棉铃虫的谷胱甘肽S-转移酶(GSTs):杀虫药剂和植物次生性物质的诱导与GSTs对杀虫药剂的代谢

棉铃虫Helicoverpaarmigera（Hubner）中肠谷胱甘肽S-转移酶（GSTs）对甲基对硫磷和灭多威的代谢能力明显高于对马来酸二乙酯（DEM）和两个混剂。LD5剂量的对硫磷和灭多威对棉铃虫3龄幼虫GSTs的活性均没有诱导增加的影响,用LD50的选择剂量仅对硫磷组GSTs活性增加15％。用含0．01％的芸香苷、2-十三烷酮和槲皮素的人工饲料饲养棉铃虫经1～4代后,GSTs活性提高4～18倍。3种植物次生性物质诱导组对灭多威和溴氰菊酯的敏感度均没有明显的变化,而槲皮素组对甲基对硫磷的敏感度则降低近一半,芸香苷和2-十三烷酮组对甲基对硫磷的敏感度略有降低。这种对甲基对硫磷敏感度的变化可能与上述GSTs活性的变化有关。     

棉铃虫的谷胱甘肽S—转移酶(GSTs)：杀虫药剂和植物次生性物质的诱导与GSTs对杀虫药剂的代谢

棉铃虫Helicoverpa armigera(Hubner)中肠谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)对甲基对硫磷和灭多威的代谢能力明显高于对马来酸二乙酯(DEM)和两个混剂。LD₅剂量的对硫磷和灭多威对棉铃虫3龄幼虫GSTs的活性均没有诱导增加的影响,用LD₅₀的选择剂量仅对硫磷组GSTs活性增加15%。用含0.01%的芸香苷、2-十三烷酮和槲皮素的人工饲料饲养棉铃虫经1～4代后,GSTs活性提高4～18倍。3种植物次生性物质诱导组对灭多威和溴氰菊酯的敏感度均没有明显的变化,而槲皮素组对甲基对硫磷的敏感度则降低近一半,芸香苷和2-十三烷酮组对甲基对硫磷的敏感度略有降低。这种对甲基对硫磷敏感度的变化可能与上述GSTs活性的变化有关。     

甲基对硫磷水解酶的重组表达及其纯化和性质研究

用PCR方法获得甲基对硫磷水解酶编码基因,构建了重组表达质粒pET29a_mpd,将其转化至Escherichia coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,得到C末端含有6个寡聚组氨酸的甲基对硫磷水解酶,用NiNTA亲和层析纯化得到具有活性的甲基对硫磷水解酶。测定了环境因素对酶活性的影响及酶动力学参数。甲基对硫磷水解酶水解甲基对硫磷时,最适pH86～8.8,最佳反应温度15℃;Mn2+、Zn2+、Cu2+可使酶活性增加15%～20%,Ca2+、Mg2+微弱地促进酶的作用,Ni2+对酶活性几乎无影响;1mmol/L EDTA·Na2+几乎不影响酶的活性,而10mmol/L EDTA·Na2+对甲基对硫磷水解酶有较强的抑制作用。甲基对硫磷水解酶水解乙基对硫磷时,最适pH86。25℃时,该酶对甲基对硫磷的米氏常数Km为（68.6 ± 5.1）μmol/L,kcat为（45 ± 6 ）S-1;对乙基对硫磷的米氏常数Km为（59.5 ± 6.0）μmol/L,kcat为（8 ± 1） S-1。Kcat/Km表明甲基对硫磷水解酶对甲基对硫磷的催化效率更高。     

拟恶性叶甲的药剂防治试验

拟恶性叶甲(Podagricomela weisei Heikertgr)是宜昌地区的柑桔重要害虫。1965年我们在黄陵庙进行了大面积药剂防治试验,结果如下: 50％乐果乳剂和50％对硫磷乳剂的2000倍稀释液,防治效果均在90％以上,6％可湿性666的250     

甲基对硫磷水解酶基因的高效表达及酶活性分析

假单胞菌WBC 3的甲基对硫磷水解酶基因mph在大肠杆菌系统AD494(DE3) pET32a ( + )中实现了高效可溶性融合表达。表达的重组酶能够有效地被亲合层析纯化。酶学性质分析表明 ,重组酶对底物乙基对硫磷水解能力较野生酶相比有近 4倍的提高 ,对甲基对硫磷和杀螟松的水解活力无明显变化。以融合蛋白形式存在的重组酶在室温及 4℃下的贮存稳定性明显优于野生型酶。     

有机磷农药在水生态系中生物净化机理研究 4. Pseudomonas sp. CTP-01 的对硫磷水解酶诱导合成性质

Pseudomonas sp.CTP-01的对硫磷水解酶具有底物诱导合成性质。停滞生长期的细胞接触底物半小时即产生相应酶的合成,而指数生长期的细胞接触底物48小时后才发生酶的合成。甲基对硫磷及对硝基酚也具有诱导作用,可见合成对硫磷水解酶的诱导特异基团可能与对硝基酚及其苯环上的取代基有密切关系。       

山楂红蜘蛛防治研究——Ⅰ.对有机磷杀螨剂的抗药性测定

本文是1964年对山楂红蜘蛛(Tetranychus vienuensis Zacher)抗药性测定的结果。本工作是在1962及1963年工作基础上进行的。结果证明河北省部分果园的山楂红蜘蛛对内吸磷和对硫磷产生了抗药性,而且对从未用过的乐果、乙硫磷、三硫磷等几种有机磷杀螨剂亦产生了抗药性。 对于内吸磷和对硫磷的抗性强度与使用药剂的次数呈正相关。防治抗性种群雌成螨的其他有效药剂为杀螨酯和石硫合剂等,防治抗性卵则以三氯杀螨砜和石硫合剂较有效。对感性种群雌成螨仍以内吸磷和对硫磷的效果为最佳,石硫合剂也较好。     

对硫磷真菌降解酶的分离纯化和性质

黑曲霉AspergillusnigerY－8在液体培养基中30℃培养5d,其菌体用超声波破碎后,经硫酸铵沉淀、DEAE-纤维素层析、Sephadex－100凝胶过滤,得到凝胶电泳均一的对硫磷降解酶,其比活为6.94,提纯倍数为13.6倍,收率为17．4％。酶作用的最适温度是50℃,最适pH为7.5,在40℃以下和pH6.0～9.0之间稳定,此酶为单亚基蛋白,凝胶过滤法测得分子量为42000,含糖14.6％,SDS、Hg2+、Ag+、Fe3+对酶有强烈的抑制作用,金属螫合剂EDTA对酶活无影响。此酶对甲基对硫磷、敌敌畏、亚胺硫磷也有较好的降解作用,当以对硫磷为底物时,Km为0.43mmol／L,Vmax为1.24μmol·mg-1·min-1。     

七氯处理种子防治地下害虫试验示范简报

近年来,华北一些地区大量使用对硫磷乳剂处理小麦、旱粮等种子以防治蝼蛄为害,获得了良好防治效果,但对硫磷对高等动物毒性大,为此,生产上迫切要求寻求高效、价廉而又使用安全的药剂,以代替对硫磷来防治地下害虫。 通过三年来的试验,我们初步明确了七氯是防治蝼蛄及其他地下害虫的良好药剂,并在不同地区进行了试验示范工作。本文是将部分研究结果简要报导,以供农业生产应用的参考。 室内毒力测定和防治初步试验 在试验中曾以华北蝼蛄进行几种杀虫剂的毒力测定,以求获得较好的种子处理药剂,其中发现七氯对华     

美人蕉对水体三唑磷降解作用研究

三唑磷(O,O-二乙基-O-(1-苯基-1,2,4-三唑-3-基)硫代磷酸酯, C12H1 6N3O3PS,TAP)是一种有机磷杀虫剂,由于其具有较高的杀虫活性、低残留等特点,逐步取代甲胺磷、对硫磷、甲基对硫磷等高毒农药,成为我国使用较多的新型农药品种.     

对防治棉铃虫常用药剂的应用研究

目前棉铃虫的防治仍以化学防治为主,如何选择好对口药剂并科学使用,是控制棉铃虫的关键。为了对防治棉铃虫常用药剂的药效有较全面了解,以便更合理地使用,我们进行了以下试验,现将结果报道如下。工材料和方法1．1材料供试药剂20％灭多威（济宁化工实验厂）;50％甲胺磷（安徽宁国农药化工厂）;20％杀灭菊酯（上海中西药厂）;35％硫丹（德国赫斯特公司）;40％久效磷（青岛农药厂）;5O％甲基对硫磷（宁阳农药厂）;50％辛硫磷（临沂农药厂）;75％拉维因（法国罗纳普朗克公司）;40％丙溴磷（招远第一化工厂）;50％水胺硫磷（青岛第…     

几种常用杀虫剂对蚜虫天敌——瓢虫的影响

作者等就11种常用杀虫剂对蚜虫的重要天敌——瓢虫进行了毒性测定,观察了它们对瓢虫的各个虫态的影响。 供试药剂 20％乐果乳剂、50％敌敌畏乳剂、50％对硫磷乳剂、50％内吸磷乳剂、25％三硫磷乳剂、50％杀螟硫磷乳剂、50％磷胺液剂、20％酚开普敦乳剂、6％丙体六六六乳剂、6％丙体六六六可湿性粉(W、P)、2.5％鱼籐精乳剂。 供试瓢虫 异色瓢虫Leis axyridis,室内饲养;龟纹瓢虫Propylaea japonica,田间采回。     

一株甲基对硫磷降解菌-布朗克假丝酵母JMUPMD-1的分离与鉴定

对一株新分离的、能以甲基对硫磷为唯一磷源生长的菌株JMUPMD-1,利用形态特征观察和生理生化特性,及结合rDNA ITS分子序列分析对JMUPMD-1进行鉴定;采用气相色谱法检测培养过程中甲基对硫磷浓度的变化,确定甲基对硫磷降解速率。该菌株的rDNA ITS序列与布朗克假丝酵母（Candida blankii）的同源性为99％。形态特征和生理生化特性与布朗克假丝酵母相符合,因此鉴定为布朗克假丝酵母。以350μg／L甲基对硫磷为唯一磷源和350μg／L甲基对硫磷及1g／L K2HPO4组成的混合磷源培养该菌株,测得该菌株的降解率为48．6％。该菌株的胞内提取液具有明显的甲基对硫磷降解酶活性。     

三化螟对丙体666、对硫磷及杀螟松的抗药性研究

三化螟(Tryporyza incertulas Walker)为我国水稻的主要害虫之一。解放后党和政府对治螟工作极为重视,有机杀虫剂的大量合成和施用,为保证水稻稳产高产起了重大作用。上海地区1958年左右开始大面积使用666可湿性粉剂(含丙体6％)防治三化螟,每亩用量为1.5—2.0斤,效果很好。但到1966年普遍反映效果大大减退。以金山县山阳公社为例,在1969年每亩用药量达4斤,效果仅为59.57％。于是1966年后各县相继改用对硫磷乳剂和对硫磷-666混合粉来防冶三化螟。对硫磷虽然是一种高效杀虫剂,但对     

黄河故道地区顶梢卷叶虫生活史及其防治初步研究

顶梢卷叶虫(Spilonota lechriaspis Mey.)是我国苹果产区普遍发生的害虫,在河南、江苏、安徽等省黄河故道砂荒地区新发展的果园中,为害相当严重,无论结果树、幼树、苗木均遭害,尤以幼树受害最重。1959年仪封园艺场的苹果幼树,春梢受害一般在50％左右,秋梢则达90％以上。此虫还为害海棠、沙果、梨和杜梨等。它主要为害果树新梢,把顶梢卷成一团,并取食卷梢上的嫩叶和幼芽,因此,对幼树的树冠形成、提早结果和对苗木的快速生长、提早出圃,都能造成不良影响。 作者于1959年在河南兰考地区,对此虫进行了初步研究,本文着重报导该虫在这一苹果栽培新区的生活史、习性;对现行人工防治措施的效果签定,并通过药剂试验明确了对硫磷、敌百虫、DDT等药剂为该虫的有效药剂,同时对其防治上的问题也进行了分析讨     

农药对农田生态系统的影响(2)

上文概述了杀虫剂对各种动物、植物及微生物的影响,下面分别就各种农田生态系统中的情况再简述一下。1.水稻田水稻田受到的最大影响就是害虫天敌的死亡(包括大量的蜘蛛),从而导致害虫的更大发生,如稻飞虱。在禁用DDT及六六六后,施用有机磷(久效磷、对硫磷、甲基对硫磷、毒死蜱等)仍然有不良影响。其次是动物相的改变(Kobayashi,1978), 直翅目及蜻蜓目受影响最大,蜘蛛次之,膜翅目受影响最小。2.谷物地谷物地受影响最大的也是昆虫,主要为步鉀。隐翅岬、虎岬等也受影响,     

四种杀虫剂对白纹伊蚊(Aedes albopictus)细胞株(C6/36)的细胞遗传学效应

本文研究了四种杀虫剂:敌敌畏乳剂,灭害灵,甲基对硫磷,叶蝉散对白纹伊蚊细胞株（C6/36）染色体畸变和姐妹染色单体互换（SCE）的影响。结果表明:0.1％和0.01％浓度的敌敌畏,可使（SCE）频率明显增加,而染色体畸变率只在0.1％浓度有显著增加;0.5％的灭害灵,可使SCE频率明显增加,而染色体畸变增加不明显;甲基对硫磷和叶蝉散的实验结果表明,无论是染色体畸变和SCE频率均没有明显增加。     

甲基对硫磷水解酶基因的克隆与融合表达

利用鸟枪法从甲基对硫磷降解菌DLL-1 Peudomonas putida）中克隆了甲基对硫磷水解酶基因(mpd)片段2．5kb,并进行了测序。通过软件分析开放阅读框和启动子序列,表明该序列中最可能为甲基对硫磷水解酶结构基因的阅读框为769—1794区域。软件分析还表明该水解酶前端45个氨基酸为典型的信号肽结构。通过PCR扩增了mpd结构基因,亚克隆到表达载体pET—32a中,构建了完整的融合表达载体pET—MP。转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG的诱导下2～4h甲基对硫磷水解酶表达可以达到最高水平;同时还研究了乳糖的诱导效果,2％乳糖诱导2h就可以起到很好的效果。通过PCR反应验证了mpd基因定位于DLL-E4的染色体而不是质粒上。     

内吸磷防治大豆蚜虫研究初报

大豆蚜(Aphis glycines M.)是我国北部大豆产区的主要害虫,目前在药剂防治上,应用666粉剂或液剂、对硫磷和烟草水等触杀药剂,都取导了一定的防治效果。但由于大豆蚜虫繁殖快,又多藏于卷曲叶片内,同时上述药剂的药效保持时间短,每次防治不可能消灭所有的蚜虫。施药后一部分未接触到药剂的蚜虫又迅速繁殖继续为害)需耍再次防治。在整个大豆生育期需喷撒2—3次药,才能控制危害。此时正值夏锄紧张时期,施药工具有限,水源不足,又兼后期防治时,豆株生长繁茂,施药不便,很难做到多次防治。 为了寻找高效残效期长的药剂,我所在1960年以前曾进行0.01—0.006％浓度的内吸磷防治大豆蚜虫的试验,由于浓度过低未获得良好效果。于1960—1962年又进行了单株、小区和大面积防治试验。鉴于文献报导,内吸磷在棉株上药效及其持久性取次于施用药剂有效成分的多少,本所进行了小容量高浓度快速的大面积防治试验。兹小结如下,仅供参考。     

一株甲基对硫磷降解菌——米曲霉JMUPMD-2的分离与鉴定

对一株新分离的、能以甲基对硫磷为唯一磷源生长的菌株——JMUPMD-2利用形态观察和rDNA ITS序列分析对JMUPMD-2进行鉴定; 用气相色谱法检测培养过程中甲基对硫磷浓度的变化, 确定甲基对硫磷降解速率。该菌株的rDNA ITS序列与米曲霉 (Aspergillus oryzae)的同源性为99%, 菌落形态和显微形态都与米曲霉特征相符, 因此鉴定为米曲霉; 以350 μg/L甲基对硫磷为唯一磷源和350 μg/L甲基对硫磷及1 g/L K2HPO4组成的混合磷源分别培养该菌株, 200 h后的分解量分别为189 μg/L及28 μg/L。该菌株的胞内提取液具有明显的甲基对硫磷降解酶活性。