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1.
摘要 目的:研究基于Wnt/β-catenin信号通路探讨微小RNA(miR)-613对宫颈癌SiHa细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法:体外培养宫颈癌SiHa细胞和正常宫颈上皮细胞H8,检测细胞中miR-613表达。根据转染miR-613 mimic浓度不同,将SiHa细胞分为0 μmol/L组,100 μmol/L和200 μmol/L组。MTT法检测细胞增殖情况,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力。蛋白免疫印迹法检测miR-613表达对Wnt/β-catenin信号通路蛋白β-catenin、Vimentin、E-cadherin和MMP9表达的影响。结果:宫颈癌SiHa细胞中miR-613表达水平均显著低于正常宫颈上皮细胞H8,差异有统计学意义(P<0.05)。转染miR-613 mimic后,100 μmol/L、200 μmol/L 组SiHa细胞中miR-613表达水平显著上调,并且具有浓度依赖性(P<0.05)。与0 μmol/L组相比,100 μmol/L、200 μmol/L组的SiHa细胞增殖,迁移,侵袭能力均明显下降,并且具有浓度依赖性(P<0.05)。免疫印迹结果,与0 μmol/L组相比,100 μmol/L、200 μmol/L各浓度组的SiHa细胞Wnt/β-catenin信号通路蛋白β-catenin、Vimentin和MMP9表达显著下调,E-cadherin表达显著上调,并且具有浓度依赖性(P<0.05)。结论:miR-613能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制人宫颈癌细胞系SiHa细胞的增殖,迁移和侵袭。  相似文献   

2.
摘要 目的:本研究旨在评估Sfrp1在血管紧张素II诱导的心肌肥厚中的心脏保护作用,并探讨其与自噬和Wnt信号通路相关的可能机制。方法:利用重组AAV9载体将Sfrp1导入Ang II诱导的肥厚型H9C2心肌细胞。用CCK8测定细胞活力。流式细胞仪检测细胞凋亡率。用显微照片记录肥厚细胞大小的变化。western blot检测Sfrp1、Bcl-2、Bax、CytC、Caspase-3、P62、ATG5、Beclin、LC3、β-catenin和DVL1的蛋白表达。通过qRT-PCR检测β-连环蛋白和DVL1的mRNA表达。自噬抑制剂3-MA也用于验证治疗过程中自噬的参与。结果:(1)Sfrp1成功转染H9C2细胞,其过度表达减轻了心肌肥厚。(2)经过AAV9-Sfrp1预处理可减少肥厚心肌的细胞凋亡,可逆转Ang II组自噬相关蛋白(p62、ATG5、Beclin、LC3)的表达;(3)自噬在治疗心肌肥厚过程中的作用通过可自噬抑制剂3-MA来证实。(4)激活的Wnt信号(β-连环蛋白,DVL1)也被AAV9-Sfrp1抑制。结论:Sfrp1通过Wnt信号通路促进细胞自噬,从而保护心肌细胞免受肥厚性损伤和凋亡,这为Sfrp1对心肌肥厚的心肌保护作用机制提供了一个重要的视角。  相似文献   

3.
摘要 目的:探讨脂联素(APN)对子宫内膜癌HEC-1B细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用及分子机制。方法:分别采用磺酰罗丹明 B(SRB)实验、细胞迁移(Transwell)实验和划痕实验检测子宫内膜癌细胞HEC-1B的增殖、迁移和侵袭能力。采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路相关蛋白、AdipoR1、AdipoR2、cyclinD1和cyclinE2蛋白表达水平。结果:与对照组相比,APN组HEC-1B细胞增殖、迁移及侵袭功能明显下降(P<0.05)。与对照组相比,APN组p-AMPK/AMPK比值明显提高,而p-mTOR/mTOR和p-4EBP1/4EBP1比值明显下降(P<0.05)。与对照组相比,APN组cyclinD1和cyclinE2蛋白表达水平明显下降(P<0.05)。APN组和对照组的AdipoR1、AdipoR2蛋白表达水平比较无统计学差异(P>0.05)。结论:APN能够激活AMPK信号通路并下调cyclinD1和cyclinE2蛋白表达,进而抑制子宫内膜癌细胞的增殖、迁移和侵袭功能。  相似文献   

4.
摘要 目的:分析miRNA-145-5p调控形成素2(formin-like 2,FMNL2)基因对口腔鳞癌干细胞增殖、迁移的影响。方法:按照脂质体2000说明书对细胞进行转染miRNA-145-5p inhibitor及miRNA-145-5p mimics,按照实验设计,将其分为空白组、沉默组(miRNA-145-5p inhibitor)及过表达组(miRNA-145-5p mimics)。荧光定量PCR法检测miRNA-145-5p、FMNL2表达量,MTT检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,采用Western blot法检测各组细胞中Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达量。结果:过表达组miRNA-145-5p、Bax蛋白表达量,凋亡率,细胞G0/G1比例高于沉默组,具有统计学差异(P<0.05);过表达组口腔鳞癌干细胞增殖率,FMNL2表达量、MMP-13、β-catenin、Bcl-2、APC蛋白表达量低于沉默组,具有统计学差异(P<0.05);过表达组口腔鳞癌干细胞迁移能力弱于沉默组,具有统计学差异(P<0.05)。结论:miRNA-145-5p通过靶向调控FMNL2,作用于Wnt/β-catenin信号通路调控口腔鳞癌干细胞,进而抑制细胞增殖、迁移。  相似文献   

5.
摘要 目的:探讨长链非编码RNA LINC00472在肾纤维化细胞模型中的表达及其在TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞纤维化和上皮间充质转化(EMT)中的功能作用。方法:使用重组人TGF-β1诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)纤维化和EMT,采用实时荧光定量PCR法检测细胞中纤维化相关基因和LINC00472的mRNA表达水平,通过Western blot免疫印迹法检测细胞中纤维化相关基因的蛋白表达水平,通过划痕实验评估LINC00472表达对HK-2细胞迁移能力的影响。结果:TGF-β1能成功诱导HK-2细胞发生纤维化和EMT,并剂量和时间依赖性地抑制LINC00472的表达(P<0.05)。抑制LINC00472进一步促进TGF-β1诱导的Fibronectin和Vimentin上调,以及E-cadherin下调(P<0.05);而过表达LINC00472则能逆转TGF-β1对纤维化相关基因的诱导作用(P<0.05)。此外,抑制LINC00472能进一步增强TGF-β1诱导的HK-2细胞迁移(P<0.05),而上调LINC00472则使细胞迁移受到抑制(P<0.05)。结论:LINC00472在TGF-β1诱导的肾纤维化细胞模型中呈低表达,其表达水平的降低能促进细胞纤维化和EMT过程。  相似文献   

6.
摘要 目的:探讨异荭草素(ISO)对乳腺癌(BC)细胞恶性生物学行为及核因子相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路的影响。方法:体外培养人BC细胞系MDA-MB-231并分组:MDA-MB-231组、MDA-MB-231+ISO组(100 μmol/L ISO处理)、MDA-MB-231+ISO+OE-NC组(转染OE-NC后用100 μmol/L ISO处理)、MDA-MB-231+ISO+OE-Nrf2组(转染OE-Nrf2后用100 μmol/L ISO处理)。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测MDA-MB-231细胞增殖;流式细胞术检测MDA-MB-231细胞周期和凋亡;Transwell实验检测MDA-MB-231细胞的侵袭和迁移能力;Western blot检测Nrf2/HO-1信号通路相关蛋白及凋亡蛋白表达。结果:与MDA-MB-231组相比,MDA-MB-231+ISO组、MDA-MB-231+ISO+OE-NC组细胞活力、S期和G2期细胞比例、迁移和侵袭能力、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Nrf2、HO-1、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白水平显著下降(P<0.05),细胞凋亡率、G1/G0期细胞比例以及Bax、cleaved-Caspase-3蛋白水平显著上升(P<0.05)。与MDA-MB-231+ISO组相比,MDA-MB-231+ISO+OE-Nrf2组细胞活力、S期和G2期细胞比例、迁移和侵袭能力、Bcl-2、Nrf2、HO-1、MMP-9蛋白水平显著上升(P<0.05),细胞凋亡率、G1/G0期细胞比例以及Bax、cleaved-Caspase-3蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论:ISO可能通过抑制Nrf2/HO-1信号通路,抑制MDA-MB-231细胞恶性增殖、迁移和侵袭等行为。  相似文献   

7.
摘要 目的:研究白藜芦醇(RES)通过蛋白酪氨酸激酶2/信号转导子与激活子3(JAK2/STAT3)信号通路对人骨肉瘤体外细胞株MG-63细胞凋亡、侵袭和迁移的影响。方法:体外培养MG-63细胞,以不同浓度的RES作用于MG-63细胞。Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测不同时间和不同浓度的RES对MG-63细胞凋亡的影响。划痕实验和Transwell实验检测不同时间和不同浓度的RES对MG-63细胞侵袭和迁移能力的影响。免疫印迹实验检测不同时间和不同浓度的RES对MG-63细胞磷酸化蛋白酪氨酸激酶2(p-JAK2)、磷酸化信号转导子与激活子3(p-STAT3)、凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2家族促凋亡蛋白(Bax)及基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9表达的影响。结果:RES浓度越高,时间越久,MG-63细胞凋亡率越高(P<0.05)。RES浓度越高,MG-63细胞迁移和侵袭能力越弱(P<0.05)。RES处理MG-63细胞后其p-JAK2、p-STAT3、Bcl-2以及MMP-2、MMP-9的表达明显降低,而Bax蛋白表达明显升高,且p-JAK2、p-STAT3、Bax、Bcl-2以及MMP-2、MMP-9的表达水平变化具有RES浓度依赖性(P<0.05)。结论:RES可能通过调控JAK2/STAT3信号通路促使人骨肉瘤MG-63细胞凋亡,并抑制MG-63细胞侵袭和迁移。  相似文献   

8.
摘要 目的:基于肝癌细胞线粒体功能受损和天冬氨酸蛋白水解酶3(caspase-3)信号通路探讨罗哌卡因促进肝癌细胞凋亡的作用机制。方法:选用细胞株人肝癌细胞BEL-7402进行实验研究。用不同浓度罗哌卡因处理BEL-7402细胞后,采用溴化噻唑蓝四氮唑(MTT)法检测肝癌细胞的增殖情况,光镜及4,6-二苯胺-2-苯吲哚二盐酸盐(DAPI)溶液染色观察细胞形态,台盼蓝染色法测定细胞活力,流式细胞术分析BEL-7402细胞的凋亡情况,电子显微镜下观察细胞线粒体,激光共聚焦显微镜观察caspase-3在BEL-7402细胞中的细胞核迁移情况,蛋白免疫印迹试验评价罗哌卡因对细胞质凋亡相关蛋白、线粒体凋亡相关蛋白、BEL-7402细胞和线粒体凋亡相关蛋白表达的影响。结果:罗哌卡因能够抑制肝癌细胞的生长,并呈剂量依赖性和时间依赖性。罗哌卡因可诱导BEL-7402细胞发生凋亡,显著增加BEL-7402细胞的凋亡率。罗哌卡因能够损伤肝癌细胞线粒体功能。激光共聚焦显微镜观察显示caspase-3分子迁移到细胞核。罗哌卡因与caspase-3相互作用,促进caspase-3向细胞核内迁移,刺激caspase-3和聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP-1)、天冬氨酸蛋白水解酶9(caspase-9)蛋白的表达,抑制B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)的表达,促进凋亡酶激活因子(Apaf-1)的表达,促进线粒体释放细胞色素C(Cytochrome C),激活caspase-3活性。结论:罗哌卡因具有促进肝癌细胞凋亡的作用,其作用机制可能与破坏肝癌细胞线粒体功能和激活caspase-3信号通路有关。  相似文献   

9.
摘要 目的:探讨大黄酸调节大鼠肉瘤蛋白(Ras)/胞外信号调控激酶(ERK)信号通路对肝细胞癌(HCC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:使用不同浓度(0、12.50、25、50、100、150、200 mol/L)大黄酸处理HepG2细胞,检测细胞活性,筛选最佳大黄酸浓度。将细胞分为对照组、大黄酸低、中、高浓度组、大黄酸高浓度+Ras/ERK激活剂组(大黄酸高浓度+ML-099组),分别检测各组细胞集落形成数、划痕愈合率、细胞侵袭数和Ras、p-ERK、ERK蛋白表达。结果:大黄酸以浓度和时间依赖性降低HepG2细胞活性(P<0.05),选用25、50、100 mol/L处理HepG2细胞24 h用于后续实验;与对照组比较,大黄酸低、中、高浓度组细胞集落形成数、G0/G1细胞比例、细胞划痕愈合率、细胞侵袭数和原癌基因(c-Myc)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、Ras、p-ERK/ERK蛋白表达呈浓度依赖性降低,S期和G2/M细胞比例、p53蛋白表达呈浓度依赖性增加(P<0.05);与大黄酸高浓度组比较,大黄酸高浓度+ML-099组细胞集落形成数、G0/G1细胞比例、细胞划痕愈合率、细胞侵袭数和c-Myc、CyclinD1、Ras、p-ERK/ERK蛋白表达显著增加,S期和G2/M细胞比例、p53蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:大黄酸可能通过抑制Ras/ERK信号通路抑制HCC细胞增殖、迁移和侵袭。  相似文献   

10.
摘要 目的:旨在探究miR-613在胶质瘤中的表达及对细胞增殖、侵袭和血管生成的影响。方法:根据细胞转染将实验分组为对照miRNA组(Control组)、miR-613模拟物组(mimics组)和miR-613 mimics+VEGFA组(VEGFA组)。采用逆转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测胶质瘤细胞和组织中miR-613和VEGFA mRNA的表达水平;采用荧光素酶报告基因分析miR-613与血管内皮生长因子(VEGF)的关系;采用Western blotting检测VEGFA蛋白的表达水平;通过体外实验检测转染细胞的增殖能力、侵袭能力和管状形成能力。结果:与正常组织样本相比,胶质瘤I-II期组样本的肿瘤细胞呈现异形,具有深核染色,并且肿瘤细胞密度适度较低,而胶质瘤III-IV期组样本的肿瘤细胞的核分裂活跃,具有明显的微血管增殖和明显的细胞异型性;miR-613在胶质瘤I-IV期组织样本中显著降低(P<0.05)。在U87和U251细胞系的VEGFA-WT组中,与Control组相比,mimics组的荧光素酶活性显著降低(P<0.05)。与Control组相比,U87和U251细胞系中mimics组VEGFA的mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。克隆形成实验、血管生成实验和细胞侵袭实验结果表明,与Control组相比,mimics组的克隆形成数量、细胞侵袭数、内皮细胞HUVEC的管状形成数和Ang-2蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);与mimics组相比,VEGFA组克隆形成数量、细胞侵袭数、内皮细胞HUVEC的管状形成数和Ang-2蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。结论:miR-613通过靶向VEGFA抑制了神经胶质瘤细胞的侵袭、增殖和血管生成,提示miR-613可能成为未来治疗胶质瘤的潜在靶点。  相似文献   

11.
摘要 目的:探讨余甘子提取物对肺癌细胞A549增殖、迁移和侵袭的影响及机制。方法:体外培养A549细胞,分为对照组、不同剂量(低、中、高剂量)余甘子提取物组、si-NC组、si-LINC01772组、高剂量余甘子提取物+pcDNA组和高剂量余甘子提取物+pcDNA-LINC01772组,细胞计数试剂盒(CCK-8)法和克隆形成实验检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,嵌入式细胞共培养法(Transwell)检测细胞侵袭,免疫印迹法(Western Blot)检测细胞中上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)和神经型钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白表达水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测LINC01772和miR-153表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证LINC01772和miR-153调控关系。结果:与对照组相比,不同剂量余甘子提取物组A549细胞中LINC01772表达降低,且光密度值(OD值)、克隆形成数、迁移以及侵袭细胞数减少(P<0.05),而miR-153含量与E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05),且呈剂量依赖性(P<0.05)。LINC01772在A549细胞中负调控miR-153表达。与si-NC组相比,si-LINC01772组A549细胞增殖,侵袭及迁移能力受到抑制(P<0.05)。与高剂量余甘子提取物+pcDNA组相比,高剂量余甘子提取物+pcDNA-LINC01772组A549细胞增殖,侵袭及迁移能力增强(P<0.05)。结论:余甘子提取物可能通过调控LINC01772/miR-153轴抑制肺癌细胞A549增殖、迁移和侵袭,其可能通过下调LINC01772进而上调miR-153表达发挥作用,具有开发为治疗肺癌药物的潜在价值。  相似文献   

12.
摘要 目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)MYU对胶质瘤细胞周期分布、细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法:实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测人脑正常胶质细胞HEB和胶质瘤细胞(U-251MG、A172、SHG139)中LncRNA MYU的表达情况。选取SHG139细胞,分为正常对照(NC)组、si-con组、si-LncRNA MYU组进行转染实验,行RT-qPCR检测转染效果。分别采用流式细胞术、细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell实验检测沉默LncRNA MYU对SHG139细胞周期分布和凋亡、细胞增殖、细胞迁移和侵袭的影响。蛋白免疫印迹(Western blot)法检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved caspase-3)、Cleaved caspase-9以及磷脂酰肌醇-3-羟激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路相关蛋白表达情况。结果:LncRNA MYU在胶质瘤细胞株中比人脑正常胶质细胞中的表达水平显著升高(P<0.05),因此选择表达量最高的SHG139细胞进行转染实验。沉默LncRNA MYU能够显著诱导SHG139细胞G0-G1期阻滞、抑制细胞增殖、迁移和侵袭并诱导细胞凋亡(P<0.05)。沉默LncRNA MYU可显著抑制MMP-2、MMP-9、p-PI3K和p-AKT表达并促进Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9表达(P<0.05)。结论:沉默LncRNA MYU可诱导胶质瘤细胞G0-G1期阻滞,抑制细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡,其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路有关。  相似文献   

13.
摘要 目的:研究不同浓度姜黄素(Cur)体外对胃癌SGC-7901细胞增殖、自噬性凋亡和TGF-β/Smad信号通路的影响。方法:体外培养SGC-7901细胞,以不同浓度Cur作用于SGC-7901细胞。MTT法检测不同浓度的Cur对SGC-7901细胞增殖的影响。Hoechst 33258法观察不同浓度Cur对SGC-7901细胞凋亡影响,流式细胞仪检测细胞凋亡率。划痕实验检测不同浓度Cur对SGC-7901迁移能力的影响。免疫印迹法检测细胞凋亡相关蛋白NF-κB、自噬相关蛋白Beclin1、LC3Ⅱ及TGF-β/Smad信号通路蛋白TGF-β和p-smad2/3表达。结果:Cur能够抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖和迁移,并且Cur对增殖和迁移的影响具有浓度依赖性。Cur能够促进胃癌SGC-7901细胞自噬性凋亡的发生,Cur浓度越高,SGC-7901细胞凋亡率越高(P<0.05)。Cur处理胃癌SGC-7901细胞后NF-κB、Beclin1、LC3Ⅱ表达明显升高,而TGF-β、p-smad2/3表达明显降低,且NF-κB、Beclin1、LC3Ⅱ、TGF-β和p-smad2/3的变化具有浓度依赖性。结论:Cur能够抑制胃癌SGC-7901细胞增殖和迁移并诱导自噬性凋亡的发生,其机制与促进NF-κB、Beclin1、LC3Ⅱ表达,抑制TGF-β/Smad信号通路激活有关。  相似文献   

14.
摘要 目的:探究富血小板纤维蛋白(PRF)对人牙周膜细胞(hPDLCs)成骨能力、炎症因子表达和 Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路的影响。方法:通过刮取法、组织块法获取 2019年 1月至 2020年 1月期间我院口腔科收治的 10例正畸患者拔除健康阻生牙或正畸牙的牙周组织作为研究样本。将 hPDLCs细胞分为干预 1组、干预 2组、对照组、肿瘤细胞坏死因子 -α(TNF-α)组,各组均采用含有 10% FBSDMEM培养基培养,TNF-α 组加用 10 ng/mL TNF-α 诱导液,干预 1组加用 50% PRF培养,干预 2组加用 10 ng/mL TNF-α 诱导液和 50% PRF。对比各组的细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性、炎症因子、Wnt/β-catenin信号通路关键因子的表达差异。结果:(1)相比于其他 3组,干预 1组的吸光度值(OD)明显升高,相比于 TNF-α 组,干预 2组、对照组的 OD值均明显升高(P<0.05);(2)和其他 3组相比,干预 1组的 ALP活性明显升高,相比于 TNF-α 组,干预 2组、对照组的 ALP活性均明显升高(P<0.05);(3)和其他 3组相比,干预 1组的骨形态发生蛋白 2(BMP2)mRNA、runt相关转录因子 2(Runx2)mRNA、BMP2及 Runx2蛋白表达水平均明显升高,相比于 TNF-α 组,干预 2组、对照组的 BMP2 mRNA、Runx2 mRNA、BMP2及 Runx2蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);(4)相比于干预 1组、对照组,干预 2组、TNF-α 组的 TNF-α mRNA表达水平明显升高(P<0.05);(5)和其他 3组相比,干预 1组的细胞周期蛋白 D1(CyclinD1)mRNA、β-catenin mRNA表达水平明显升高,相比于 TNF-α 组,干预 2组、对照组的 CyclinD1 mRNA、β-catenin mRNA表达水平均明显升高(P<0.05)。结论:PRF可以促进 hPDLCs细胞增殖和成骨,并减少炎症因子表达,提升 ALP活性,其可能是通过激活 Wnt/β-catenin信号通路促进 CyclinD1、β-catenin mRNA表达加快hPDLCs细胞成骨。  相似文献   

15.
摘要 目的:探讨蜂毒素通过下调F2RL1表达从而遏制胶质瘤细胞荷瘤小鼠肿瘤增殖的机制。方法:40只雄性 NOD/SCID小鼠(5周龄,15-18 g)购自北京维塔河实验动物技术公司。实验前,让小鼠适应环境一周。NOD/SCID 小鼠在右侧海马体中注射了2×105 U87-MG细胞建立异种移植模型。当肿瘤体积增长到100 mm3时,将小鼠随机分为模型组(空腹注射生理盐水)和蜂毒素组(腹腔注射5 mg/kg 蜂毒素),每组20只小鼠。在第5天(注射的第5天)、第10天、第15天每次处死5只小鼠,通过实时PCR分析小鼠肿瘤组织中F2RL1、Bcl-2、Bax和Capase-3的mRNA表达。使用卡尺测量荷瘤小鼠肿瘤体积,使用电子天平对肿瘤组织进行称重测量。通过蛋白印迹分析肿瘤组织中p-PI3K、p-AKT 和p-mTOR的蛋白表达。通过TUNEL染色检测人脑肿瘤中凋亡细胞的百分比。结果:蜂毒素组F2RL1 mRNA表达较模型组降低(P<0.05),蜂毒素抑制F2RL1 mRNA表达。第5 d、10 d和15 d测得肿瘤体积发现蜂毒素肿瘤体积较模型组减小(P<0.05)。第5 d、10 d和15 d测得肿瘤体积发现蜂毒素肿瘤重量较模型组减轻(P<0.05)。蜂毒素组p-PI3K、p-AKT 和p-mTOR的蛋白表达较模型组降低(P<0.05)。蜂毒素组Bax和Capase-3的mRNA表达较模型组降低(P<0.05),蜂毒素组Bcl-2 mRNA表达较模型组升高(P<0.05)。蜂毒素组TUNEL阳性细胞的百分比较较模型组升高(P<0.05)。结论:蜂毒素通过下调肿瘤小鼠体内F2RL1表达抑制PI3K/AKT信号通路激活,促进了体内肿瘤细胞凋亡,从而有效抑制经胶质瘤细胞的生长、增殖。  相似文献   

16.
摘要 目的:研究微小RNA(miR)-451a对胰腺癌BxPc3细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法:体外培养BxPc3细胞,将不同浓度(50、100 和 200 μmol/L)miR-451a模拟物(mimic)转染至胰腺癌细胞株BxPc3中,利用荧光定量聚合酶链式反应( PCR)法检测miR-451a的表达,MTT增殖实验检测不同浓度miR-451a对细胞增殖的影响,细胞划痕实验检测不同浓度miR-451a对细胞迁移能力的影响,Transwell实验检测不同浓度miR-451a对细胞侵袭能力的影响。Western blot法检测不同浓度 miR-451a转染后BxPc3细胞p-PI3K、p-AKT、TGF-β和p-smad2/3 蛋白的表达情况。结果:转染不同浓度miR-451a mimic后,胰腺癌BxPc3细胞内miR-451a的相对表达量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。过表达miR-451a后,BxPc3细胞的增殖能力明显减弱,细胞迁移能力明显减弱,细胞侵袭能力明显减弱,差异均有统计学意义(P<0.05)。相比于0 μmol/L 组,转染50、200 μmol/L miR-451a后BxPc3 细胞p-PI3K、p-AKT、TGF-β和p-smad2/3蛋白表达水平明显降低(P<0.05),并且p-PI3K、p-AKT、TGF-β和p-smad2/3蛋白表达水平变化具有浓度依耐性。结论:miR-451a能抑制胰腺癌BxPc3细胞株的增殖、迁移、侵袭能力。  相似文献   

17.
摘要 目的:探讨姜黄素治疗骨折的潜在应用价值及其对Wnt/β-catenin信号通路的可能影响。方法:本研究建立了胫骨骨折SD大鼠模型(模型组),然后应用不同剂量的姜黄素(50、100和200 mg/kg/d)治疗胫骨骨折大鼠4周。治疗4周后,通过苏木精和伊红(HE)染色评价骨折区域的形态,通过ELISA法测定大鼠血清中TGF-β、BMP-2、OC和CTX-I水平。应用不同浓度的姜黄素(0、5、10、20、和50 μM)或Wnt/β-catenin信号通路抑制剂ICG-001(10 μM)处理成骨细胞3 d,然后检测细胞的ALP活性、PCNA和COL-1的含量及Wnt /β-catenin信号通路相关分子的表达水平。结果:不同剂量的姜黄素处理组大鼠的小梁状骨和胶原明显增多。与模型组相比,不同剂量的姜黄素处理组大鼠血清中的TGF-β、BMP-2和OC水平均升高,而CTX-I水平降低(P<0.05);与模型组相比,不同剂量的姜黄素处理组大鼠骨折区域中的COL-1阳性率升高(P<0.05),而COL-2水平未发生显著变化(P>0.05)。在药物干预3 d后,10和20 μM的姜黄素促进了细胞增殖,而100和200 μM的姜黄素抑制了细胞增殖(P<0.05)。与0 μM组比较,10 μM和20 μM的姜黄素组成骨细胞上清液中PCNA和COL-1水平及ALP活性水平均显著升高(P<0.05)。与模型组相比,不同剂量的姜黄素处理组大鼠骨折区域中的Wnt-3a和β-catenin mRNA和蛋白表达水平升高,而GSK-3β降低(P<0.05)。与姜黄素组相比,ICG-001处理后成骨细胞活力、ALP活性和β-catenin的表达水平均显著下降(P<0.05)。结论:姜黄素通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进骨折愈合并刺激成骨细胞的增殖和分化。  相似文献   

18.
摘要 目的:探讨狐猴酪氨酸激酶2(LMTK2)基因沉默对人上皮性卵巢癌(EOC)细胞生长和转移的抑制作用及其可能的机制。方法:通过RT-qPCR和Western-blot检测了人正常卵巢上皮细胞IOSE80和人上皮性卵巢癌细胞系(SKOV3、ES2、OVCAR-3和HEY)中LMTK2的表达,使用Lipofectamine 3000转染试剂将LMTK2的短发夹RNA(shRNA)、阴性对照shRNA、LMTK2过表达重组pcDNA3.1质粒或阴性对照质粒转染到SKOV3细胞中,并分为LMTK2-shRNA组、NC-shRNA组、LMTK2-pcDNA3.1组或NC-pcDNA3.1组。另外,使用PI3K/Akt抑制剂LY294002处理SKOV3细胞1 h。通过CCK-8法测定细胞增殖,Annexin V-FITC/PI染色法测定细胞凋亡,划痕实验评价细胞迁移,Transwell实验评价细胞侵袭。对BALB/c雌性裸鼠皮下注射转染NC-shRNA或LMTK2-shRNA的SKOV3细胞建立体内移植瘤模型,并记录接种28 d内的肿瘤体积。结果:与人正常卵巢上皮细胞IOSE80相比,卵巢癌细胞系(SKOV3、ES2、OVCAR-3和HEY)中LMTK2的mRNA和蛋白表达水平均显著升高,其中SKOV3的LMTK2 mRNA和蛋白表达水平最高(P<0.05)。与NC-shRNA组相比,LMTK2-shRNA组SKOV3细胞活力、相对迁移面积、侵袭细胞数均显著降低,而细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。此外,与NC-shRNA组相比,LMTK2-shRNA组SKOV3细胞中Bax的蛋白表达水平显著升高,而Bcl-2、MMP2、MMP9、p-Akt的蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。LY294002处理逆转了上调LMTK2对SKOV3细胞生长和转移的影响(P<0.05)。在接种第21天和28天时,与NC-shRNA组相比,LMTK2-shRNA组裸鼠的肿瘤体积显著降低(P<0.05)。结论:LMTK2基因沉默通过抑制PI3K/Akt信号通路降低了人上皮性卵巢癌细胞的生长和转移能力。  相似文献   

19.
摘要 目的:探究miR-20a与CCND1蛋白在皮肤鳞状细胞癌(CSCC)中的作用关系,以及其可能涉及的信号通路分子机制。方法:分别收集皮肤鳞状细胞癌患者的皮肤癌组织及其邻近正常皮肤组织,采用qRT-PCR分析组织中miR-20a和CCND1基因表达水平。为探究miR-20a对CSCC细胞的影响,将SCL-1细胞分为对照组(不转染)、miR-NC组(转染miR-NC)和miR-20a mimics组(转染miR-20a mimics);为探究CCND1与PI3K/AKT信号通路的关系,将SCL-1细胞分为对照组(不转染)、si-NC组(转染si-NC)和si-CCND1组(转染si-CCND1);为探究miR-20a与CCND1间的作用关系及对CSCC细胞的影响,将SCL-1细胞分为miR-NC组(转染miR-NC)、miR-20a mimics组(转染miR-20a mimics)、mimics+pcDNA组(共转染miR-20a mimics和pcDNA)和mimics+CCND1组(共转染miR-20a mimics和pcDNA-CCND1)。采用Western blot分析p-AKT、AKT、p-PI3K、PI3K和GSK-3β蛋白表达水平;采用MTT检测细胞增殖情况;采用流式细胞术检测细胞凋亡情况;采用Transwell分析细胞迁移和侵袭情况;采用双荧光素酶报告基因检测分析miR-20a与CCND1的靶向关系。结果:CSCC癌组织和SCL-1中miR-20a均低表达,CCND1高表达。与对照组和miR-NC组比较,miR-20a mimics组SCL-1细胞增殖水平以及侵袭和迁移数量均降低(P<0.05),SCL-1细胞凋亡水平升高(P<0.05),PI3K和AKT蛋白磷酸化水平降低(P<0.05)。TargetScanHuman数据库分析和双荧光素酶报告基因检测结果显示miR-20a与CCND1存在靶向作用关系。与对照组和si-NC组比较,si-CCND1组SCL-1细胞中CCND1和GSK-3β蛋白表达水平以及PI3K和AKT蛋白磷酸化水平均降低(P<0.01)。与miR-20a mimics组或mimics+pcDNA组比较,mimics+CCND1组SCL-1细胞增殖水平以及侵袭和迁移数量均升高(P<0.05),SCL-1细胞凋亡水平降低(P<0.05),PI3K和AKT蛋白磷酸化水平均升高(P<0.05)。结论:过表达miR-20a可能通过靶向抑制CCND1的表达而抑制PI3K/AKT信号通路的激活,从而抑制CSCC细胞的增殖、侵袭和迁移,并促进癌细胞凋亡。  相似文献   

20.
摘要 目的:通过实验探究miR-142靶向高迁移率族蛋白1(high-mobility group box 1 protein,HMGB1)对宫颈癌(cervical cancer,CC)细胞生物学行为的影响及其潜在的作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测CC组织和正常组织中miR-142和HMGB1 mRNA及蛋白表达水平,采用荧光素酶报告实验分析miR-142与HMGB1的靶向关系,CCK-8法检测CC细胞生存能力,克隆形成实验检测CC细胞增殖能力,划痕修复实验检测CC细胞迁移能力,基质胶侵袭实验检测CC细胞侵袭能力。结果:CC组miR-142 mRNA和蛋白表达水平显著低于正常组(P<0.05),HMGB1 mRNA和蛋白表达水平显著高于正常组(P<0.05),且CC癌组织中miR-142和HMGB1 mRNA和蛋白表达水平均呈显著负相关(r=-0.399,P=0.002;r=-0.429,P=0.001);miR-142与HMGB1存在靶向关系;CCK-8法实验、克隆形成实验、划痕修复实验和基质胶侵袭实验结果显示,miR-142 mimic组细胞生存、增殖、迁移和侵袭能力显著低于miR-NC组(P<0.05),miR-142 inhibitor组细胞生存、增殖、迁移和侵袭能力显著高于miR-NC组;Western Blot实验结果显示,HMGB1过表达时miR-142 mimic+plasmid组HMGB1蛋白表达水平显著高于miR-142 mimic+control plasmid组(P<0.05),显著低于miR-NC+plasmid组(P<0.05);CCK-8法实验、克隆形成实验、划痕修复实验和基质胶侵袭实验结果显示,HMGB1过表达时miR-142 mimic+plasmid组细胞生存、增殖、迁移和侵袭能力显著高于miR-142 mimic+control plasmid组(P<0.05),显著低于miR-NC+plasmid组(P<0.05)。结论:miR-142可通过靶向负调控HMGB1表达,进而抑制CC细胞生存、增殖、迁移和侵袭。  相似文献   

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