辐射及活性氧对DNA的损伤以及芥子碱的保护作用

在X射线照射下,小牛胸腺DNA的碱基损伤及链断裂随着剂量升高而增加,其损伤主要集中于链断裂;活性氧可以引起DNA损伤,H2O2仅造成少量伤害,当在含有H2O2的体系中加入微量的Cu2＋、Fe2＋时损伤急剧增加,这是由反应产生的·OH所致,Cu2＋的致损伤效果明显高于Fe2＋。·OH清除剂芥子碱具有很强的抗辐射及抗氧化作用,且对DNA无伤害。这说明·OH在DNA的氧化损伤中起重要作用。     

果蝇伴性隐性致死突变试验中芥子碱的辐射保护作用

过去的工作证明一些十字花科植物的抗辐射性与其体内存在的天然辐射保护物质有关。芥子碱是存在于十字花科植物中的一种天然辐射保护物质。它对大麦和小麦以及小鼠均有辐射保护作用。本文报道芥子碱在果蝇伴性隐性致死(SLRL)突变试验系统中的辐射保护作用。供试果蝇并不拒食芥子碱水溶液。10 mg/ml芥子碱对果蝇无生理毒性,对生育力亦无不良影响。40 Gy X 射线诱发8.96% SLRL 突变。而40 Gy 辐照前喂10 mg/ml芥子碱的果蝇其SLRL 突变率降为0.4%。Oregon K 果蝇的自发突变率为0-0.4%。可见喂芥子碱后辐射诱发的SLRL 突变不复出现,说明芥子碱对果蝇有很强的辐射保护作用。也讨论了芥子碱作为潜在抗癌物质的可能性。     

活性氧对花生叶片大分子量DNA的损伤

花生幼苗叶片DNA分子量略大于23.1kb,甲基紫精或黄嘌吟-黄嘌吟氧化酶所产生的O_2~-对其结构有剪切或降解作用。活性氧清除剂SOD、甘露醇和硫脲在一定程度上抑制活性氧对DNA结构的损伤。     

HPLC法测定白芥子药材中芥子碱硫氰酸盐的含量

本文采用RP-HPLC法测定了不同产地白芥子药材中芥子碱硫氰酸盐的含量,方法为色谱柱Alltima Phenyl,5μ,250×4.6mm;流动相乙腈-0.08mol/L磷酸二氢钾溶液(1585),检测波长326nm;流速1mL/min.柱温室温.实验表明,该法快速、简便,具有很好的重现性和稳定性.     

拟南芥芥子酸酯对UV-B辐射的响应

芥子酸酯(sinapate esters)是拟南芥和其他十字花科植物中大量存在的一类具有紫外吸收作用的羟基肉桂酸衍生物,有研究表明其紫外吸收能力甚至强于类黄酮。以模式植物拟南芥(Arabidopsis thaliana)为实验材料,通过施加低强度(40 μW/cm²)、相对长时间(7 d)的UV-B辐射,考察了拟南芥幼苗和成苗芥子酸酯组分(芥子酰葡萄糖、芥子酰苹果酸)和含量及合成途径关键酶编码基因表达水平对UV-B辐射的响应。经过7 d的UV-B辐射处理,拟南芥幼苗和成苗的芥子酰葡萄糖、芥子酰苹果酸含量均高于对照植株,芥子酸酯表现为响应UV-B辐射而积累。无论是幼苗还是成苗,叶片中芥子酰苹果酸的含量都要比芥子酰葡萄糖高出一个数量级,而且在UV-B处理过程中观察到芥子酰葡萄糖含量减少而芥子酰苹果酸含量增加,催化芥子酰葡萄糖生成芥子酰苹果酸的芥子酰葡萄糖苹果酸转移酶编码基因的表达水平也显著提高,说明芥子酰苹果酸在拟南芥叶片响应UV-B辐射过程中起重要作用并优先合成。另外,拟南芥幼苗中两种芥子酸酯的含量是成苗中的数十倍之多,芥子酸酯合成途径关键酶编码基因fah1和sng1的相对表达量也显著高于成苗。同时,在响应UV-B辐射的过程中,幼苗中芥子酰葡萄糖、芥子酰苹果酸含量的变化幅度(分别是7.01％、6.05％)远远低于成苗叶片中芥子酰葡萄糖、芥子酰苹果酸含量的变化幅度(分别是21.88％、70.63％),这可能意味着拟南芥叶片中芥子酸酯对于UV-B辐射的防护作用,幼苗属于组成型防御(constitutive defense),而到成苗则转变为诱导型防御(inducible defense)。     

菟丝子提取物对活性氧引起已分化的PC12细胞损伤的保护作用

以常用的神经嗜铬细胞瘤PC12细胞株为实验模型,通过比较活性氧(ROS)作用细胞后的细胞活力、凋亡相关蛋白(p53、Bax)水平以及细胞中SOD、GSH、MDA的差异,发现菟丝子提取物不仅能提高ROS损伤的已分化PC12细胞活力,调节细胞中凋亡相关基因的表达,而且还能提高细胞中SOD和GSH的含量,降低MDA水平。由此表明,菟丝子提取物对ROS造成的PC12细胞损伤有一定的保护作用。     

泥鳅多糖清除活性氧和保护DNA链的作用

采用化学发光法和分光光度法在多种化学模拟体系中研究了泥鳅多糖清除活性氧的作用 ,并用化学发光法观察了泥鳅多糖对·OH导致DNA链损伤的抑制作用。结果表明 ,泥鳅多糖能够有效地清除O·-2 、·OH、H2 O2 等活性氧 ,对DNA链具有良好的保护作用     

NNK诱发BEP2D细胞产生活性氧及其对DNA的损伤

通过测定细胞内和细胞上清中活性氧（ｒｅａｃｔｉｖｅ ｏｘｙｇｅｎ ｓｐｅｃｉｅｓ,ＲＯＳ）水平,以及ＤＮＡ 加合物——８－羟基脱氧鸟嘌呤核苷（８－ｈｙｄｒｏｘｙｄｅｏｘｙｇｕａｎｏｓｉｎｅ,ＯＨ８ｄＧ）含量,对烟草特异亚硝胺类化合物４－甲基亚硝胺－１（３－吡啶基）－１－丁酮（４－（ｍ ｅｔｈｙｌｎｉｔｒｏｓａｍ ｉｎｏ）－１－（３－ｐｙｒｉｄｙｌ）－１－ｂｕｔａｎｏｎｅ,ＮＮＫ）诱发人乳头状病毒永生化的人支气管上皮细胞（ｈｕｍ ａｎ ｐａｐｉｌｌｏｍ ａｖｉｒｕｓ－ｉｍ ｍ ｏｒｔａｌｉｚｅｄ ｈｕｍ ａｎｂｒｏｎｃｈｉａｌｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｌｉｎｅ,ＢＥＰ２Ｄ）产生的ＲＯＳ及其对ＤＮＡ 的氧化损伤进行研究,并观察纳米硒的保护作用．结果表明,ＢＥＰ２Ｄ 细胞经不同浓度的ＮＮＫ 作用后,细胞内和细胞上清中ＲＯＳ以及ＯＨ８ｄＧ含量均显著增加,并有较好的剂量效应关系．１ μｍ ｏｌ·Ｌ－ １纳米硒（ｎａｎｏｓｅｌｅｎｕｉｍ ,ＮＳ）能明显抑制ＮＮＫ 诱发ＢＥＰ２Ｄ细胞产生的ＲＯＳ及ＯＨ８ｄＧ 水平．揭示ＮＮＫ 能造成细胞的氧化损伤,而ＮＳ对ＮＮＫ 所致细胞的氧化损伤有保护作用．     

麦芽酚对活性氧损伤人神经瘤细胞的保护作用

以人神经瘤细胞株 (SH SY5Y)为材料 ,使用过氧化氢 (H2 O2 )产生过量活性氧诱导SH SY5Y细胞株进入氧化应激状态 .研究麦芽酚对过量活性氧造成的SH SY5Y细胞株氧化损伤的保护作用 .分析活性氧对细胞膜蛋白和DNA的损伤 ,细胞线粒体功能变化 ,白介素 6 (IL 6 )的表达变化以及细胞核因子κB(NF κB)的激活 .结果显示 ,2mmol L麦芽酚保护细胞 2h后 ,对细胞膜蛋白和DNA的损伤均有明显的保护作用 ,减少了膜蛋白的氧化和细胞DNA片段化的形成 ,细胞线粒体功能损伤减小 ,细胞表达的IL 6减少 ,被激活的NF κB水平同时降低 .结果证明 ,麦芽酚可以有效保护活性氧对神经细胞的氧化损伤 ,维持细胞的正常生理功能     

紫外辐射诱导植物叶片DNA损伤敏感性差异

单细胞凝胶电泳（彗星检测,cometassay）技术已广泛应用于动物细胞DNA损伤检测,但在植物细胞DNA损伤检测中的应用尚不多见。本研究通过对动物细胞彗星检测方法的改进,利用植物细胞原生质体作为材料,研究了不同发育期九里香（Murraya panicuata）叶片对UV-B诱导的DNA损伤的敏感性差异。彗星检测结果表明,九里香叶片DNA的损伤程度与UV-B辐射的剂量呈正相关：在相同UV—B辐射剂量下,九里香幼嫩叶片比成熟叶片的DNA损伤量大,表明其幼嫩叶片对UV-B辐射的敏感性比成熟叶片高。     

紫外辐射诱导植物叶片DNA损伤敏感性差异

单细胞凝胶电泳(彗星检测, comet assay)技术已广泛应用于动物细胞DNA损伤检测, 但在植物细胞DNA损伤检测中的应用尚不多见。本研究通过对动物细胞彗星检测方法的改进, 利用植物细胞原生质体作为材料, 研究了不同发育期九里香(Murraya panicuata)叶片对UV-B诱导的DNA损伤的敏感性差异。彗星检测结果表明, 九里香叶片DNA的损伤程度与UV-B辐射的剂量呈正相关; 在相同UV-B辐射剂量下, 九里香幼嫩叶片比成熟叶片的DNA损伤量大, 表明其幼嫩叶片对UV-B辐射的敏感性比成熟叶片高。     

小檗碱对动脉粥样硬化性损伤的保护作用

目的:探讨小檗碱对动脉粥样硬化损伤的保护作用。方法:将56只大鼠,随机分为对照组(C),高脂饮食假手术组(HD),肾动脉狭窄组(RAS),肾动脉狭窄高脂饮食组(HD+RAS)。C及RAS组给予正常饮食,HD及HD+RAS组给予高脂饮食,RAS及HD+RAS组采用固定内径银夹夹左肾动脉。饲养12周,每组处死6只进行检测,剩余除C外每日灌胃小檗碱(150mg/kg),C予以等量生理盐水灌服,持续4周,四周后处死进行相同检测,用药前后结果进行对比评价小檗碱功能。结果:与C相比,HD,RAS,HD+RAS组肌酐显著升高(P<0.05),HD及HD+RAS组胆固醇明显升高(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)在HD,RAS及HD+RAS组显著降低(P<0.05),丙二醛(MDA)在HD,RAS及HD+RAS组显著增高(P<0.05),血管内皮生长因子VEGF在HC,RAS及HD+RAS组表达量升高。给予小檗碱灌胃处理后,检测指标各组间无统计学差异(P>0.05)。结论:小檗碱对动脉粥样硬化性损伤具有良好的保护作用。     

芥子碱硫氰酸盐清除超氧阴离子自由基作用的研究

目的:研究芥子碱硫氰酸盐清除超氧阴离子自由基的作用。方法:用化学发光法测定芥子碱硫氰酸盐清除超氧阴离子自由基的能力,并以抗坏血酸的清除能力做为对照,以IC50值(清除率为50%时的浓度值)作为评价指标。结果:芥子碱硫氰酸盐和抗坏血酸的IC50值分别为0.135 mmol/L和18.74 mmol/L,后者的IC50值约为前者的140倍。结论:芥子碱硫氰酸盐具有良好的抗氧化作用,可以作为天然抗氧化剂进行开发。     

小檗碱对动脉粥样硬化性损伤的保护作用

目的：探讨小檗碱对动脉粥样硬化损伤的保护作用。方法：将56只大鼠,随机分为对照组（C）,高脂饮食假手术组（HD）,肾动脉狭窄组（RAS）,肾动脉狭窄高脂饮食组（HD＋RAS）。C及RAS组给予正常饮食,HD及HD＋RAS组给予高脂饮食,RAS及HD＋RAS组采用固定内径银夹夹左肾动脉。饲养12周,每组处死6只进行检测,剩余除C外每日灌胃小檗碱（150mg/kg）,C予以等量生理盐水灌服,持续4周,四周后处死进行相同检测,用药前后结果进行对比评价小檗碱功能。结果：与C相比,HD,RAS,HD＋RAS组肌酐显著升高（P〈0.05）,HD及HD＋RAS组胆固醇明显升高（P〈0.05）,超氧化物歧化酶（SOD）在HD,RAS及HD＋RAS组显著降低（P〈0.05）,丙二醛（MDA）在HD,RAS及HD＋RAS组显著增高（P〈0.05）,血管内皮生长因子VEGF在HC,RAS及HD＋RAS组表达量升高。给予小檗碱灌胃处理后,检测指标各组间无统计学差异（P〉0.05）。结论：小檗碱对动脉粥样硬化性损伤具有良好的保护作用。     

紫外线-B辐射对植物DNA及蛋白质的影响

大气平流层中的臭氧衰减,导致太阳辐射中的紫外辐射量有明显的增加,其中UV-B辐射对植物会产生不同程度的影响。分子生态学理论认为,UV-B辐射对植物造成的损伤,首先伤害植物的生物大分子,即进行光化学修饰。本文就臭氧衰减对生态环境和植物的影响途径进行了讨论,重点论述了UV-B辐射对植物蛋白质合成的抑制和DNA的损伤修复途径。并应用分子生物学技术研究植物对UV-B辐射的抗性机理和DNA修复技术的前景进行了展望。     

紫外辐射诱导烟草原生质体中DNA损伤的彗星电泳检测

以烟草原生质体为材料,采用彗星电泳检测用0.5W·m^-2紫外线以不同时间（0、5、10、30、60和120s）诱导的烟草原生质体中DNA的损伤。结果表明,在0～10s的时间内代表DNA损伤程度的尾矩、Olive尾矩等参数与紫外线照射时间具有良好的时间依赖关系。本文建立的烟草原生质体体系采用彗星电泳技术,可以快速而灵敏地检测紫外线对植物细胞的损伤程度。     

远紫外辐射诱导紫杉产生的活性氧

为了解活性氧和自由基在介导远紫外辐射对植物伤害上的作用 ,在实验室内用远紫外线源对紫杉 (TaxuscuspidataSieb .etZucc .)苗进行了 4周的辐射处理。每周取样 ,对针叶的有机自由基及离体叶绿体的O-·2 和1O2 分别进行了电子自旋共振 (ESR)检测 ,以了解它们各自的相对重要性。结果表明针叶的有机自由基水平最能说明远紫外辐射剂量的积累效应。其次是叶绿体产生的O-·2 。叶绿体产生的1O2 也随辐照时间的增加而略有增加 ,但由于本底数值过高 ,它在介导远紫外辐射引起的伤害上可能不如O-·2 重要