卵巢激素对肺泡巨噬细胞趋化活性的影响

为探讨卵巢激素对非性器官肺脏的防御功能有无影响,本研究以肺泡巨噬细胞（ＡＭ）趋化活性为指标,观察了卵巢激素对成年雄性大鼠离体ＡＭ的趋化活性的作用。结果显示：不同浓度的酵母多糖激活血清与ＡＭ在体外培养３．５ｈ,对ＡＭ趋化性有良好的线性关系。雌二醇能抑制ＡＭ的趋化活性,量效关系显著（ｒ＝－０．９２８０,Ｐ＜０．０１）;而孕酮则促进ＡＭ的趋化活性,亦具有剂量依从性（ｒ＝０．９９７５,Ｐ＜０．０１）。提示：卵巢激素除参与性器官功能的调节外,对于非性器官肺脏的防御功能亦具有一定的调控作用。     

卵巢激素对肺泡巨洚细胞趋化活性的影响

为探讨卵巢激素对非性器官肺脏的防御功能有无影响,本研究以肺泡巨噬细胞（ＡＭ）趋化活必来指标,观察了卵巢激素对成年雄性大鼠离体ＡＭ趋化活性的作用。结果显示：不良浓度的酵母多糖激活血清与ＡＭ在体外培养３．５ｈ,对ＡＭ趋化性有良好的线性关系。雌二醇能抑制ＡＭ的趋化活性,量效关系显著（ｒ＝－０．９２８０,Ｐ＜０．０１）;而孕酮则促进ＡＭ的趋化活性,亦具有剂量依从性（ｒ＝０．９９７５,Ｐ＜０．０１）．ｒｊｆ     

前列腺素对肺泡巨噬细胞分泌白细胞介素－8的调控

本实验在经血清调理酵母聚糖激活的大鼠肺泡巨噬细胞（ＡＭ）体外培养４ｈ后,检测其上清液中的ＰＧｓ含量。消炎痛预处理使激活的ＡＭ的释放的ＰＧＥ１、Ｅ２、Ｆ２ａ量显著减少,Ｅ２／Ｅ１和Ｅ２／Ｆ２ａ比值降低;而细胞松弛素Ｂ预处理ＡＭ则可使上述ＰＧｓ的含量显著增加。以中性粒细胞趋化指数来反映ＩＬ－８的活性,表明消炎痛预处理ＡＭ组的ＩＬ－８的分泌量显著减少,而细胞松弛素Ｂ预处理ＡＭ组的ＩＬ－８分泌量显著增多。ＡＭ的ＰＧｓ释放量与其ＩＬ－８分泌量呈平行的变化关系,说明内源性ＰＧｓ在ＡＭ的分泌ＩＬ－８的活动中起着调控作用。     

表皮生长因子对肺泡巨噬细胞趋化性的调控

采用测定趋化性的方法,观察了表皮生长因子（ＥＧＦ）和纤维连接蛋白（ＦＮ）对肺泡巨噬细胞（ＡＭ）趋化运动的影响。结果显示,ＥＧＦ能抑制ＡＭ的趋化性,量效关系显著（ｒ＝－０．９９１０,Ｐ＜０．０１）,而ＥＧＦ本身对ＡＭ并不表现趋化吸引作用。ＦＮ亦能抑制ＡＭ的趋化性（Ｐ＜０．０１）,ＥＧＦ和ＦＮ两者协同作用时,对ＡＭ趋化性的抑制程度大于各自的单独作用（Ｐ＜０．０１）。实验证明ＥＧＦ具有调节ＡＭ趋化运动的非促丝裂功能。提示肺内的细胞因子ＥＧＦ和细胞外基质成分ＦＮ参与肺部炎症及免疫反应的调控。     

性激素对肺泡巨噬细胞溶菌酶分泌的影响

目的：探讨肺泡巨噬细胞（AM）的功能及调控机制。方法：采用电泳法观察大鼠AM分泌的溶菌酶活性及雄酮、雌二醇对其分泌的影响。结果：雄酮、雌二醇对大鼠AM溶菌酶有显著促进作用（P＜0．01）,吲哚美辛能降低雄酮及雌二醇的这种作用。提示性腺功能的衰退、性激素水平的降低可能是机体免疫功能下降,易患某些感染性疾病的机理之一。结论：性激素有促进AM分泌溶菌酶的作用,其作用与前列腺素的合成有关。     

大鼠肺泡巨噬细胞的前列腺素分泌

肺泡巨噬细胞(AM)除有吞噬、溶菌等防御功能外,还参与许多调节活动,如抑制肺纤维化,免疫调控,气道阻力调节等。近年来注意到AM这些功能的发挥与前列腺素(PG)有关。本研究拟观察大鼠AM分泌某些PG的动态变化及其特点,以期为探讨AM的功能提供参考。 1 材料和方法 1.1 AM培养上清液制备 健康Wistar大鼠,体重150g左右,雌雄不拘。洗肺法收集AM,台盼蓝排斥法计数存活率在92％以上,分类计数AM纯度     

RNA干扰技术抑制BAG-1在大鼠肺泡巨噬细胞表达及恢复GR抗炎效应的研究

目的利用RNA干扰技术,建立脂多糖(LPS)和地塞米松(Dex)作用大鼠肺泡巨噬细胞BAG-1基因阻断模型,并阐明BAG-1表达对糖皮质激素受体(GR)抗炎活性的影响。方法构建两个针对BAG-1的RNAi质粒表达载体,分别命名为SiBAG-1α和SiBAG-1β,经测序确认后,转染大鼠肺泡巨噬细胞。细胞免疫组织化学法检测细胞核中BAG-1表达变化;电泳迁移率改变分析法(EMSA)检测GR活性变化。结果经测序证实:成功构建两个针对BAG-1基因的RNAi(RNA干扰)质粒表达载体SiBAG-1α和SiBAG-1β;转染质粒SiBAG-1α可明显降低胞核内BAG-1蛋白表达(P<0.05),而转染质粒SiBAG-1β对胞核内BAG-1蛋白表达无明显影响;质粒SiBAG-1α转染组细胞GR活性明显明显增强(P<0.05)。结论成功地构建并筛选出一个特异而高效地阻断BAG-1表达的质粒表达载体SiBAG-1α,抑制BAG-1表达可恢复GR抗炎活性,逆转GR活性下降所致的糖皮质激素抵抗。     

肺泡巨噬细胞对豚鼠气道平滑肌神经兴奋的影响

以调理酵母多糖（ＯＰＺ）激活的大鼠肺泡巨噬细胞（ＡＭ）上清液,作用于受电场刺激的豚鼠单个气管环平滑肌标本。结果显示,对气道平滑肌（ＡＳＭ）胆碱能神经兴奋有易化作用,其机理可能是ＡＭ释放前列腺素类物质（ＰＧｓ）促进了接头前膜ＡＣｈ的释放。ＡＭ上清液对肾上腺素能和非肾上腺素能抑制神经活动没有明显影响,但使ＡＳＭ舒张恢复５０％时程（ＲＴ１／２）缩短,提示在病理情况下ＡＭ大量激活时,可导致气道口径缩小、阻力增大;这可能在哮喘的发病中起一定作用。     

大鼠肺泡巨噬细胞的更新时间

在估算吸入放射性核索致肺巨噬细胞的剂量以及分析有害因子对它的损伤效应时,肺泡巨噬细胞的更新时间是重要的生物参数。本文用颈静脉点滴的方法给大鼠注入~3H-TdR,剂量为4.64×10~4Bq/g体重,在注入后1—41天期间分批活杀,用0.02％EDTA-PBS洗肺获取肺泡巨噬细胞,用放射自显影方法测定标记的肺泡巨噬细胞％。注入后1天标记细胞为5.1％,第5天达峰值8.4％,以后随时间延长,标记细胞％降低,到41天降至0.6％。标记细胞％与注入后时间之间的关系,可拟合二项指数函数,相关系数0.9990。56％的细胞更新一半的时间为0.9天,44％的细胞为14天。文内还就本实验得到的结果与国外报道的资料进行了比较与讨论。     

亲水性糖皮质激素衍生物对巨噬细胞呼吸爆发的影响

目的:观察糖皮质激素(GC)衍生物对巨噬细胞呼吸爆发的影响,并探讨GC对巨噬细胞呼吸爆发的非基因组作用机制.方法:合成亲水性和疏水性的系列GC衍生物,分离并培养腹腔巨噬细胞,应用细胞色素C还原法检测PMA刺激巨噬细胞生成超氧阴离子的能力.结果:获得了亲水性的GC衍生物氢化可的松-21-甘氨酸酯盐酸盐(HG)、氢化可的松-21-赖氨酸酯盐酸盐(HL)和疏水性的氢化可的松-21-苯丙氨酸酯盐酸盐(HP),HG和HL可显著促进PMA刺激巨噬细胞生成超氧阴离子,HP无显著作用.结论:GC快速增加PMA刺激的巨噬细胞超氧阴离子产生是通过非基因组机制实现的,这一作用与疏水性有关.     

氢化可的松对人白细胞趋化移动的抑制

应用改良的 Boyden 小室法发现人白细胞的随机移动和趋化移动(GhtM)呈明显的昼夜节律,0∶00移动最快,8∶00移动最慢,两者相差P<0.01。氢化可的松(F)对 GhtM 有明显的抑制作用,生理浓度 F10~(-9)—10~(-7)mol/L 之间,抑制效应呈剂量依赖性强,糖皮质激素受体(GR)的竞争性拮抗剂 RU38486可完全逆转这抑制效应。超过10~(-5)mol/L 以上的药理剂量F 对 GhtM 的抑制更为明显,这种抑制可部份地被 RU38486所逆转。本实验结果提示,糖皮质激素(GG)对白细胞功能存在着受体介导的生理调节,药理剂量 GG 对 ChtM 的明显抑制是这种激素抗炎机制之一,这种作用有可能部分地通过低亲和力 GC 特异结合部位所介导。     

肺泡巨噬细胞对豚鼠气道平滑肌张力的调控

经调理酵母多糖(OPZ)刺激的大鼠肺泡巨噬细胞培养上清液可松弛豚鼠离体气管肌条,上清液中PGE_1增加,表明PGE_1是肺泡巨噬细胞松弛气管肌条的介质之一。经OPZ激活的肺泡巨噬细胞培养上清液与豚鼠血小板作用后,其松弛效应被逆转为收缩效应,提示可能由于肺泡巨噬细胞分泌血小板活化因子激活血小板,使释放收缩介质所致。肺泡巨噬细胞借助所分泌的介质经常性地调节气道阻力,对肺通气具有保护意义。     

戴氏虫草抗紫外线及对巨噬细胞吞噬功能影响

采用孔雀绿比色法研究了戴氏虫草菌丝体水提物在体外对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响,同时采用紫外线辐射的方法测定了其对金黄色葡萄 球菌,大肠埃希氏菌,铜绿假单胞菌,枯草芽胞杆菌抗紫外线辐射的保护效应,其结果表明：戴氏虫草菌丝体水提物在较高浓度下能够抑制小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,但在较低浓度下却能拮抗氧化可的松对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的抑制,对金黄色葡萄球菌,大肠埃希氏菌,铜绿假单胞菌,枯草芽胞杆菌抗紫外线辐射具有一定的保护效应。     

磷脂酶A2对中性粒细胞趋化和粘附的影响

胰源性１４×１０￣３ｕ磷脂酶Ａ＿２（ＰＬＡ＿２）在体外同大鼠中性粒细胞（ＰＭＮ）培养６０ｍｉｎ后,细胞对ＴＮＦ趋化增强,培养１０ｍｉｎ后上清液中血栓素（ＴＸＢ＿２）含量比正常增高（Ｐ＜０．０１）。前列环素（ＰＧＩ＿２）含量不变。ＰＬＡ＿２激动剂Ａ２３１８７也能显著加强中性粒细胞对ＴＮＦ的趋化,并伴有ＴＸＢ＿２释放增多（Ｐ＜０．０１）。此外,ＰＬＡ＿２和Ａ２３１８７还显著增强ＰＭＮ对玻璃珠的粘附活性。使用ＰＬＡ＿２抑制剂二溴苯乙酮（ＰＢＰＢ）和ＰＬＡ＿２多克隆抗体可抑制外源性ＰＬＡ＿２对ＰＭＮ趋化和粘附的增强作用,但对Ａ２３１８７的调节作用无效。以上结果表明ＰＬＡ＿２激活及其代谢产物可能介导ＰＭＮ趋化和粘附作用。     

糖皮质激素受体的光亲和标记

利用[~3H]去炎松缩酮([~3H]TA)进行了糖皮质激素受体(GCR)的光亲和标记。[~3H]TA和GCR共价交联的证据有:(1)光照后,10％的三氯醋酸不能使[~3H]TA和GCR解离;(2)SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳时,有单一的放射活性峰;(3)用地塞米松保护后,GCR不被标记。采用本方法测定的GCR分子量为94000±3000 dalton,该方法可用于GCR分子量的测定、提纯和配基结合区的分析。     

大鼠脑突触质膜糖皮质激素受体样抗原的免疫电镜研究

本文利用ABC金标记法(受体-抗受体中的单克隆抗体-生物素化马抗鼠IgG-金标链霉亲和素),首次在电镜下观察到大鼠脑突触质膜的外表面存在有糖皮质激素受体样抗原,为神经细胞膜上可能存在有糖皮质激素受体提供了形态学依据。     

乳酸杆菌对小鼠腹腔巨噬细胞活化作用及细胞毒作用的初步研究

本文研究了乳酸杆菌对小鼠腹腔巨噬细胞（ＰＥＭ）的活化作用及其细胞毒作用。实验结果表明：腹腔注射乳酸杆菌后,ＰＥＭ体外细胞毒作用及体内细胞毒作用增强,酸性磷酸酶含量及非特异性酯酶含量增加、ＴＮＦ—α释放量增加。电镜显示：ＰＥＭ体积增大、伪足增多、线粒体、溶酶体等细胞器数量增多。本研究表明：乳酸杆菌具有较强的活化ＰＥＭ的作用。