胰腺癌裸鼠皮下异种移植动物模型建立研究

目的:用人体胰腺癌细胞株,建立小鼠胰腺癌细胞株(pGHAM-1)移植性胰腺癌模型,并研究其生物学特性。方法:将pGHAM-1细胞培养后配成1×107/ml,取0.2mL接种于小鼠皮下。于接种后20、30、40天观察肿瘤的生长、转移及腹水量。接种40天后处死动物,解剖取出移植瘤,用游标卡尺测量肿瘤大小,再进行HE染色的组织病理学检查,免疫组织化学检测血管内皮细胞生长因子(VEGF)及肿瘤转移相关蛋白(nm23-H1)的表达。结果:分别于20、30、40天测量肿瘤体积为84.1±21.9 mm3,413.7±208.4 mm3,2187.3±1882.8 mm3,后者与10 d前比较差异均具有统计学意义(P<0.01)。HE染色结果显示肿瘤组织呈条索状或小梁状排列,肿瘤组织与正常组织交界处有少量淋巴细胞浸润,肿瘤组织中血管生成罕见。免疫组织结果显示VEGF和nm23-H1蛋白在肿瘤组织中均呈阴性表达。结论:异位裸鼠人胰腺癌移植瘤模型易复制,时间短,成功率高,为胰腺癌体内研究提供了理想的动物模型。     

丹参对冻融入胎儿卵巢组织异种移植早期血管生成的影响

目的：研究冻融人胎儿卵巢组织移植早期血管生成过程中微血管形态和密度的改变以及血管生成相关基因mRNA的表达;探讨丹参注射液对移植物血管生成的影响。方法：冻融胎儿卵巢组织异种移植至裸鼠肾被膜下,按给药不同分为对照组（生理盐水）和丹参组（丹参注射液每只0．09g／d）,分别于移植后48h、7d和28d回收移植物。结果：移植后两组卵巢组织微血管密度均明显增多;对照组移植后7d血管密度达峰,丹参组血管密度在移植后48h即已显著上升,此后两个时间段保持相对平稳。Angiopoietin-2mRNA表达在移植后48h两组均显著升高,丹参组上升幅度大于对照组（P〈0．05）。结论：冻融人胎儿卵巢组织新血管生成开始于异种移植后48h内,移植后7d组织内微血管密度达峰。丹参在移植早期应用可以促进移植后血管生成,其机制可能与它增加了血管生成相关因子Ang-2mRNA的表达有关。     

人肿瘤干细胞异种移植模型进展

人肿瘤干细胞（human cancer stem cells,CSCs）分离后异种移植至模型内的成瘤特性,为研究肿瘤病因学和制订抗癌策略提供了新的手段和方法。但是,目前人肿瘤干细胞的鉴别离不开移植至异种免疫缺陷鼠内建立肿瘤干细胞的动物模型。本文主要从CSCs的概念、CSCs与肿瘤的关系、CSCs异种移植模型研究进展、模型建立的影响因素、模型建立存在的问题等进行简要综述,为异种移植模型的建立提供参考。     

卵巢组织冻存与移植生育力保存的应用现状与研究进展

年龄增长、疾病以及抗肿瘤治疗等均可能会造成女性生育力的下降甚至丧失。随着诊疗技术的发展,癌症死亡率逐渐下降,因此患者的生育力保存需求较前增加。胚胎冻存、卵母细胞冻存和卵巢组织冻存是目前常用的女性生育力保存方式。卵巢组织冻存与移植至今仅有20余年历史,现已成为临床上具备医学指征的生育力保存方式,有助于重建患者的内分泌和生育功能,已有超200多例患者通过此技术成功完成生育。为提高冻存卵巢组织再移植的安全性,现有研究将卵母细胞体外成熟技术、人工卵巢技术与之相结合,避免携癌风险高的冻存卵巢组织移植后的癌症复发风险。较多的研究均已证实了卵巢组织冻存与移植技术的有效性和安全性。尽管卵巢组织冻存与移植技术得到了快速发展,但是该技术仍面临如何通过减少卵泡储备损失进而延长卵巢组织移植后有效性等挑战,尚需要更多的基础和临床研究促进卵巢组织冻存和移植技术的进步与发展。     

人淋巴细胞经冻存复苏后DNA,RNA和蛋白质的合成代谢

本实验采用同位素掺入和光镜放射自显影技术,研究新鲜未经冻存、冻存1年和冷冻杀伤的人外周血淋巴细胞,对3~H-TdR、3~H-UR和3~H-亮氨酸的掺入量进行测量。并观察其掺入部位,以反映淋巴细胞经过冻存不同时间后,它们的DNA、RNA和蛋白质的合成强度和合成部位。实验结果表明,冻存1年的淋巴细胞,复苏后的回收率和存活率均在90％以上。PHA刺激后的3~H-TdR、3~H-UR和3~H-亮氨酸的掺入量,虽比冻存前降低,但仍相当活跃,保持较高水平。3~H-TdR集中在细胞核,3~H-UR和3~H-亮氨酸除分布在细胞质外,在核内也有一定数量。表明在合适的冻存条件下,长期深低温冻存的淋巴细胞,能保持较高的DNA、RNA和蛋白质合成代谢水平。     

生物血管异种移植的初步研究

目的为了寻求一种新的小口径血管代用品,建立异种移植的动物实验模型,以观察异种移植物的安全性、可靠性、通畅性及组织学改变。方法共采用17只杂种雌性犬,实验组10只,植入经环氧化物处理的猪血管移植物;对照组7只,植入人造血管。手术方法为右侧股动静脉瘘。术后通过超声和血管造影方法来观察移植血管的通畅性,并在术后3月将移植物取出,进行病理学检查,观察移植前后移植物的组织学改变。结果术后第一周、二周行Doppler超声检查结果,两组动静脉瘘均通畅,2周内血管通畅率为100%。术后3个月动脉造影检查后,生物血管组(PG)通畅5只,通畅率62.5%,e-PTFE组通畅4只,通畅率66.7%。两组数据统计学处理,差异无显著性(P>0.05)。术后3月对移植物取材,进行光镜及扫描电镜病理学检查,通畅的生物血管吻合口无狭窄,吻合部位有新的内膜覆盖,周围组织无钙化,有新生的内皮细胞覆盖。结论经环氧化物处理的猪的血管移植物(PG)生物血管作为异种移植物,生物相容性好,具有一定的可行性。     

腺病毒介导的nm23-H1对人结直肠癌裸鼠移植作用的实验研究

目的 探讨Ad-GFP-nm23-Hl对人高转移结直肠癌移植瘤的抑制作用,为临床肿瘤基因治疗提供一定的理论依据.方法 将15只人结直肠癌移植瘤裸鼠随机分为高剂量组(1010 PFU/ml Ad-GFP-nm23-Hl)、低剂量组(109 PFU/ml Ad-GFP-nm23-Hl)、阴性对照组(PBS).均采用瘤体注射给药,连续给药4 d,每2 d测一次肿瘤体积.观察10 d后取瘤块称重和组织病理学检查.结果 Ad-GFP-nm23-Hl高剂量组移植瘤体积较其他各组明显缩小(P<0.05),瘤体积抑制率和瘤重抑制率分别为76%和66%. 结论 Ad-GFP-nm23-Hl对人高转移结直肠癌移植瘤有抑制作用,并存在剂量依赖性.     

卵巢冷冻保存和移植的研究进展

卵巢冷冻保存和移植是建立卵子库的一项有效技术,近年来取得了很大进展。本文介绍了卵巢组织冷冻保存和移植的方法及近年来的研究情况。     

异种移植的病毒安全性研究进展

猪-人异种移植有望解决人源器官短缺的严重问题。然而,以前病毒（provirus）形式整合入猪基因组中的猪内源性反转录病毒（porcine endogenous retrovirus,PERV）难以去除,PERV有可能通过异种移植传播给人类,甚至产生新的病毒性疾病。本文回顾了PERV与异种移植病毒安全性及我国特有小型猪中PERV的相关研究。     

人胎胸腺基质细胞的免疫组织化学观察

用免疫组织化学法观察了六种单克隆抗体在１４例２１～３８周胎儿胸腺基质细胞中的反应。结果表明,三种ＭＨＣ－Ⅱ类抗原的表达有差异。ＨＬＡ－ＤＲ＋和ＨＬＡ－ＤＱ＋细胞多,主要分布于髓质,皮质中较少。ＨＬＡ－ＤＰ＋细胞少,几乎只见于髓质。抗表皮角蛋白抗体阳性的上皮细胞见于部分髓质与少数皮质上皮细胞,被膜及小叶间隔下上皮细胞和胸腺小体。Ｓ－１００＋的交错突细胞主要分布于髓质,皮质中较少。ＭＯ＋２的巨噬细胞见于整个胸腺实质,皮质深层最多。     

人股骨抽提物的骨诱导活性分析

骨诱导因子在骨的发生及损伤修复过程中起重要作用,因而它们在治疗骨缺损、骨质疏松等病症方面有广阔的应用前景。本实验测定了人股骨内活性因子的骨诱导活性。结果表明,人胎骨抽提物能在小鼠体内诱导未分化的间充质细胞向骨细胞转化,对培养人骨细胞的ＤＮＡ合成与碱性磷酸酶活性均有刺激作用。抽提物经初步纯化后,活性有所增强。     

正常人卵巢绒毛膜促性腺激素(hCG)受体的研究

23例正常卵巢制备之细胞膜,可与绒毛膜促性腺激素(hCG)发生特异性结合,最大结合率为13.2±2.24％,Scatchard作图分析,得一直线。23例正常卵巢之受体量为O.66±0.142×10~(-10)M/μg膜蛋白,Kd值为10.16±5.5×10~(-9)M。     

人胎脾细胞IL-2和IL-6的产生及其与NK细胞功能发育的关系

人类胚胎发育时期,脾细胞IL-2和IL-6的产生及其与NK细胞功能发育关系的研究结果表明,胚胎20周龄前IL-2的活性和NK活性细胞基本缺乏,但可分泌低水平的IL-6;随个体发育,IL-2、IL-6的产生和NK细胞活性均逐渐增强,三者间呈直线正相关关系(r>0.86);出生前,IL-6的产生和NK细胞活性显著低于成人组(p<0.01),而IL-2的产生巳达成人水平(p>0.05)。最后,对在胚胎发育过程中IL-2和IL-6的产生,及其与NK细胞功能发育间的关系进行了讨论。     

人巨细胞病毒先天性中枢神经系统感染小鼠模型的建立

将人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）接种至８￣１２周龄Ｂａｌｂ／ｃ雌雄小鼠腹腔后,交配。等雌鼠临产时剖腹取出胎鼠脑双侧大脑皮层,进行病毒分析、病理学检测及用地高辛标记的ＨＣＭＶ寡核苷酸探针对大脑皮层细胞压印片进行原位分子杂交检测。病理学研究结果证实,鼠脑为侵袭性脑膜脑炎性病理改变,并在神经细胞内发现病毒特性性的大的核内嗜碱性包涵体;原位杂交结果显示,病毒核酸存在于受染神经细胞及神经胶质细胞核内及胞浆内;在鼠     

人胎垂体生长激素样免疫反应细胞的发育

为探讨人胎垂体生长激素细胞发育规律,本文用免疫细胞化学结合图像分析,研究１９例不同胎龄人胎垂体生长激素细胞的形态、大小、光密度变化。结果如下：①胎１６周已存在生长激素免疫反应细胞,随胎龄增加,细胞多排列成团或索,并由周边部向远侧部的中央延伸。②随胎龄增加,生长激素样免疫反应细胞数量逐渐增多,细胞逐渐增大,胞浆逐渐增多,核浆比值逐渐变小。至胎龄３２周,生长激素样免疫反应细胞以大型细胞为主,多为圆形或卵圆形。③生长激素样免疫反应细胞的光密度随胎龄增加而逐渐增高,２６周达高峰,以后呈下降趋势,但仍高于２４周的水平,结果提示：垂体生长激素细胞的发育是从幼稚到成熟的过程,生长激素细胞的功能在胎２４－２６周最旺盛。     

周期型马来丝虫感染期幼虫在人卵巢癌细胞系中的体外培养

周期型马来丝虫感染期幼虫(L_3)在三种含人卵巢粘液性囊腺癌细胞系(OMC_(685))的RPMI1640培养系统中均能蜕皮发育为L_4,幼虫最长存活66天,蜕皮率和完成蜕皮率可分别达57.1％和89.3％。在不含细胞系的培养液中,幼虫最长存活14天,基本上不蜕皮。本实验结果提示OMC_(685)细胞系可能产生某些有利于周期型马来丝虫L_3体外生存和发育的物质。     

短盖巨脂鲤卵巢发育组织学研究

通过对短盖巨脂鲤各个生长时期卵巢组织学研究以及成熟卵超微结构观察,获得短盖巨脂鲤生长发育过程中卵巢发育规律;同时对卵母细胞核仁排出物与核质关系及在卵黄形成中的作用等问题作了初步探讨;并根据卵巢的卵母细胞组成确定了其产卵类型。     

人胎肝中肝细胞生长因子生物活性的研究

人胎肝细胞裂解液经膜超滤,在分子量10～30kD组分中可检测出人肝细胞生长因子(hHGF)活性。hHGF为一热稳定的蛋白质或多肽类物质。它可特异地刺激肝来源细胞~3H-TdR掺入的增加,并且存在量效依赖关系,而对非肝来源细胞的DNA合成无刺激作用。hHGF的生物活性及理化性质与某些已知因子,如胰岛素、胰高血糖素、血小板来源的生长因子、表皮生长因子及增殖刺激因子等有所不同。     

人胎肝基质细胞培养上清液中造血生长因子的分析

采用人胎肝造血基质细胞的体外液体培养技术,结合造血干细胞和祖细胞的体外测试方法,研究了造血基质细胞所释放的造血生长因子与造血干细胞和祖细胞之间的相互作用。结果表明,在适宜的条件下,人胎肝造血基质细胞可在体外传代培养达100d之久。培养过程中,对不同时间收集的培养上清液进行测试的结果表明,这些贴壁细胞可以不断地释放多种造血活性物质。在100d培养过程中,上清液中始终都可以检出CFU-S增殖刺激物活性。培养第24天的上清液中还可检出BPF和GM-CSF活性。这些造血活性物质对CFU-S的生理状态和祖细胞的增殖与分化有着深刻的影响。但是在培养上清液中未检出IL-3样活性物质。