用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量

测定蛋白质分子量的方法有:氨基酸组成分析、渗透压计算、超离心沉降平衡和葡聚糖凝胶过滤等。这些方法各有独特之处。但也都有一定的局限性。 聚丙烯酰胺凝胶电泳方法具有较好的分离效果,样品不易扩散,热稳定性强,机械强度大,     

平板恒压式 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)作为分离分析生物大分子的有效手段已广泛应用于生物科学研究及医学临床工作中.国内文献所见SDS-PAGE分离蛋白质常用圆盘式管状电泳.近年来板状电泳逐渐增多,其中多为板状恒流方式,采用板状恒压者不多.本实验室采用垂直平板恒压式SDS-PAGE分析了粗制肌浆网(CSR)蛋白,获得良好结果.试剂及仪器CSR由本实验室从兔骨骼肌制备.β-半乳糖苷酶和乳酸脱氢酶;牛血清白蛋白和卵清蛋白;溶菌酶和四甲基乙烯二胺(TEMED);丙烯酰胺、三羟基氨基甲烷(Tris)和考马斯亮蓝G250分别为Mannheim、Phar-     

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳用于根瘤菌鉴定的研究

运用凝胶电泳技宋分析了40余个根瘤菌菌株的可溶性蛋白。对蛋白质电泳图谱做了紫外扫描。结果发现,供试的慢生根瘤菌与快生根瘤菌各个种有明显区别,快生根瘤菌种间也有明显差别。蛋白质电泳图谱可用于种群鉴定,用于区分各种群的主要区域在相对迁移率为0.42至1.0之间。该方法比裂解气相色谱法费时多些,但比生理生化鉴定快,且重复性好,方法简便。     

人表皮生长因子发酵液的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

一般蛋白质样品的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)通常只用一种浓度的分离胶(单层分离胶)。我们发现,将这种方法用于未经处理的重组人表皮生长因子(rhEGF)发酵液的电泳时,效果不好。我们推测可能是由于发酵液成分复杂,蛋白分子大小不均。基于这种考虑,我们就分离胶浓度对电泳效果的影响进了一些探索。     

一种利于蛋白质回收的快速SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳染色-脱色方法

在实践基础上摸索出一种快速并有利于蛋白质回收的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳染色-脱色方法：经常用的考马斯亮蓝R-250染色液短暂染色后直接用250 mmol/L KCl溶液脱色.这种方法染色-脱色的清晰程度与常规的染色-脱色方法接近,而且能使蛋白质回收率提高三倍多.     

聚丙烯酰胺凝胶电泳

电泳是分离混合物中离子成分的最有效方法之一。以聚丙烯酰胺凝胶作支持物的电泳称为聚丙烯酰胺凝胶电泳。这种电泳方法分辨率高,灵敏度大,重复性强,并且操作简便,因此广泛应用于分子生物学,生物化学,细胞学,免疫学,酶学等学科的研究,近年来在微生物分类上的应用也逐渐引起人们的注意。例如1968年     

五种啮齿类动物核型和血清蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析

本文对5种啮齿类动物(岩松鼠、花鼠、五趾跳鼠、棕背(鼠平)和岢岚绒鼠)的核型及其血清蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行了分析。通过分析结果,探讨了它们的核型及血清蛋白在其分类中的意义。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳技术

聚丙烯酰胺凝胶用于分析和制备长度小于1,000碱基对的DNA片段。 根据所研究的DNA片段的大小,可以选用从3.5％到20％的不同浓度的聚丙烯胺凝胶。     

枯草杆菌70S核糖体蛋白质的双向聚丙烯酰胺凝胶电泳

原核生物的核糖体,其大亚基由34种蛋白 质和两种RNA构成,小亚基由21种蛋白质和 一种RNA构成。在原核生物中,以大肠杆菌的 核糖体研究得最为详细。根据前人报道,抗链 霉素或依赖链霉素的大肠杆菌突变体的核糖 体,其小亚基第12号蛋白质（简称S12）上第 42位或第87位氨基酸发生了变化［[z3。本实验 室前曾报道：枯草杆菌ATCC 6633菌株的依 赖链霉素突变体全部表现为寡抱子突变体,而 抗链霉素突变体的抱子形成则正常^[1]。由大肠 杆菌的研究结果推断：本实验室分离的这些突 变体中,核糖体蛋白质可能发生了某些变化,为 此试图用双向聚丙烯酸胺凝胶电泳的方法分析 其核糖体蛋白质。     

鱼类同工酶和蛋白质的聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳法

同工酶分析一般常用淀粉凝胶电泳进行,但它常受淀粉质量的制约,在淀粉的水解和制胶过程较难标准化,因而不易掌握,其机械强度不够也不易操作。       

核糖核酸的聚丙烯酰胺凝胶电泳

自从1959年报道了聚丙烯酰胺凝胶电泳以来,这种电泳方法已有了迅速的发展和广泛的应用。它与纸电泳、琼脂电泳、淀粉胶电泳等相比,具有更多的优点。例如:机械强度好、无色透明、纯度高;在很多种溶剂中不溶解、不带电荷,故没有造成污染的问题,也没有     

两种硬蜱表皮水溶性蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳

<正> Hackman(1953 a,b);Shawky et al.(1978);Hillerton(1979)曾对一些昆虫表皮蛋白的溶解性,氨基酸组成、分子量及等电点进行分析,证实了昆虫表皮蛋白的异质性,并且表明:以不同种昆虫中提取的表皮蛋白各异。不过,迄今尚未能将这些蛋白质成功地分离,并确定究竟有多少种蛋白质存在,对某生物学功能则所知甚少。     

鹿科动物血清蛋白质的SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分析

本文对鹿科动物(黑鹿、白唇鹿、黇鹿、白黇鹿、麋鹿、东北马鹿、甘肃马鹿、中亚马鹿、日本梅花鹿、东北梅花鹿、狍)的2个亚科、4个属、7个种进行了血清蛋白质的SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳测定。结果表明,鹿的血清蛋白在该种电泳方法中,共可分辨出分子量在1.24—9.5×10~4范围内的53个蛋白区带。其中最少的是白唇鹿,黇鹿为24条,最多的是日本梅花鹿为35条。     

检测SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中家蝇蛋白的新方法——海波银染法

介绍一种检测SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳中家蝇幼虫蛋白的新方法-海波银染法。该方法对传统银染方法中的试剂与步骤加以改进,省略了乙醇固定与洗涤步骤,只需20 min即可完成全部染色过程,且仅在国产分析纯试剂及普通操作条件下,灵敏度可达毫微克级水平。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳的初步经验

聚丙烯酰胺凝胶电泳是目前认为具有较高分辨能力的分离和分析蛋白质等物质的一种方法。为了鉴定一些生物化学制剂的纯度以及观察在疾病中血清蛋白的变化情况,我们初步建立了这一方法,并用以观察了人、狗血清的电泳情况和一种酶分离的电泳图谱。     

硝酸还原酶聚丙烯酰胺凝胶电泳活性染色

高等植物的硝酸还原酶除诱导酶(NR,E.C.1.6.6.1.)外,还有以组成酶(constitative enzyme,E.C.1.6.6.2.)的形式存在,分别以还原辅酶Ⅱ(NADPH,C_1NR)及还原辅酶Ⅰ(NADH,C_2NR)为电子供体。为深入研究NR各同工酶的特性,我们以聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)对NR粗酶液(油菜子叶)进行分离,完善了以甲基紫精(MV)为电子供体的NR同工酶染色法,并在甲(月替)反应原理基础上首次建立了以NAD(P)H为电子供体的NR活性染色系统。     

改良聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA

本文介绍了应用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA的改进方法。与以往方法相比,本方法从配制凝胶储备液,无需封口的水平灌胶,适当地提高电泳的电压梯度,采用改良银染法检测,省却凝胶固定,银染法DNA的纯化方法,及溴化乙锭染色法的操作等一系列改进措施,使聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA的操作得到简化,更便捷,并减小了对人与环境的毒害作用。     

超薄板状聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳

在分析蛋白的工作中,常常遇到被分析的试样数目多但含量甚微等问题。使普通用的板状凝胶电泳,往往达不到分离的效果。因此,必须寻找一种分离效果好,又能进行大批量微量试样分析的方法。我们在进行单肌细胞蛋白成份的超微量分析时,经过反复摸索试验,成功地制成一种“超薄板状聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳”。凝胶的厚     

聚丙烯酰胺凝胶电泳的快速脱色方法

以牛血清白蛋白为材料进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),凝胶固定后,用考马斯亮蓝R-250染色后比较传统脱色液(冰乙酸-甲醇溶液)和不同盐溶液(NACL、KCL、CUCL2)的脱色效果的结果表明:PAGE和SDS-PAGE胶,0.25和0.5MOL·L-1NACL,在70℃(PAGE)、50℃(SDS-PAGE)下脱色,约2￣4H,效果好,灵敏度高,背景低。