5-HT受体亚型在大鼠颌下腺的免疫组织化学定位及5-HT的功能研究

目的 研究探讨了大鼠颌下腺中5-羟钩胺受体亚型的分布以及5-HT功能。方法 免疫组织化学法和免疫酶联检测法,结果 大鼠颌下腺的浆液性腺泡上皮细胞,闰管,颗粒曲管,纹状管和排泄管的管壁上皮细胞均呈5-HT1AR离体培养的颌下腺分泌神经生长因子（NGF）,但是,当外源5-HT浓度大于10^-7时却抑制NGF的分泌。结论 提示5-HT对颌下腺NGF的分泌可能起双向调节的作用。     

小鼠颌下腺降钙素基因相关肽的免疫组织化学定位

本文用免疫组织化学ＡＢＣ法,对小鼠颌下腺中降钙素基因相关肽（ＣａｌｃｉｔｏｎｉｃＧｅｎｅ－ＲｅｌａｔｅｄＰｅｐｔｉｄｅ,ＣＧＲＰ）的分布进行了观察。结果表明：小鼠颌小腔内有降钙素基因相关肽免疫反应神经的分布,它们主要分布于小叶间结缔组织中。此外,颗粒由管细胞也呈降钙素基因相关肽免疫反应阳性。提示降钙素基因相关肽可能参与颌下腺的分泌活动及血液循环等生理调节。     

长春花悬浮细胞培养体系对脱氢表雄酮的生物转化

利用长春花(Catharanthus roseus (L.) G. Don)悬浮细胞培养体系对脱氢表雄酮进行了生物转化,通过柱层析及制备薄层层析进行分离纯化,并利用核磁共振氢谱、碳谱以及ESI等仪器分析手段进行了化合物的结构鉴定, 分离到13个转化产物,并对其中的9个进行了结构鉴定,它们分别是:androst-4-ene-3,17-dione (Ⅰ)、 6a-hydroxyandrost-4-ene-3,17-dione (Ⅱ)、 6a,17b-dihydroxyandrost-4-en-3-one (Ⅲ)、 6b-hydroxyandrost-4-ene-3,17-dione(Ⅳ)、 17b-hydroxyandrost-4-en-3-one (Ⅴ)、 15a, 17b-dihydroxyandrost-4-en-3-one (Ⅵ), 15b,17b-dihydroxyandrost-4-en-3-one (Ⅶ)、 14a-hydroxyandrost-4-ene-3,17-dione (Ⅷ)和17b-hydroxyandrost-4-ene-3,16-dione (Ⅸ)。所鉴定的9个化合物均为首次通过生物转化的方法从长春花悬浮细胞培养体系中分离得到。     

大鼠实验性胃溃疡自愈过程中颌下腺GCT细胞的组织学和组织化学观察

实验用成年雄性 Wistar 大鼠46只,分为溃疡组、盐水组和空白组。溃疡组和盐水组各又分为术后2、4、10、14、21和28天组。分别于术后相应时间取颌下腺,进行组织学和组织化学观察,结果表明:溃疡术后2～4天。多颗粒细胞和颗粒明显减少;术后10天略增多;术后14～21天,多颗粒细胞和颗粒明显增多,尤以术后14天明显;术后28天,上述变化趋于恢复。溃疡术后2～4天,GCT 细胞 PAS 反应明显减弱;术后14～21天,反应增强,以术后14天更明显;术后28天恢复;溃疡全过程中 GCT 管腔内容物 PAS 反应均强于对照组,溃疡术后2～4天,GCT 细胞 SDH 活性由略弱到略强,ACP、NE 活性略减弱;术后10～21天,SDH、NE 活性强于空白组;术后28天,SDH、NE 趋近恢复,ACP 于术后10天恢复,Mg~(++)—ATPase 活性于术后14～28天增强。作为反映 GCT细胞功能重要指标的颗粒多少和各类型细胞相对数量以及与 GCT 细胞分泌物的形成、物质转运和分泌等活动有关的酶活性.在溃疡愈合过程中呈现明显的规律性变化,提示 GCT 细胞可能参与了溃疡愈合的调节作用。     

脱氢表雄酮对大鼠脂类代谢和抗氧化作用的影响

目的：研究灌胃脱氢表雄酮（DHEA）对大鼠脂类代谢和抗氧化作用的影响。方法：选用健康雄性SD大鼠40只,随机分为4组（n=10）。对照组灌胃给予灭菌生理盐水,实验组灌胃给予20mg／kg、10mg／kg、5mg／kg体重的DHEA受试溶液,灌胃量均为1．5ml。每天一次,连续35d。实验结束后采血测定血糖（BG）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TO）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）,血清和肝脏超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量。结果：DHEA显著降低大鼠血糖、TG、HDL-c及血清和肝脏MDA含量,显著升高血清LDL-c含量和肝脏SOD活性,而对大鼠体重、血清TC含量和SOD活性没有显著影响。结论：DHEA具有降低大鼠血脂和增强抗氧化能力的作用。     

大鼠颌下腺促性腺激素释放激素及其mRNA的免疫组织化学与原位杂交研究

用免疫组织化学及原位杂交法,研究了促性腺激素释放激素及其ｍＲＮＡ在大鼠颌下腺的分布。结果显示,大鼠颌下腺的浆液性腺泡的上皮细胞,各级导管的上皮细胞及副交感神经节细胞均呈促性腺激素释放激素免疫反应阳性,阳性反应物质分布在胞质,胞核呈阴性反应。颌下腺的浆液性腺泡上皮细胞,各级导管上皮细胞同样被检测到很强的促性腺激素释放激素ｍＲＮＡ杂交信号。以上结果提示,大鼠颌下腺能自身合成促性腺激素释放激素,促性腺激素释放激素对消化功能可能有重要调节作用。     

大鼠胰腺γ-氨基丁酸免疫组织化学定位

本文用ABC—GDN免疫组织化学方法,研究了γ-氨基丁酸(Gamma—Aminobutyric Acid,GABA)在大鼠胰腺的定位和分布,并用相邻切片法,观察它与胰岛素的共存关系。结果发现GABA免疫反应阳性细胞主要分布于胰腺内分泌部(胰岛)。在外分泌部亦有少许分布。大部分胰岛细胞呈GABA免疫反应阳性,集中位于胰岛的中央部。相邻连续切片免疫染色证实GABA与胰岛素共存于胰岛B细胞中。外分泌部胰腺GABA免疫反应阳性细胞,呈零散分布于腺泡和导管上皮间。本文为进一步探讨GABA在胰腺的生理作用提供了形态学依据。     

长春花悬浮细胞培养体系对脱氢表雄酮的生物转化

利用长春花(Catharanthus roseus(L.)G.Don)悬浮细胞培养体系对脱氢表雄酮进行了生物转化,通过柱层析及制备薄层层析进行分离纯化,并利用核磁共振氢谱、碳谱以及ESI等仪器分析手段进行了化合物的结构鉴定,分离到1 3个转化产物,并对其中的9个进行了结构鉴定,它们分别是:androst-4-ene-3,17-dione(Ⅰ)、6α-hydroxyandrost-4-ene-3,17-dione(Ⅱ)、6α,17β-dihydroxyandrost-4-en-3-one(Ⅲ)、6β-hydroxyandrost-4-ene-3,17-dione(Ⅳ)、17β-hydroxyandrost-4-en-3-one(Ⅴ)、15α,17β-dihydroxyandrost-4-en-3-one(Ⅵ),15β,17β-dihydroxyandrost-4-en-3-one(Ⅶ)、14α-hydroxyandrost-4-ene-3,17-dione(Ⅷ)和17β-hydroxyandrost-4-ene-3,16-dione(Ⅸ).所鉴定的9个化合物均为首次通过生物转化的方法从长春花悬浮细胞培养体系中分离得到.     

神经肽Y免疫反应神经和细胞在大鼠颌下腺的分布

本研究应用免疫组织化学ＡＢＣ技术,观察了含神经肽Ｙ神经和细胞在大鼠颌下腺内的分布特点。结果显示：含神经肽Ｙ神经纤维主要走行于腺泡、导管及血管周围。颌下腺内神经节细胞和颗粒曲管细胞亦呈神经肽Ｙ免疫反应阳性。提示：大鼠颌下腺的腺体分泌和血液供应可能受神经肽Ｙ能神经调控。     

鼠胚中脑多巴胺神经元的体外发育及靶细胞对其影响

１４天大鼠胚中脑腹侧神经元在体外进行分散培养,用抗酪氨酸羟化酶血清（ＴＨ）检测多巴胺（ＤＡ）神经元。培养２４小时即可见ＴＨ阳性神经元,３天后数量开始增加,高峰出现在１４天左右,此后逐渐减少。ＴＨ阳性神经元胞体随培养时间的延长渐增大,核浆比例减少,表明神经元趋向成熟。收集培养液用高效液相色谱一电化学仪（ＨＰＬＣ－ＥＣ）测定其中ＤＡ递质的含量,在培养最初的７２小时内其浓度极低,至１５天时为初７２小时的５０余倍,此后开始下降,与ＤＡ神经元的形态发育同步。将中脑腹侧多巴胺神经元与其靶细胞纹状体神经元共培养时．ＴＨ阳性神经元数明显增加．培养液中的ＤＡ浓度均为同期中脑腹侧神经元单纯培养时的一倍,ＴＨ活性也较单纯培养时为高,表明靶细胞能明显提高ＤＡ神经元的存活能力。     

小鼠颌下腺上皮细胞的培养及表皮生长因子的鉴定

体外培养小鼠颌下腺细胞,形态学观察可见有上皮样细胞生长。免疫细胞化学及蛋白质印迹转移分析结果表明,体外培养的颌下腺上皮样细胞可合成并分泌表皮生长因子。     

大鼠泪腺睾酮受体直空负压ABC法光镜观察与免疫金探针超微结构定位

动物实验发现睾酮能改善干眼病动物模型干眼症状,促进泪腺分泌,但作用机理不明,本研究探讨泪腺细胞中是否存在睾酮受体。雌雄各8只大鼠的泪腺分别制成石蜡切片和超薄切片,睾酮分别采用ABC法及免疫金标记,通过真空负压ABC法光镜观察及免疫金探针超微结构定位进行细胞睾酮受体检查。结果：光镜下泪腺导管上皮细胞的胞浆及胞核中出现免疫染色阳性,泪腺上皮细胞则很少见到;电镜下泪腺细胞胞浆及核中可见金颗粒,对照组则染色阴性。结论 泪腺细胞存在着睾酮受体,睾酮通过受体对泪腺发生作用。     

大白鼠颌下腺促性腺激素释放激素受体(GnRHR)mRNA的RT-PCR和原位杂交的研究

本实验采用RT－PCR法探讨大白鼠颌下腺是否存在GnRH受体mRNA,并用原位杂交法对其细胞定位进行了研究。结果显示RT－PCR可扩增出大白鼠颌下腺GnRH受体mRNA的特异性片段,其碱基数与设计的一致,原位杂交发现颌下腺浆液性腺泡上皮细胞、颗粒曲管、排泄管及分泌管上皮细胞内有GnRH受体mRNA的杂交信号,信号物质分布于胸质内,胞核阴性。上述结果表明大白鼠颌下腺能合成GnRH受体,颌下腺产生的GnRH可作用于颌上腺的靶细胞,参与颌下腺生理功能的调节。     

大鼠胰腺嗜铬颗粒素A分布的免疫组织化学研究

本研究用ＡＢＣ免疫组织化学方法,在Ｂｏｕｉｎ液固定的常规石蜡切片上,观察了啥铬颗粒素Ａ在大鼠胰腺内分泌细胞内的定位和分布,并用相邻切片双标记法,观察了它与胰高血糖素、胰岛素、生长抑素的共存关系。结果发现,大鼠胰腺嗜铬颗粒素Ａ样免疫反应细胞主要分布于胰岛的周边部,胰腺外分泌部的导管和腺泡等处均未见ＣｇＡ祥物质存在。用相邻薄切片免疫显色技术证明,大鼠胰腺中ＣｇＡ样物质与胰高血糖素共存。结果提示,ＣｇＡ可能是胰腺内分泌细胞的一个新的标志物,在胰腺功能调节上发挥着重要作用。     

棉酚对大鼠前列腺细胞增殖的影响

我们从体内及体外二个方面研究了棉酚对大鼠前列腺细胞的影响。在体内研究中,给成年SD大鼠口服棉酚对其前列腺作组织学观察;在体外研究中,将棉酚溶液直接加入培养系统中,对包括组织学结构、细胞生长速度、DNA合成状态及细胞分裂周期等多项指标进行分析。实验结果指出,在形态学上,经棉酚处理的大鼠前列腺的体积及重量均下降,与对照组有明显差异;二组前列腺的腺泡在组织学结构上也有明显不同:对照组前列腺的腺泡中充满突出的褶襞,由饱满的立柱形的上皮细胞构成这些褶襞及腺泡壁;而在实验组的腺泡中褶襞较少,构成褶襞及腺泡壁的为方形或扁方形的细胞。而腔内具有褶襞的腺泡总量实验组低于对照组约14%。根据体外实验的结果,可见随着棉酚浓度的增加,细胞增殖水平和DNA合成水平也相应下降,而呈剂量及时间的相关效应,其中10μg/ml的剂量能引起最大的抑制作用。根据对细胞分裂周期的分析,在棉酚组细胞进入S期的比例仅为全部细胞的31%,而对照组则为41%,这进一步说明了由于棉酚阻碍细胞进入S期从而抑制了细胞的增殖。