小青龙汤、射干麻黄汤及其合方并用对大鼠哮喘模型血清IL-4/INF-γ影响的实验研究

目的:观察小青龙汤、射干麻黄汤及其合方并用对大鼠哮喘模型血清IL-4/INF-γ的影响。方法:将健康雄性SD大鼠共90只,随机分为6组。每组15只,采用卵蛋白致敏及激发的方法制作大鼠哮喘模型。用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组大鼠血清中IFN-γ和IL-4的浓度。结果:哮喘模型对照组血清中IFN-γ的含量明显低于正常对照组(P<0.05),而血清IL-4的含量明显高于前者(P<0.05),存在着严重的IFN-γ/IL-4比例的失衡;与哮喘模型对照组相比较,各药物治疗组均可不同程度的上调IFN-γ并下调血清IL-4的水平;这其中尤以合方并用组的作用最为显著。结论:小青龙汤及射干麻黄汤对哮喘动物模型的免疫失衡均有调节作用,二者合用其调节作用更为显著。     

黄芪桂枝五物汤对AA大鼠血清IL-1β、TNF-α的影响

目的:探讨佐剂性关节炎大鼠血清中IL-1β、TNF-α含量的变化和黄芪桂枝五物汤对其变化的影响,以求阐明该黄芪桂枝五物汤治疗类风湿性关节炎的作用机制。方法:选用健康SPF级SD雌性大鼠60只随机分为六组:空白对照组,模型组,甲氨喋呤(MTX)组,黄芪桂枝五物汤高剂量组,黄芪桂枝五物汤中剂量组和黄芪桂枝五物汤低剂量组。大鼠先进行一周的适应性饲养后用完全弗氏佐剂诱导制作大鼠佐剂性关节炎模型,并用黄芪桂枝五物汤进行干预。采用放射免疫法测定大鼠血清中IL-1β、TNF-α的含量。结果:与空白时照组相比,模型组大鼠血清中细胞因子IL-1β、TNF-α的水平明显升高(P<0.01);与模型组相比,经黄芪桂枝五物汤高、中剂量组、MTX组治疗干预后,大鼠血清中IL-1β、TNF-α的水平明显下降,且呈现一定的量效关系。结论:黄芪桂枝五物汤有抑制佐剂性关节炎大鼠血清中细胞因子IL-1β、TNF-α升高的作用。     

五虎汤对咳嗽变异性哮喘大鼠血清IL-33和TSLP水平的影响及机制研究

摘要 目的：探讨与研究五虎汤对咳嗽变异性哮喘大鼠血清白介素（Interleukin,IL）-33和胸腺基质淋巴细胞生成素（Thymic stromal lymphopoietin,TSLP）水平的影响及机制。方法：咳嗽变异性哮喘大鼠（n=48）随机平分为三组-模型组、孟鲁司特钠组与五虎汤组,模型组给予蒸馏水10 mL/(kg?d)灌胃,孟鲁司特钠组给予孟鲁司特钠10 mg/(kg?d)灌胃,五虎汤组给予五虎汤药液50 g/(kg?d)灌胃,1次/d,持续4周。结果：孟鲁司特钠组与五虎汤组治疗第2周、第4周的1min内桡鼻、打喷嚏次数少于模型组（P<0.05）,五虎汤少于孟鲁司特钠组(P<0.05)。孟鲁司特钠组与五虎汤组治疗第4周、第8周的白细胞计数及嗜酸性粒细胞百分率少于模型组,五虎汤少于孟鲁司特钠组（P<0.05）。孟鲁司特钠组与五虎汤组治疗第4周、第8周的血清IL-33、TSLP含量少于模型组（P<0.05）,五虎汤少于孟鲁司特钠组（P<0.05）。孟鲁司特钠组与五虎汤组治疗第4周、第8周的肺组织紧密连接蛋白-1（Zonula occludens-1,ZO-1）、钙粘附蛋白E（E-cadherin）蛋白相对表达水平高于模型组（P<0.05）,五虎汤组高于孟鲁司特钠组（P<0.05）。结论：五虎汤在咳嗽变异性哮喘大鼠的应用可能通过上调ZO-1、E-cadherin蛋白的表达,抑制血清IL-33和TSLP水平的表达,能促进缓解症状,降低白细胞计数及嗜酸性粒细胞百分率。     

COPD大鼠肺组织中Muc5ac和IL-13的相关性研究

目的:研究慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠气道粘蛋白Muc5ac和白介素13(IL-13)的表达及其相关性.方法:20只wistar雄性大鼠随机分为对照组和COPD组.正常组8只,COPD组12只,分别用免疫组化法测定肺组织Muc5ac和IL-13的表达.结果:Muc5ac和IL-13蛋白表达主要位于气道上皮细胞,细胞胞浆呈棕黄色.COPD组大鼠肺组织IL-13和Muc5ac的表达均高于正常组(P均＜0.05).结论:IL-13是引起粘液分泌的重要因子,它可能上调Muc5ac的表达.     

IL-10对哮喘小鼠血清IL-5和IgE的影响

目的:探讨IL-10治疗对哮喘鼠血清IL-5及IgE水平的影响.方法:制备20只小鼠哮喘模型,随机分为治疗组、哮喘组,前者使用IL-10治疗,后者未予治疗,用ELISA双抗体夹心法测定治疗组和哮喘组血清IL-5和IgE的水平.以10只健康小鼠为对照组.结果:与对照组比较,哮喘组IL-5和IgE水平较高,差异均有统计学意义(P＜0.05);经IL-10治疗后,治疗组的血清IL-5、IgE的水平明显低于哮喘组水平,其差异有统计学意义(P＜0.05);治疗组治疗后IL-5和和IgE检测值与正常组水平差异无统计学意义(p＞0.05).结论:IL-10能够降低哮喘小鼠血清的IL-5和IgE水平.     

IL-13在支气管哮喘中的作用机制及治疗靶位

支气管哮喘是由多种细胞包括气道炎性细胞、结构细胞和多种细胞组分参与的气道慢性炎症性疾病。其发病原因复杂,以反复发作的呼吸困难、气道的高反应性和慢性炎症为特点。细胞因子作为免疫活性细胞中的效应分子,具有的免疫调节作用,诸多学者认为白介素-13(interleukin-13,IL-13)在哮喘发病中扮演重要角色,其拮抗剂有望成为哮喘治疗的新方法,本文欲将IL-13的生物学功能、IL-13在支气管哮喘中的作用机制及干预治疗靶位加以综述,为制定哮喘防治策略、开发新治疗技术提供新思路。     

高体重指数支气管哮喘患者血清中IL-8、IL-10及INF-γ的研究及意义

目的:探讨高体重指数支气管哮喘患者血清中IL-8、IL-10及INF-γ的变化及临床意义。方法:选择高体重指数支气管哮喘患者(36例)、正常体重指数支气管哮喘患者(32例)以及健康人(32例),采用双抗体夹心ELISA法检测其急性发作期和缓解期血清中IL-8、IL-10和INF-γ的水平。结果:①高体重指数支气管哮喘组与正常体重指数支气管哮喘组急性发作期血清中IL-8水平显著高于缓解期以及对照组的水平(P<0.05)。②在缓解期,高体重指数支气管哮喘组血清中IL-8水平仍高于正常体重指数支气管哮喘组和对照组的水平(P<0.05)。③在急性发作期,高体重指数支气管哮喘组和正常体重指数支气管哮喘组血清中IL-10水平均显著低于其在缓解期及对照组的水平(P<0.05)。④三组间血清INF-γ水平在急性期与缓解期均无明显差异(P>0.05)。结论:血清中IL-8是高体重指数支气管哮喘患者发病过程中的重要炎症因子,并且始终参与其中。IL-10可能是支气管哮喘的抑炎因子,其缺乏可能是导致哮喘患者急性发作的因素之一。     

健脾渗湿汤对脾虚湿盛泄泻患者肠道微生态及舌部菌群影响的研究

目的观察中药健脾渗湿汤对脾虚湿盛泄泻的患者肠道微生态及舌象变化的影响。方法选取脾虚湿盛泄泻的患者90例及正常健康人30例为研究对象,90例患者随机分为健脾渗湿汤治疗组30例,双歧三联活菌制剂贝飞达治疗组30例,氟哌酸治疗组30例,30例正常健康人作为对照组;观察治疗前后的舌象等临床表现,测定粪便中4种肠道常驻菌及舌部菌群的变化情况。结果健脾渗湿汤组和贝飞达组总有效率明显高于氟哌酸组。90例脾虚湿盛泄泻的患者粪便中双歧杆菌比健康人明显减少(P<0.05),并且其舌部(腻苔)的菌群构成与健康人(薄白苔)差异有显著性。治疗后健脾渗湿汤组和贝飞达组粪便中双歧杆菌增加明显,白腻苔及舌部菌群改善明显,说明健脾渗湿汤和贝飞达均具有调整肠道菌群及舌部菌群平衡的作用。结论(1)健脾渗湿汤具有调整肠道菌群及舌部菌群失调的作用,治疗脾虚湿盛泄泻疗效显著。(2)健脾渗湿汤是一理想的微生态调节剂,可起到益生元的作用,与益生菌合用可达到合生元的效果;与抗生素合用,可起到边抗边调的作用,应用前景广阔。     

丁苯酞对哮喘小鼠气道黏液高分泌及IL-13、TNF-α的影响*

目的: 研究丁苯酞对哮喘小鼠气道黏液高分泌及白介素-13(IL-13)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法: 小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组和丁苯酞高、中、低剂量(100、50、25 mg/kg)组(n=12)。实验第1日、8日、15日通过注射卵清白蛋白(OVA)致敏,第22日吸入OVA连续激发5周复制哮喘模型,同时在激发前给予丁苯酞20 mg/kg进行干预,观测哮喘行为学、气道杯状细胞及黏蛋白5ac(Muc5ac)的分泌,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)粘度,采用ELISA法测定BALF中Muc5ac、IL-13及TNF-α的水平。结果: 与空白对照组比较,模型对照组小鼠打喷嚏、抓鼻及哮喘的程度显著加重(P＜0.01),小鼠气道上皮杯状细胞增生及Muc5ac的分泌显著增加(P＜0.01),BALF的粘度及其中的Muc5ac、IL-13和TNF-α的含量显著升高(P＜0.01);与模型对照组比较,25、50、100 mg/kg丁苯酞干预后哮喘行为学评分明显下降(P＜0.01);小鼠气道上皮杯状细胞增生、Muc5ac的分泌、BALF的粘度及其中的Muc5ac、IL-13和TNF-α的含量均明显降低(P＜0.05, 0.01)。结论: 丁苯酞具有抑制哮喘气道黏液高分泌而平喘的作用,缓解IL-13、TNF-α异常高表达是其抑制气道黏液高分泌的作用机制之一。     

固本颗粒胶囊对大鼠COPD模型血清IL-8及TNF-α影响的实验研究

目的:根据COPD慢性气道炎症学说,探讨固本颗粒胶囊对COPD模型大鼠血清中相关细胞因子的影响,从而阐明其防治COPD的作用机理,为固本颗粒胶囊的临床应用提供实验依据.方法:将50只Wistar大鼠随机分成正常对照组、模型对照组、强的松组、固本颗粒胶囊低剂量组、固本颗粒胶囊高剂量组,每组10只,以烟熏及气管内滴注脂多糖的方式建立大鼠COPD模型,予相应药物干预,观察记录大鼠一般状况,至实验结束,酶联免疫吸附法检测大鼠血清中相关细胞因子(IL-8、TNF-α)的含量.相关实验数据用SPSS10.0统计软件进行统计学处理.结果:大鼠一般状况及组织病理学改变提示COPD模型复制成功,与正常对照组比较,模型对照组大鼠血清中相关细胞因子(IL-8、TNF-α)的含量水平失衡.在改善COPD模型大鼠的一般状况、病理学改变及细胞因子含量比例失衡的作用结果来看,各治疗组与模型对照组均有显著差异(P＜0.05).综合比较,强的松组治疗作用最为显著,固本颗粒高剂量次之,固本颗粒低剂量组作用最弱.结论:①.固本颗粒胶囊能有效缓解COPD模型大鼠临床表现及气道炎症,其作用机制在于:能纠正COPD大鼠体内细胞因子水平失衡;②.上述作用,具有一定的量效关系,即随着给药剂量的增加有加强趋势.     

地塞米松对哮喘豚鼠血清白细胞介素-4 变化及肺组织形态的影响

目的:观察地塞米松对哮喘豚鼠血清白细胞介素-4(IL-4)及肺组织形态的影响,探讨糖皮质激素治疗哮喘的机制。方法:30只健康雄性Hartley系豚鼠随机分为空白对照组,病理模型组,地塞米松组。用卵白蛋白(OVA)复制哮喘豚鼠模型。采用流式细胞术分析CD4+interleukin-4(IL-4)细胞占CD4+T细胞的比例,光镜检查肺组织形态变化。结果:病理模型组外周血中IL-4明显高于空白对照组(P<0.05),地塞米松组外周血中IL-4较病理模型组明显降低(P<0.05),且地塞米松组支气管上皮损伤,粘液腺增生等病理改变较病理模型组明显改善。结论:地塞米松治疗哮喘的作用与抑制Th2的活化,改善支气管上皮损伤,粘液腺增生等病理改变有关。     

茵陈蒿汤加减方对哮喘大鼠模型气道TGF-beta1 的干预作用

目的:探讨茵陈蒿汤加减方对哮喘气道转化生长因子-β1(TGF-β1)的干预机制。方法:制备大鼠哮喘模型,模型动物随机分为四个组:模型组、西药(地塞米松)组、中药组,空白对照组,每组10只大鼠。从第17天起开始给予相应药液灌胃,西药组给予地塞米松1 g/kg,中药组给予茵陈蒿汤加减方配方颗粒溶液(浓度0.5 g/m L)5 m L/kg,每日1次。空白对照组和模型组分别以等量的生理盐水灌胃,每周按照大鼠体重调整1次。连续给药干预4周,检测血清中TGF-β1含量并进行比较分析。结果:中药组与西药组均可降低TGF-β1的含量,与模型组比较有显著性差异(P<0.01),中药组与西药组效果相当(P>0.05)。结论:茵陈蒿汤加减方能通过有效地减低大鼠血清中TGF-β1的含量,从而阻断气道重塑的发生,达到预防和缓解哮喘的治疗目的。     

Bronchial epithelial cells produce IL-5: Implications for local immune responses in the airways

IL-5 is a pleiotropic cytokine that promotes eosinophil differentiation and survival. While naïve bronchial epithelial cells (BEC) produce low levels of IL-5, the role of BEC-derived IL-5 in allergic airway inflammation is unknown. We now show that BEC, isolated from mice with OVA-induced allergic airway disease (AAD), produced elevated levels of IL-5 mRNA and protein as compared to BEC from naïve mice. To determine the contribution of BEC-derived IL-5 to effector responses in the airways, IL-5 deficient bone marrow chimeric mice were generated in which IL-5 expression was restricted to stromal (e.g. BEC) or hematopoietic cells. When subjected to AAD, IL-5 produced by BECs contributed to mucous metaplasia, airway eosinophilia, and OVA-specific IgA levels. Thus, IL-5 production by BEC can impact the microenvironment of the lung, modifying pathologic and protective immune responses in the airways.     

5%环孢菌素霜对银屑病合并代谢综合征患者血清IL-17 及IL-18 水平的 影响

目的:探讨5%环孢菌素霜对银屑病合并代谢综合征患者外周血IL-17、IL-18水平及PASI评分的影响。方法:选择我院收治的寻常型银屑病合并代谢综合症患者68例,分为实验组和对照组。对照组予以复方甘草酸苷和卡泊三醇治疗,实验组在此基础上加用制备好的5%环孢菌素霜,观察并比较两组患者治疗前后外周血IL-17及IL-18水平的变化情况以及血压、空腹血糖、血脂及PASI评分结果。结果:与治疗前比较,两组患者治疗后IL-17及IL-18水平、血压、FPG、TG及PASI评分均显著降低,而HDL-C明显升高,差异均具有统计学意义(P0.05);与对照组比较,实验组治疗后IL-17及IL-18水平、血压、FPG、TG及PASI评分较低,而HDL-C较高,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论:5%环孢菌素霜辅助治疗可调节银屑病合并代谢综合征患者外周血IL-17、IL-18水平,降低其PASI评分,改善患者机体代谢紊乱状态,对银屑病合并代谢综合症有显著临床疗效。     

IL-13对小鼠AGR2表达的影响及其在哮喘气道黏液过度分泌中的作用

目的研究白细胞介素-13(IL-13)对AGR2mRNA和蛋白在哮喘小鼠肺组织中表达的影响,探讨AGR2在哮喘气道黏液过度分泌中的作用。方法 18只雌性小鼠随机分为哮喘组、对照组和IL-13组,IL-13组于26d-28d激发前经鼻滴入100μg重组小鼠IL-13。收集支气管肺泡灌洗液(BALF)计嗜酸性细胞分类计数。Real time-PCR方法检测肺组织AGR2mRNA表达。免疫组化法分别检测AGR2蛋白和Muc5ac蛋白在小鼠肺组织的表达。结果哮喘组BALF中嗜酸性细胞分类计数(19.1±6.34)%较正常组(0.28±0.29)%明显增多(P<0.01);IL-13组BALF中嗜酸性细胞分类计数(30.05±9.32)%较哮喘组明显升高(P<0.01)。IL-13组小鼠肺组织中AGR2mRNA(1.702±0.046)和蛋白(0.617±0.028)的表达较哮喘组(1.52±0.071,P<0.01;0.505±0.078,P<0.05)升高,IL-13组AGR2mRNA与Muc5ac蛋白的表达水平呈直线正相关(r=0.862,P<0.05);AGR2蛋白与Muc5ac蛋白水平呈直线正相关(r=0.847,P<0.05)。结论 AGR2可能参与了哮喘气道黏液过度分泌发病机制,IL-13可通过上调其表达,进一步促进黏蛋白Muc5ac表达。     

氧化苦参碱对哮喘大鼠肺组织IL-10 表达的影响

目的:观察不同浓度氧化苦参碱(Oxymatrinem,Oxy)对哮喘大鼠肺组织IL~(-1)0表达的影响,并探讨其作用机制。方法:构建哮喘大鼠模型,将40只清洁级健康雌性SD大鼠随机分成5组,每组8只:A:哮喘组(仅卵蛋白(Ovalbumin,OVA)致敏)、B:低浓度组(Oxy 50 mg/kg)、C:中浓度组(Oxy 100 mg/kg)、D:高浓度组(Oxy 150 mg/kg)、E:对照组(生理盐水),末次激发24 h后处死全部大鼠,取大鼠肺脏,HE染色观察肺组织病理改变,采用RT-PCR、Western Blot测定各组肺组织中IL~(-1)0基因及蛋白水平的表达。结果:HE结果显示,哮喘组可见大量炎症细胞浸润,气管平滑肌明显增厚。对照组肺泡壁薄且光滑,未见明显炎性细胞的浸润,不同浓度氧化苦参碱药物干预组其肺组织炎症细胞浸润及气管平滑肌病变程度随着用药浓度的增高呈逐渐减轻趋势。RT-PCR以及Western blot检测IL~(-1)0发现,哮喘组、氧化苦参碱低浓度组、氧化苦参碱中浓度组与对照组相比IL~(-1)0的表达均有所减低(P0.05),而氧化苦参碱高浓度组与对照组比较,IL~(-1)0的表达无统计学意义(P0.05);氧化苦参碱中浓度组、氧化苦参碱高浓度组与哮喘组相比IL~(-1)0的表达均有所增高(P0.05),氧化苦参碱低浓度组与哮喘组相比IL~(-1)0的表达无统计学意义(P0.05)。结论:氧化苦参碱抑制、控制哮喘发作可能与促进肺组织中IL~(-1)0基因、蛋白的表达相关,且促进程度在一定范围内与浓度呈正比。     

γ-干扰素对哮喘血清炎症因子及MUC5ac表达的影响分析

为了解析γ-干扰素对哮喘的治疗效果,及对血清炎症因子和MUC5ac表达情况的影响,本研究选取2016年2月至2017年2月在我院接受治疗的哮喘患者为研究对象,根据治疗方式分为对照组和观察组,对照组给予孟鲁司特等常规药物治疗,观察组在此基础上给予γ-干扰素治疗。观察两组患者的治疗效果,比较两组患者治疗前后炎症因子、肺功能和MUC5ac表达水平的差异。研究显示,观察组患者治疗的有效率(97.50%)显著高于对照组(85.00%);两组患者治疗前的炎症因子水平无差异,治疗后,观察组IL-8、IL-17、hs-CRP和TNF-α水平低于对照组;两组患者治疗前的肺功能指标无差异,治疗后,观察组6MWT、FVC、MMEF和PEF水平高于对照组;两组患者治疗前的MUC5ac水平无差异,治疗后,观察组MUC5ac水平低于对照组。本研究表明,哮喘患者采用γ-干扰素进行治疗的效果显著,可有效降低炎症因子及MUC5ac水平,应用价值良好。     

IL-13 is associated with reduced illness and replication in primary respiratory syncytial virus infection in the mouse

The role of IL-13 in respiratory syncytial virus (RSV) immunopathogenesis is incompletely described. To assess the effect of IL-13 on primary RSV infection, transgenic mice which either overexpress IL-13 in the lung (IL-13 OE) or non-transgenic littermates (IL-13 NT) were challenged intranasally with RSV. IL-13 OE mice had significantly decreased peak viral titers four days after infection compared to non-transgenic littermates. In addition, IL-13 OE mice had significantly lower RSV-induced weight loss and reduced lung IFN-gamma protein expression compared with IL-13 NT mice. In contrast, primary RSV challenge of IL-13 deficient mice resulted in a small, but statistically significant increase in viral titers on day four after infection, no difference in RSV-induced weight loss compared to wild type mice, and augmented IFN-gamma production on day 6 after infection. In STAT1-deficient (STAT1 KO) mice, where primary RSV challenge produced high levels of IL-13 production in the lungs, treatment with an IL-13 neutralizing protein resulted in greater peak viral titers both four and six days after RSV and greater RSV-induced weight loss compared to mice treated with a control protein. These results suggest that IL-13 modulates illness from RSV-infection.     

Accelerated regeneration of the skeletal muscle in RNF13-knockout mice is mediated by macrophage-secreted IL-4/IL-6

RING finger protein 13 (RNF13) is a newly identified E3 ligase reported to be functionally significant in the regulation of cancer development, muscle cell growth, and neuronal development. In this study, the function of RNF13 in cardiotoxin-induced skeletal muscle regeneration was investigated using RNF13-knockout mice. RNF13^-/- mice exhibited enhanced muscle regeneration —characterized by accelerated satellite cell proliferation —compared with wild-type mice. The expression of RNF13 was remarkably induced in macrophages rather than in the satellite cells of wild-type mice at the very early stage of muscle damage. This result indicated that inflammatory cells are important in RNF13-mediated satellite cell functions. The cytokine levels in skeletal muscles were further analyzed and showed that RNF13^-/- mice produced greater amounts of various cytokines than wild-type mice. Among these, IL-4 and IL-6 levels significantly increased in RNF13^-/- mice. The accelerated muscle regeneration phenotype was abrogated by inhibiting IL-4/IL-6 action in RNF13^-/- mice with blocking antibodies. These results indicate that RNF13 deficiency promotes skeletal muscle regeneration via the effects on satellite cell niche mediated by IL-4 and IL-6.