L-型细菌蛋白表达系统

L-型细胞由于缺乏细胞壁以及具有的其它特殊生物学特性,通过连接合适的信号肽,可以用于许多外源蛋白的可溶性,功能活性形式的分泌表达,表达产物在培养基中,表达的产量依赖于不同的基因序列,载体,宿主和诱导表达条件等因素,此外,L-型细菌还能将具有功能活性的蛋白展示在胞浆膜表面。     

甲基营养型L-丝氨酸产生菌的选育

以甲基营养型假单胞菌J-12为出发菌株,经硫酸二乙酯（DES）和亚硝基胍（NTG）诱变处理,D-丝氨酸结构类似物平板和高浓度甘氨酸平板定向筛选,获得1株三-丝氨酸高产菌N-13,其发酵液中L-丝氨酸产量较出发菌株提高97．9％。在含有20g/L甘氨酸和7mL／L甲醇的培养基中,L-丝氨酸积累可达4．81g／L。     

L-精氨酸对任意型皮瓣成活的影响

目的　探讨L 精氨酸对任意型皮瓣的成活的影响。方法　以Wistar大鼠为实验对象 ,在其背部设计 7cm×2cm任意型皮瓣 ,于术后给予腹腔注射L 精氨酸 30 0mg/kg ,对照组给予 0 9%生理盐水。术后 7d ,通过图像分析技术观察皮瓣成活率 ;通过生物化学技术、组织学和免疫组织化学技术对不同时间皮瓣组织中一氧化氮含量、组织形态学变化、白细胞计数以及ICAM 1的表达进行观测。结果　外源性L 精氨酸可提高皮瓣组织一氧化氮含量 ,L 精氨酸组ICAM 1表达呈弱阳性、术后 12h皮瓣组织真皮中性粒细胞计数减少 ,L 精氨酸组皮瓣成活率明显高于对照组 (P <0 0 1)。结论　外源性L 精氨酸可提高皮瓣组织NO含量 ,ICAM 1表达下调 ,中性粒细胞浸润减少 ,提高任意皮瓣成活率。     

温度敏感型突变细菌生产L-谷氨酸

新发明的一种好气性培养用的培养基,除去富含生物素而外,还含有油酸一类的高度不饱和脂肪酸。在这样的培养基上发酵培养谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutanicum和乳酸发酵短杆菌(Brevibacterium lactofermentum)温     

L-酪氨酸合成L-多巴的研究

<正> L-酪氨酸是许多农副产品的蛋白质的组成之一,在利用某些农副产品作原料生产所需产品时,往往有大量酪氨酸从废液、废渣中被丢弃,例如:用毛发制备胱氨酸,国内已年产胱氨酸几百吨,而毛发中含2—3％的酪氨酸,大都从废液中排掉,茧丝工业的废水中和蚕蛹中都含有不少酪氨酸。L-多     

蛇床子素对L-和N-型钙通道的影响

目的:比较蛇床子素对不同钙通道亚型的作用差异方法:首先在tsA201细胞上瞬时转染Cav1.2,Cav1.3,Cav2.2e[37a],和Cav2.2e[37b]通道,然后采用全细胞膜片钳技术,记录tsA201细胞上的钙电流,并观察蛇床子素对各种钙通道亚型的影响结果:蛇床子素可以浓度依赖性抑制Cav1.2和Cav1.3电流,抑制的半有效浓度分别为162.1μmol·L^-1和56.2μmol·L^-1。此外,蛇床子素对Cav2.2通道也有一定的抑制作用,在300μmol·L^-1的浓度下,抑制38%的Cav2.2e[37a]电流和61%的Cav2.2e[37b]电流蛇床子素对钙电流的抑制是快速可逆的蛇床子素在各个测试电位水平均能抑制上述四种钙通道电流,但不改变电流的激活阈值和最大峰值电流的激活电压。结论:蛇床子素以浓度依赖的方式抑制多种钙通道亚型并表现出不同的亲和力     

星形胶质细胞存在L-型钙通道的新证据

以纯化培养的小鼠星形胶质细胞(Astrocyte,AS)为实验材料,采用激光共聚焦钙成像和荧光分光光度计技术,探讨钙激动剂Bay k8644和钙拮抗剂nimodipine对星形胶质细胞胞内钙离子浓度的影响。结果显示,Bay k8644在0.0001、0.001和0.01mmol/L浓度下均可显著增加星形胶质细胞的细胞内钙水平,而nimodipine在0.001、0.01和0.1mmol/L浓度下均可显著降低星形胶质细胞胞内钙水平,并阻止KCl引起的细胞内钙升高。上述结果表明星形胶质细胞对L-型钙通道激动剂和拮抗剂的反应与神经元的反应相似,提示星形胶质细胞胞膜上也存在L-型钙通道。     

蛇床子素对L-和N-型钙通道的影响

目的：比较蛇床子素对不同钙通道亚型的作用差异。方法：首先在tsA201细胞上瞬时转染Cavl．2,Cav1.3,Cav2．2e[37a],和Cav2．2e[37b]通道,然后采用全细胞膜片钳技术,记录tsA201细胞上的钙电流,并观察蛇床子素对各种钙通道亚型的影响。结果：蛇床子素可以浓度依赖性抑制Cav1．2和Cav1.3电流,抑制的半有效浓度分别为162．1μmol·L-1和56．2μmol·L-1．此外,蛇床子素对Cav2．2通道也有一定的抑制作用,在300μmol·L-1。的浓度下,抑制38％的Cav2．2e[37a]电流和61％的Cav2．2e[37b]电流,蛇床子素对钙电流的抑制是快速可逆的。蛇床子素在各个测试电位水平均能抑制上述四种钙通道电流,但不改变电流的激活阂值和最大峰值电流的激活电压。结论：蛇床子素以浓度依赖的方式抑制多种钙通道亚型并表现出不同的亲和力。     

日立L-8900型氨基酸分析仪用缓冲液的研究

为立足于氨基酸分析仪所用缓冲液国产化,论证其可行性和可靠性,确定缓冲液的最佳配方,采用进口和自配两套缓冲液对各氨基酸的分离度、试剂的稳定性和定量分析的准确性进行比较。使用自配缓冲液,各氨基酸的分离度较好,自配试剂能够较长时间保持稳定,定量分析准确。结论:日立L-8900型氨基酸分析仪所用自配缓冲液保存时间长、分离效果好、定量准确、经济、适用,有一定的应用价值。     

L-谷氨酸的综合利用 Ⅰ报:从 L-谷氨酸制取 L-谷氨酰胺

<正> 前言L-谷氨酰胺(L-Glutamine)是自然界中存在的一种氨基酸,它已广泛用于生化和医药,对神经障碍及癫痫病人的脑机能有改善作用。特别对消化器官溃疡的治疗有卓越的效果。由于它的价格高,应用受到极大限制。其主要原因是不能采用一般制备酰胺的方法来制取。如以L-谷氨酸-r-甲酯为原料。直接在氨溶液中进行酰胺化时。产物     

蚕丝中 L-丝氨酸、L-丙氨酸、L-酪氨酸、L-门冬氨酸、甘氨酸的分离和提纯

蚕丝是我国的传统产品,产量居世界之前列。在缫丝印染过程中有很多的下脚丝,大部分可做绢纺,有些不宜绢纺如渣头丝给茧机卷绕丝(以下简称卷绪丝)等。数量也很可观,仅杭丝联统计每年渣头约有15吨卷绪丝约1吨。如将这些下脚丝用来生产丝氨酸丙氨酸则是缫丝厂综合利用的一个新项目。蚕丝是蛋白质的一种,它是约占1/4的丝胶(球蛋白)和3/4的丝素(角蛋白)组成,关     

L-丝氨酸

<正> 丝氨酸是一种中性脂肪族含羟基的氨基酸,早在1865年Cramer从蚕丝中抽提出丝胶,用硫酸水介丝胶蛋白得到一种新的氨基酸,当初把它误认为是甘氨酸。而后发现其分子结构和丙氨酸很相似,所不同的是其分子结构中存在着一个羟基。由于这种氨基酸是从丝胶(Sericin)蛋白中分离得到的,因此命名为“丝氨酸”(Serine)。1865年后大约30年间由于丝氨酸单离较为困难,所以在文献上一直没有出现。 1902年Fiecher,Skita等把丝胶水介进行脂化分馏,从高沸点部分单离出丝氨酸,但     

L-色氨酸

<正> L-色氨酸是Hopkins和Kole于1901年发现和分离出来的氨基酸。它是一个含吲哚基的芳香族氨基酸。其化学名称为α-氨基—β-吲哚丙酸。在天然蛋白质中,一般含量甚低。含量较高的蛋、奶、肉类等动物蛋白仍不超过1%,植物蛋白中含量一般很低。特别在玉米、木茨、葫萝卜中,色氨酸含量几乎测不出来。此外,还以一些衍生物存在于自然界,如:可可的干酪苦味就是与     

L-丝氨酸

<正> 丝氨酸是一种中性脂肪族含羟基的氨基酸,早在1865年Cramer从蚕丝中抽提出丝胶,用硫酸水介丝胶蛋白得到一种新的氨基酸,当初把它误认为是甘氨酸。而后发现其分子结构和丙氨酸很相似,所不同的是其分子结构中存在着一个羟基。由于这种氨基酸是从丝胶(Sericin)蛋白中分离得到的,因此命名为“丝氨酸”(Serine)。1865年后大约30年间由于丝氨酸单离较为困难,所以在文献上一直没有出现。 1902年Fiecher,Skita等把丝胶水介进行脂化分馏,从高沸点部分单离出丝氨酸,但     

L-色氨酸

<正> L-色氨酸是Hopkins和Kole于1901年发现和分离出来的氨基酸。它是一个含吲哚基的芳香族氨基酸。其化学名称为α-氨基—β-吲哚丙酸。在天然蛋白质中,一般含量甚低。含量较高的蛋、奶、肉类等动物蛋白仍不超过1%,植物蛋白中含量一般很低。特别在玉米、木茨、葫萝卜中,色氨酸含量几乎测不出来。此外,还以一些衍生物存在于自然界,如:可可的干酪苦味就是与     

应激对大鼠心室肌细胞L-型钙离子通道的影响

目的 :研究应激对心室肌细胞L 型钙离子通道电流及激活、失活门控动力学特性的影响。方法 :制备离体心室肌细胞并用去甲肾上腺素 (NE)诱导建立应激心肌细胞模型 ,应用流式细胞术 (FCM )和Fura 2荧光分光光度法测定应激心室肌细胞的凋亡率和心肌细胞内游离钙浓度变化。利用膜片钳全细胞钳制记录法记录应激心室肌细胞L 型钙离子通道电流I V曲线图及稳态激活、失活曲线图。结果 :FCM检测发现 1 0 - 4mol/L的NE模拟应激可导致心室肌细胞凋亡率明显上升 ,对照组 :0 .36 % ,应激组 :2 .1 7% (P <0 .0 1 )。 1 0 - 4mol/L的NE干预使Ica L峰电流幅值显著性上升 ,激活曲线分析发现应激后曲线明显左移 ,半数最大激活膜电位 (V1 /2 )为 (- 1 4 .59± 0 .2 4 )mV ,较之于对照组 :(- 0 .69± 0 .36)mV ,差异显著 ,而稳态失活曲线特性未发生有意义的改变。实验组心肌细胞内游离钙浓度较对照组升高 1 6 .7%。结论 :应激可导致L 型钙离子通道电流增加 ,通道更易于激活 ,通道的这种异常活动可能导致钙超载 ,从而引起心肌细胞凋亡 ,介导应激性心肌损伤的发生     

普通小麦型恢复源L-344阳一的发现

小麦雄性不育杂种优势利用的研究是探讨小麦高 产的又一新途径。选育恢复力高农艺性状优良的恢复 系是配制强优势杂种组合的关键。丰富的恢复源又是 选育优良恢复系的基础。因此,我们把恢复源的发现 列为小麦杂种优势利用研究内容的一个方面。     

中枢神经系统L-型电压门控钙通道的功能调控与脑缺血

中枢神经系统L 型电压门控钙通道 (L typevoltage gatedcalciumchannels ,L VGCCs)由α1C(D)亚基和辅助亚基组成。α1C亚基的C 端包含多个功能结构域 ,可分别与钙调素、钙调蛋白酶、cAMP依赖性蛋白激酶、Src家族酪氨酸蛋白激酶 (Srcfamilyproteintyrosinekinases ,SrcPTKs)等相互作用 ,从而参与L VGCCs的功能调控。SrcPTKs介导的两种钙通道———L VGCCs和N 甲基 D 天冬氨酸 (N methyl D aspartate ,NMDA)受体的对话可能是缺血性脑损伤的重要机制     

添强L-赖氨酸、L-胱氨酸、L-酪氨酸对小猪增重的影响

<正> 高效又价廉地为人类提供更多高蛋白食品和工业原料,现代畜牧业都趋向以动物不同生长阶段,按需饲以全价混合饲料的饲养法。日粮采用氨基酸添加剂成为其中重要的技术措施之一。目前,许多科学技术先进的国家都制定了以氨基陵需要量为指标的营养标准。氨基酸添加剂的应用,有效地提高了畜牧饲养业的生产率和饲料利用率,节约了蛋白质饲料,降低了成本有力地促进了畜牧业的发展。