人工瘤胃发酵饲料的简易保温方法

利用牛胃液中的多种微生物,在体外接种于粗料而调制成的一种喂猪的饲料,就叫做“牛胃液”发酵饲料。因为它是模仿牛瘤胃环境条件对饲料进行发酵,所以也叫“人工瘤胃”发酵饲料。这种发酵饲料,经瘤胃微生物(特别是纤维分解菌)的作用,能把饲料中一部分不能被猪利用的粗纤维分解,变为可被消化吸收     

重组瘤胃细菌有利于饲料消化

美国国家农业研究中心科学家们研制了一种遗传工程细菌,旨在促进反刍动物中饲料的利用率。饲料费用可能占家畜生产价格的50％,所以,如果饲料的消化率能提高5％的话,则可大大降低其成本费用。因此,研究人员研制了一种天然瘤胃细菌,以促进动物消化饲料纤维中的木聚糖。从栖瘤胃拟杆菌分离出木聚糖酶的基因,然后借助于一质粒把这种基因插入人结肠细菌多形拟杆菌里。用燕麦外壳分离的木     

利用基本培养基初步筛选牛瘤胃中纤维素降解菌

目的初步筛选牛瘤胃中纤维素降解菌。方法分别采用基本培养基（牛肉膏蛋白胨培养基、马丁培养基）,利用好氧、兼性和厌氧3种不同的培养方法进行初选,初步分离牛瘤胃中的细菌与真菌,再通过复选培养基（加入微晶纤维素）,筛选降解纤维素的菌种。结果筛选分离出降解纤维素的1株厌氧细菌和1株厌氧真菌。结论此实验方法简单易行,能够有效地从牛瘤胃中筛选出生长良好的纤维素降解菌。     

乙醇对瘤胃细菌发酵纤维类饲料产短链脂肪酸能力的影响

【背景】瘤胃细菌发酵碳水化合物产生的短链脂肪酸(Short Chain Fatty Acid,SCFA),可作为燃料和化工产品的前体物。乙醇在碳链延伸产生己酸过程中具有重要作用,但对瘤胃发酵不同纤维类饲料产己酸能力的研究少有报道。【目的】揭示乙醇对纤维类饲料体外瘤胃发酵的SCFA产量差异,挖掘潜在的产C5和C6脂肪酸细菌。【方法】利用体外连续传代和Illumina HiSeq测序等技术,比较了添加乙醇对6种饲料产SCFA能力的影响以及细菌群落结构的差异。【结果】6种纤维类饲料的总SCFA产量顺序为黑麦草>小黑麦草>燕麦草>玉米芯>稻秸>甜叶菊。添加乙醇显著提高了小黑麦草、黑麦草的戊酸和己酸产量;细菌群落以厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes)为优势菌门,乙醇显著提高了燕麦草组和小黑麦草组的放线菌门(Actinobacteria)和软壁菌门(Tenericutes)相对丰度;种水平上,甜叶菊、稻秸和玉米芯的优势菌与燕麦草、小黑麦草和黑麦草的优势菌相对丰度不同。相对丰度前10的细菌中,Prevotella sp. DJF CP...     

几种瘤胃细菌对大麦、玉米和小麦的消化作用

三种主要的消化淀粉的瘤胃细菌,牛链球菌(Streptococcus bovis 26),嗜淀粉瘤胃细菌(Ruminobac-ter amylophilus 50),和溶纤维丁酸弧菌(Butyrivibriofibrisolvens A38),在消化大麦、玉米和小麦时是各具特色的。S.bovis 26对所有谷物类淀粉的消化速率比R.amylophilus 50或B.fibrisolvens A38都快。S.bovis 26对小麦淀粉的消化又比大麦或玉米都快;而R.amylophilus 50对大麦淀粉的消化则快于玉米或小麦淀粉。B.fibrisolvens A38对大麦和玉米淀粉的消化程度相似,但实际上不能消化小麦淀粉。B.fibrisolvens     

不同日粮饲养黄牛的胃部微生物群落多样性比较分析

为分析不同饲料喂养对黄牛胃中微生物群落结构的影响,分别用芒草单一喂养和农家混合饲料喂养两年的黄牛为实验组和对照组。以瘤胃、蜂巢胃、重瓣胃和皱胃四个胃中的微生物为研究对象,采用原位包埋裂解法和脉冲场电泳（pulsed field gel electrophoresis,PFGE）提取微生物总 DNA,脉冲场电泳（pulsed field gel elec-trophoresis,PFGE）。使用细菌16S rRNA 引物341F ／534R 及真菌18S rDNA 引物 NS1／GCFungi 进行降落 PCR 扩增。变性梯度凝胶电泳（denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE）对扩增产物进行区分,使用硝酸银染色。电泳扫描结果通过 Quantity one 软件进行分析,SPSS 软件进行数据统计。针对实验组和对照组瘤胃样品共性条带和特性条带测序并比对。结果表明：实验组与对照组细菌群落结构变化较大,UPGAM聚类图上被分为两支,相似性只有0．35。且香农多样性指数及条带丰度都明显少于对照组。真菌 DGGE 图谱条带差别不大,聚类图上显示实验组四个样品与对照组四个样品相似性在0．43～0．68之间。多样性及条带丰度在实验组与对照组之间差异0．0027～0．5999。测序结果,细菌与数据库中未培养细菌种类较为接近,而真菌中部分与已知菌种接近。芒草单一饲养对牛胃中的微生物群落结构具有极大的影响,对细菌的影响尤为明显。     

不同日粮饲养黄牛的胃部微生物群落多样性比较分析（英文）

为分析不同饲料喂养对黄牛胃中微生物群落结构的影响,分别用芒草单一喂养和农家混合饲料喂养两年的黄牛为实验组和对照组。以瘤胃、蜂巢胃、重瓣胃和皱胃四个胃中的微生物为研究对象,采用原位包埋裂解法和脉冲场电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)提取微生物总DNA,脉冲场电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)。使用细菌16S rRNA引物341F/534R及真菌18S rD NA引物NS1/GCFungi进行降落PCR扩增。变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)对扩增产物进行区分,使用硝酸银染色。电泳扫描结果通过Quantity one软件进行分析,SPSS软件进行数据统计。针对实验组和对照组瘤胃样品共性条带和特性条带测序并比对。结果表明:实验组与对照组细菌群落结构变化较大,UPGAM聚类图上被分为两支,相似性只有0.35。且香农多样性指数及条带丰度都明显少于对照组。真菌DGGE图谱条带差别不大,聚类图上显示实验组四个样品与对照组四个样品相似性在0.43~0.68之间。多样性及条带丰度在实验组与对照组之间差异0.0027~0.5999。测序结果,细菌与数据库中未培养细菌种类较为接近,而真菌中部分与已知菌种接近。芒草单一饲养对牛胃中的微生物群落结构具有极大的影响,对细菌的影响尤为明显。     

广西水牛瘤胃中的细菌多样性

[目的]了解广西水牛瘤胃中细菌的组成及其可能的降解纤维素细菌的主要类群。[方法]提取水牛瘤胃内容物和高效降解滤纸的水牛瘤胃内容物的富集培养物的宏基因组DNA,以宏基因组DNA为模板,扩增16S rRNA基因序列,构建该两种样品的细菌的16S rRNA基因文库。通过对16S rRNA基因序列的分析,了解这两种样品的细菌群体种类及数量。 [结果] 水牛瘤胃内容物与其富集培养物中均主要含有LGCGPB (low G+C Gram-Positive Bacteria)、CFB (Cytophaga-Flexibacter-Bacteroides)两大类菌群和少数的螺旋体菌（Spirochaetes）,且LGCGPB所占的比例都是最高的,LGCGPB在水牛瘤胃内容物细菌中的比例为56.66%,而在富集培养物细菌中的比例升高为73.33%。在水牛瘤胃内容物中,丝状杆菌（Fibrobacteres）占3.33%,但在富集培养物中未被检测到。而在富集培养物中占13.33%的变形杆菌（Proteobacteria）,在水牛瘤胃内容物中未被检测到。本研究还发现了分类地位尚未明确的一菌群（R46）。[结论]细菌类群LGCGPB、Proteobacteria可能在水牛瘤胃中的纤维素降解过程中起重要作用。此外,水牛瘤胃中的细菌组成和牦牛、牛、羊瘤胃中的细菌组成较相似但比例有所不同。     

利用定量杂交法检测绵羊瘤胃纤维细菌的研究

实验利用通用细菌探针和3株纤维分解菌的特异性探针,初步建立起对瘤胃细菌进行检测的16SrRNA定量杂交的方法。试验将提取的总RNA按浓度系列稀释后与通用细菌探针进行杂交,检测结果所做的回归分析表明,杂交信号与尼龙膜上的所点RNA的量具有明显线性关系。同时对几份瘤胃样品进行3种纤维分解菌的初步定量检测,结果显示3种纤维分解菌的相对丰度与前人报道相似,表明该方法能够对瘤胃细菌进行定量分析,可在后续相关研究中使用。     

利用定量杂交法检测绵羊瘤胃纤维细菌的研究*

实验利用通用细菌探针和3株纤维分解菌的特异性探针,初步建立起对瘤胃细菌进行检测的16S rRNA定量杂交的方法。试验将提取的总RNA按浓度系列稀释后与通用细菌探针进行杂交,检测结果所做的回归分析表明,杂交信号与尼龙膜上的所点RNA的量具有明显线性关系。同时对几份瘤胃样品进行3种纤维分解菌的初步定量检测,结果显示3种纤维分解菌的相对丰度与前人报道相似,表明该方法能够对瘤胃细菌进行定量分析,可在后续相关研究中使用。     

瘤胃纤维素降解细菌的研究进展

反刍动物瘤胃是自然界中最有效的纤维素降解系统，其纤维素降解能力主要源于寄居于其中的纤维素降解细菌、真菌和原虫。其中，瘤胃纤维素降解细菌因数量庞大、种类繁多以及代谢途径丰富，在木质纤维素降解及利用方面发挥着重要作用。本文综述了国内外瘤胃纤维素降解细菌的种类，分析了瘤胃纤维素降解细菌的特性；阐述了瘤胃纤维素降解细菌通过纤维小体对纤维素的降解过程，以及瘤胃微生物之间的相互作用和相互制约关系；简述宏组学技术在开发新纤维素降解菌和新纤维素酶方面的应用，旨在为进一步研究纤维素降解细菌的降解机理，开发新的纤维素菌种和酶资源提供新的思路。     

瘤胃真菌的营养功能及其应用

在过去几十年里,人们对反刍动物胃肠道消化功能起主导作用的微生物区系的研究取得很大的进展,但主要集中在细菌和纤毛虫上,对瘤胃真菌的描述却很少,这是因为,以前在研究瘤胃微生物时,人们往往采用经纱布或尼龙网过滤后的瘤胃液.这样正好把粘在固体残渣上的真菌滤掉了,因此,看到的只是有鞭毛的细胞,这些细胞被误认为原虫.近年来人们开始转向瘤胃真菌的研究.得知,瘤胃真菌在降解饲料,特别是大颗粒、大片段、植物纤维过程中起着重要作用.本文就瘤胃真菌的特点、形态、在饲料降解中的作用及其应用前景做一综述.     

日粮中添加鱼油后肉牛瘤胃细菌区系的变化

目的：研究肉牛日粮中添加2%鱼油后瘤胃细菌区系的变化。方法：分别于添加鱼油前后取瘤胃液提取总DNA,根据细菌通用引物27F/1492R扩增16S rDNA基因序列,分别构建2个16S rDNA基因文库;从每个文库中各随机挑取384个克隆,对阳性克隆用HhaⅠ进行限制性片段长度多态性（RFLP）分析、聚类,取各RFLP类群中的代表克隆进行16S rDNA序列测定,构建系统发育树,研究细菌区系多样性的变化。结果：添加鱼油前、后,文库的RFLP图谱分别可以分成74和41个RFLP类群;添加鱼油前后的优势菌群均为噬纤维菌-屈挠杆菌-拟杆菌（CFB）和低（G＋C）含量的革兰阳性菌（LGCGPB）,但添加鱼油后文库中LGCGPB比例降低,而且未检测到纤维菌门细菌;有50%～60%的测定序列与GenBank数据库中的序列相似性高于97%,90%以上为未培养的细菌;添加鱼油后瘤胃细菌的多样性减少。结论：日粮添加鱼油后CFB比例增高但多样性下降,LGCGPB、纤维杆菌比例下降,这一结果为调控瘤胃发酵提供了依据。     

奶牛瘤胃中牛链球菌的分离鉴定

采用厌氧分离技术从奶牛瘤胃中分离出1株细菌,通过对其形态、培养特性、生理生化特性、16S rRNA基因序列测定与同源性分析等研究,确定分离菌株为牛链球菌（Streptococcus bovis）,为进一步研究其对瘤胃发酵的影响奠定了基础。     

提高噬菌体裂解酶抗菌活性的研究进展

随着细菌耐药性问题的日益严重,人们开始寻求新型抗菌制剂。噬菌体裂解酶是一种由ds DNA噬菌体编码的水解酶,能高效特异性地裂解细菌细胞壁且不易使细菌产生耐药性。由于天然裂解酶具有宿主谱窄,不能裂解革兰阴性菌等缺点,研究者对裂解酶进行了大量的设计改造。本研究主要对提高噬菌体裂解酶抗菌活性的研究进展进行综述。     

氯化镧对西门塔尔牛瘤胃发酵及尿嘌呤衍生物的影响

选用4头体重420 kg,年龄2.5岁装有永久性瘤胃瘘管的中国西门塔尔牛,采用4×4拉丁方设计,以混合精料和玉米秸秆为基础日粮,研究日粮中添加氯化镧(0、0.45、0.9和1.8 g/head/d)对瘤胃pH、NH,-N、VFA、营养物质降解及尿嘌呤衍生物浓度的影响.每头牛每天日粮添加0.9 g氯化镧后显著降低瘤胃pH和NH,-N浓度,提高了玉米秸秆干物质、有机物质、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的有效降解率(P＜0.05);对豆粕干物质、有机物质和粗蛋白质降解无显著影响(P＞0.05);显著提高了瘤胃丙酸、总挥发性脂肪酸浓度和尿嘌呤衍生物的排出量(P＜0.05);乙酸/丙酸显著下降(P＜0.05). 日粮中氯化镧的适宜添加水平为每头牛每天0.9 g.     

厌氧真菌纤维降解酶及其应用潜力的研究进展

反刍动物的瘤胃是已知的纤维降解能力最强的天然发酵罐,其发酵粗纤维的能力很大程度上依赖于其中栖息的各类微生物的功能。厌氧真菌作为瘤胃内的一类低丰度菌群,最先定殖到宿主动物摄入的纤维质饲料上,并通过分泌大量高效的碳水化合物活性酶降解粗纤维。然而,由于缺乏足够的基因组信息和有效的厌氧真菌遗传操作系统,目前国内外对厌氧真菌分泌的纤维降解酶及其降解机制的研究进展有限。本文对厌氧真菌的分类及已发表的基因组信息进行概述,介绍了各类纤维降解酶及纤维小体的组成结构和催化机制特点,并对纤维降解酶在生物质能、饲料处理、纺织造纸及食品加工等方面的应用进行总结。研究厌氧真菌纤维降解酶的作用特性,将有助于完善其在瘤胃环境中有效竞争资源并降解粗纤维的知识体系,也将进一步了解其生物技术应用潜力,为工业生产中应用酶制剂提供新思路。     

2-甲基丁酸对西门塔尔牛瘤胃发酵的影响

研究了2-甲基丁酸对西门塔尔牛瘤胃pH、NH3-N、VFA、营养物质降解率及微生物蛋白质产量的影响。选用4头体重420 kg,年龄2.5年,装有永久性瘤胃瘘管的西门塔尔牛,采用4×4拉丁方设计,在每头牛基础日粮中添加2-甲基丁酸(0、8.4 g/d、16.8 g/d组和25.2 g/d),以饲喂基础日粮组为对照组。结果表明:对瘤胃pH无显著影响(P>0.05),16.8 g/d和25.2 g/d组饲喂后NH3-N浓度显著低于对照和8.4 g/d组(P<0.01);16.8 g/d和25.2 g/d组豆粕干物质、有机物质和粗蛋白质有效降解率显著低于对照组(P<0.05);16.8 g/d组提高了玉米秸秆干物质、有机物质、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的有效降解率(P<0.05);采食后16.8 g/d组瘤胃乙酸、总挥发性脂肪酸浓度和乙酸/丙酸比例显著增加(P<0.05),8.4 g/d和16.8 g/d组瘤胃微生物蛋白质产量显著提高(P<0.05)。日粮添加2-甲基丁酸对瘤胃发酵有促进作用,适宜添加水平为16.8 g/d。     

显微观察中国荷斯坦牛瘤胃纤毛虫的物种多样性北大核心CSCD

瘤胃纤毛虫是反刍动物瘤胃微生物的重要组成部分,在维持瘤胃微生态和对宿主动物供能等方面起重要作用。本研究采集5头中国荷斯坦牛(Bos taurus)瘤胃液样品固定染色,而后通过光学显微镜计数瘤胃纤毛虫的密度和属的组成及组成比,并对其中常见属进行观察和特征描述,旨在了解中国荷斯坦牛瘤胃纤毛虫的物种多样性,为反刍动物的瘤胃内纤毛虫生物多样性研究提供资料。结果发现,中国荷斯坦牛瘤胃纤毛虫在瘤胃液中的平均密度为(3.2±3.4)×10^(8)个/L,共检出13属瘤胃纤毛虫,其中检出率最高的3个属依次为内毛属(Entodinium)、单甲属(Eremoplastron)和双毛属(Diplodinium),检出率最低的3个属依次为鞘甲属(Elytroplastron)、后毛属(Metadinium)和多甲属(Polyplastron)。内毛属是中国荷斯坦牛瘤胃液中最主要的属,其平均组成比为84.0%±10.2%,而其他属的组成比都低于5%。本研究表明,中国荷斯坦牛瘤胃液中瘤胃纤毛虫具有丰富的物种多样性。     

苦瓜皂苷和硝酸钠对山羊瘤胃细菌多样性的影响

瘤胃细菌在反刍动物瘤胃发酵中发挥着重要作用。本研究采用末端限制性片段长度多态性分析和克隆文库技术,研究了苦瓜皂苷和硝酸钠对体外发酵山羊瘤胃液细菌多样性的影响。结果表明,苦瓜皂苷显著影响6 h发酵液中细菌的丰富度指数和24 h发酵液中细菌的香农指数与丰富度指数,并对Rumen bacterium R-7、丁酸弧菌属细菌影响较大。硝酸钠对细菌的多样性指数没有显著影响,但也一定程度的影响细菌的群落结构和促进24 h发酵液中的白色瘤胃球菌的生长。