从九连小檗细胞培养物中分离和鉴定药根碱

九连小檗的叶片,在含有2,4-D(1mg/l),KT(0.1mg/l),琼脂(0.8%),蔗糖(2%)的B,培养基上,诱导出愈伤组织,在25±2℃条件下进行固体、液体培养、收集悬浮培养20天的细胞进行化学抽提和分离,得到一种橙黄色结晶,经 HPLC、UV、IR、MS 和 NMR 等分析鉴定,证明为药根碱。经药理试验表现有明显的生理活性。     

从九连小檗细胞培养物中分离和鉴定药根碱

九连小檗的叶片,在含有2,4－D（1mg/l),KT(0.1mg/l),琼脂（0．8％）,蔗糖（2％）的B3培养基上,诱导出愈伤组织,在25±2℃条件下进行固体,液体培养,收集悬浮培养20天的细胞进行化学抽提和分离,得到一种橙黄色结晶,经HPLC,UV,IR,MS和NMR等分析鉴定,证明为药根碱,经药理试验表现有明显的生理活性。     

从中国红豆杉细胞培养物中分离鉴定紫杉醇

中国红豆杉(Taxus chinensis(Pilger．)Rehd)细胞在培养过程中合成了紫杉醇,我们利用固液分离、大孔吸附树脂吸附富集、有机溶剂萃取、硅胶柱层析、低压硅胶柱层析、重结晶等方法,从中国红豆杉的细胞培养物中分离纯化了紫杉醇,用多种核磁共振波谱方法(^1H NMR,^13C NMR,DEPT,^1H-^1H-COSY,NOESY,HMQC,HMBC)结合质谱(FABMS),红外光谱、紫外光谱等方法鉴定了它的化学结构,证明与源于天然红豆杉植物材料提取的紫杉醇为同一物质。     

黄连根茎中小檗碱积累的组织化学研究

黄连属植物根茎中小檗碱的组织化学研究以往都采用新鲜材料切片。试验应用碘化汞钾处理黄连根茎,使其中小檗碱沉淀后,石蜡法制片。观察结果表明,黄连根茎中小檗碱主要分布在皮层,髓和髓射线薄壁组织细胞内,木化细胞的细胞壁中也有小檗碱。根茎的基部小檗碱含量少,中部和分枝内较多;节部比节间含量多。在不同年生根茎中,二年生苗根茎的一些细胞内小檗碱开始积累,以后逐年增加,至第六年达小檗碱积累高峰,以后根茎内小檗碱含     

中国红豆杉细胞培养物中两种紫杉烷的分离鉴定

从中国红豆杉细胞培养物中分离得到两个紫杉化合物,它们的结构为1β－ 羟基巴卡亭Ⅰ（1β-hydroxy baccatinⅠ）和云南红豆杉甲素（yunnanxane）。     

蔗糖和硝酸铵对黄连悬浮培养细胞生长和小檗碱含量的影响

在６、７－Ｖ液体培养基中较为适合黄连细胞生长的蔗糖浓度为．３％,当蔗糖浓度增加到７％时,细胞生长速率开始下降,但小檗碱含量提高到５．２０％．小檗碱产率为４５６．６０ｍｇ／Ｌ（２３天）。基本培养基中随着补加ＮＨ４ＮＯ３浓度的增加,抑制细胞生长愈严重;补加０．８ｇ／ＬＮＨ４ＮＯ３的小檗碱含量比未加的增加约１０％,随着浓度的增加又急剧下降。     

小檗碱的消炎镇痛作用

皮下注射小檗碱明显减少醋酸性小鼠扭体反应次数,半数有效量为3.5mg/kg,仅在皮下注射8mg/kg的大剂量时,对热板法实验表现出镇痛作用。口服60mg/kg 小檗碱明显抑制醋酸提高小鼠腹腔毛细血管通透性;皮下注射20和50mg/kg都显著抑制组胺提高大鼠皮肤毛细血管通透性。给小鼠皮下注射4和8mg/kg小檗碱显著抑制二甲苯引起耳壳肿胀;给大鼠皮下注射20和40mg/kg时显著抑制角叉菜胶引起的足跖肿胀,作用持续7小时以上。小檗碱的消炎镇痛作用随剂量增大而增加。     

Anatomical Studies of After-Ripening of Coptis chinensis Seed

The seeds of Coptis chinensis Franeh took 9–10 months to germinate after they were collected and buried under ground.. This is due to the fact that the embryo of Coptis chinensis was not fully developed after shedding but remained in the stage of globular or early heart-shaped embryo, and the latter of which has to pass through a rather long period before it developed into torpedo-embryo stage. Embryo completed its growth about January of the following year. The delay in seed germination is because of the embryo not being fully developed after shedding. However, the primordium of the first foliage leaf initiated early in the apical meristem of the young embryo. Perceiving the whole process of the young embryo growth, it seems possible that, if a suitable condition is envisaged to shorten the heart-shaped embryo stage, the whole germinating process of seed might be somewhat curtailed.     

南方红豆杉产紫杉醇内生真菌的分离鉴定

从南方红豆杉(Taxus chinensisvar.mairei)植株分离到内生真菌63株,其中24株经鉴定分属于19个种(属).真子囊菌纲的2个属2株,半知菌纲的14个属22株.真子囊菌纲的无毛毛壳属(Achaetomiumsp.)的1株为新发现种.半知菌纲的葡萄孢属(Botrytissp.)1株和无孢菌群(Mycelia sterlia)2株的培养液,经浓缩萃取,薄层层析检测,Rf值分别为0.404、0.404、0.401,与紫杉醇对照品Rf值一致,为南方红豆杉产紫杉醇内生真菌.     

龙柏茎叶中抑菌活性成分的分离与鉴定

采用活性追踪和柱层析法,以苹果腐烂病菌、葡萄白腐病菌等为靶标菌,提取、分离、鉴定了龙柏茎叶中抑菌活性成分.结果表明,对龙柏茎叶乙醇提取物的石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取物活性测定中,石油醚萃取物的活性最高.对石油醚萃取物进行硅胶柱层析,得到一种活性较高的化合物A,对苹果腐烂病菌的EC_(50)为0.862 4 mg/mL.经氢谱(1H-NMR)、碳谱(~(13)C-NMR)和红外等确定了化合物A的结构为4-松香酸.     

川连抗癌的实验研究

目的通过对动物体内抗癌实验的观察研究,验证中药川连具有抑制和治疗肿瘤的生物学特性。方法选取80只昆明小鼠,于前肢皮下接种小鼠肉瘤细胞。将动物随机分为对照组和川连治疗组。治疗组每日给予川连汤剂稀释液（0．5mg,瘤内注射,1次／d）,连续10d;对照组注射同体积生理盐水。结果连续观察70d,治疗组小鼠存活率100％,对照组小鼠存活率为0％。结论中药川连具有抑制和治疗肿瘤作用,其抗肿瘤作用机制有待于进一步研究。     

红豆杉悬浮细胞放大培养的细胞生长与紫杉醇合成动力学

研究了在Murashige&skoog s(MS)和 6 2号两种不同的培养基中 ,红豆杉细胞悬浮细胞从摇瓶到 1 0L机械通气搅拌式反应器放大培养过程中细胞生长与紫杉醇合成动力学 .结果表明 :尽管在不同的培养条件下 ,细胞生长曲线均呈现“S”型 .紫杉醇在延迟期与指数生长期中基本上没有积累 ,而且随着培养规模的增大 ,紫杉醇的含量逐渐降低 .进一步对各级放大培养的细胞生长 ,比生长率与胞内外紫杉醇合成量进行分析 ,发现MS利于细胞生长但不利于紫杉醇合成 ,而 6 2号则相反 .根据此文的结果 ,提出了红豆杉细胞培养条件的优化和大规模细胞培养生产紫杉醇应采取的策略     

Antifungal effects of volatile organic compounds from the endophytic fungus Cryptosporiopsis ericae Cc-HG-7 isolated from Coptis chinensis Franch

In this study, 136 strains of endophytic fungi were isolated from the Chinese traditional medicinal plant Coptis chinensis Franch. Of these, 129 strains were classified into 12 different genera according to morphological traits and internal transcribed spacer (ITS) gene sequence analyses. Their antifungal activities were assessed against the following fungi: Magnaporthe oryzae, Pythium graminicola, Cylindrocarpon destructans, Fusarium oxysporum, Cercospora zeae-maydis, Sclerotinia sclerotiorum, Setosphaeria turcica and Botrytis cinerea. Fourteen endophytic strains were active against at least one of the selected fungi. The most active strain Cc-HG-7 identified as Cryptosporiopsis ericae displayed inhibition rates of 81.42% and 72.00%, respectively, against S. sclerotiorum and S. turcica in dual culture technique. The volatile antifungal compounds were identified using headspace solid-phase microextraction, followed by gas chromatography mass spectrometry to investigate the potential biocontrol mechanisms of strain Cc-HG-7. The results suggested that the strain Cc-HG-7 could be a potential agent for the biological control of S. sclerotiorum and S. turcica.     

兔胚胎神经干细胞的分离、培养和鉴别

目的：研究兔胎脑神经干细胞体外生长特性,为探讨神经干细胞的临床应用及神经系统的发育奠定基础。方法：采用含碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和表皮细胞生长因子（EGF）的N2无血清培养技术,取18天龄兔胚胎脑组织,分离神经干细胞,并观察分离的细胞体外培养、增殖、分化潜能,免疫组化鉴定。结果：从18天龄兔胎脑皮质和纹状体中成功分离出具有自我更新和多分化潜能的神经干细胞,在无血清培养时细胞呈半贴壁状态生长,形成神经球,可传代。细胞呈Nestin免疫反应阳性;在含血清培养基中培养时则分化,分化后的细胞表达神经元细胞、星形胶质细胞和少突胶质细胞的特异性抗原。结论：来自兔胎脑神经干细胞能在体外培养、增殖并保持传代能力。无血清N2EGF、bFGF培养基有利于兔胎脑神经干细胞的存活和增殖,含血清培养基能诱导兔胎脑神经干细胞分化。     

江苏引种黄连副产物的生物碱含量测定

利用薄层扫描法和高效液相色谱法测定了江苏引种黄连根茎以外的副产物（须极、连渣、叶片、叶柄）中生物碱的含量,其中４年生黄连叶片生物碱含量达２．４３％,叶柄达３．７５％,６年一黄连须根生物碱含理达５．６７％,连渣达６．３２％,建议充分利用须根、连渣、叶片、叶柄等副产物。     

条件培养液对红豆杉细胞Paclitaxel生产的促进作用

在两步法红豆杉（Taxus chinensis)细胞悬浮培养体系的生产阶段,加入从生长阶段悬浮培养物中制得的条件培养液（conditioned Medium,CM)既能促进细胞的生长,又能提高紫杉醇（paclitaxel)的产率,解决了生产培养时,细胞生长受抑制的问题,特别是,取自生长12天的细胞悬浮培养物的CM按体积分数为25％添加到新鲜生产培养基中时,可使细胞紫杉醇最高产量达28．5mg/L,细胞干重达32．3g/L,分别是对照的2．4倍和2．2倍,对CM中的蔗糖,果糖,NO3－和PO4－3等的含量的进行了分析。