奈瑟菌的带菌率及血清分型调查

目的：获取本地区正常人群鼻咽部脑膜炎奈瑟菌携带情况,为政府制定预防和控制流行性脑脊髓膜炎暴发流行提供科学决策依据。方法：随机抽检正常人群（按人群防疫监测共分四组：2～4岁、6～8岁、9～12岁、25～39岁组）鼻咽拭子进行培养,分离,鉴定及血清分型。按《全国临床检验操作规程》进行。结果：403人共检出22株脑膜炎奈瑟菌,总检出率为5.46%,男性检出9株,检出率4.46%,女性检出13株,检出率为6.47%,其血清分型为A型群3株,B群14株,C群2株,1892型1株,未定型2株,2～4岁组检出6株,检出率8.57%（6/70）,6～8岁组检出4株,检出率7.41%（4/54）;9～12岁组检出6株,检出率8.00%（6/75）;25～39岁组检出6株,检出率2.94%（6/204）,男女性别之间及少年不同组别正常人群鼻咽部脑膜炎奈菌携带率经X^2检验差异均无显著性,而少年组与成人组比较和差有显著性意义。结论：调查显示,本地区正常人群鼻咽部脑膜炎奈环瑟菌携带率为5.46%,处于较低水平,血清分型以B群为主,本地为非流行株。不同性别正常人群鼻咽部脑膜炎奈瑟菌的携带率无差别,儿童携带率较成人高,调查结果显示本地区目前不具备流行特点,A群脑膜炎奈瑟菌未造成本地流行性脑脊髓膜炎的流行。     

基于Z曲线方法重新注释脑膜炎奈瑟菌MC58株基因组

已测序的微生物基因组中包含的注释开放阅读框(open reading frames,ORFs)可以分为两大类:第一类对应于功能已知的蛋白质编码基因;第二类则为功能未知的假设ORFs,其中通常有一部分实际上不编码蛋白质。采用基于Z曲线的方法从属于第一类的功能已知基因出发训练参数,进而确定第二类ORFs中非编码的部分。通过支持向量机的学习及分类,结果显示十重交叉检验平均正确率为98.45%,说明Z曲线联合支持向量机是一种高度准确的基因识别方法。最终,确定216个假设ORFs实际上不编码蛋白质。通过采用Blastp进行序列比对,保留的假设ORFs中有341个在高可靠性的条件下获得了功能信息。根据蛋白质直系同源簇方法进行功能分类,分别有30、53、59和159个新注释的假设ORFs属于信息储存和加工类、细胞加工和信号传递类、新陈代谢类和特征不明显类。另外还有70个不属于其中的任何一类。注释结果比RefSeq及GenBank提供的原注释更加准确,更加完整。     

一种快速准确测定A群脑膜炎奈瑟菌活菌率的方法

目的研究"美蓝-(碱性)藏红O"双染色法用于快速准确测定A群脑膜炎奈瑟菌(group A Neisseria meningitidis,以下简称A群脑膜炎球菌)活菌率的可行性。方法制备A群脑膜炎球菌悬液,取菌悬液双染色法染色,用光学显微镜观察,计算活菌率。将菌悬液进行10倍系列稀释,各菌液分别用平板涂布法接种至10%羊血普通琼脂平皿,于CO2环境下、35~37℃培养12~20 h,计算菌悬液活菌率。比较两种方法测定8批A群脑膜炎球菌所测得的活菌率,并进行相关性和线性回归分析。结果 "美蓝-(碱性)藏红O"双染色法与平板涂布法所测得的活菌率结果差异无统计学意义(P>0.05);两种方法所测得的活菌率具有显著的直线回归关系(P<0.01,n=8),相关系数r=0.984,其回归方程为y=0.919x+1.661(R2=0.967)。结论 "美蓝-(碱性)藏红O"双染色法检测时间短、判定结果直观、操作简单、计数结果准确,可用于A群脑膜炎球菌活菌率的快速测定。     

外科血培养标本中病原菌分布及耐药性分析

目的了解中山大学附属第一医院外科血标本中病原菌的菌种分布及常见菌株的耐药性。方法血标本用Bact/A lert-120全自动血培养仪进行血培养,阳性血培养转种后用VITEK-60 AMS细菌鉴定仪鉴定,用K-B法进行药敏试验。结果2002年1月至2005年12月血培养标本中共分离出病原菌256株,阳性率为10.6%。122株(47.7%)为革兰阴性杆菌,其中肠杆菌科细菌占72.1%(88/122),非发酵菌占27.9%(34/122);113株(44.1%)为革兰阳性球菌,其中葡萄球菌属占51.3%(58/113),肠球菌占38.1%(43/113);真菌21株(8.2%)。血培养中的革兰阴性杆菌对亚胺培南、美洛培南治疗敏感;革兰阳性球菌对万古霉素和替考拉宁敏感。结论肠杆菌科细菌和葡萄球菌是外科血培养中的主要病原菌,其耐药现象严重,宜根据药敏结果选用敏感抗菌药物治疗。     

血培养中病原菌分布及药敏调查分析

目的了解血培养中病原菌的分布及药敏情况,供临床借鉴。方法对中山大学附属第三医院血培养标本中所分离到的细菌及药敏结果进行统计分析。结果从血培养标本中分离到细菌239株,其中其中革兰阴性杆菌(G-b)131株,占52.6%,革兰阳性球菌(G+c)99株,占39.8%(99/236),真菌占6.8%,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs菌检出率分别是54.2%和48.6%,只对亚胺培南、特治星和阿米卡星敏感,敏感率超过85%,G+c中,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率分别是42.9%和89.2%,只对万古霉素敏感(100%),检出的肠球菌已出现对万古霉素耐药。结论血培养分离的病原菌分布复杂,产ESBLs菌和MRS菌株检出率高,临床应重视血培养检测结果.合理用药。     

老年患者血培养病原菌分布及耐药性调查

目的了解老年患者血液感染的病原菌种类以及对抗菌药物的耐药状况。方法对2290份老年住院患者血培养标本中186例培养阳性检出菌及药敏结果进行统计学分析。结果在分离的172株细菌中,革兰阴性菌、革兰阳性菌及真菌分别占54.7%、34.9%和10.5%;革兰阴性菌中以大肠埃希菌占绝对优势(20.9%),假单胞菌其次(10.5%),革兰阳性菌中以凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)占绝对优势(20.9%),金黄色葡萄球菌仅为2.9%。药敏试验表明老年菌血症的病原菌对常用抗菌药物的耐药严重,尤其是CNS及假单胞菌属细菌表现为较高的耐药率及多重耐药性。结论老年菌血症病原菌以机会致病菌感染比例较高,致病菌耐药问题严重,及时监测老年致病菌的变迁和耐药发展趋势以指导临床用药至关重要。