直肠接种卡介苗可诱导出与注射接种相似的免疫应答和保护作用

本文通过直肠途径接种卡介苗(BCG),并与肠胃外途径接种进行比较对结核分枝杆菌(结核杆菌)的免疫应答及保护作用.实验选用动物为BALB/c小鼠、远交系Hartley豚鼠和恒河猴;BCG为Pasteur株1173P2;攻击用菌种为结核杆菌H37Rv.直肠免疫小鼠、豚鼠及恒河猴时分别接种2×109、2×1010和6×1010活菌单位的BCG;皮下注射免疫小鼠时接种100 μl BCG(含108活菌单位);皮内注射免疫豚鼠和恒河猴时分别接种5×106和1×109活菌单位的BCG.在两条途径免疫后不同时间,取豚鼠和恒河猴脾细胞在96孔微孔板培养,用3H TdR掺入法测定对PPD刺激的增殖反应.     

卡介苗标准化(续完)

<正> 7.菌苗不得含有其他微生物:菌苗生产整个过程要做无菌试验,通常取苏通培养物,批量菌苗和生产完毕后随机抽样的液体部份进行。最好使用硫乙醇酸盐培养基作所有的无菌试验,因它适合于需氧菌、厌氧菌及一些霉的生长。有些实验室也用琼脂、肉汤、沙氏或一些培养霉菌的培养基,一般pH为8.3。孵育温度30-32℃,至少观察7天。对浓度大的菌苗及观察有困难时,可于第5天后移种,重复培养。第二次接种也应在7天后观察判定结果。所有接种菌苗的管都不得污染。成品安瓶应进行菌苗的毒性试验,用一支安瓶内全部菌苗腹腔注射10只小鼠,10天后小鼠全部活存。其他试验:在短期内测定BCG活菌数,     

铜绿假单胞菌菌苗预防白色念珠菌感染的实验研究

目的利用铜绿假单胞菌菌苗探索阻断白色念珠菌感染的影响。方法家兔耳皮内注射白色念珠菌,进行活菌攻击,建立动物感染模型。观察用铜绿假单胞菌菌苗免疫的家兔状况;用试管凝集法测定家免的抗体效价;采用小白鼠体内吞噬法测定免疫组和空白对照组巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数,以得出铜绿假单胞菌菌苗的免疫性。结果观察发现：与对照组比较,铜绿假单胞菌菌苗免疫组抗体效价,巨噬细胞的吞噬能力明显提高;注射区局部感染及全身症状明显减轻;肾脏感染灶减少,病理切片显示病情较轻。结论铜绿假单胞菌菌苗能够减轻注射区局部感染及全身症状,对肾脏的播散性白色念珠菌感染具有一定的阻断作用。     

布鲁氏菌变态反应原的研究Ⅴ.犬种菌的变态反应原性

我们按照规程要求制备了犬种菌素。它在致敏豚鼠和人体中证明了:它虽为粗糙型菌种,但仍具有变态反应原性;用死菌液10亿/0.1ml给致敏动物作皮试,亦出现良好的变态反应。24小时反应强度为15.8—18.4mm;48小时为6.8—10.8mm。犬种菌液热处理后,其上清液经硫酸铵透析,取其粗提蛋白作为变态反应原,用50μg/0.1ml给致敏动物作皮试,经犬种菌免疫的动物出现弱变态反应(24小时均在10mm以下),经活菌苗致敏的动物出现较强的变态反应(24小时为13—14mm,48小时为10.5—11mm)。犬种     

牛种布氏菌天然半抗原用于放免试验

<正> 人和动物布病的诊断,主要基于标准试验,如玻片血清凝集试验、虎红平板试验、补体结合试验和牛奶环状试验对抗体的测定。预防措施包括血清学测定和阳性动物的捕杀以及用牛种布氏菌B_(10),45/20或羊种布氏菌H_(38)、Rev-1进行预防接种。但是,接种产生的抗体不能与实际感染相区别。这     

布鲁氏菌苗的免疫研究I．布鲁氏菌皮上接种的动物试验

皮上感染布鲁氏菌之后,在短期内(15分钟)即有大量细菌进入豚鼠体内并且迅速散布全身。在比较皮下厦皮上接种力法时发现皮下注射后大部分帝田菌停留在局部注射处,而扩散到各内脏的活菌教反而不如度上法。从细菌的扩散来考虑,皮上接种看来是一个适宜的活菌免疫途径。皮上接种时菌量与布鲁氏菌进入量有密切关系,而划痕的道数却不是决定性的。动物免疫力试验说明具有较强剩余毒力的菌株,例如104M菌株,在皮上免疫后有较好的免疫力。因此在选择皮上接种用的布鲁氏菌苗菌株时有必要考虑菌株的这一免疫性能。     

纯化布氏菌素的研制与应用*

用三氯醋酸和硫酸铵从布氏菌菌液中提取了纯化的布氏菌蛋白衍生物,对动物及布氏菌病病人、布氏菌隐性感染者、布氏菌苗免疫者、肺结核和其他病人及健康人群做皮内变态反应试验。结果证明,该制品具有良好的皮肤变态反应原性,其特异性和敏感性与国际相关标准品完全一致;其显著特点是安全性好,无副作用,非特异性反应也大大低于现行菌素;同时提出了临床判定的阳性参考标准。     

纯化布氏菌素的研制与应用

用三氯醋酸和硫酸铵从布氏菌菌液中提取了纯化的布氏菌蛋白衍生物,对动物及布氏菌病病人、布氏菌隐性感染者、布氏菌苗免疫者、肺结核和其他病人及健康人群做皮内变态反应试验。结果证明,该制品具有良好的皮肤变态反应原性,其特异性和敏感性与国际相关标准品完全一致;其显著特点是安全性好,无副作用,非特异性反应也大大低于现行菌素;同时提出了临床判定的阳性参考标准。     

小鼠模型用作口服痢疾活菌苗效力指标的意义

小鼠皮下免疫、腹腔攻击模型作为验证减毒痢疾活菌苗效力的指标已沿用多年,但其能否代表痢疾菌苗的效力还有待商榷。实验选用口服痢疾活菌苗ＦＳ,以不同活菌含量来验证模型的意义。实验表明,菌体皮下免疫均能产生类似的保护效果,与活;菌含量无关,血清学试验也论证了同样观点,而人体试验表明,菌苗的保护效果与活菌数密切相关,故认为小鼠皮下免疫、腹腔攻击模型不能准确反应痢疾菌苗的保护效果。     

破伤风抗毒素临床反应观察报告

作者对兰州生物制品研究所常规生产的3批破伤风抗毒素（TAT）进行了临床反应观察。结果表明,TAT皮内试验假阳性反应率平均为13．3％,阳性反应率为0．9％。450例患者注射后过敏反应发生率为0,年龄,性别因素与皮试阳性率及注射后反应无相关性。     

一种全细胞百日咳菌苗效力试验替代方法的建立

<正>全细胞百日咳菌苗的效力通过小鼠保护试验(AMPT)来判定。此法是用不同稀释度的百日咳国际参考苗(ZSPV)和待检菌苗免疫小鼠,14天后脑腔攻击Bordetella百日咳菌18323(100-1000LD50)。 从1951年到1959年,由医学研究委员会进行的现场研究表明,能使小鼠抵抗脑腔攻击的百日咳菌苗也可保护儿童。尽管在AMPT的结果和接种的个体产生的保护力之间有高度的相关性,此试验仍有许多操作上的困难:(i)需要大量可对百日咳菌苗的免疫产生应答的小鼠。这些动物须在适宜的环境中喂养一个月,费用很高;(ii)脑腔注射需要毒株;(iii)实验室间和实验室内的结果有很大的     

利用rCFP-10/ESAT-6融合蛋白刺激γ-IFN体外释放测定替代结素皮试检出结核感染的可行性

评估rCFP-10/ESAT-6融合蛋白刺激γ-IFN体外释放测定与结素皮试检出结核感染的敏感性及特异性。对疑似结核病患者共229例进行随机、双盲、平行、对照、前瞻性试验,后经细菌培养证实患结核病的病人共129人,没有结核病史的非结核病患者共100人。以某一特定的γ-IFN体外释放水平及结素皮试反应硬结直径?10 mm为阳性切割值,rCFP-10/ESAT-6融合蛋白刺激γ-IFN体外释放测定的敏感性为96%,显著高于结素皮试(89%)(χ2=4.92;0.025相似文献   

霍乱毒素的研究进展

<正>提纯的霍乱毒素(CT)具有很强的生物学活性,0.1μg就能使家兔回肠结扎段液体贮留,10pgCT接种于家兔或豚鼠皮内可引起皮肤血管通透性增加,特别是对蛋白质的通透性增加,给小鼠静脉或腹腔注射CT,小鼠于2～3天后死亡,其LD_(50)为5μg。但对人不起作用,因CT不能进入血液循环。用10pg提纯CT可使小鼠Y—1肾上腺细胞变圆,同等剂量加入CHO细胞,可使其变长。     

伤寒Vi多糖菌苗接种反应观察

本文报告了对我国首次成功的伤寒Ｖｉ多糖菌苗进行人体接种反应观察结果,接种对象为２０至５４岁无伤寒病史,近年无伤寒菌苗接种史的健康人,共６０名,以完全随机的方法分为两组,实验组注射３０μｇＶｉ多糖菌苗,对照组注射Ｖｉ多糖菌苗的稀释液。其结果３０名Ｖｉ多糖菌苗接种者注射后体温无中重反应发生,局部红肿仅有１例中反应。注射后对血压、心律没有影响。红细胞计数,白细胞计数均在正常范围,与接种前相比,无显著差异     

痢疾T32与伤寒Ty21a两价菌株的组建

用体内重组的方法,将经过多次现场考核,证明安全有效的痢疾T32无毒株和伤寒Ty21a无毒株,用前者作给体后者作受体,以两步法组建成一株既具痢疹福氏2a抗原特性又保持伤寒Ty21a株特性的两价菌株。经猴体免疫力试验,在对照组全部发病的情况下,能保护80％的免疫猴免于感染菌痢;以c,H系小鼠做免疫力试验,能保护伤寒毒菌的感染。该菌株经实验室传30代仍保持稳定,豚鼠角膜毒力试验无炎症反应,以400亿活菌口饲猴体,对101人,每人口服15 7—200亿活菌,均未发现不良反应,是一株有希望的菌苗候选株。     

脑膜炎双球菌蛋白菌苗和多糖菌苗中脂多糖(内毒素)的测定

<正>脂多糖(LPS)、荚膜多糖(PS)、外膜蛋白(OMP)和伞毛(菌毛)是革兰氏阴性菌细胞表面抗原。由于LPS有各种毒性反应故称之为内毒素。除LPS外,其它表面抗原可用来制造菌苗。脑膜炎双球菌荚膜多糖菌苗和外膜多糖菌苗已用于预防脑膜炎双球菌感染。当非肠道使用的脑膜炎荚膜多糖(PS)菌苗、沙门氏伤寒ViPs菌苗和脑膜炎蛋白(OMP)菌苗含有LPS时,会引起发烧和其它反应。而对于OMP菌苗要想不使蛋白抗原变性而彻底除去LPS是不可能的。所以,菌苗中的LPS应设法降低其含量达不至于引起发烧或其它异常反应的水平。在这些制品的质量检定中,—个特定剂量的家兔热原试验应为阴性。 Gotschlich等人报道用10ng/kg或更高剂量的脑膜炎菌LPS静脉注射家兔会引起明显的体温上     

改良炭疽菌苗开发中克隆的保护性效力和进展

<正>以往的研究致力于开发更安全、有效的人用炭疽菌苗,已经证明无论化学菌苗或活菌苗必须含有一种或几种毒素成份方可保护活芽胞攻击。我们近期的研究致力于∶畜苗炭疽杆菌Sterne株Aro_突变株,产保护性抗原(PA)的重组活菌苗,和含PA,PA片段和新佐剂配方的非活菌苗。 炭疽杆菌Aro—1和Aro—2 用四环素抗性转座子Tn916致突变,使炭疽杆菌链霉素抗体、产毒素、无荚膜株UM23—1产生两个独立的Aro~-突变株,此二株Aro~-突变株的生长需要几种芳香族复合物,命名为Aro—1、Aro~-—2,它们对小鼠和豚鼠比UM23—1株毒力弱,但用其免疫小鼠和豚鼠,对强毒炭疽杆菌芽胞致死量非肠道攻击提供明显保护。当体外无四环素培养时,两种Aro~-突变株回变到亲本表型。     

由霍乱毒素或其B亚单位与高分子量或低分子量的Vi组成的Vi多糖—蛋白接合物的免疫原性比较

<正>伤寒沙门氏菌引起的伤寒在发展中国家最为常见而且病情严重。接种伤寒沙门氏Vi荚膜多糖预防伤寒已在两个控制伤寒的随机双盲研究中得到证实。在5—44岁的儿童和成人中一次注射Vi,可提供大约70%的抗伤寒保护作用。在尼泊尔和南非德兰土瓦东部大约有75%的接种者Vi抗体效价升高4倍以上,Vi抗体的升高与Vi菌苗的有效率相似。 Vi是半乳糖醛酸(1→,)的线形同种聚合体,有与其它荚膜多糖特有的相同特性,即在动物和人类中重复注射并不引起加强应答。 接种Vi刺激产生的保护性免疫成份是血清抗体。两种试验结果证明,Vi抗体的临界水平可提供对伤寒的免疫保护作用。为了增强免疫原性,从而     

肉毒杆菌毒素的作用机理(下)

作用特点剂量-反应曲线引起机体中毒或阻遏离体神经-肌肉标本接头传递所需要的肉毒绝对量是很少的,曾有人以每只豚鼠与小白鼠含有250万个神经细胞推算,它们分别平均每个神经细胞只要4或8个肉毒分子便可被杀死。将稀释几个数量级的肉毒溶液注射给动物,动物存活时间仅较注射未经稀释原液的延长几分钟。肉毒作用的剂量-反应关系为双对数曲线,即将毒素剂量、反应大小分别取对数,二者关系呈一直线。将哺乳动物膈神经-膈肌     

冻干口服霍乱rBS—WC菌苗安全及保护效果评价的小鼠模型探讨

本文仿照人口服免疫程序用小鼠为模型对冻干口服霍乱ｒＢＳ－ＷＣ菌苗制品进行了安全及保护率评价。给ＫＭ小鼠口服三种不同剂量的ｒＢＳ－ＷＣ菌苗后,无发病,无体重减轻,无死亡现象,表明该菌苗安全,无毒副作用。免疫组与安慰剂组小鼠用肠结扎攻毒试验评价保护效果,两组小鼠用吴江－２及滨－４３活菌攻击后,免疫组显示良好保护作用（Ｐ＜０．０５）。此法可以用于口服型ｒＢＳ－ＷＣ菌苗的评价,但也存在需要动物数较多,个体间差异较大,手术较麻烦的问题。