植物转座子

在简要介绍转座子的种类、结构和特性的基础上,综述了利用转座子诱变、基因标签和克隆方面的研究进展。     

植物转座子在基因工程应用上的研究进展

本文综述了植物转座子在基因工程应用上的最新研究进展。转座子已成为引入注目的植物基因分离手段。转座子还可以作为一种新的载体系统介导外源基因转移并消除转基因植物中的选择标记基因。     

转座子标签法克隆基因的改进——sAc/Ds双系统法

1　转座子及转座子标签法克隆基因基因标签法克隆植物组织中的基因是较为常用的一种方法 ,T-DNA和转座子均可作为基因标签。转座子最早由美国的细胞遗传学家 Mc-clintock在玉米中发现 ,它是指基因组中一段特定 DNA片段 ,能在转位酶的作用下从基因组的一个位点转移到另一个位点。转座子不仅能在本基因组中转座 ,也能转入其它植物的基因组中。转座的结果是使被转入的基因失活 ,从而有效地诱导产生表型突变株。然后构建一个对应于突变株的基因库 ,用作标签的转座子作为探针从基因库中筛选相对应的克隆 ,分离得到相对应于变异的基因 ,这就是…     

植物基因工程中的转座子标签

195 1年ＢａｒｂａｒａＭｃｌｉｎｔｏｃｋ首先在玉米中发现了控制元件 ,后来命名为转座元件或转座子 (ｔｒａｎｓｐｏｓｏｎ)。转座子是基因组中一段可移动的ＤＮＡ序列 ,可以通过切割、重新整合等一系列过程从基因组的一个位置“跳跃”到另一个位置。这一元件不仅可用于分析生物遗传进化上分子作用引起的一些现象 ,还为基因工程和分子生物学研究提供了强有力的工具 ,可以在不了解基因产物的生化性质和表达模式的情况下 ,分离克隆植物基因 ,即转座子标签 (ｔｒａｎｓｐｏｓｏｎｔａｇｇｉｎｇ) ,又称为转座子示踪法。其原理是利用转座子的…     

转座子在植物基因分离中的应用研究进展

转座子在植物基因分离中的应用研究进展朱乾浩（浙江省农科院作物所杭州３１００２１）转座子（ｔｒａｎｓｐｏｓｏｎ）最早由美国的玉米遗传学家Ｂ．ＭｃＣｌｉｎｔｏｃｋ在玉米中发现。但转座子的概念直到１９６７年在大肠杆菌（Ｅ．Ｃｏｌｉ）的半乳糖操纵子研究中发现插入序列这类转座因子后才被普遍承认和接受。     

转座子标签法突变呋喃丹降解菌CFDS-1

通过接合使供体大肠杆菌DH5α中的质粒pSC123上的转座子插入到受体菌CFDS-1基因组DNA中,以引起该菌株的基因插入突变。利用转座子上的卡那霉素抗性基因和呋喃丹降解过程中红色物质的产生与否初步筛选出6株突变株,分别命名为CFDS—M1～CFDS—M6。紫外扫描和气谱检测结果进一步证明这些突变子确实失去了对呋喃丹的降解能力。根据转座子的序列设计引物,以6株突变株的基因组DNA为模板进行PCR扩增,并对PCR产物进行限制性酶切分析,结果表明这些突变子中呋喃丹降解基因的失活就是由于转座子的插入而导致的。     

植物抗病相关基因分离策略

近年来植物基因克隆技术已经取得了很大进展。文章对分离植物抗病相关基因的一系列策略及其研究进展进行了综述,并对这些技术的异同,各自的优缺点,以及它们在植物中的应用现状及前景作了评述。     

植物抗病基因克隆研究进展

随着分子生物学及其相关技术的飞速发展,人们对植物与病原微生物相互作用的分子机制了解得越来越透彻。本文对植物过敏性反应和系统获得抗性作了简要概述,并着重讨论了植物抗病基因克隆的进展,涉及到转座子标签技术、定位克隆技术、染色体步行、染色体登陆等方法和策略,归纳了克隆到的植物抗病基因及其产物结构,概述了这些基因产物所共有的特点,并简要介绍了植物抗病基因工程的进展。     

转座子标签及其在酿酒酵母基因功能研究中的应用

转座子标签(transposontagging)技术是研究功能基因的有效的工具之一。介绍了几种在酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)基因功能研究中应用的转座子标签:mTn3标签、miniMu噬菌体标签和Ty转座子标签,阐述了转座子标签的构建原理、应用策略和转座子标签插入位点的鉴定方法。     

Tagging of a nitrogen pathway-specific regulator gene in Tolypocladium inflatum by the transposon Restless

Restless is an endogenous hAT transposon found in the cyclosporin-producing fungus Tolypocladium inflatum. This element is present in about 15 copies in a particular strain (ATCC34921) which was used for successful gene tagging. We have isolated a T. inflatum mutant with a defect in nitrogen metabolism. This mutant carries a copy of the Restless element in a gene encoding a C6 zinc-finger protein. The deduced amino acid sequence of the gene product shows a significant similarity to the NIT4 protein of Neurospora crassa, which is a regulator of nitrogen metabolism. The wild-type T. inflatum gene was shown to complement a nit-4 mutant of N. crassa. From these data, we conclude that the T. inflatum gene also encodes a regulator of nitrogen metabolism, which was named tnir1 (Tolypocladium nitrogen regulator 1). To the best of our knowledge, this is the first fungal gene to be identified by transposon-directed gene tagging. A general method for gene tagging using an endogenous fungal transposon is presented. Received: 20 October 1999 / Accepted: 15 December 1999     

植物抗病基因同源序列及其在抗病基因克隆与定位中的应用

近10年来已有20多个植物抗病基因被克隆,测序,这些抗病基因所编码的蛋白中大多含有核苷酸结合位点,富含亮氨酸重复序列,蛋白激酶,亮氨酸拉链结构,跨膜结构域,Toll白介素－1区域等保守结构域。利用这些保守结构域合成PCR引物,已扩增出大量的植物抗病基因同源序列（RGA）。对RGA与抗病基因的关系进行了分析,讨论了RGA在研究抗病基因进化中的作用,指出RGA在抗病基因定位和转基因中具有重要意义。     

T-DNA标签在植物基因克隆和功能分析中的应用

在植物功能基因组学的研究中,插入突变已成为迅速识别和研究标签基因的一个有效遗传工具.本文介绍了T-DNA标签的概念及应用前提,详细论述了T-DNA标签在大规模植物基因功能分析中的应用以及使用启动子和增强子诱捕技术分离时空特异性启动子和表达基因,另外还分析了利用其特殊形式激活标签进行基因克隆和功能分析的优越性,并展望了T-DNA标签的应用前景.     

转座子标签法在构建G-细菌突变体库中的应用

应用转座子标签法以水稻黄单胞菌 (Xoo)为研究对象 ,构建了Xoo的突变体库 ,为革兰氏阴性细菌突变体库的建立 ,验证了一个较新的方法和思路。经分子生物学检测 ,此方法简便易得、高效稳定 ,可以定向突变 ,为研究G-细菌的各项功能提供了良好的素材 ,加快了研究进程。     

紫杉醇生物合成相关酶基因的克隆与表达

以牛儿基牛儿基二磷酸为前体的紫杉醇生物合成大约有20步酶促反应,其反应过程已基本阐明,近一半的相关酶基因已得到克隆与表达。综述了编码参与紫杉醇生物合成的紫杉二烯合酶、紫杉二烯5α羟化酶、紫杉烷10β羟化酶、紫杉烷13α羟化酶、紫杉二烯5α醇O乙酰基转移酶、紫杉烷2α苯甲酰转移酶、去乙酰基巴卡亭Ⅲ10βO乙酰转移酶、3氨基3苯基丙酰转移酶和3N去苯甲酰2脱氧紫杉醇苯甲酰转移酶等9个酶基因的克隆和表达方面的研究情况,并指出随着紫杉醇生物合成的分子生物学研究的不断深入,利用分子生物技术大规模生产紫杉醇将为期不远 。     

玉米Ac双因子转座标签系统的构建及其转化烟草后代的遗传分析

用使质粒pKU3所携带的玉米Ac因子的5'末端和中间编码转座酶的基因片段分别发生缺失的方法构建成质粒pKU3（△B）和pKU3（△H）。质粒所携带缺失的Ac因子单独存在时都无自主转座能力,但当Ac（△H）和Ac（△B）共存于一个细胞时,由于Ac（△B）产生转座酶的互补作用促使Ac（△H）恢复转座能力,而当Ac（△B）和Ac（△H）因子被分离后即获得Ac（△H）因子的稳定插入突变株,它可克服因突变不稳定而给用转座因子标签法分离基因所造成的困难。将双因子系统导入烟草原生质体并获得再生植株,从而选得卡那霉素抗性植株,显示Ac（△H）因子已经从原质粒上的NPTⅡ前导顺序中切离。Sortharnblot和PCR分析表明：Ac（△H）和Ac（△B）因子已经整合在转化烟草的基因组并能遗传至F1和F2代植株中;有些植株后代中已检测不到Ac（△B）因子的存在,说明它们的Ac（△B）因子已与Ac（△H）因子相分离;各转化植株中Ac（△H）因子在基因组中的插入拷贝数从一个到几个不等;初步显示Ac（△H）因子多数插入或转座在基因组的结构基因中。     

异源植物中转座因子标签研究的进展

异源植物中转座因子标签研究的进展瞿绍洪１,２）景健康１）胡含１）（１中国科学院遗传研究所,北京１００１０１;２中国科学院植物研究所,北京１０００９３）ＰｒｏｇｒｅｓｏｆＴｒａｎｓｐｏｓｏｎＴａｇｇｉｎｇｉｎＨｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓＰｌａｎｔｓＱｕＳｈ...