急性冷暴露对大鼠肺组织中水通道蛋白AQP-1和AQP-5表达的影响

目的：探讨急性冷暴露后肺组织超微结构变化以及对水通道蛋白-1（AQP-1）和AQP-5表达的影响。方法：12只健康雄性Wistar大鼠随机分为室温（23℃±2℃）对照组和-25℃ 2 h冷暴露组（n=6）;记录冷暴露后大鼠直肠温度;透射电镜观察肺组织超微结构改变;RT-PCR法和Western blot法测定大鼠肺组织AQP-1和AQP-5基因和蛋白的表达水平。结果：急性冷暴露后大鼠的体心温度与对照组相比,明显降低（P<0.05）;肺组织超微结构亦发生改变,基底膜明显增厚,肺泡I上皮细胞（AT-I）核固缩,肺泡Ⅱ上皮细胞（AT-Ⅱ）胞浆空泡化增多;冷暴露后大鼠肺组织AQP-1的基因和蛋白表达未见明显变化,AQP-5的基因和蛋白表达均显著降低（P<0.05）。结论：急性冷暴露肺组织AQP-5基因和蛋白表达降低与寒冷暴露引发肺组织结构损伤可能存在一定因果关系。     

香烟烟雾暴露对支气管哮喘大鼠肺组织水通道蛋白5表达的影响

目的探讨香烟烟雾暴露对支气管哮喘大鼠肺组织水通道蛋白5(Aquaporin 5,AQP5)和黏蛋白5AC(MUC5AC)表达的影响。方法将30只雄性SD大鼠随机分为3组(n=10),对照组雾化生理盐水,哮喘组采用卵清白蛋白(OVA)致敏并吸入激发制备哮喘模型,哮喘+烟雾暴露组于每日雾化激发OVA前给予香烟烟雾吸入。收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行白细胞计数及分类,测定肺组织病理变化及湿干重比值。实时定量PCR(Realtime PCR)测定AQP5和MUC5AC mRNA的表达,免疫组化法测定AQP5蛋白分布情况,免疫印迹法(Western blot)测定AQP5蛋白的表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定BALF中MUC5AC的含量。结果①与对照组相比,哮喘组大鼠BALF中白细胞、淋巴细胞、嗜酸粒细胞、中性粒细胞数量明显增加;与哮喘组相比,暴露组大鼠BALF中白细胞、中性粒细胞数量明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。②与对照组相比,哮喘组和暴露组大鼠肺组织中AQP5表达明显减少,而MUC5AC蛋白含量明显增加;与哮喘组相比,暴露组大鼠肺组织中AQP5明显减少,而MUC5AC蛋白含量明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。③肺组织中AQP5表达与肺组织BALF中MUC5AC蛋白含量呈负相关(r=-0.852和-0.895,P<0.05)。结论香烟烟雾暴露可导致哮喘大鼠肺组织AQP5表达减少而MUC5AC含量增加,进一步加重哮喘气道炎症和黏液高分泌反应,这可能为哮喘吸烟患者的早期防治提供新思路。     

甘草内生菌发酵物对痰浊阻肺大鼠炎症相关因子、水通道蛋白的影响

目的：筛选具有祛痰作用的甘草内生菌菌株发酵物。方法：Wistar大鼠90只,雌雄各半,随机分为9组（n=10）：即空白组、模型组、阳性对照组、甘草水煎液组、甘草内生菌发酵物5组（JTZB005、JTZB006、JTZB043、JTZB060、JTZB063）。采用SO₂烟薰30 min、低温兼冷风刺激10 min诱导痰浊阻肺大鼠模型,每天2次,连续10 d。造模10 d后,空白组、模型组给予生理盐水10 ml/kg灌胃,阳性组给予复方贝母氯化铵片0.08 g/kg灌胃,水煎液组给予甘草水煎液0.95 g/kg,内生菌各组给予甘草内生菌发酵液蒸干粉末0.95 g/kg,每天灌胃给药1次,连续7 d,观察大鼠一般情况。第7天,灌胃给药2 h后,断颈处死大鼠,取右肺上叶,4%戊二醛固定,HE染色切片,光镜下观察肺组织病理形态学变化,免疫组化染色切片,检测水通道蛋白1、5（AQP1、AQP5）的分布及表达。硝酸还原酶法测定肺组织一氧化氮（NO）含量,ELISA检测大鼠肺组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、细胞间粘附分子-1（ICAM-1）的含量及环氧化酶-2（COX-2）的浓度。结果：与空白组比较,模型组大鼠肺组织中NO、TNF-α、ICAM-1的含量及COX-2的浓度显著升高,而水通道蛋白AQP1、AQP5的表达显著降低（P<0.01）。与模型组比较,水煎液组、JTZB005、JTZB006、JTZB063组肺组织NO、TNF-α、ICAM-1的含量及COX-2的浓度均显著降低,AQP1、AQP5的表达水平显著升高（P<0.05,P<0.01）。结论：筛选出JTZB005、JTZB006、JTZB063等3株具有祛痰作用的甘草内生菌有效菌株。     

跑台运动对攻击行为大鼠内侧下丘脑和中脑导水管周围灰质5-HT1A受体、5-HT2A受体蛋白表达的影响

目的:探讨跑台运动对攻击行为大鼠内侧下丘脑(MH)和中脑导水管周围灰质(PAG)5-HT1A受体、5-HT2A受体蛋白表达的影响,为研究运动对攻击行为改善的神经生物学机制提供实验基础.方法:3月龄雄性SD大鼠40只,体重160～180 g,随机分为4组:安静组(A)、攻击模型组(G)、攻击跑台组(GP)、入侵组(R)....     

清气化痰汤联合穴位贴敷治疗AECOPD痰热壅肺证的疗效及对血清MMP-2、MMP-9、MMP-12的影响

摘要 目的：探讨清气化痰汤联合穴位贴敷治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期（AECOPD）痰热壅肺证的疗效及对血清基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9、MMP-12的影响。方法：选取武汉市中医医院2020年8月~2022年8月期间收治的116例AECOPD 痰热壅肺证患者,按照随机数表法分成对照组（n=58,西医常规治疗联合穴位贴敷治疗）和实验组（n=58,对照组基础上联合清气化痰汤治疗）。对比两组中医证候积分、慢性阻塞性肺疾病评估测试问卷（CAT）评分、炎症因子指标[白细胞介素（IL）-6、IL-8、降钙素原（PCT）]、肺功能指标[第一秒用力呼气容积（FEV₁）、用力肺活量（FVC）、FEV₁/FVC]、血清MMP-2、MMP-9、MMP-12水平。结果：两组治疗后发热、咳嗽或喘息气急、大便干结、口渴喜冷饮、痰多色黄或白黏、CAT评分下降,且实验组低于对照组（P<0.05）。两组治疗后FEV₁、FVC、FEV₁/FVC升高,且实验组高于对照组（P<0.05）。两组治疗后IL-6、IL-8、PCT下降,且实验组低于对照组（P<0.05）。两组治疗后血清MMP-2、MMP-9、MMP-12下降,且实验组低于对照组（P<0.05）。结论：清气化痰汤联合穴位贴敷治疗AECOPD痰热壅肺证,可改善患者的肺功能,降低炎症因子和血清MMP-2、MMP-9、MMP-12水平,进一步改善患者的临床症状。     

重组CC16蛋白对慢性阻塞性肺疾病小鼠肺组织结构及MMP-9和TIMP-1表达的影响

目的研究重组大鼠CC16(rCC16)蛋白质对减轻慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)小鼠模型肺组织损伤的作用,及对肺组织中基质金属蛋白酶(MMP)-9和基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1表达的调节作用。方法将40只清洁级C57BL/6小鼠随机分为4组,分别为空白组、COPD模型组、rCC16剂量组1和剂量组2。除空白组外,其余小鼠均采用吸烟3月法制备COPD模型,从第3月开始空白组和模型组给予PBS滴鼻,rCC16剂量组1和剂量组2分别给予1μg/g体重和2.5μg/g体重的rCC16滴鼻干预。观察各组小鼠精神状态、饮食情况、体重变化及大小便情况等,H&E染色观察各组小鼠肺组织形态结构变化,荧光定量聚合酶链式反应、免疫组织化学法检测MMP-9和TIMP-1信使RMA(mRNA)和蛋白质的表达变化。结果空白组小鼠体重随饲养周期增大,COPD组小鼠体重较空白组明显减轻,rCC16干预组后,干预组2小鼠体重逐周增大,但干预组1小鼠体重增加较缓慢,差异均有统计学意义(P<0.05);COPD模型组小鼠肺组织结构明显破坏,肺泡间隔增宽,部分形成肺气肿,rCC16干预组后,小鼠肺部的肺泡结构趋于完整,肺大泡的形成也减少;COPD模型组小鼠肺组织MMP-9和TIMP-1的表达均明显高于空白组(P<0.05);rCC16干预后,均可降低MMP-9和TIMP-1的表达,差异均有统计学意义(P<0.05),rCC16对MMP-9的降低作用具有剂量依赖性,而对TIMP-1的调节不呈剂量依赖性。结论 rCC16滴鼻干预可以减轻COPD小鼠肺组织的损伤,降低肺组织中MMP-9和TIMP-1的表达,对COPD的治疗具有积极意义。     

健胃愈疡颗粒剂对大鼠胃溃疡模型溃疡愈合及胃组织IL-1β蛋白表达的影响

目的:探讨健胃愈疡颗粒对大鼠胃溃疡模型溃疡愈合及胃组织IL-1β蛋白表达的影响.方法:用Okabe改良法复制SD大鼠胃溃疡模型,观察溃疡指数,采用免疫组织化学法观察胃粘膜组织形态及IL-1β蛋白表达的变化.结果:①健胃愈疡组的溃疡指数明显低于模型组和法莫替丁组;②HE染色法显示健胃愈疡组较模型组及法莫替丁组黏膜厚度增加,溃疡床及溃疡周围炎性细胞浸润明显减少,纤维排列较为整齐.③IL-1β在正常胃组织呈阴性或偶有阳性信号表达,造模型7d后表达显著增加,健胃愈疡组和法莫替丁组低于模型组(P＜0.01);14 d后各组的阳性信号表达均降至接近正常.结论:健胃愈疡颗粒能保护大鼠胃粘膜组织,降低胃溃疡大鼠模型溃疡指数,改善溃疡愈合质量,减少胃组织IL-1β蛋白的表达,促进溃疡愈合.     

活血化瘀方对糖尿病模型大鼠糖脂代谢、血管内皮生长因子和血管紧张素II1型受体表达的影响

目的:探讨活血化瘀方对糖尿病模型大鼠糖脂代谢、血管内皮生长因子(VEGF)和血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)表达的影响。方法:选取健康雄性SD大鼠50只,适应性喂养7 d后以随机数字表法分成对照组10只、模型组13只、中药组14只、西药组13只。其中模型组与对照组予以纯净水灌胃,中药组予以活血化瘀通络中药配方颗粒灌胃,西药组则予以厄贝沙坦灌胃,1次/d,连续灌胃16周。分别比较各组大鼠的糖脂代谢指标水平及24 h尿蛋白定量、糖化血红蛋白、血清肌酐水平,并检测肾组织VEGF和AT1R表达情况。结果:模型组、中药组、西药组大鼠空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平均高于对照组,中药组、西药组大鼠LDL-C水平低于模型组,中药组大鼠FBG水平低于模型组与西药组(P0.05)。模型组、中药组、西药组大鼠24 h尿蛋白定量与糖化血红蛋白均高于对照组,中药组、西药组大鼠24 h尿蛋白定量低于模型组(P0.05)。模型组、中药组、西药组大鼠VEGF、AT1R水平均高于对照组,中药组、西药组大鼠VEGF、AT1R水平低于模型组,中药组大鼠AT1R水平低于西药组(P0.05)。结论:活血化瘀方可有效改善糖尿病大鼠糖脂代谢状态,通过抑制VEGF与AT1R的表达水平,延缓糖尿病的发生与发展。     

不同潮气量机械通气对大鼠肺组织HMGB1表达的影响

目的观察不同潮气量机械通气大鼠肺组织高迁移率族蛋白1（HMGB1） mRNA及其蛋白的表达水平,探讨HMGB1在呼吸机相关性肺损伤（VILI）发病中的作用。方法24只雄性Wister大鼠随机分为对照组、小潮气量组和大潮气量组,分别采用原位分子杂交技术和免疫组织化学染色法检测肺组织HMGB1 mRNA及其蛋白的表达水平。结果与对照组和小潮气量组比较,大潮气量组大鼠肺组织HMGB1 mRNA及其蛋白表达水平明显升高（均P〈0.01）,小潮气量组与对照组各项指标比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论大潮气量机械通气可诱导肺组织HMGB1 mRNA及其蛋白高表达;HMGB1分泌增多导致肺组织炎症反应扩大,可能是呼吸机相关性肺损伤（VILI）发生的重要因素之一。     

甲基苯丙胺中毒mG1uR5的表达（英文）

目的：研究代谢性谷氨酸受体5（mG1uR5）在甲基苯丙胺中毒的损伤机制中的作用。方法：设立实验组,对照组。实验组分别给予20 mg/kg,10 mg/kg腹腔注射MA;对照组分别给予同剂量的生理盐水。末次注射后24 h内腹腔注射戊巴比妥钠麻醉大鼠后用4%多聚甲醛灌注、取脑后行代谢性谷氨酸受体5的免疫组织化学染色,观察并计数mG1uR5在不同脑区的表达。结果：实验组mG1uR5在大脑纹状体、海马的表达较对照组显著增强,差异有显著性（P〈0.05）,并呈剂量依赖性。结论：mG1uR5参与了甲基苯丙胺中毒的损伤机制。     

甲基苯丙胺中毒mG1uR5 的表达

目的:研究代谢性谷氨酸受体5(mG1uR5)在甲基苯丙胺中毒的损伤机制中的作用。方法:设立实验组,对照组。实验组分别给予20 mg/kg,10 mg/kg腹腔注射MA;对照组分别给予同剂量的生理盐水。末次注射后24 h内腹腔注射戊巴比妥钠麻醉大鼠后用4%多聚甲醛灌注、取脑后行代谢性谷氨酸受体5的免疫组织化学染色,观察并计数mG1uR5在不同脑区的表达。结果:实验组mG1uR5在大脑纹状体、海马的表达较对照组显著增强,差异有显著性(P<0.05),并呈剂量依赖性。结论:mG1uR5参与了甲基苯丙胺中毒的损伤机制。     

水杨酸钠对胰岛素抵抗大鼠胰岛素受体底物-1的影响

目的探讨抗炎药水杨酸钠对胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感性的影响及其作用机制。方法分别给大鼠静脉输注脂肪乳+肝素,脂肪乳+肝素+水杨酸钠和生理盐水7 h,并在输注的最后2 h,行清醒状态高胰岛素-正血糖钳夹试验,测定血浆葡萄糖、游离脂肪酸(FFA)、胰岛素和C-肽水平,检测肝脏、肌肉中胰岛素受体底物-1(IRS-1)及307位丝氨酸磷酸化的IRS-1表达。结果输注脂肪乳大鼠葡萄糖输注率(GIR)是输注生理盐水大鼠的45%,水杨酸钠可使GIR提高1.3倍(P0.01)。脂肪乳输注组大鼠肝脏及肌肉中307位丝氨酸磷酸化的IRS-1分别为生理盐水输注组大鼠的3倍和3.8倍(P0.001),输注水杨酸钠,肝脏、肌肉307位丝氨酸磷酸化的IRS-1下降45%、20%(P0.05)。结论 FFA增高引起肝脏及肌肉中307位丝氨酸磷酸化的IRS-1水平增高,可能是导致胰岛素抵抗发生的机制之一,应用水杨酸钠,大鼠肝脏及肌肉组织中IRS-1丝氨酸磷酸化水平下降,胰岛素抵抗改善。抗炎药物水杨酸钠可能通过抑制FFA引起的IRS-1丝氨酸磷酸化,而发挥改善胰岛素抵抗的作用。     

基质金属蛋白酶-2、-9及其组织抑制剂-1在大鼠肺组织中的增龄变化

目的研究基质金属蛋白酶（MMPs）-2、-9及组织型基质金属蛋白酶抑制剂（TIMPs）-1在大鼠肺组织中的增龄性变化规律。方法不同月龄（1月龄、3月龄、12月龄、18月龄、24月龄）雄性清洁级（SD）大鼠47只分为5组,按月龄取实验大鼠的右下叶肺组织,用流式细胞术检测MMP-2、MMP-9及TIMP-1的表达水平,进行定量分析。结果 MMP-2、MMP-9和TIMP-1均随着月龄的增长呈先降后升波谷型曲线变化;3月龄、12月龄和18月龄MMP-2、MMP-9和TIMP-1均较1月龄明显下降,且以12月龄为最低值;24月龄MMP-2、MMP-9和TIMP-1均较1月龄上升。MMP-2/TIMP-1比值和MMP-9/TIMP-1比值均随着月龄的增长呈先升后降波峰型曲线变化;12月龄和18月龄均较1月龄明显升高,且以18月龄为最高点;3月龄的MMP-2/TIMP-1较1月龄有所上升,3月龄的MMP-9/TIMP-1与1月龄持平;24月龄的MMP-2/TIMP-1和MMP-9/TIMP-1较1月龄也有不同程度上升。结论大鼠肺组织中MMPs及其抑制剂TIMPs随月龄的增长,呈特征性变化规律。     

髓核突出模型大鼠背根神经节中Wnt5a的表达

目的:观察Wnt5a在大鼠髓核突出模型的表达变化,探索Wnt5a在神经根病中的作用。方法:将80只成年雄性大鼠随机分为假手术组(Sham组,n=20)、髓核突出组(NP组,n=20)、髓核突出+生理盐水组(NP+Saline组,n=20)、髓核突出+益赛普组(NP+Etanercept组,n=20)。从大鼠尾椎椎间盘中取髓核,将髓核种植于L5背根神经节旁,制作髓核突出大鼠模型。采用免疫组织化学法分别检测各组大鼠背根神经节中的Wnt5a蛋白的表达,利用RT-PCR的方法分别检测各组大鼠背根神经节中Wnt5a m RNA的表达。结果:免疫组化结果显示,各组大鼠背根神经节的大中小神经元均有Wnt5a的表达,NP组较Sham组在3天、7天时Wnt5a表达量均增加(P0.01),3天和7天时NP+Etanercept组大鼠背根神经节中Wnt5a的表达量较NP+Saline组均减少(P0.01)。RT-PCR的结果与免疫组化的结果相符,表现为NP组较Sham组在3天、7天时Wnt5a mRNA的相对表达量增加(P0.01),NP+Etanercept组大鼠背根神经节中Wnt5a的相对表达量较NP+Saline组均减少(P0.01)。结论:髓核突出并压迫背根神节时,可引起背根神经节Wnt5a的表达增加,且阻断肿瘤坏死因子α(TNF-α)时,背根神经节的Wnt5a表达减少。     

柴胡渗湿汤对哮喘大鼠血清中IL-5 及IL-13 影响的实验研究

目的:观察柴胡渗湿汤对哮喘大鼠血清中IL-5及IL-13含量的影响,探讨柴胡渗湿汤治疗哮喘的作用机制。方法:将84只雄性Wi star大鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型对照组、地塞米松组、定喘汤组、柴胡渗湿汤低剂量组、柴胡渗湿汤中剂量组、柴胡渗湿汤高剂量组,每组12只,采用卵蛋白制作大鼠哮喘模型,予相应药物干预。用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组大鼠血清中IL-5及IL-13水平。实验数据采用SPSS11.5统计软件进行分析。结果:实验后各组死亡率比较均无差异,P>0.05;模型对照组与正常对照组血清中IL-5及IL-13含量水平有显著差异,表明大鼠哮喘模型存在着血清IL-5及IL-13含量异常增高的病理状态;与模型对照组相比较,各治疗组血清中IL-5及IL-13的含量明显降低,其中尤以地塞米松组、柴胡渗湿汤中剂量组和柴胡渗湿汤高剂量组的作用更明显。结论:柴胡渗湿汤治疗哮喘的作用机制与降低IL-5及IL-13的水平有关;上述作用具有一定的量效关系,但并不因给药剂量的增加而增加。     

Effects of a High-Fat Diet and Strain on Hypothalamic Gene Expression in Rats

Objective: This study was designed to investigate whether dietary fat and genetic background might differentially alter the expression of hypothalamic genes involved in food intake. Research Methods and Procedures: Three-month-old Osborne-Mendel (OM) and S5B/Pl rats were fed either a high-fat or a low-fat diet for 14 days. mRNA for neuropeptide Y (NPY), corticotrophin-releasing hormone, NPY Y-1 receptor and Y-5 receptor, and serotonin 2c (5-HT2c) receptors were measured using Northern blotting or ribonuclease protection assays. Results: OM rats showed an increased expression of NPY and corticotrophin-releasing hormone compared with S5B/Pl rats. The expression of NPY-Y1 and -Y5 receptor mRNA was significantly higher in the hypothalamus of OM rats compared with S5B/Pl rats. The expression of 5HT-2c receptor mRNA was significantly reduced in both strains of rats eating a high-fat diet when compared with the animals eating the low-fat diet. Discussion: These data suggest that over activity of the NPY system may contribute to the development of obesity in OM rats and that expression of the 5HT-2c receptor gene may be modulated by dietary fat.     

表达K1-5 蛋白的人胎盘间充质干细胞抑制大鼠主动脉环血管生成的实验研究

目的:观察表达外源性Kringle1-5(K1-5)蛋白的人胎盘组织的间充质干细胞(HPMSCs)在体外对大鼠主动脉环血管生成的影响。方法:用胶原酶和贴壁法从人胎盘组织中提取间充质干细胞。选取感染复数MOI:50,将重组腺病毒载体rAd-K1-5感染HPMSCs至48 h;应用荧光显微镜观察转染效率。取8周雌性SD大鼠的腹主动脉,建立主动脉环血管生成体外模型,6天后观察基质胶内微血管形成的情况。结果:从人胎盘组织提取的成纤维样细胞具有贴壁生长特性,可向成骨细胞、脂肪细胞分化,证明从胎盘提取的细胞是间充质干细胞。采用rAd-K1-5腺病毒载体感染的HPMSCs可分泌Kringle1-5蛋白,表达K1-5蛋白的转基因HPMSCs处理的基质胶栓中管样结构的形成明显减少。结论:表达外源性Kringle1-5蛋白的HPMSCs能够体外抑制大鼠主动脉环新生血管生成。