角蛋白载药纳米颗粒的制备及药物可控释放性能研究*

目的:以角蛋白作为药物载体材料,制备智能响应性药物递送系统,研究其药物装载和释放性能。方法:利用去溶剂法制备角蛋白纳米颗粒(KNP),以罗丹明B(RB)和姜黄素(Cur)为亲水性和疏水性模式药物,制备载药KNP。利用钨灯丝扫描电镜(SEM)、动态光散射(DLS)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)和药物体外释放实验等对KNP的尺寸、形貌、结构、载药和释药性能进行研究。结果:成功制备出粒径均一、约为300 nm 的KNP,能够装载亲水性和疏水性药物。载药颗粒在体外释放研究中表现出pH和氧化还原双重响应性。结论:利用去溶剂法,简便、安全地制备了分散性良好且具有pH和氧化还原双重响应性释放特性的角蛋白载药纳米颗粒,为角蛋白作为智能响应型药物递送载体的研究和应用提供了参考。     

巨噬细胞膜伪装纳米颗粒的制备和功能表征

摘要 目的：巨噬细胞具有炎症趋化能力,近年来巨噬细胞膜伪装的纳米递送载体引起研究者的广泛关注。本文提供了一种巨噬细胞膜伪装纳米颗粒的方法,即摄取-挤出法,并对该法制得的纳米颗粒进行表征,考察纳米颗粒在不同细胞中的摄取。方法：利用溶胶-凝胶法制备装载阿霉素的介孔硅（DMSN）纳米颗粒,再利用RAW 264.7巨噬细胞吞噬DMSN,最后将巨噬细胞连续挤出制得巨噬细胞膜伪装的载有阿霉素的介孔硅（DMSN@CM）纳米颗粒。动态光散射激光粒度仪（DLS）测定DMSN@CM颗粒的粒径和表面电位,透射电子显微镜（TEM）观察纳米颗粒形态,聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）验证细胞膜的成功伪装。然后通过激光共聚焦显微镜与流式细胞术共同考察了DMSN@CM在不同细胞中的摄取情况。结果：成功制备了DMSN和DMSN@CM纳米颗粒。DMSN粒径为116.7±3.2 nm,zeta表面电势为 -29.5± 1.3 mV;MSN@CM粒径为128.0±9.3 nm,zeta表面电势为 -26.7 ±1.2 mV。TEM与SDS-PAGE共同验证了DMSN@CM表面细胞膜的成功包覆。细胞摄取试验表明巨噬细胞膜的伪装可以抑制RAW 264.7细胞对DMSN@CM的摄取;促进MDA-MB-231细胞对DMSN@CM的摄取。结论：利用摄取-挤出法成功构建了DMSN@CM纳米颗粒,该法简便高效,为纳米颗粒的细胞膜伪装提供了一种新的手段。     

巨噬细胞装载纳米颗粒用于药物递送

目的:活细胞药物递送系统具有主动靶向至肿瘤部位,防止被免疫系统清除等诸多优势。本文提供了一种巨噬细胞负载纳米颗粒的递送方法,并探讨不同载药量对巨噬细胞的活性以及运动性的影响。方法:通过超声乳化法制备包载阿霉素的DOX@PLGA纳米颗粒。纳米粒度分析仪测量粒径和表面电位,透射电镜观察纳米颗粒形态。将DOX@PLGA纳米颗粒与巨噬细胞共同孵育,即得到负载DOX@PLGA纳米颗粒的巨噬细胞用以药物递送。然后通过CCK-8法、LDH法以及细胞迁移实验检测不同载药量情况下细胞活力水平、细胞损伤程度以及细胞运动性。结果:制备的DOX@PLGA纳米颗粒呈圆形或椭圆形,粒径为109.2±2.3 nm;表面电位为-45.0±2.0 m V;载药量为4.61%。当单个巨噬细胞负载0.15 pg DOX时细胞存活率为:71.5±4.4(%);细胞损伤率为:26.3±1.8(%);迁移率为:61.6±5.7(%)。结论:成功制备巨噬细胞负载DOX@PLGA纳米颗粒的递药系统,载药量适当的情况下载体细胞依然具有良好的活性和运动性。     

还原可降解聚磺酸甜菜碱型纳米水凝胶的制备及载药研究

目的:制备与表征还原可降解的聚磺酸甜菜碱型纳米水凝胶,利用该纳米递药系统包载阿霉素(DOX)并初步评价其抗肿瘤性能。方法:利用回流沉淀聚合的方法合成含二硫键的聚磺酸甜菜碱甲基丙烯酸酯(PSBMA)纳米水凝胶及不含二硫键的PSBMA纳米凝胶(nd-PSBMA);通过粒度仪和透射电镜考察两种纳米水凝胶的粒径、形态以及稳定性;通过考察谷胱甘肽(GSH)对纳米凝胶溶液相对浊度的影响以评价还原环境对两种纳米凝胶的还原可降解性;利用纳米凝胶包载阿霉素(DOX),考察载药凝胶在GSH中的释药行为,并初步评价其对A549肿瘤细胞的杀伤作用。结果:以N, N'-双丙烯酰胱胺为交联剂制备了含二硫键的PSBMA纳米凝胶,其粒径在180～200 nm;同时以N, N'-双丙烯酰胺为交联剂制备了不含二硫键的n-PSBMA纳米凝胶。两种纳米凝胶与小鼠血清共孵育7天水合粒径仍无明显变化,表明磺酸甜菜碱型纳米凝胶具有良好的抗蛋白吸附能力。此外,PSBMA纳米凝胶在GSH溶液中迅速地降解,且降解速度与GSH浓度呈正相关;而nd-PSBMA纳米凝胶在GSH溶液中几乎不降解。载DOX的PSBMA纳米凝胶可在GSH作用下快速的释放药物而载DOX的nd-PSBMA纳米凝胶在GSH作用下缓慢的释放药物;体外细胞实验显示空白纳米凝胶和载药nd-PSBMA对A549细胞无明显毒性作用,但载DOX的PSBMA纳米凝胶可高效地杀死A549肿瘤细胞,其药效与游离DOX相仿。结论:还原可降解的PSBMA纳米水凝胶有望成为智能型控释药物载体。     

海藻酸钠漂浮微囊的制备以及载药应用研究

目的:本文研究了一种海藻酸钠漂浮微囊的制备方法用以实现胃部持续给药。方法:采用微胶囊发生器制备海藻酸钠漂浮微囊,壁材为海藻酸钠,芯材为食用油的漂浮微囊,衡量不同的制备参数对微囊的理化特性影响;采用克拉霉素作为模型脂溶性药物,测量漂浮药物递送系统的控制释放性质、以及微囊载药特性和小鼠体内漂浮验证。结果:成功制备出了具有漂浮特性的海藻酸钠微囊,其中泵送速度对微囊性质的影响最大。制备出的微囊具有低细胞毒性,可以实现90%的药物包埋率。此外,微囊可以在小鼠的胃中保存超过6小时,具有良好的漂浮特性。结论:海藻酸钠漂浮微囊是一种有效的胃部药物递送系统,可明显延长药物在胃部的滞留时间。     

PF127修饰的石墨烯复合材料的制备及其载药系统研究

实验制备负载阿霉素的PF127修饰的还原态石墨烯复合材料,并对其性能进行研究和评价。其方法是首先制备由弗朗尼克F127非共价功能化修饰的还原氧化石墨烯材料,记为PF127/GN,然后将该复合物对药物阿霉素进行负载,记为PF127/GN/DOX,并与未经阿霉素负载的纳米药物载体（PF127/GN）进行对比分析。观察其药物释放行为,细胞内递送过程和细胞毒性。研究发现,PF127/GN粒子大小为80μm左右,且粒子分布较均匀,厚度约增加至9.646μm;利用阿霉素对纳米载体进行负载之后,负载效果随药物浓度的增加而不断提高,负载在氧化石墨烯表面的阿霉素的释放行为可通过改变体系的pH值进行调节。负载了阿霉素的纳米药物载体能够发挥良好的释放作用,具有相对较强的生物毒性。因此经过阿霉素负载的PF127修饰的还原态石墨烯复合材料性能良好,具有广阔的应用前景。     

肿瘤靶向纳米载药系统的设计与构建

近年来将纳米载药系统应用于肿瘤靶向递药的研究层出不穷。与正常组织相比,肿瘤组织具有较低的pH环境、大量新生血管生成、 不规则的血流灌注、局部缺氧等特异性的微环境,利用这些特点进行合理的纳米载药系统设计能够实现肿瘤部位的高效递药及深层穿透, 显著提高肿瘤治疗效果。针对现有的肿瘤靶向纳米载药系统的构建与设计方法进行综述,以阐述纳米载药系统在肿瘤靶向传递中的研究进展     

核定位信号肽修饰的抗肿瘤纳米载药体系

纳米载药体系作为一类具有可控性和靶向性的药物递送工具,可以保护生物分子药物免于细胞内快速酶促降解、免于快速血液清除,确保将生物分子药物安全递送至作用部位,从而有效改善药物的生物利用度,提高药物疗效并降低毒副作用,在生物医学领域具有广阔的应用前景,在功能材料研究和肿瘤靶向治疗研究中受到广泛关注.近年来,通过使用功能性生物...     

聚合物脂质纳米球的制备优化

目的:制备粒径均一且稳定、载药率和包埋率较高的聚合物脂质纳米球。方法:将HSPC(氢化大豆卵磷脂)与PLGA(聚乳酸-羟基乙酸共聚物)两种材料结合,利用超声复乳法制备聚合物脂质纳米球,采用响应面法优化最佳制备工艺;以HSPC(氢化大豆卵磷脂)与PLGA(聚乳酸-羟基乙酸共聚物)的比例、PVA浓度、超声功率为条件优化制备参数,以粒径为响应值。结果:优化后的最佳工艺参数为:HSPC与PLGA的比例为1:10,PVA浓度为0.66%,超声功率为51.34%(205.36 W)。结论:按最优工艺制备出的聚合物脂质纳米粒的粒径为230 nm左右,多分散系数(PDI)值为0.057,与预测值偏差较小,且粒径分布均一,可作为蛋白及多肽类药物的递送载体。     

微针用于生物大分子及纳米药物透皮给药的尝试与挑战

生物大分子及纳米药物,比如,亚单位疫苗、DNA疫苗、以及针对真皮层的治疗药物,作为近年来新兴的治疗药物,在有些治疗领域有着透皮给药的需求。由于具有靶向性高,疗效显著等特点,生物大分子及纳米药物逐渐成为新的研究热点。微针作为一种新型的给药技术,不仅具有无痛、给药方便等优点,而且运用物理手段可大幅提高大分子甚至纳米药物的透皮吸收及皮层靶向,能够避过胃肠道消化作用以及肝脏首过效用。将微针技术与生物大分子药物相结合,能够同时发挥两者的优势,实现高靶向生物药物的无痛给药。本文简述微针透皮给药技术、以及生物大分子给药的研究进展,对微针技术用于生物大分子及纳米药物透皮给药的尝试研究做了介绍和总结,对存在的技术挑战进行了分析和展望。     

共载依克立达和阿霉素的PBM-Hz-PEG纳米粒制备与性能研究

摘要 目的：研究不同比例依克立达（ELC）和阿霉素（DOX）的联合抗肿瘤效果,确定最佳联用比例。以生物可降解材料聚苹果酸苄基酯（PBM）为载体包封两种药物,得到一种酸敏感纳米胶束。方法：以L-天冬氨酸为原料通过内酯开环法制备PBM,并以酸敏感的腙键（Hz）连接PEG,得到嵌段聚合物PBM-Hz-PEG,红外光谱和核磁氢谱对其结构进行表征。动态透析法制备纳米胶束,测定纳米胶束的粒度、分散系数（PDI）、临界胶束浓度（CMC）及其载药量（DL）、包封率（EE）。动态透析法模拟胶束的体外释药性能,采用三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞系考察载药纳米胶束的体外细胞毒性。结果：①ELC能够增敏DOX,二者摩尔比为1:3时有最强肿瘤抑制作用。②经红外光谱和核磁共振氢谱表征,嵌段共聚物PBM-Hz-PEG成功合成。③空白纳米胶束的粒径为69.67±11.55 nm,PDI为0.245 ± 0.026,CMC值为3.9 μg?mL^-1;载药纳米胶束粒径略大,粒径在96.92 ~ 113.47 nm之间,ELC和DOX的载药量与投料比一致。④载药纳米胶束在pH 7.4和pH 6.0时的药物释放率曲线和体外细胞毒性试验证实载药胶束具有良好的酸敏特性。结论：ELC和DOX联用有较强的肿瘤抑制作用,PBM是二者的优良载体。该PBM-Hz-PEG纳米胶束载药率高,其特有的酸敏性能够有效降低药物对正常组织的毒副作用,具有肿瘤组织富集释放特性,有望成为一种新型智能释药平台。     

Synthesis and evaluation of a potent,well-balanced EP2/EP3 dual agonist

A highly potent and well-balanced dual agonist for the EP₂ and EP₃ receptors is described. Optimization of the lead compound was accomplished in consideration of the relative agonist activity against each EP subtype receptor and the pharmacokinetic profile. As the result, 2-[(2-{(1R,2R)-2-[(1E,4S)-5-cyclopentyl-4-hydroxy-4-methyl-1-penten-1-yl]-5-oxocyclopentyl}eth-yl)thio]-1,3-thiazole-4-carboxylic acid (10) showed excellent potency (human EC₅₀ EP₂?=?1.1?nM, EP₃?=?1.0?nM) with acceptable selectivity over the EP₁ and EP₄ subtypes (>2000-fold). Further fine-tuning of compound 10 led to identification of ONO-8055 as a clinical candidate. ONO-8055 was effective at an extremely low dose (0.01?mg/kg, po, bid) in rats, and dose-dependently improved voiding dysfunction in a monkey model of underactive bladder (UAB). ONO-8055 is expected to be a novel and highly promising drug for UAB.     

甲亢源性心房颤动与肾素-血管紧张素系统相关发病机制的研究

目的:研究高甲状腺素导致房颤与肾素-血管紧张素系统(RAS)相关的发病机制.方法:左旋甲状腺素经兔腹腔注射,制作甲亢源性房颤易患模型,同时厄贝沙坦经胃管灌胃,乳兔左心房肌细胞培养药物干预;检测房颤诱发率、左心房肌细胞凋亡情况,检测RAS相关的细胞因子,凋亡蛋白表达情况.结果:中途撤药组、厄贝沙坦组、对照组房颤诱发率低于...     

人乳头瘤病毒(HPV)31型中和单克隆抗体的制备及性质鉴定

目的:构建获得HPV31构象依赖的中和单抗。方法:采用昆虫细胞表达的HPV31 L1VLP(virus-like particle, VLP)免疫BALB/c小鼠,取免疫鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,收集杂交瘤细胞培养上清,首先采用HPV31 VLP-ELISA及HPV31假病毒中和实验筛选分泌HPV31中和单抗的杂交瘤细胞株,然后纯化单克隆抗体,分别采用假病毒中和实验及ELISA实验对纯化后单克隆抗体进行鉴定,包括抗体的亚型及其结合表位的构象特征、针对HPV31的中和IC50及针对HPV16、HPV18、HPV33、HPV45、HPV52、HPV58、HPV6、HPV11的交叉中和活性。结果:筛选获得9株HPV31构象依赖中和单抗,其中3株HPV31特异性中和单抗中有2株的IC5010 ng/mL,分别是XM31-13(0.36,Ig G1)及XM31-23(7.10,Ig G1),6株交叉中和单抗中亦有2株的IC5010ng/mL,分别是XM31-19(7.14,Ig G1)、XM31-20(6.91,Ig G1)。结论:获得的9株HPV31构象依赖的中和单抗,特别是其中4株单抗IC50值10 ng/mL的4株单抗,可用于含HPV31L1VLP多价疫苗的质控疫苗的研究。     

The density dependence of plant responses to elevated CO2

1 Stands of the annual Brassica kaber were grown at a range of six densities in both ambient and elevated CO₂ environments, and measurements of shoot growth were made from seedling emergence through to reproduction.
2 Early in stand development (21 days following emergence), CO₂ enhancement (β) for above-ground biomass was highly density-dependent, ranging from 1.41 at the lowest density (20 plants m−2) to 0.59 at the highest density (652 plants m−2).
3 As stands matured and total biomass exceeded a relatively low threshold level (<10.0 g m^{−2; c.}  20% of final yield), the density-dependence of β disappeared. Above this shoot biomass threshold, β-values remained remarkably stable (β = 0.34) across a broad range of stand biomass, independent of a stand's initial density or age.
4 Average stand-level reproductive β-values at a final harvest were very similar to biomass values (β = 0.38) and, as with biomass values at later stages, showed no apparent density-dependence.
5 These results highlight the importance of considering density and the time-course of stand development simultaneously when assessing the potential for CO₂-induced growth enhancements in plants.     

Crystal structures of MoCl2(O)(O2)(OPMePh2)2 and mixtures of MoCl2(O2)(OPPh3)2 and MoCl2(O)(O2)(OPPh3)2: allylic alcohol isomerization studies using MoCl2(O)(O2)(OPMePh2)2

Adding one equivalent of H₂O₂ to compounds of stoichiometry MoCl₂(O)₂(OPR₃)₂, OPR₃ = OPMePh₂ or OPPh₃, leads to the formation of oxo-peroxo compounds MoCl₂(O)(O₂)(OPR₃)₂. The compound MoCl₂(O)(O₂)(OPMePh₂)₂ crystallized with an unequal disorder, 63%:37%, between the oxo and peroxo ligands, as verified by single-crystal X-ray diffractometry, and can be isolated in reasonable yields. MoCl₂(O)(O₂)(OPPh₃)₂, was not isolated in pure form, co-crystallized with MoCl₂(O)₂(OPPh₃)₂ in two ratios, 18%:82% and 12%:88%, respectively, and did not contain any disorder in the arrangement of the oxo and peroxo groups. These complexes accomplish the isomerization of various allylic alcohols. A mechanism of this reaction has been constructed based on ¹⁸O isotopic studies and involves exchange between the alcohol and metal bonded O atoms.