辽宁产东亚钳蝎(Buthus martensii Karshi)毒两种毒素的纯化及其部分性质的研究

用CM-Sephadex C-50分离辽宁产东亚钳蝎毒得到十二个蛋白组份,对其中的第八组份进行了CM-Sephadex C-50重层析和Sephadex G-50凝胶过滤,最后得到两种纯化的毒素。应用低pH系统不连续聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳、SDS-不连续聚丙烯酰胺凝胶板状电泳及等电聚焦聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳鉴定均为单一条带。二者的分子量和等电点分别为8,980,8,660和7.58,7.90。还测定了粗毒对小白鼠的LD50(腹腔注射)、有关酶活力和毒素I的氨基酸组成。 试验结果还表明,用13％胶浓度的SDS-不连续聚丙烯酰胺凝胶板状电泳测定小于10,000道尔顿的蛋白质的分子量,可以获得较为满意的结果。     

沙冬青cDNA-AFLP银染和条带回收方法分析

通过比较而获得沙冬青cDNA-AFLP银染和条带回收的最佳方法.银染时采取Bassam法和Sanguinetti法,凝胶条带回收时利用直接回收法、试剂盒法、LiCl高盐法和聚丙烯酰胺凝胶高效回收法.比较不同方法对于开展聚丙烯酰胺凝胶电泳的影响.采用Bassam银染法对获得的扩增产物进行染色后无法得到差异显示条带,而利用Sanguinetti银染法显色后可观察到比较明显的差异表达条带;以直接回收法、PAGE试剂盒法、LiCl高盐法对差异条带进行回收后,二次PCR无法得到扩增产物,采用聚丙烯酰胺凝胶高效回收法后则可获得比较清晰的二次扩增产物.Sanguinetti银染法和聚丙烯酰胺凝胶高效回收法是应用于本研究的最佳方法.     

一种利用普通垂直电泳槽回收PAGE胶蛋白条带的简便方法

植物总蛋白样品经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离之后,直接用考马斯亮蓝染色、切胶回收目的条带,再用聚丙烯酰胺凝胶电泳槽电洗脱纯化得到单一条带的目的蛋白.此法可得到有活性的黄瓜衰老叶片中被特异激活的DNA酶,对样品中含量少,特别是与其他分子量相近的蛋白质十分有效.     

聚丙烯酰胺凝胶中DNA的银染方法

聚丙烯酰胶凝胶电泳具有极高的分辨率,用于DNA分析时,长度仅差0.2％（即对500bp样品中的1bp长度差异）也可以凝胶上分开,因此被广泛用于对DNA需要进行高分辨率分析的程序之中,直到目前为止它仍是DNA测序工作中DNA片段长度检测的主要手段。由于聚丙烯酰胺凝胶对荧光染料溴化乙锭的荧光有熄灭作用,EB染色法很难检测到少于10纳克的DNA条带,因此在传统的DNA测序工作中经常采用放射性同位素自显影方法来检测DNA带的位置,不但增加了实验成本,而且使操作本来就较为繁琐的聚丙烯酸胶凝胶电泳变得更加麻烦;利用荧光标记的方法虽然…     

一种新的制备酸性聚丙烯酰胺凝胶的引发系统

一种新的制备酸性聚丙烯酰胺凝胶的引发系统孙新立＊孙海虹王友爱（河北师范大学生物系,石家庄０５００１６）关键词引发系统;转化率;聚合;酸性凝胶;成胶时间碱性聚丙烯酰胺凝胶电泳已经广泛应用于生化分析的各个领域。但酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳、过硫酸铵（ＡＰ）－...     

聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳分离血红蛋白的研究

本文采用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳,借助圆盘电泳仪的简易装置,对正常血红蛋白及异常血红蛋白(Hb)等进行了分析,获得满意效果。一、方法 1.凝胶制备 40％聚丙烯酰胺液(丙烯酰胺38.4克及甲叉双丙烯酰胺1.6克溶于蒸馏水至100毫升)1份,20％两性载体(Ampholine,国产、pH4—10)0.5份,蒸馏水3份,0.25％过硫酸铵液(临用前配制)2份,混匀,立即分装于内径4毫米,长9厘米的玻管中,胶长6厘米,日光灯下聚胶(约2小时),待胶聚合后,加样     

微卫星PCR产物变性与非变性PAGE-银染检测方法的比较

用鸡的微卫星引物对6个中国地方鸡种的两个微卫星位点进行PCR扩增。将扩增产物在变性与非变性聚丙烯酰胺凝胶（PAGE）上进行电泳,经银染,表明微卫星产物在二者上的电泳结果有明显的差异。在非变性聚丙烯酰胺凝胶中,表现为有较多的非特异带,而在变性胶中微卫星扩增产物条带清晰,易于鉴定。Abstract：The genomic DNAs from six chicken breeds in China were amplified using two microsatellite primers. The PCR products were detected by non-denatured and denatured PAGE gels respectively, and the gels were dyed by silver. There were distinct differences between the two kinds of gel. In non-denatured gels. There were many nonspecific bands while clear purposed bands were showed in denatured gels.     

乌骨鸡皮肤酪氨酸酶的荧光特性研究

酪氨酸酶是生物体合成黑素的关键酶,广泛存在于动植物及人体黑素细胞中.我们曾用一步柱层析方法纯化了乌骨鸡皮肤酪氨酸酶.本文报道用荧光光谱学研究乌骨鸡酪氨酸酶物化性质的一些实验结果. 酪氨酸酶在聚丙烯酰胺疑胶上仅呈一条带. 乌骨鸡酪氨酸酶和许多既含色氨酸又含酪     

以噬菌体作为配基的一种新型亲和材料的制备方法研究

目的:针对亲和层析材料制备困难的问题,本文拟研究以聚丙烯酰胺冷凝胶为基质,以噬菌体展示多肽为配基制备亲和材料方法的可行性.方法:以低温聚合制备的聚丙烯酰胺冷凝胶作为基质,将筛选噬菌体展示人肝脏cDNA文库获得的噬菌体作为配基,通过两种不同的化学键合方法键合于凝胶表面,制备亲和材料.通过高效液相色谱法(HPLC)分析此亲和材料对药物分子是否具有亲和能力.结果:聚丙烯酰胺冷凝胶具有较大的孔径及良好的亲水性,适用于生物大分子如噬菌体的键合,键合特异噬菌体展示多肽的凝胶材料与键合未筛选噬菌体文库的亲和材料比较,对药物分子具有明显的高亲和力.结论:以展示特异多肽的噬菌体为亲和配基,以聚丙烯酰胺冷凝胶为基质,通过化学键和方法制备亲和材料是具有可行性的,此种亲和材料在生物分子纯化特别是药物分析纯化、蛋白质分离纯化以及细胞分离分析等方面将具有一定的应用前景.     

微量DNA的聚丙烯酰胺凝胶薄板电泳分析

聚丙烯酰胺凝胶薄板电泳,是进行微量DNA分析的一种有效方法。它能快速鉴定DNA的迁移位置,并将分子量大小不同的DNA片段进行分离。通常DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳均采用2—3毫米厚的平板胶,由于板胶厚度大,因