龙胆紫希夫氏液显示DNA染色新方法

应用龙胆紫配制成Schiff(希夫氏)试剂,在微波辐射下进行Feulgen染色,结果使正常及良、恶性肿瘤组织细胞核内DNA着紫红色,并能应用真彩色图像仪进行DNA的定量分析.其方法操作简便,便于临床病理诊断应用.现介绍如下.标本的采集:活检手术切取的肿瘤组织100余例,经甲醛固定,石蜡包埋.切片,厚5μm.染液的配制:①8.3%盐酸水溶液(HCl8.3ml、蒸馏水 91.7ml);②龙胆紫(上海试剂站)希夫氏试剂的配制同PAS方法,以龙胆紫代替碱性品红;③亚硫酸氢盐溶液(10%偏重亚硫酸钠溶液5ml、1mol/L-HCl5ml、蒸馏水90ml).染色步骤;①切片脱蜡至水—蒸馏水;②8.3%盐酸水溶液水解切片1min(微波仪5档),蒸馏水洗;③     

快速捕获基因的方法——差异显示法

差异显示法是近年来出现的一些快速捕获基因的新方法,它的不断改进与完善,使基因表达的研究提高到一个新的水平。本对该方法的模板、引物、差异显示和鉴定等关键问题进行了论述。     

核仁和核仁染色质

真核细胞基因表达的调节控制是当前分子生物学领域最令人感兴趣的研究课题之一。但由于真核细胞基因组的复杂性,目前对此问题的了解还是不够深入的。随着生物化学、细胞化学和遗传工程技术的发展,使得基因表达的研究,尤其是特定基因表达的研究成为可能。从动物细胞分离的核仁和核仁染色质,为     

应用真空负压LSAB法快速显示各种组织相关抗原的研究

应用真空负压ＬＳＡＢ法快速显示各种组织中的相关抗原,无论从时间上,还是从二抗三抗的稀释度,阳性物的显示强度和效果等,都比免疫组化中的其它方法好。冰冻切片和培养细胞片,整个过程需时５０ｍｉｎ左右,石蜡切片全过程需时６０ｍｉｎ左右,如果从抗体的孵育时间讲,则孵育时间仅为产品说明书注明的时间的１／５。稀释度产品说明书注明二抗三抗为１：４００,该法二抗三抗的稀释度为１：８００,如此可增加标记切片的张数,降低成本。根据实验对比,在组织切片含有大量的抗原或抗体时,它与真空负压ＡＢＣ法没有明显差别,在抗原抗体含量少的情况下,真空负压ＬＳＡＢ法就显示出优势,阳性反应物明显比其它方法都强。真空负压ＬＳＡＢ法之所以具有上述的优点,这主要是它不需要提前形成复合物,因此,它的分子量小行动敏捷灵活,对组织的渗透性强。它与生物素的结合点多,加上真空负压的特殊条件,这就使真空负压ＬＳＡＢ法成为需时少,效果好,敏感性高的一种新方法。     

动植物染色体显示法

在动植物細胞染色体的显示方法中,可采用压片法,因为这种方法有很大的优点:操作簡单,节省时間,在切片法中,往往不能得到完整的染色体相,而压片法則能将所包含的染色体,全部保存下来,故較切片法为优。当然,行这种操作,要求却是严格的:第一,器皿必须是很清洁的;第二,所用的試剂、药品要保証化学純粹;第三,时间的掌握和控制要准确。植物方面材料:洋葱根尖。取休眠期之洋葱,放在一个盛满清水的杯口上,使水恰好浸沒洋葱之根部,在室温中放置約3—4日后,洋葱下部卽生出新根,长約2厘米时,剪下固定。固定:剪取长約1厘米左右的根尖,一定要初生根。最好在晚上12时至1时固定,因此时細胞处于分裂最多的时候。固定下述试液:45％冰醋酸或純酒精     

核仁的蛋白质组学

核仁是胞核内高度紧密的结构,参与转录、剪接、核糖体合成等重要生命过程,并与细胞分裂、衰老有关。1963年虽已从哺乳动物肝脏提纯核仁,并鉴定了所含的一些蛋白质,但还有不少核仁蛋白质迄今尚未阐明。2002年英国、丹麦的两实验室首次完成了核仁的蛋白质组学分析。本文就近年报道有关核仁蛋白质组的分离和检测、检出的271种核仁蛋白质的分类,蛋白质在胞核内迁移以及核仁蛋白质组学检测技术的问题和发展前景等方面作一简介。     

核仁蛋白质的定位、移位和核仁功能

核仁一直被认为只是核糖体合成和加工的场所,但是近年研究发现它具有其他功能.核仁是一个高度动态的亚细胞结构,通常情况下核仁蛋白质在核仁内外不断穿梭完成对于核糖体的运输.但在细胞应激反应时核仁成为细胞应激的感受器(cell stress sensor),核仁蛋白质在核仁内外的定位分布发生改变,同时伴随功能改变,介导细胞的应激反应.     

龙胆紫染色剂有哪些优点?

在遗传实验和植物实验教学中,龙胆紫是染色体的一种优良的染色剂,它的酒精溶液就是医用的紫药水,它具有其它染色剂所不及的优点。总结其优点如下: 1.作核及染色体的染色剂既经济又容易得到(一般的医疗卫生部门都有售);2.配制和保存简便,且比较稳定,不象其它染色剂那样因受光照和氧气的影响而发生     

差别显示mRNA法的改良

本文介绍了一种筛选和克隆差异表达基因的新方法——差别显示mRNA法。并在模板、引物、反应体系、反应条件等方面,对该方法作了深入的探索和改进,与原方法相比,改良法具有高效、可靠性高、经济等优点。实验表明,该方法能有效地筛选到一对细胞或组织在不同状态下表达差异的基因。为新基因的发现和克隆提供了新的手段。     

核仁抗原的研究进展

核仁内含有大量的蛋白质成份,在rRNA 合成,RNP成熟、组装、运输的过程中起重要作用。本文论述了近年来对核仁抗原研究的概况,特别对与细胞增殖相关的多种抗原和银染蛋白进行了详尽的介绍。     

焦性磷酸酶的组织化学显示法

甲) 硷性焦性磷酸酶(alkaline pyrophosphase)的显示法: 1) 新鲜组织片固定于冷的5%中性福尔马林液中(此液含有0.9%氯化钠)1小时。 2) 以0.9%氯化钠洗10—20分钟。 3) 冰冻切片(20—35微米),切片径入0.9%氯化钠中或酶作用基液中(Substrate solution)。 4) 切片入酶作用基液内,在37℃下作用3小时,基液之     

核仁和核仁蛋白

核仁是位于细胞核内的非膜结构。电子显微镜下的核仁从形态上可以分为三层结构包括纤维中心区(FC)、高密度纤维区(DFC)和颗粒区(GC)。核仁内的蛋白有核糖体蛋白和非核糖体蛋白两种。利用蛋白质组学方法已经鉴定了350多种核仁蛋白,其中包括80多种核糖体蛋白。核仁是核糖体合成的场所,核仁中的非核糖体蛋白对核糖体的生物合成起关键调控作用。核仁不仅是细胞内通讯和核糖体：RNA加工的中心,而且在细胞周期、细胞增殖和衰老中起重要调控作用;核仁也是tRNA、mRNA和其它类型小分子RNA加工的场所。因此核仁是一个多功能的细胞生命活动中心。     

核仁研究新进展

核仁是真核细胞间期核中最显著的结构。其主要功能是进行rRNA的合成和核糖体大、小亚基的装配。然而,近年来的研究提示核仁可能还参与了一系列其他功能活动,如mRNA和tRNA的加工成熟、信号识别颗粒的组装、端粒酶活性和调节细胞周期等。对多个物种核仁蛋白质组数据的分析也显示核仁中具有许多与核糖体生物合成无关以及功能未知的蛋白,表明核仁在组成和功能上远比人们以前的认识复杂。同时,核仁蛋白质组数据的获得也为人们从组学水平研究核仁的起源与进化提供了新视角。该文对近年来在核仁结构、功能、蛋白质/基因组学研究及其起源与进化等方面的进展进行了概述,并探讨了一些有待于进一步研究的问题。     

核仁组成区相关嗜银蛋白染色革新法

核仁组成区相关嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲ）银染技术已广泛用以研究细胞生长活性,根据ＡｇＮＯＲ数目多少来判定肿瘤的良恶性和对肿瘤进行鉴别诊断。然而ＡｇＮＯＲ技术至今还存在背景非特异性银颗粒沉积问题而影响结果判定。本研究发现影响背景染色结果的主要因素是明胶的质量,采用Ｆａｒｍｅｒ’ｓ液可以清除背景染色,运用微波炉染色不仅可以缩短染色时间而且可以减少银用量。     

人卵母细胞前期染色体和核仁、微核仁的观察

多年来,许多生物学家采用压片法(Ohno等,1961,1962;Baker 1963),空气干燥法(Luciani等,1974;Vebele-Kaelhardt,1978;Speed,1985))连续切片的电镜观察(Baker和Franchi,1967)等相继对人卵母细胞染色体进行过研究。Hart-ung等(1978)曾经以~3H-尿嘧啶核苷标记人卵母细胞前期核,观察了RNA的进行性变化。近年来,银染法的广泛运用,不仅揭示了动物,而且还揭示了人的卵母细胞前期核     

核仁小分子RNA

核仁小分子ＲＮＡ屈良鹄（中山大学生命科学学院生物工程研究中心广州５１０２７５）关键词核仁小分子ＲＮＡ（ｓｏｎＲＮＡ）;内含子（ｎｉｔｒｏｎ）;基因（ｇｅｎｅ）;核糖体（ｒｉｂｏｓｏｍｅ）真核生物（ｅｕｋａｒｙｏｔｅ）在真核生物细胞中,除了人们所熟悉的ｒＲＮＡ,ｍＲＮＡ和ｔＲＮＡ之外,还存在着许多小分子ＲＮＡ［１,２］,如核小分子ＲＮＡ（ｓｎＲＮＡ）,核仁小分子ＲＮＡ（ｓｎｏＲＮ）以及细胞过程中的调控活动,具有十分重要的生物学意义[3,4].     

快速催芽法

在毛主席和党中央提出全面大跃进,技术革新和和文化革新的指示下,教育结合生产,来培养有文化科学知识的劳动者。在校党政工团及勤工俭学委员会的具体领导和帮助下,为了早春早播蔬菜早日供应市场,在工作中创造了快速催芽法。     

快速肥鸡法

动物体在进行新陈代謝的过程中,当同化作用超过異化作用愈大时,則該动物的生长发育愈显著。反之,异化作用超过同化作用愈大时,则该动物的生長发育愈不明显而消瘦。因此,要使动物的生長速度快,那就要同化作用超过异化作用,动物体才能肥健起来,为了达到这一目的,我们做了这方面的試驗,通过試驗証明,抑制或摘除动物体的甲狀腺,就能加速肥大。现將     

响应面法优化微波辅助提取山苍子核仁油的研究

通过微波辅助提取技术结合响应面法优化山苍子核仁油提取条件,以期建立更高产率的提取方法。该研究在单因素设计基础上,选取液料比、微波功率、萃取时间、萃取温度4个主要因素,分析这4个因素对山苍子核仁油提取率的影响。结果表明:通过建立多元回归拟合分析,得出山苍子核仁油提取最佳工艺条件为液料比1∶16,萃取温度为69℃,微波功率为337 W,萃取时间为63 min,在此条件下山苍子核仁油提取率为37.42%,与环己烷溶剂回流法相比较提取率提高了30.11%。气质联用仪分析结果显示,山苍子核仁油主要成分有16种占总成分的88.21%,鉴定出10种脂肪酸占总成分的78.24%,饱和脂肪酸有4种占总成分的43.23%,不饱和脂肪酸有6种占总成分的35.01%,脂肪酸中含量最高的为月桂酸(31.36%)。该研究结果表明该方法严谨、可靠,采用微波辅助提取山苍子核仁油是可行的。