转基因猪研究

引言 Palmiter(1982)将含小鼠金属巯因(Metallothioein-Ⅰ,MT)基因启动子的DNA片段与大鼠生长激素结构基因融合的质粒,用显微注射法注入小鼠受精卵的原核中,经移植至受体共产下21只小鼠,其中7只带此融合基因,且有6只小鼠显著比同窝正常小鼠生长快,约10周龄时,转基因小鼠的体重为41.2克,而同窝正常小鼠的体重仅21.2克。从而提示人们可能通过基因导入方法提高家畜的生产性能、抗病性、繁殖力、甚至生产某些药物。在提高生产性能方面,人们自然考虑到对瘦肉型猪基因工程育种的研究,因为猪的世代间隔短、可集约化生产、经济效益高,通过基因导入可能育成生长快、肉质好的新猪种。     

转基因动物研究中存在问题

１５年来已建了许多用作研究人类疾病的转基因动物模型。转基因动物已作为研究代谢调节、分化、发育中有关基因功能的工具,它已作为一种分子农场可生产基因产品等。但要看到,转基因还有许多问题要解决。首先是转基因的阳性率低,这是受了许多因素如ＤＮＡ样品质量,分子大小和结构,动物种属,原核的可见性,注射针的调节和微注射技术等影响。通常转基因首建的阳性率在１０－２０％,有时甚至低于１％。在基因操作后,外源基因整合     

转基因猪的研究进展

本文综述了转基因技术在猪的生产性能改良、抗病、器官移植及作为生物反应器的研究进展情况。     

转基因猪研究进展

转基因猪是指运用分子生物学技术方法,将人工分离或改造过的基因整合到猪的基因组中,并能稳定的遗传给后代。转入的基因可以使猪的某些性状向人类需要的目标发生转变,因此在猪的遗传育种、以及将猪作为药物评价、疾病模型、特异性药物生产的生物反应器和组织器官移植的供体等方面具有重要的作用。就目前转基因猪的研究进展、技术方法及应用现状进行简要的综述。     

转基因猪外源基因染色体定位的研究

转基因猪外源基因染色体定位的研究ＥＸＯＧＥＮＯＵＳＧＥＮＥＬＯＣＡＬＩＺＡＴＩＯＮＯＮＣＨＲＯＭＯＳＯＭＥＳＯＦＴＲＡＮＳＧＥＮＩＣＰＩＧ关键词基因定位染色体原位杂交转基因猪ＫｅｙｗｏｒｄｓＧｅｎｅＬｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ,Ｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄ...     

克隆猪技术及其在转基因猪研究中的应用

哺乳动物核移植技术是一种可以获得基因组遗传信息完全相同的后代的生物技术。猪体细胞核移植技术包括以下几个环节：卵母细胞的体外成熟、供体细胞的分离和处理、体细胞的核转移、重构胚胎的人工激活、胚胎体外培养和胚胎移植。由于该技术在最近几年的迅速发展,很多实验室已通过该技术成功获得了克隆猪后代。核移植克隆猪技术的出现为生产转基因猪提供了一种有效的方法,并且是目前生产基因打靶猪的惟一方法。至今利用克隆猪技术已经成功获得了一系列的转基因猪和基因敲除猪。以核移植技术产生基因修饰猪目前正处于从基础研究走向应用的过渡阶段。尽管猪体细胞核移植克隆的效率（出生克隆猪数占所用卵数的比例）还不高,但是由于通过该技术能够对猪基因组进行特定的修饰,确保生产的克隆动物100％为转基因动物,从而大大提高了转基因猪的制作效率,可以预料猪核移植技术将会对医药业和农业产生重大的影响。     

植物转基因的失活与沉默

植物外源基因转化研究揭示有相当比例的植物转基因表现失活与沉默。这一现象涉及转基因重复拷贝之间的异源配对,基因顺序的甲基化,转录后的衰退调控以及插入位点染色质高级结构的改变,并与外源基因的随机整合有关。克服转基因失活的方法包括单拷贝转基因子代筛选,构建细胞核基质支架附着区载体以及采用具有特殊功能的启动子与增强子。转基因失活问题的发生提示人们,外源基因的转化与整合存在一些特有的遗传机制。     

转基因动物技术及其应用

转基因动物技术及其应用张涛（北京医科大学生物遗传教研室北京１０００８３）关键词转基因动物８０年代初期，由于分子生物学和动物实验胚胎学的发展和相互渗透，使科学家可以借助实验手段，将特定的目的基因从某一动物体分离出来，进行扩增或加工，再导人另一动物的早期...     

转基因动物与基因表达调控的研究

十余年来,随着转基因技术的快速发展,基因表达调控的转基因研究已逐渐开展。本文在下列几方面介绍了转基因动物技术在基因表达调控中的应用。转基因动物可作为在体内研究外源基因表达调控的“反应器”,例如研究酶对底物作用的种属特异性。可以精确研究ＤＮＡ顺式作用序列,探讨包括改变基因表达在内的组织和阶段特异性表达,增强子、内含子和核基质附着区的调节作用以及各基因间相互作用。转基因动物可研究发育中的时、空调节（如     

利用转基因猪生产人血清白蛋白

人血清白蛋白 (HSA)是人血浆中重要组成部分 ,它在肝脏中合成进入血液 ,可运输脂类物质、维持血浆渗透压和增强机体免疫力。这在医学临床上广泛应用于治疗失血、创伤、癌症所引起的休克、水肿和低蛋白血症等病。但是目前医疗中所用的HSA由人血中提取。这种人血资源也极为有限 ,且有的还含有各种不同的病原污染 ,不能广泛地取材。为扩大HSA的来源 ,湖北省农科院生物技术研究所郑新民、华文君、肖作焕等研究人员利用转基因猪生产HSA已基本获得成功。他们用含猪血清白蛋白测翼序列的微小人血清白蛋白基因、用显微注射法导入猪的基因组中 ,…     

转基因油菜研究进展

转基因油菜研究进展周延清（河南师范大学生物学系４５３００２）１９８３年,Ｈｅｒｒｅｒａ等首次把细菌的抗卡那霉素基因插入植物细胞核基因组中,并旦成功地表达,从而诞生了第一株含有合成蛋白质外源基因的植物,为植物基因工程带来了广阔前景。由于植物基因工程与植...     

猪生长激素基因表达质粒的构建及其转基因动物研究

将猪生长激素基因（ＰＧＨ）克隆到质粒ｐＵＣ１９上,经酶切分析,确定其酶切图谱。把ＰＧＨ转录起始位点以前的序列切掉,换上羊ＭＴ－１ａ基因的启动子,构建成可以调控的表达载体ｐＳＭＴＰＧＨ,用于转基因动物的研究。采用微注射法将线状ｐＳＭＴＰＧＨ导入猪、鼠和金鱼的受精卵中,得到了相应的转基因动物。对这些动物鉴定分析表明,外源基因整合率因动物不同而异,但该基因在这３种动物中的整合率均在９％以上,其生长速度都     

以精子为载体的体外转基因猪胚胎研究

去精清精子与外源DNA共孵育,使其携带外源DNA,再与成熟卵母细胞进行体外受精,生产转基因猪胚胎,为通过胚胎移植生产转基因猪奠定基础。结果:通过PCR从不同时期胚胎中检测出携带外源DNA的阳性胚,说明精子与外源DNA共孵育能使精子携带外源DNA,并通过体外受精技术使外源DNA进入早期胚胎。     

带有猪生长激素基因的转基因鼠

为研究外源基因在转基因动物中的整合及表达调控的机制,我们首先进行了转基因鼠的研究。(a)外源基因片段的制备:把羊金属硫蛋白启动基因(SMT)和猪生长激素基因(PGH)与载体质粒pUC19相连接,构建成psMTPGH表达质粒。用BglI全酶切和     

转基因猪体内外源基因的整合鉴定

外源猪生长激素基因被导入湖北白猪．为避免羊、猪之间在金属硫蛋白启动上的同源性而造成PCR检测结果的假阳性,分别将PCR合成反应的两个引物设计在羊金属硫蛋白基因启动子一侧和猪生长激素一侧,使PCR合成反应的结果特异地反映外源基因的整合性,准确地鉴定出转基因猪．DNA印迹分析结果表明,43头待检仔猪中有6头呈外源基因整合阳性．