miR-451a促进胰腺癌细胞对吉西他滨的敏感性

目的:探究miR-451a在胰腺癌吉西他滨耐药中的功能。方法:通过低浓度梯度递增法建立胰腺癌吉西他滨耐药细胞株,microRNA(miRNA)测序筛选耐药相关miRNA;细胞存活曲线、克隆形成实验及流式凋亡实验分析miR-451a对胰腺癌细胞耐药的影响;裸鼠成瘤实验检测在动物体内模型中miR-451a对胰腺癌吉西他滨耐药的调控作用;调取TCGA数据分析miR-451a表达水平与胰腺癌病人预后的相关性。结果:胰腺癌吉西他滨耐药细胞株中miR-451a表达水平明显下调;miR-451a过表达增加胰腺癌细胞对吉西他滨的敏感性,增强了吉西他滨抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用;miR-451a诱导了裸鼠皮下肿瘤对吉西他滨敏感;miR-451a低表达与胰腺癌患者不良预后相关。结论:miR-451a增强了胰腺癌细胞对吉西他滨的敏感性。     

三阴性乳腺癌相关miRNA筛选及其靶基因的生物信息学分析

应用生物信息学方法筛选并分析三阴性乳腺癌（triple-negative breast cancer,TNBC）相关miRNA及其靶基因,为TNBC的研究提供潜在的分子靶点。采用GEO2R分析TNBC相关miRNA芯片数据集,筛选差异表达倍数最大的5个上调和5个下调miRNA。miRWalk、TargetScan和miRDB预测靶基因并进行Veen分析取交集。利用DAVID对靶基因进行GO富集分析和KEGG通路分析。利用STRING数据库构建蛋白互作网络,并结合Cytoscape构建miRNA-靶基因调控网络,从而筛选出关键的miRNA及其关键靶基因。利用GEPIA2数据库对靶基因进行生存分析。GEO2R筛选出486个差异miRNA,上调和下调的miRNA分别有298个和188个。对差异倍数最大的5个上调和5个下调miRNA的靶基因进行富集分析显示,靶基因主要参与ErbB信号通路、癌症中转录调控紊乱和cGMP-PKG信号通路等。miRNA-靶基因调控网络显示,表达上调的关键miRNA为miR-611,其关键靶基因为CDC27、UBE2D2、UBR1、SPSB1、HERC2和RLIM;表达下调的关键miRNA为miR-1205,其关键靶基因为WSB1、FBXL8、UBE2W、PTPN11、ARF6、DNAJC6和COPS2。生存分析表明,UBR1（P=0.007 2）和PTPN11（P=0.029）表达上调可显著降低TNBC患者的整体生存率。经筛选获得的关键miRNA及其关键靶基因可作为潜在分子标记物用于TNBC的早期诊断、治疗靶点选择和预后判断,并为后续的研究提供参考依据。     

miRNA-200 家族在卵巢癌中作用的研究进展

MicroRNA(miRNA)是一类非编码小分子RNA,参与基因转录后水平调控,与肿瘤的形成、侵袭及转移、治疗及预后过程密切相关。研究发现,miRNA-200家族包括miR-141、miR-200a、miR-200b、miR-200c和miR-429在卵巢癌中的表达改变明显,且参与卵巢癌的发生、侵袭转移、卵巢癌细胞对紫杉醇的敏感性及复发过程,可能是用于卵巢癌的早期诊断、治疗、预后预测的指标。本文主要对miRNA-200家族在卵巢癌中的研究进展进行综述。     

胰腺癌细胞株和胰腺癌组织中miRNAs的表达检测

目的:探明miRNAs在胰腺癌细胞株及组织中的表达情况,证实miRNAs的差异表达与胰腺癌的发生有相关性.方法:对胰腺癌细胞株和胰腺癌组织进行总RNA的提取,通过Real-time PCR方法检测17种miRNAs(miR-16、miR-20a、miR-21、miR-26a、miR-142-3p、miR-155、miR-210、miR-181a、miR-181b、miR-196a、miR-939、miR-223、miR-1202、miR-1207-5p、miR-1825、miR-1228、miR-1915)在胰腺癌细胞株及胰腺癌组织中的表达,分析miRNAs的表达与胰腺癌患者临床表现之间有无相关性.结果:胰腺癌细胞株和胰腺癌组织中miRNAs的表达明显较正常胰腺组织高.癌组织及癌旁组织中miRNAs表达量在不同性别的胰腺癌患者中差异不大(P＞0.05),并且miRNAs的表达与患者年龄及其血清CA19-9关系不大.结论:经筛选的miRNAs可以作为胰腺癌的诊断标志.胰腺癌组织中的miRNAs表达并不是一成不变的,而是随着肿瘤的生长而不断发生变化.     

人卵巢癌OVCAR3细胞FOXM1相关差异miRNA表达谱分析鉴定

为探究人卵巢癌OVCAR3细胞FOXM1基因敲减前后miRNA表达差异,并建立FOXM1相关miRNA差异表达谱,我们应用感染复数为20的靶向FOXM1 shRNA慢病毒颗粒及阴性对照慢病毒感染人卵巢癌OVCAR3细胞96 h,此后提取并鉴定细胞总RNA,纯化分离miRNA,应用高通量miRNA芯片技术分析2组miRNA的表达差异,并对5倍以上差异表达的miRNA进行RT-PCR验证。通过实验我们共发现34个miRNA发生表达变化,其中上调超过5倍的miRNA 4个:miR-327、miR-505、miR-1297、miR-122;下调超过5倍3个:miR-21、miR-409-3p、miR-200a,其中miR-122、miR-1297、miR-21、miR-200a等4个miRNA经RT-PCR验证为真实差异表达。这表明我们成功建立人卵巢癌OVCAR3细胞FOXM1相关miRNA差异表达谱,所筛选出的差异表达miRNA可能与FOXM1具有密切调控关系。     

胃癌相关miRNA表达的表观遗传学调控机制

胃癌是人类最常见的肿瘤之一,其发病机制尚不完全清楚.微小RNA(microRNA,miRNA)是一组最近发现的长度为22个核苷酸左右的非编码RNA,具有负性调控基因表达的功能.本文对miRNA在胃癌发生中的作用及其表达调控机制进行综述.不断有文献显示,miRNA在多种肿瘤(包括胃癌)的发生过程中发挥着重要作用.作者和其他研究人员发现,miRNA的表达异常(如:miR-421和miR-21的上调或/和miR-31和miR-218的下调等)与胃癌的发生相关,提示miRNA是胃癌发生的重要因素.目前,miRNA表达的分子机制尚未完全明了.最近研究较清楚地显示,miRNA的表达受到DNA甲基化和组蛋白修饰等机制的调控.这说明,胃癌相关miRNA的表达水平受到表观遗传机制的调控。     

miR-106a在肿瘤中的研究进展

miR-106a是一种致瘤性的miRNA,在多种肿瘤中表达发生变化并与肿瘤耐药性密切相关。miR-106a通过调控多种靶基因,在细胞增殖、细胞凋亡、细胞迁移和自噬等过程中发挥重要作用。结合临床诊断和预后检测结果,miR-106a很可能成为肿瘤标记物。本文对miR-106a在不同肿瘤中的研究进展进行综述。     

miR-373与肿瘤相关作用的研究进展

miRNA是一类非编码小RNA,经转录后调节靶基因的表达,影响细胞的功能。异常表达的miRNA可引起包括癌症在内的各种疾病的发生发展。miR-373通过参与病毒感染和炎症反应、细胞的增殖和凋亡、迁移和侵袭以及作为生物标志物评估临床肿瘤特征在肿瘤中发挥作用。miR-373在许多肿瘤中表达异常:一方面,其受上游调控因子作用表达异常,影响肿瘤细胞的功能;另一方面,异常表达的miR-373通过调控下游靶基因介导信号通路影响肿瘤细胞的功能。故miR-373可作为肿瘤早期诊断、基因治疗靶点或是临床预后监测指标。该文就miR-373在肿瘤中的功能作用和调节机制的相关研究进展作一综述。     

热休克蛋白gp96 3′UTR作为ceRNA通过 miR-642a调控DOHH的表达

热休克蛋白gp96在肝脏等多种肿瘤中过量表达,与肿瘤的恶性程度和患者不良预后呈显著相关性,其在肿瘤发生发展中作用机制有待深入探讨.通过生物信息学技术预测、荧光素酶报告基因检测、免疫印迹分析、实时定量PCR、RNA干扰,研究gp96 3′UTR作为ceRNA(competing endogenous RNA)对miR-642a和脱氧羟腐氨酸羟化酶(deoxyhypusine hydroxylase,DOHH)表达的影响.研究结果显示,miR-642a特异性靶向的野生型gp96 3′UTR,而不是miR-642a结合位点突变的gp96 3′UTR,可吸附下调miR-642a并同时上调miR-642a靶基因DOHH的表达,进一步研究发现gp96 3′UTR对DOHH的调控依赖于miR-642a.实验还发现DOHH并不影响gp96的表达.Gp96通过ceRNA上调DOHH的表达,为研究gp96促进肝癌等肿瘤的发生发展提供了新思路.     

miR-335在肿瘤组织中的表达及其预测靶基因的生物信息学分析

目的:分析miR-335在多种肿瘤组织与癌旁组织中的表达,预测其靶基因并进行相关生物信息学分析,为进一步研究miR-335在肿瘤中的调控机制提供理论基础。方法:分析miR-335的保守性及在多个肿瘤组织中的表达;预测miR-335靶基因,并使用DAIVID对miR-335靶基因进行生物信息学分析。结果:miR-335序列高度保守,在肝癌、肺癌、乳腺癌、肝内胆管癌、脂肪肉瘤中表达下调(P<0.05)。预测miR-335靶基因共34个,靶基因集合功能富集于细胞迁移、凋亡、转录调控,以及蛋白质分子连接、细胞骨架组成等生物学过程和分子功能(P<0.05);主要参与了轴突向导和黏着斑信号通路、黑素瘤疾病信号通路及TGF-β信号通路(P<0.05)。结论:miR-335在多种肿瘤中表达异常,且涉及多个生物学过程和信号转导通路,与肿瘤的发生发展密切相关。