灵芝深层发酵优良菌株的筛选

灵芝种类多,种间与品种间的不同均可能引起有效成分在产量表达上的差异,为了能筛选适宜深层发酵法生产的灵芝菌株,以8个灵芝菌株为研究对象,比较不同菌株在固体培养基上的菌丝体及液体发酵的菌球萌发菌丝生长速度、液体发酵产物、子实体多糖等指标。结果表明:8个菌株菌丝体生长速度有一定差异,以灵芝G9、红芝早萌发且生长速度快,甜芝、紫芝、灵芝G8、血芝其次,灵芝5760、黑芝最慢。8个菌株深层发酵产物由于生物学特性不同而有差别,同时菌株菌丝体生物量与次生代谢产物多糖之间无必然的联系,甜芝菌丝体生物量最大但自溶速度最快,灵芝5760菌球细小,速度最慢,血芝次生代谢产物多糖最高。菌丝体多糖与子实体多糖比较,各个菌株的菌丝体多糖含量均高于子实体多糖含量。提取多糖工艺以超声波辅助破壁处理后,再以热水浸提法提取多糖的得率明显提高,紫芝、黑芝提高了2倍以上。     

苦荞杂交后代优良株系筛选研究

对来源不同的9个苦荞品种的开花日数、株高、一级分枝数等9个农艺性状进行了Tukey的多重比较和主成分分析,筛选出性状间有显著差异的6个品种,进行了不完全双列杂交。根据对不完全双列杂交亲本间差异的分析结果,从中筛选出株高、一级分枝数等6个性状有显著遗传性差异的2个品种,测定其分离后代(F2和F3)各农艺性状的遗传模式和遗传相关。在北陸4号和石荞的F4中发现了12个优良单株(早熟、矮秆、高产),并根据苦荞各农艺性状的遗传特性,讨论了筛选优良株系的选拔方法。结果表明,利用杂交育种法筛选优良株系时,首先利用SSD法繁殖至F4,再利用系统育种法来选拔最为有效。     

桑黄菌株活力评价及优良菌株筛选

通过对菌株生长活力、菌株抗氧化能力等多种生理生化指标的测定分析,对7个“桑黄”菌株进行了菌株活力评价,筛选出1株优良菌株SH1,该菌株的菌丝生长活力、发酵生物量、抗氧化能力均优于其他6个菌株。并且通过相关性分析,建立了一种有效评价桑黄生物量高产菌株的快速筛选方法。     

应用变色法筛选斑玉蕈优良杂交子

【目的】将变色检测方法应用于斑玉蕈优良杂交菌株的选育,缩短育种过程。【方法】采用分光光度计检测变色培养基的颜色变化,计算脱色率(D值)。【结果】变色检测培养基的颜色变化和脱色率(D值)是一致的,即培养基显示黄色时D值是正值,培养基显示蓝色时D值是负值。D值与斑玉蕈主要农艺性状具有紧密联系,D值是正值的菌株平均吃料速度比D值是负值的菌株快,单瓶产量和正常子实体数与D值呈正相关性,畸形菇数与D值呈负相关性。【结论】应用变色检测法可以快速简单地筛选出优良菌株,缩短斑玉蕈育种进程。     

金针菇自交后代生物学特性的研究

选用6个生产用金针菇菌种(白色品种菌株F10、F4、FM、F21,黄色品种菌株F29、F3)分别进行自交,对其S1代自交群体的菌丝生长速度、产量、原基发生早晚、农艺性状进行综合分析。结果表明,自交导致后代群体的平均生长速度、平均产量降低。黄色自交子代菌株平均生长速度快于白色自交子代菌株。菌丝生长速度与产量不具有相关性,产量与现原基早晚有较强相关性,相同自交系中黄色品种现原基早于白色品种,F3菌株黄色后代现原基早于白色后代。在各菌株自交子代群体中,FM菌株子代具有高产优势,F3菌株子代有短菌龄优势,F10菌株子代有较好的商品表型特征,可根据育种目标选择自交子代群体中的优势菌株加以利用。     

黑木耳优良菌株选育研究达国内领先水平

“黑木耳优良菌株选育研究”是黑龙江省科学院应用微生物所承担的院基金项目。该项目于1993年10月30日通过了由省科学院主持的技术鉴定。 该课题组从野生菌种驯化和原生质体再生株两方面选育出黑木耳“8808”和“931”菌株。其中“8808”菌株经种性研究,不同地区栽培比较试验,在省内及全国十几个省市18万支母种的推广证明:该菌株的遗传特性不同于老菌株,它是一株耐低温、抗污染、优质、丰产性能     

8个平菇栽培菌株的亲缘关系及培养特性研究

研究了8个平菇栽培菌株的亲缘关系及培养特性。结果表明:8个栽培菌株分别属于3个品种,根据子实体性状可划分为深色和浅色2个品系。其中菌株P8、P5和P1菌丝生长速度快,生长势强,产量高。     

水稻稻瘟病拮抗菌株的筛选

从水稻病健叶、茎和根组织以及稻田土分离得到的 90个菌株中 ,筛选出对稻瘟病菌分生孢子萌发和菌丝生长均有较强抑制能力的 2个菌株 ,并对这 2个菌株进行室外盆栽试验。结果表明 ,它们均可显著地降低稻瘟病的发生。经初步鉴定 ,这 2个拮抗菌株分别为Enterobactersp.(X2 3 )和Streptomycessp .(Y42 )。     

拮抗细菌B9菌株抗菌物质的初步研究

B9菌株是从番茄灰霉病发生严重植株的健康叶片上分离到的拮抗细菌。采用酸沉淀的方法从B9菌株的发酵液中得到抗菌物质的粗提物。该物质在中性和碱性条件下都能溶解于水和有机溶剂,在270~280 nm处有吸收峰,其成分可能是蛋白质。平板抑菌试验表明抗菌物质抑菌谱广,对供试的6种病原菌都有不同程度的抑菌作用。稳定性试验结果表明抗菌物质对温度比较稳定,经80~100℃处理10 min或者121℃(1.4 Pa/cm2)高温抑菌活性才显著降低;对紫外光稳定性差,随着紫外照射时间的延长抑菌活性逐渐减弱。     

吉林省金顶侧耳种质资源评价及优良菌株筛选

利用体细胞不亲和性分析、酯酶同工酶分析、SRAP分子标记分析及表型性状分析对吉林省栽培及野生金顶侧耳Pleurotus citrinopileatus进行种质资源评价及优良菌株筛选。结果表明：10株供试菌株两两对峙培养（栽培菌株X2、X3、X13、X18、X20,野生菌株Y13,Y21,Y22,Y24,Y26）均可产生体细胞不亲和现象;酯酶同工酶共有12条迁移率不同的酶带,其中有4条酶带为供试菌株基础酶带,Rf值分布在0.10～0.69;利用15对SRAP引物对供试菌株共扩增出102条带,有70条多态性条带,平均多态性条带比例为68.6%。酯酶同工酶聚类分析结果显示,栽培菌株X20与野生菌株Y24聚为一类;SRAP分子标记聚类分析结果显示,栽培菌株X13与野生菌株Y13聚为一类;两项研究结果均表明,在同一类群中既有栽培菌株又有野生菌株。通过对表型性状测定,野生菌株的菌柄直径、菌盖厚度、菌盖颜色、菌柄长度等表型性状变异系数大于栽培菌株;菌盖厚度与菌柄直径、菌盖直径呈正相关性。在充分了解菌株间遗传关系的基础上,结合表型性状筛选出1株优良菌株X18,表现为菌盖较大、菌肉较厚、颜色鲜黄;筛选出1株优良野生种质材料Y13,在表型性状中表现为菌盖较厚、菌柄较粗,可为新品种改良提供基础材料。从细胞水平（体细胞不亲和性）、蛋白水平（酯酶同工酶）、分子水平（SRAP分子标记）、个体水平（表型性状）共4种方法对种质资源进行评价,不同分析方法的结果间差异较大,因此,有必要使用多种方法进行种质资源的综合评价。     

木耳栽培种质资源的数量分类研究

在木耳栽培种质资源农艺性状调查的基础上,应用数量分类学中的Q型聚类分析法对20个木耳菌株进行分类研究,并对14个农艺性状进行R型聚类分析和主成分分析。结果表明：Q型聚类将20个木耳菌株在欧氏距离6.29处依据子实体朵型性状分为簇生型菌株和菊花型菌株两大类群,菊花型类群在欧式距离4.79处依据生育期性状的原基发生类型划分为分散型和集中型两个亚群;R型聚类表明菌丝体性状（1个）、生育期性状（2个）、子实体性状（8个）等11个农艺性状间相关性较强;主成分分析中,发现子实体背面皱褶、耳片数、原基发生时间、子实体朵型、干耳背面颜色等5个性状是14个农艺性状的第1主成分,贡献率高达62.26%,把第1主成分命名为朵型-生育期构成因子,作为种质评价的指标。     

中国木耳栽培种质生物学特性及遗传多样性分析

对中国32个木耳Auricularia auricula-judae主要栽培菌株的生物学特性进行了系统分析,在此基础上分别对27个生物学特性指标赋值,运用UPGMA聚类法及PCO主坐标分析法对木耳种质资源的遗传多样性进行研究。研究结果显示中国木耳栽培种质的遗传多样性丰富,32个供试菌株在生物学特性指标上均存在着一定差异;供试菌株聚为3个主要类群,分别包含大部分东北地区菌株,中部及东南部地区菌株,华北华南及部分中部地区菌株;表明生物学特性与地域来源呈一定相关性,同一地域来源的栽培菌株相似度更高,部分菌株间存在着同物异名现象。     

SSR在黑木耳和毛木耳转录组中的分布和序列特征

以黑木耳和毛木耳转录组测序获得的转录本序列为基础,采用软件SSR Locator对两个物种中SSR的数量、分布和结构特征等方面进行分析,发现毛木耳中SSR的丰度和密度较黑木耳小。在两者的SSR中,三碱基和六碱基重复的出现最多。对含量最多的三碱基重复序列的基序进行分析表明富含GC的SSR在这两个种的转录组中占优势地位。     

木耳菌丝老化过程的微形态学研究

分别从显微和超微结构观察木耳菌种老化过程中菌丝细胞的形态变化。结果显示：接种后30d时,光镜下观察到菌丝结构均匀紧凑,细胞壁光滑;电镜下观察到细胞结构完整,内含物丰富,各种细胞器形态规整,没有老化现象。接种后60d时,光镜下菌丝部分肿胀,色泽加深;电镜下细胞壁疏松,线粒体和液泡肿大,细胞核不规则肿胀,核仁消失,脂肪滴和囊泡增多,并有少量电子致密度高的嗜锇性黑色颗粒状物质出现,表明菌丝开始老化。90d时,光镜下部分菌丝严重肿胀,且色泽更深;电镜下线粒体和液泡肿胀明显,部分细胞核破裂,脂肪滴、囊泡和电子致密度高的嗜锇性黑色颗粒状物质显著增多,细胞壁更加疏松。120d时,光镜下许多菌丝开始断裂,色泽进一步加深;电镜下细胞壁塌陷,膜系统也随之解体,线粒体等细胞器部分溶解消失。150d时,光镜下大部分菌丝完全断裂,并失去菌丝形态;电镜下细胞膜及其内含物已基本消失,只剩部分严重塌陷的细胞壁残骸。由此表明,木耳菌丝的老化是一个由个别向整体逐渐过渡的不可逆的过程。     

Production of an anti-complement exo-polymer produced by Auricularia auricula-judae in submerged culture

Exo-polymer (EP) was produced at 1.2 g l(-1) in submerged culture of Auricular auricula-judae. Crude EP (AJ-0) has 70% anti-complementary activity (inhibition of total complementary hemolysis 50%; ITCH50). The activating pathway of the complement system occurred through both the classical and alternative pathways, though the major pathway was the classical one. Fractionation of AJ-0 using Sepharose CL-6B gel chromatography gave three major fractions (AJ-Fr-I, II and III) of which the first was the most active. The mycelial growth and EP production of A. auricula-judae were optimal at pH 6, 25 degrees C and pH 5, 25 degrees C, respectively.     

东北地区木耳"白毛菌病"的病原菌

"白毛菌病"是近年来东北地区木耳栽培中一种常见病害.其病原菌在盛夏伏天侵染木耳子实体,在木耳耳片腹面生长一层白色网状霉层,对木耳生长及商品形态造成严重危害.从黑龙江省尚志地区染病耳片上分离得到两株病原菌,经对它们进行形态学特征观察、rDNA ITS序列分析和致病性测定,证明这两株病菌为尖孢镰孢和厚垣镰孢,二者均对栽培木...     

库尔勒香梨黑斑病菌拮抗菌筛选及其抑菌机理

【背景】由互隔交链孢(Alternaria alternata)引起的黑斑病是库尔勒香梨采后贮期的主要病害之一,严重影响果实品质,造成巨大的经济损失。【目的】筛选对梨黑斑病菌具有高拮抗活性的菌株并探究其可能的抑菌机制,为香梨采后保鲜提供理论依据。【方法】从库尔勒香梨园健康植株根际采集土壤样品,采用稀释涂布法分离细菌并进行纯化,通过平板对峙法和琼脂打孔法筛选对梨黑斑病菌具有显著拮抗作用的菌株,结合形态学观察和16S rRNA基因序列分析进行初步鉴定;通过平板对峙法对拮抗菌抑菌谱进行测定;采用特异性平板定性检测拮抗菌产酶活性,采用3,5-二硝基水杨酸比色法法及福林-酚法定量酶活;通过孢子萌发抑制试验和扫描电镜观察,测定拮抗菌对梨黑斑病菌的拮抗作用。【结果】筛选得到2株对梨黑斑病菌有较强抑制活性的菌株JE53和JE56,经分析鉴定为多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)及枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),其发酵上清液对梨黑斑病菌的抑菌圈直径分别为22.49 mm和22.40 mm。抑菌谱测定结果表明,菌株JE53和JE56对马铃薯黑痣病菌等9种植物病原菌均有不同程度的抑制作用。胞外酶测定结果显示这2株菌可产生4种胞外酶;其发酵上清液能够显著抑制病原菌孢子萌发,抑制率分别为70.30%和88.87%;扫描电镜发现这2株菌可导致病原菌菌丝表面粗糙、扭曲变形。【结论】JE53和JE56对梨黑斑病菌有较好的抑制效果,具有进一步开发和应用的潜力。     

黑龙江省东部山区森林植物物种多样性的研究

通过对黑龙江省东部山区原始阔叶红松林和次生林物种多样性的比较研究,结合定量化的群落动态和环境梯度,分析论证了演替阶段、环境梯度、生长状况及干扰与物种多样性的相关关系。结论如下：次生林物种多样性高于原始阔叶红松林,但均匀度较原始林小;物种多样性较高的群落其森林生产力中等,森林生产力较大的群落其物种多样性小;中度干扰的群落,其物种多样性较高,而重度和轻度干扰的群落,其多样性低;物种多样性指数从演替初期到中期不断增加,到演替后期逐渐下降。     

Screening of antagonistic bacterial strains against Meloidogyne incognita using protease activity

Twenty-six bacterial strains that had demonstrated antagonism to some fungal and bacterial pathogens were evaluated for their ability to inhibit Meloidogyne incognita Kofoid & White. The inhibition rates of egg-hatching and second-stage juveniles (J2) mortality of M. incognita by these strains ranged from ?16.5 to 87.4% and from 1.3 to 77.8%, respectively. The 12 strains causing J2 mortality over 40% were chosen for greenhouse experiments in which their biocontrol efficacy reached 33.3–65.6%. On the other hand, among the 26 strains, 20 demonstrated in vitro protease activity and 14 revealed chitinase activity. Significantly, strains Bacillus sp. AR156 and GJ24 in greenhouse tests showed the strongest protease activities. The analyses of the relationships of the efficacy of the 12 strains with their protease and chitinase activities, respectively, indicated that biocontrol efficacy was highly correlated with protease activity (r=0.92, P<0.001) but barely correlated with chitinase activity. The strong positive correlation between protease activity and efficacy suggests that in vitro protease activity could be used as a parameter for selecting biological control agents (BCAs) against root-knot nematodes. Consistently, the biocontrol efficacy of AR156, GJ24, abamectin reached 74.3, 73.4, and 40.9% in the field in Huai-an, Jiangsu; and 71, 69.9, and 37% in Zao-zhuang, Shandong, respectively. The fact that the strains with high protease activities also had significantly higher biocontrol efficacy than abamectin in the field implies that in vitro protease activity may be adopted as a reliable new parameter for speeding up the process of screening the biological control agents (BCAs).