全自动密闭式组织脱水机在石蜡切片组织处理中的应用

全自动密闭式组织脱水机问世以来,以其安全、高效和良好的处理效果等优点,深受病理学、解剖学、动物实验和组织胚胎等技术人员的青睐。我科自2002年使用全自动密闭式组织脱水机处理组织以来,组织的处理效果明显改观,石蜡切片质量显著提高,现将应用经验简介如下。材料和方法1·材料1·1标本组织来源于我院手术的活检标本。1·2仪器和设备樱花VIP-E150型全自动密闭式组织脱水机为日本原装进口,附带不锈钢脱水篮1只,可容150个包埋盒;塑料包埋盒为国产。1·3试剂冰乙酸,甲醛原液,95%乙醇,无水乙醇,二甲苯,石蜡(58-60℃)均为国产试剂。AAF固定…     

全自动密闭式脱水机试剂更换量化处理的探讨

在蜡块制作过程中 ,为了节约试剂 ,尽量用一批制剂多做蜡块与保证切片质量是一对矛盾 ,对此本文以如何能够既保证蜡块质量 ,又能节约试剂 ,通过 15 0次实验观察 ,总结出全自动脱水机试剂更换的量化处理方案。1 材料和方法材料 :组织来源为本院外科手术标本 ,组织块的取材厚度为 2～ 3mm。脱水机型号 :英国产SHANDON牌全自动密闭式脱水机 ,浸蜡用的石蜡其溶点为 5 6～ 5 8℃[1] 。试剂菜单 :AF液 1缸 (75 %乙醇 +10 %福尔马林 ) ,80 %乙醇 1缸 ,90 %乙醇 1缸 ,95 %乙醇3缸 ,无水乙醇 2缸 ,二甲苯 2缸 ,石蜡 4缸。程序 :组织块置脱水篮 ,…     

乳腺恶性肿瘤标本固定方法比较

目的 通过对比3种乳腺根治术标本的取材方式和固定时间,摸索制备高质量乳腺根治术标本切片的最佳固定方法。方法 随机收集上午、下午接收乳腺根治术标本50例,上午每例标本各取一块肿物、腺体组织和淋巴结组织,固定9 h后放入脱水机;下午每例肿物、腺体和淋巴结各取2块,1块固定4 h后放入脱水机,另1块固定28 h后放入脱水机。各组织常规脱水、石蜡包埋、切片后,进行HE染色、E-cadherin酶标法免疫组织化学检测和Her-2荧光原位杂交染色。比较3种固定方法的制片质量,探讨乳腺根治术标本最佳固定方法。结果 固定4 h即开始脱水的肿物和腺体组织的切片不完整发生率显著高于固定9 h和28 h;固定4h和9h的淋巴结切片不完整发生率高于固定28 h;固定4 h、9 h、28 h肿物、腺体HE染色质量无明显差异,但固定9 h与28 h的肿物、腺体E-Cadherin酶标法免疫组织化学正常率高于固定4 h,固定28h淋巴结染色质量高于固定4 h与9 h;固定4 h肿物Her-2荧光原位杂交成功率低于固定9 h与28 h。结论 乳腺根治术标本的肿物与腺体固定9 h后即可放入脱水机,淋巴结则需延长固定时间...     

腹水离心石蜡切片联合免疫组化检测CA125、CK7、Ki67对卵巢癌的诊断价值

目的:探讨腹水离心石蜡切片及免疫组织化学在卵巢癌诊断中的价值.方法:对30例腹水标本离心收集细胞沉渣,经自动脱水机脱水后石蜡包埋,切片进行免疫组织化学检测CA125、CK7、Ki67表达.结果:腹水离心石蜡切片细胞形态清晰,着色鲜艳,免疫组织化学阳性定位准确.结论:腹水离心石蜡切片联合免疫组织化学检测CA125、CK7、Ki67对卵巢癌具有临床诊断价值.     

脂肪组织石蜡切片制作方法探讨

目的探讨脂肪组织石蜡切片制作方法,改善和提高其切片质量。方法将送检的脂肪组织切开固定于中性甲醛液中;取材后将标本放入脱水机中,调整脱水机设置程序,在常规方法的基础上适当增加组织再固定及脱水、透明时间;包埋时采取挤压组织等改进方法。结果通过改进和调整后制作的脂肪组织蜡块平整无塌陷,石蜡切片优良,厚薄均匀,完整,无空洞、无挤压、镜下组织结构完整清晰,细胞无挤压、重叠等现象。细胞形态清晰,着色均匀艳丽。结论通过上述方法的改进,能尽可能多地减少脂肪组织的脂滴,增加脂肪组织的硬度,使组织和石蜡能很好的融合在一起,有利于切出完整的厚薄均匀的石蜡切片,提高制片质量。     

干枯组织的软化法

在日常病理技术工作中，有时由于脱水机出现故障或组织邮寄会诊等原因使组织标本变为干枯，致使切片无法进行，给病理诊断及回顾性研究造成很大影响。为了挽救干枯组织，我们经反复实验，采用碳酸钠软化法，对干枯组织进行软化，使其恢复到原来的形态，收到了较好的效果。现将此法介绍如下：１．软化剂的配方５％碳酸钠３份，冰醋酸２份，甘油１份，１０％福尔马林４份，混匀，即可使用。２．组织标本软化方法①将干枯组织浸入软化剂内２４小时，即能回软；②将其移入１０％中性缓冲福尔马林液内固定２小时；③按常规组织处理、切片及ＨＥ染…     

生物标本石蜡包埋保存法

生物标本石蜡包埋保存法其制作过程基本同显微镜永久玻片标本制片方法相似。新鲜的生物整体材料如植物柔软的果实、花、蕈类、小型哺乳动物、鱼类、两栖动物以及动物的局部器官和组织,经固定、脱水、石蜡渗透等步骤处理,可以制成干制本标。由     

草履虫大量材料集中制备与制片

通过系列创新措施,滤筛操作、预固定及固定、虫体纯化、接合生殖及横分裂生殖筛选富集,大批量虫体集中染色、脱水、透明等处理步骤进行草履虫玻片标本制作。采用滤筛操作法,比传统离心法具有能够一次性获得大量虫体材料和操作简便快速等优点。     

便携式脑循环功能分析仪的研制

介绍了一种结构新颖的便携式脑循环功能分析仪的基本原理、参数算法和仪器设计方法。该仪器动用超声多普勒、超声脉冲和臂式自动血压模块检测颈动脉血流速度、血管管径及肱动脉舒张压和收缩压。根据血液动力学原理建立了简化的脑血管动力学参数计算方法,可获得人体颈动脉系统外周阻力、动态阻力、临界压力及搏动指数等反映脑循环功能状况的动力学参数。该仪器结构精巧、操作便捷、指标敏感,适用于各级医院、医疗机构,特别是基层医院和社区康复中心对脑血管病进行早期诊断。     

应用VAN-Clear与低甲醛的病理组织处理改良方法的评价

目的探索一种可靠、稳定、高效、环保、可替代传统病理组织处理与制片方法的改良方法。方法选取10只实验大鼠,每只大鼠选取14种组织,每个组织均匀切成3块,第一块采用4%中性甲醛固定(改良中性甲醛组),第二块采用4%多聚甲醛固定(改良多聚甲醛组),第三块采用4%中性甲醛固定(传统中性甲醛组);两个改良组的组织经相应固定液固定后均用流水及75%酒精祛除组织的固定液,然后进入梯度酒精及VAN-Clear进行脱水透明;传统中性甲醛组在固定后不进行祛除固定液处理而直接入梯度酒精及二甲苯进行脱水透明。对比3组实验的HE、Masson、PAS及免疫组织化学染色效果和HE染色评分;比较取材室及技术室的甲醛、二甲苯及噪声污染的数据。结果两个改良组与传统组的HE、Masson、PAS及免疫组织化学染色效果及HE染色评分基本一致,3组HE切片的优良率均为100%,优级率均大于85%;甲醛及二甲苯检测结果远远低于我国的最高容许浓度,噪声监测优于中国环境噪声容许的夜间噪声标准。结论采用VAN-Clear以及低甲醛的病理组织处理改良方法可靠、稳定、高效、环保,可替代传统病理组织处理方法。     

一种微生物生长动态的研究仪器Biotran Ⅲ的用法

微生物生长动态的重要参数是细胞群体中细胞数目、形态和大小的变化。这些参数的测量虽很重要,但由于实验费时、费力,且有操作人员主观上的误差,从而影响了我国这方面研究工作的开展。最近由美国引入一批自动计数及求积的仪器——Biotran Ⅲ,是New Brunswich Scientific Co.Ine.生产的,该仪器能自动计数菌落,而且在与显微镜或其它图象放大仪联用时,     

病理石蜡制片中试剂标准化操作的应用体会

近年来,随着经济的发展,蜡块制作由人工操作转向全自动密闭式脱水机的广泛使用,组织的固定、脱水、透明、浸蜡已进入恒温、恒湿化操作,有效地提高和稳定了病理制片的质量,但在各实验室石蜡HE制片中的试剂使用尚未统一实现标准化操作,影响了制作的蜡块质量稳定性。现将石蜡切片试剂标准化使用问题作如下探讨：     

凤仙花属两种植物花粉的扫描电镜制样研究

采用腊叶标本花粉直接制样法、烘干法、FAA固定液复原法(酒精梯度脱水、自然干燥)和FAA固定新鲜花药法(脱水、干燥处理同前)四种不同处理方法对凤仙花属(Impatiens L.)植物红纹凤仙花(I.rubro-striata Hook.f.)和长角凤仙花(I.longicornut Y.L.Chen)的花粉进行了制样研究。结果表明:经后两种方法处理的花粉形状不变,且外壁网纹清晰,可获得质量较高的照片,观察时间也不受季节和产地的影响,既可在野外固定保存新鲜花蕾备用,又可利用标本馆现有的腊叶标本花粉经固定液复原后制样观察,操作简便,是进行花粉形态研究的一种较理想的方法。     

复苏植物耐脱水机制研究进展

大多数高等植物无法耐受极度脱水状态,然而有一小部分被称为"复苏植物"的植物,它们进化出独特的耐脱水机制,能够耐受体内水分丧失90%以上,且复水后迅速恢复生活状态。对复苏植物分布与分类,干旱诱导的形态结构变化,尤其是其耐脱水生理生化及分子机制进行了综述,并对复苏植物今后的研究和应用方向进行了展望。     

硬体壁动物和昆虫扫描的简便制作方法

扫描电子显微镜在各学科广泛应用以后,在动物,昆虫分类学中应用很广,但有些标本采到的数量很少,经扫描电镜标本常规制作镀金后标本不能再作分类用;经固定、脱水、干燥、镀金等处理后,原有姿态很难保存,我们试验了直接拍摄活虫、干标本、70％乙醇保存1年以上的标本、导电液浸泡及双重导电法等,得到了正在取食、产卵、交尾孵化等的照片,细微结构清晰,为分类及形态学研究提供了方便的手段。过去很多     

制作粉虱玻片标本的一种新方法

<正> 人们制作昆虫玻片标本,一般用酒精脱水,费时较长,有时易造成标本萎缩变形。现介绍一种制作粉虱玻片标本的方法,该方法利用冰醋酸脱水,避免了酒精脱水的不足,经作者使用,效果良好。 标本制作方法如下:(1)将标本放入5％     

仪器法耐万古霉素肠球菌及耐药性监测

自从 1988年首次发现肠球菌 (GRE)对糖肽类抗生素耐药以来 ,肠球菌己成为医院感染的重要病原菌 ,给临床治疗造成了极大的困难。为了解我院肠球菌的流行及耐药现状 ,我们对我院 1999年 5月至 2 0 0 2年 4月分离到的 51株肠球菌种类分布及耐药性作了回顾性分析 ,现将结果报告如下。1　材料与方法1.1　标本来源　从 1999年 5月至 2 0 0 2年 4月我院所有血、体液 (胸水、腹水、脑脊液等 )标本和部分痰、分必物等标本分离到的肠球菌共计 51株。1.2　仪器及试剂　 mini VITAL全自动荧光血培养仪及专用需氧和厌氧血培养瓶 ,VITEK-3 2全自动细…     

改良固定方式以提高淋巴瘤组织的制片质量

目的通过改良两种时段接收淋巴结的固定方式,提高淋巴瘤诊断的制片质量。方法随机收集上午10时左右及下午4时左右接收的132例淋巴结标本,每例各切取2块组织,上午切取的组织随机分为2组,分别行短时间固定处理程序(上午短时间组)和延长固定时间处理程序(上午长时间组)进行固定,下午切取的组织也随机分为2组,也分别行短时间固定处理程序(下午短时间组)和延长固定时间处理程序(下午长时间组)进行固定。回顾性分析并筛选出病理诊断为弥漫大B细胞淋巴瘤的58例,其中包括上午10时左右接收的26例及下午4时左右接收的32例。脱水处理后的4组组织进行包埋后,按常规进行切片、HE染色、CD79a免疫组织化学检测、C-MYC双色分离荧光原位杂交实验(fluorescence in situ hybridization, FISH)。通过比较4组切片出现肉眼可见裂隙、皱折及破碎不全发生率、HE染色质量、免疫组织化学检测阳性率、荧光原位杂交成功率,探讨最佳的淋巴结固定方法。结果上午长时间组制片CD79a免疫组织化学检测阳性率、荧光原位杂交成功率均不如上午短时间组,切片不完整发生率及HE染色质量与上午短时间组无明显差异;下午短时间组制片切片不完整发生率高且HE染色质量、CD79a免疫组织化学检测阳性率、荧光原位杂交成功率明显不如上午短时间组;下午长时间组切片以上指标均与上午短时间组无明显差异。结论上午接收的淋巴结标本应剖开于当天进行隔夜常规脱水,下午接收的淋巴结标本必须剖开后行延长固定程序进行脱水,随后得到的淋巴结组织在切片完整性、HE染色、免疫组织化学检测及FISH检测中能更好地提高淋巴瘤诊断的制片质量。     

一种用于显微观察的蓟马标本的制片新方法

蓟马（昆虫纲：缨翅目）是昆虫纲中有重要经济意义的目之一,由于个体微小,因此需要制作成高质量的玻片在高倍显微镜下观察和研究。如果玻片标本质量欠佳,常常导致无法鉴定其种类。不同的研究中处理蓟马标本的技术和方法各异。本文介绍一种新的制片方法,这一方法需要更少的化学药品,且适合处理深颜色的标本。而且,用这个方法处理的标本清晰,保持其自然体色,这些特征在鉴定种类时是十分必要的。本方法处理标本包括4个步骤：氢氧化钾透明（一般5％一10％KOH溶液中,常温放置1～2d或者100℃水浴加热1～2h,处置时间随材料大小和颜色的深浅有所变化）、纯酒精脱水（材料透明后转移到纯酒精中浸泡4—5min）、Hoyer＇s介质装片（滴一滴Hoyer＇s介质于载玻片中央,而后将脱水后的材料转移至介质中,用细拨针小心整翅、足以及触角的姿态,盖上盖玻片）和干燥贴标签（装片后放置在35～45℃烘箱中2～3d或者室温下放置1星期,然后将采集信息、寄主信息以及鉴定表格制成标签,贴于玻片两侧）,与其它制片方法相比,此法最简洁。文末对不同的制片方法作了比较和讨论。     

微生物自动化分析仪的毕业实习带教初探

对如何在微生物毕业实习教育中利用自动化仪器进行教学进行了初步探讨。从上机前的标本处理、正确使用仪器、仪器结果分析、认识仪器的局限性、发临床检测报告、利用VITEK软件的资料处理系统对医院感染进行监控和分析等 6大方面对学生进行培训。认识仪器鉴定的局限性和手工操作的重要性 ,把理论知识和实践工作有机地结合起来。