猪源肠道乳酸菌的分离与生物学特性研究

目的分离猪消化道中的乳酸菌。方法无菌采集健康猪的新鲜粪便,接种MRS培养基,厌氧培养分离乳酸菌。并对分离菌形态学,生化特性,产酸性,耐酸性,耐胆汁性,高温耐受性,抑菌性等方面进行研究。结果分离到5株嗜酸乳杆菌,分离的细菌对2株致病菌明显具有抑制性。结论为研制高效专一的猪用微生态制剂奠定基础。     

市售酸奶中乳酸菌的鉴定与耐药性

[目的]检测市售酸奶中乳酸菌的种类及其耐药情况.[方法]收集10种来自5个不同厂家的酸奶,通过细菌基因组重复基因外回文序列-PCR (repetitive extragenic palindromic-PCR,rep-PCR)结合16S rRNA同源性分析的方法对分离的乳酸菌进行基因分型和菌种鉴定.利用药敏纸片扩散法(K-B法)对分离的乳酸菌进行针对7种抗生素的药敏实验,用PCR特异性扩增结合测序的方法检测每个样品中不同基因型菌株的耐药基因(包括红霉素耐药基因erm A、erm B和四环素耐药基因tetM、tetK、tet S、tetQ、tetO、tetL、tetW).[结果]10种市售酸奶中分离到100株乳酸菌.其中,德氏乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii ssp.bulgaricus)23株,干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)26株,嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)30株,嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)5株,植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)6株,副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)10株.药敏实验发现所有100株乳酸菌均对链霉素和庆大霉素耐药,42株对万古霉素耐药,没有菌株对头孢氨苄,四环素,红霉素以及土霉素耐药.在28株经过16S rRNA测序的乳酸菌中检测到5种不同的耐药基因,在8株乳酸菌中检测到erm B基因,4株检测到tetK基因,2株菌检测到tetL基因,4株菌检测到tet M基因,2株菌检测到tet O基因,没有检测到erm A,tet S,tet Q,tet W基因.28株乳酸菌中有15株(53.57%)检测到耐药基因,其中有4株L delbrueckii ssp.bulgaricus检测到2-3种不同的耐药基因.[结论]本研究在市售酸奶中除了检测到商品标签上标注的L.delbrueckii ssp.bulgaricus和S.thermophilus以外,还检测到商标上没有标注的乳酸菌;作为常用发酵剂的德氏乳杆菌保加利亚亚种和嗜热链球菌更容易检测到耐药基因;分离得到的乳酸菌均对红霉素和四环素敏感却检测到相应的耐药基因,再一次证明了没有耐药表型的菌株也可能携带耐药基因.     

耐受微酸性次氯酸水乳酸菌的分离鉴定、耐受特性及益生特性

【背景】次氯酸水具有杀菌性,当其作为饮用水可能会对畜禽肠道内有益菌造成负面影响。【目的】筛选出具有耐受微酸性次氯酸水(slightly acidic hypochlorous acid water, SAHW)能力的乳酸菌并研究其益生特性。【方法】从内蒙古地区传统自然发酵制品中分离筛选出8株乳酸菌菌株,经16SrRNA基因测序进行鉴定。进一步通过耐受SAHW、耐酸、耐胆盐、疏水性及自凝聚能力试验进行耐受特性和益生特性研究。【结果】菌株MBH3-2为副干酪乳杆菌,其经过质量浓度为20mg/L的SAHW处理2h,菌落对数值仅下降0.3lg(CFU/mL),存活率为50.10%;而且在酸性(pH 2.0、2.5和3.0)、胆盐环境下均可存活;疏水率达62.12%,属于高度疏水性;自凝聚能力在2 h达到97.29%。【结论】最终确定一株具有优良耐受SAHW及基本满足作为微生态制剂要求的菌株,MBH3-2具有作为新型微生态制剂菌株的潜力。     

酸奶中保加利亚乳杆菌分离条件的优化

为优化从酸奶中分离保加利亚乳杆菌的培养条件,初步建立一种较简单有效的分离方法。以成都市市售的主要酸奶－华西牌瓶装酸牛奶为来源,采用MRS、SL、LS、蕃茄酵母4种经典的乳酸菌选择性培养基,并分别进行有氧及烛缸厌氧分离培养测定其得率。采用X^2检验对不同组的分离得率进行统计学分析。结果表明MRS培养基为酸奶中保加利亚乳杆菌分离首选培养基,分离得率达66．67％;微氧环境优于有氧环境（PO＜0．05）。     

乳酸菌微囊化工艺的初步研究

目的 对保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌的微囊化工艺进行摸索。方法 采用喷雾干燥方法。结果 以Ｃ胶（１３．３ｍｌ）＋Ｂ胶（２０ｇ）微囊化对乳酸菌的保护效果较好,菌体存活率达３４．６％,而Ｃ胶（７５ｍｌ）＋Ａ胶（５０ｇ）微囊化对乳酸菌的保护效果最佳,菌体存活率７８％,冷冻干燥工艺结合微囊化技术,可获得较高存活率的乳酸菌活性。结论 微囊化技术可提高菌体的抗热性。     

猪源乳酸菌的分离鉴定及部分生物学特性

目的 筛选出安全无毒可食用的乳酸菌。 方法 以仔猪粪便为样品,分离筛选出1株乳酸菌,经理化鉴定和16S测序,鉴定为乳酸片球菌,对其进行生长曲线、产酸能力测定,抗逆性、黏附性和抑菌能力等特性分析。 结果 该菌株在8 h达到稳定期,12 h菌液pH值为4.51,抗逆性、黏附性和抑菌能力等特性较为优秀。 结论 该菌株具有很好的生物学特性,可作为优秀的食用菌种应用于动物微生态制剂以及猪饲料添加剂中。     

安徽部分地区猪丹毒杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

【目的】对安徽省8个不同地区猪场临床疑似猪丹毒病/死猪进行细菌分离鉴定,并研究其生物学特性。【方法】通过形态学及培养特性观察、生化试验、PCR方法对菌株进行鉴定,并进行药物感受性实验及免疫保护实验。【结果】共分离到29株猪丹毒杆菌,源自8个地区的猪丹毒杆菌分离菌具有较一致的形态特征和相似的生化特性。对29株猪丹毒杆菌进行18种常用抗菌药物的药敏试验,结果显示分离菌对氨苄西林、头孢曲松敏感率均达100%,其次是青霉素93%、红霉素89.7%和头孢噻肟75.9%,对其他13种药物则表现不同程度的耐药性。8株不同地区猪丹毒杆菌分离菌的LD50在(14.30?2.36)×102 CFU/mL之间,显示分离菌对小鼠均具有较强的致病力。商品化猪丹毒G4T10株弱毒疫苗2次颈部皮下免疫小鼠后,分别用剂量为100 LD50的8株猪丹毒杆菌分离菌腹腔攻毒小鼠,免疫保护率为100%。【结论】安徽地区猪丹毒发生有上升趋势,不同地区的猪丹毒杆菌分离菌具有较为一致的生物学特性,青霉素类和头孢类抗菌药物有显著疗效,使用猪丹毒G4T10株弱毒疫苗可产生有效的免疫保护力。     

两株乳酸菌的产酸性能及其对抗生素敏感性研究

从市售酸奶中分离出2株乳酸菌,经鉴定为嗜热链球菌(St)与保加利亚乳杆菌(Lb),并对其产酸性能及对抗生素敏感性进行了研究。结果表明:St与Lb 1∶1混合发酵效果优于单菌发酵;乳酸菌对4种抗生素类药物敏感性较弱,服用该类药物对人体肠道内乳酸菌的有益作用产生的影响较小。     

内蒙古原始森林桦树皮内生和表生乳酸菌分离鉴定及其特性

[背景]随着乳酸菌产业的快速发展,不同环境乳酸菌群落结构的分析和菌种资源的开发利用已经成为该领域的研究热点.从不同环境、不同来源分离、保藏乳酸菌对于优良菌种的筛选和开发利用具有重要意义.[目的]阐明内蒙古原始森林桦树皮中乳酸菌的组成,并获得丰富的野生型乳酸菌资源,为优良菌株的筛选和工业化应用提供核心菌株,从原始森林桦树...     

圈养大熊猫肠道乳酸菌分离及益生特性

【背景】大熊猫数量稀少、繁殖困难,在其生长过程中极易感染消化系统疾病甚至死亡。【目的】分析圈养大熊猫肠道可培养乳酸菌的群落结构与功能,筛选具有益生特性的乳酸菌菌株,为大熊猫消化系统疾病的预防和肠道微生物研究提供理论参考及菌种资源。【方法】采用3种培养基分离大熊猫粪便中的乳酸菌,通过革兰氏染色镜检和过氧化氢试验对分离的菌株进行初步鉴定,基于BOXA1R-PCR图谱遗传多样性选取代表菌株进行16S rRNA基因测序分析并进行主成分分析(principal component analysis, PCA),同时分析乳酸菌菌株安全性和益生特性。【结果】通过初步鉴定共分离获得58株乳酸菌,根据BOXA1R-PCR结果挑选20株菌进行测序,结果显示20株菌分属于明串珠菌属(Leuconostoc)、肠球菌属(Enterococcus)、魏斯氏菌属(Weissella)和链球菌属(Streptococcus)这4个属,主成分分析结果表明不同年龄段的大熊猫肠道乳酸菌群落结构存在差异。20株乳酸菌均不溶血,17株乳酸菌对11种抗生素均敏感;11株菌耐pH值2.0酸性条件,14株菌对0.3%的胆盐具有良好...     

阴道中益生特性乳杆菌的分离与功能评价

目的 分离健康女性阴道中的乳杆菌并鉴定其益生特性,为开发治疗妇科疾病的复方益生菌制剂提供新型菌株。方法 采集健康女性阴道分泌物并分离筛选乳杆菌,通过16S rDNA序列分析鉴定乳杆菌分离株,并对其产酸性能、产H2O2能力、抑菌能力、产生物膜能力进行检测。结果 从50名健康女性阴道内共分离出179株乳杆菌,其中卷曲乳杆菌101株、詹氏乳杆菌42株、格氏乳杆菌26株、植物乳杆菌5株、唾液乳杆菌3株以及干酪乳杆菌2株。179株乳杆菌中有146株具有产酸能力,发酵液pH值的最低的5株菌分别为卷曲乳杆菌J3、卷曲乳杆菌J8、詹氏乳杆菌J87,植物乳杆菌J75以及格氏乳杆菌J35,其pH分别为4.20、4.23、4.24、4.26及4.36;产H2O2弱阳性菌株有87株、阳性有37株、强阳性有9株,这9株菌分别为卷曲乳杆菌J3、卷曲乳杆菌J8、卷曲乳杆菌J20、詹氏乳杆菌J87,詹氏乳杆菌J90、詹氏乳杆菌J15、格氏乳杆菌J11、植物乳杆菌J75、植物乳杆菌J69以及植物乳杆菌J40;能拮抗大肠埃希菌的菌株有115株、拮抗金黄色葡萄球菌的有84株、拮抗白假丝酵母的有52株;经统计,对三者同时有拮抗作用且作用最强的只有6株,分别为卷曲乳杆菌J3、卷曲乳杆菌J50、卷曲乳杆菌J62、詹氏乳杆菌J87、詹氏乳杆菌J16和格氏乳杆菌J66;不同乳杆菌产生物膜能力数值范围在1.0~5.4,卷曲乳杆菌、詹氏乳杆菌、干酪乳杆菌的生物被膜形成能力显著高于其他三种菌（P<0.05）。在全部179株菌中,卷曲乳杆菌J3和詹氏乳杆菌J87既具有强的产酸能力和产过氧化氢能力,又有较强抑菌活性,同时产生物膜能力也最强。结论 卷曲乳杆菌J3和詹氏乳杆菌J87具有优良的生物学特性,有望成为用于治疗妇科疾病微生态制剂的备选菌株。     

鸡肠源芽胞杆菌的分离、鉴定和抗菌活性

从人工饲养的健康三黄肉鸡的盲肠和大肠中分离出10株芽胞杆菌,对其进行菌落形态观察、革兰染色、芽胞染色和生理生化特性鉴定,确定为枯草芽胞杆菌、地衣芽胞杆菌、蜡状芽胞杆菌、巨大芽胞杆菌、球形芽胞杆菌、短小芽胞杆菌、凝结芽胞杆菌。同时测定了它们对动物病原性大肠埃希菌和链球菌的抑菌活性。其中有9株芽胞杆菌对大肠埃希菌有抑制作用,8株芽胞杆菌对链球菌有抑制作用。结果表明芽胞杆菌分离株Y2、Y3、Y4、Y5、Y6、Y7、Y8具有作为益生菌开发的潜力。     

云南泡梨中乳酸菌的分离鉴定及其应用

【背景】泡梨是云南省常见的一种腌渍水果,在云南加工食用已经有一百多年的历史,因其味道酸甜可口、风味独特而深受人们喜爱,而目前对泡梨中微生物种群的系统分析和发酵原理的研究尚未见报道。【目的】研究乳酸菌在云南泡梨中的分布及应用,阐明乳酸菌种类对泡梨发酵中风味物质的影响。【方法】从云南省4个不同地区采集12份泡梨样品,经菌落菌体形态、生理生化特性和16SrRNA基因序列分析进行菌种分离与鉴定。利用分离的乳酸菌为菌种进行泡梨的制备,采用GC-MS技术对人工接种的复合乳酸菌发酵与自然发酵泡梨进行风味物质的分析与感官评价。【结果】分离鉴定出79株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、 3株类植物乳杆菌(Lactobacillus paraplantarum)、1株戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)、1株干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、2株副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)和1株短乳杆菌(Lactobacillus brevis),植物乳杆菌为泡梨发酵中的优势菌。将分离所得乳酸菌用于泡梨制备的结果表明,...     

Isolation and characterisation of promoter regions from Streptococcus thermophilus

Abstract Four promoter regions required for the expression of a promoterless antibiotic resistance gene ( cat194 ) in Streptococcus thermophilus were isolated by random chromosomal cloning experiments. These were shown to be functional in vivo, and their sequences were determined. Each region expressed different amounts of Cat protein as determined by enzyme activities. One region, STP10, was found to contain the 5' coding region of the large ribosomal subunit protein L20.     

一株光合细菌的分离鉴定及其净化甲醛能力的研究

目的 筛选能够高效净化甲醛的光合细菌菌株。方法 采用双层平板法,从滇池湿地公园入口处污水中分离得到1株光合细菌,将其命名为PSB2-3,对菌株进行形态学观察、生理生化特性研究、16S rDNA分子鉴定及净化甲醛能力的测定。结果 经鉴定这株光合细菌为荚膜红假单胞菌。该菌株的最适生长条件：厌氧条件,温度30℃,pH 7.0～8.0,接种量25%～30%;最适碳源和氮源分别为CH3COONa和(NH4)2SO4。在最适生长条件下,该菌株对甲醛的耐受浓度可达60 mmol/L,96 h可将其降解73.35%,64 h可将40 mmol/L的甲醛全部降解,32 h可将20 mmol/L的甲醛全部降解。结论 菌株PSB2-3对甲醛具有很高的耐受浓度及降解能力。     

内蒙古牧区乳与乳制品中乳酸菌资源及其生态分布

从代表内蒙古牧区不同地域特点和独特生态环境的9个盟市18个牧业旗519户牧民家庭,使用目的采样和层次分类随机采样相结合的方法,共采集鲜乳及乳制品样品752份,分离到947株乳酸菌,并通过形态、染色、培养特性及生化反应等实验对其进行了鉴定,有765株实验菌株分别归于7个属50个种和亚种,其中归于乳杆菌属的有28个种和亚种;归于双歧杆菌属的有2个种;归于肠球菌属的有9个种;归于链球菌属的有1个种;归于乳球菌属的有3个种和亚种;归于明串珠菌属的有6个种和亚种;归于片球菌属的有1个种。研究表明,内蒙古牧区乳及乳制品中乳酸菌的种类多、分布广;有些菌株对温度和pH值等环境条件的适应性强;有些菌株还有较强发酵利用松三糖、蜜二糖、棉子糖等糖的能力。     

Lactic acid bacteria isolated from fermented flour of finger millet,its probiotic attributes and bioactive properties

This study aims to isolate and identify lactic acid bacteria from fermented flour of selected finger millet varieties grown in Sri Lanka and to evaluate their probiotic attributes and bioactive properties in vitro. Fifteen lactic acid bacteria were isolated from three varieties of fermented finger millet flour namely ravi, raavana and oshadha. These isolates were screened for phenotypical and biochemical characteristics. The selected isolates were identified by 16 S rRNA sequencing as Bacillus cereus (five strains), Streptococcus lutetiensis, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus fermentum (two strains), Brevibacillus borstelensis, Paenibacillus species, Lactococcus lactis subspecies lactis, Enterococcus faecium, Pediococcus acidilactici, and Enterococcus lactis, and their partial sequences were deposited in GenBank. Among them, five isolates including two isolates, L. plantarum MF405176.1 and L. fermentum MF033346.1 isolated from ravi; two isolates, L. lactis MF480428.1 and E. faecium MF480431.1 isolated from raavana; and P. acidilactici MF480434.1 isolated from oshadha varieties respectively, exhibited in vitro safety attributes and could tolerate acid, gastric juice, bile, salt, phenol, and temperature under simulated gastric conditions, and also were susceptible to antibiotics tested. Further, they demonstrated bactericidal activity against both drug-sensitive and multidrug-resistant pathogens. Among the selected isolates, L. plantarum MF405176.1 demonstrated highest hydrophobicity and adhesion to both colon colorectal adenocarcinoma and colon colorectal carcinoma cell lines. L. lactis subspecies lactis MF480428.1 exhibited the highest auto-aggregation and 2, 2, diphenyl-1-pricrylhydrazyl free radical scavenging activity. P. acidilactici MF480434.1 demonstrated the lowest IC50 values against HCT-116 and HT-29 cells. None of the LAB isolates could assimilate > 10% cholesterol in vitro.     

Relationship between lactose utilization of lactic acid bacteria and browning of cheese during storage

ABSTRACT

To produce processed cheese turning hardly brown during transportation and storage at room temperature, natural cheese showing less discoloration should be used as a raw material. The purpose of this study was to clarify the relationship between the lactose utilization of lactic acid bacteria and the browning of cheese during storage. Three type-cultures (Lactobacillus plantarum and Streptococcus thermophilus) and five isolates from Japanese pickles (Lactobacillus spp.) were used. Cheese curds inoculated with these bacteria were prepared and stored. The L. plantarum-inoculated curds showed smaller ΔE-values after storage, an indicator for the browning, compared to the others. Accumulation of galactose was observed in the curd to which S. thermophilus was inoculated. The sample showed larger ΔE-value after storage. These results showed the lactose utilization of bacteria affected galactose concentration in cheese and its browning during storage. L. plantarum might be a good starter for preparing cheese turning hardly brown.