不同來源的核酸原肌球朊的比較研究

近年来,大家都已公认,肌肉收缩功能的蛋白质基础是肌球朊与肌动朊。1946年Bailey以有机溶刘处理肌原纖维,用克分子鹽液抽提出一种分子不对称的新的蛋白质——原朊球朊;其化学结构、物理化学性质及肽链摺疊构型,都和肌球朊极为類似,但分子量僅为53,000,较肌球朊小十余倍。据Bailey推测,原肌球朊可能是构成肌球朊巨分子的基本单位之一。1951年Hamoir     

不同來源的原肌球朊化學結構的比較研究 Ⅰ.氨基酸組成與氨基末端結構

在前此的工作中,我們研究了各種不同動物中横紋肌、平滑肌或心肌原肌球朊的抽提、淨化、結晶及與核酸絡合的情况;並比較了幾種原肌球朊的若干物理化學性質。這些工作顯示了從不同種屬動物或不同功能結構的肌肉製備的原肌球朊,在分子大小、溶解度、結晶形狀與核酸絡合的量、聚合能力等多種物理化學性質上,有着細微或顯著的差異。雖然目前還沒找到原肌球朊有任何酶的活力,以與其他肌肉蛋白區分,但就可逆聚合、結晶能力、高度不對稱性、對有機溶劑的穩定性等性質上看,作為一類的蛋白質,原肌球朊是有其特徵的。為了更進一步比較它們在結構上微觀的異同,並深入了解     

不同來源的核酸原肌球朊的電泳行为及其所含戌醣核酸的核鹼組成

關於原肌球朊的許多未解決的問題之中,一項關鍵性的問題便是與核酸絡合的實質。Bailey的古典原肌球朊不含核酸;Hamoir用共沉澱法自鯉肉製得的原肌球阮合戊醣核酸達10—20％,曹利用鹽液自兔横紋肌,猪心心肌與牛子宫平滑肌製得結晶的原肌球朊,其核酸含量各為4％,16％,16％;盛与曹比較全面地研究了各種動物     

肌動朊、肌球朊与腺嘌呤核苷三磷酸在溶液中的相互作用

绪言 1939年和发现“肌球朊”具有腺嘌吟核苷三磷酸酶活力,同时底物水解所产生的能量,又用来供应肌肉的伸缩。这种结构与功能统一的观点,奠定了肌肉伸缩的生理化学基础。其後Straub发现了肌动朊,证实旧时所谓“肌球朊”实是肌球朊与肌动朊的络合体。目前研究肌肉     

兎原肌球蛋白的巰基及巰基邻近氨基酸的排列次序

原肌球蛋白是肌原纤维蛋白之一。在结构上,它有很显著的特征,如极性氨基酸侧链占60%以上,分子的三级结构很少而螺旋度很高,分子的外形和电荷分布极不对称,在特殊的断链情况下,可以找到一相当大的具有抗原性的碎片,其中不含硷性与芳香族氨基酸等等。原肌球蛋白在整体肌肉组织中的生理功能和在离体体系中的特殊性质自然是和这些结构上的特点分不开的。     

Prion名词的争议

Prion是protein和infection的缩写,是一种蛋白质侵染因子,引发致命性的脑病如人克雅病、疯牛病等,它与类病毒不同的是纯由蛋白质因子组成而不含有核酸。也就是说,尽管此病原不含核酸,但仅是蛋白质分子即可引发疾病,故称之为朊病毒（Prion）,它是一种科技创新的内含,这种蛋白质侵染因子（Prion）可被蛋白酶完全分解。Prion在我国最早音译叫普里昂,后科技名词委员会有关病毒学专家研究,将其译为朊病毒,而后多年引发争论不止。其实,普里昂和朊病毒均可,不用另立新词如朊粒等等。不过要特别提醒的是,不要把“朊”写成“肮”,在我国有些工具书如英汉生物学词典等将Prion译成中文名为肮病毒,朊与肮在汉字中是否通用,未做研究。     

人肌和兔肌肌酸激酶在低pH条件下再折叠的研究

利用蛋白质内源荧光和远紫外ＣＤ光谱研究了在低ｐＨ条件下人肌肌酸激酶和兔肌肌酸激酶的构象状态。结果表明,在低离子强度下,随着酸的加入人肌和兔肌肌酸激酶去折叠,至ｐＨ２．０附近几乎都达到充分去折叠。它们的色氨酸荧光发射峰位红移至３５０ｎｍ,这表明了内埋的色氨酸残基已经完全暴露到极性溶剂之中,它们的远紫外ＣＤ光谱表明二级结构也遭破坏,但是仍保留有相当部分的二级结构。而且在高离子强度低ｐＨ条件下由Ｇｏｔｏ等人首先发现的中间体构象状态（融球结构状态）在我们的实验中也被观察到了。它具有与天然酶类似的二级结构。色氨酸荧光发射光谱表明与天然酶类似,它的最大发射峰位也为３３５ｎｍ表明了蛋白质已经完全折叠,然而其荧光强度远低于天然酶,表明这种结构状态具有较大运动性而导致荧光的动态淬灭。上述结果支持了Ｇｏｔｏ等人的发现,说明了融球中间体结构可能是蛋白质折叠过程需经历的一个中间态。     

平滑肌收缩—松弛偶联机制及钙的调节作用

平滑肌细胞的重要功能是收缩,它的细胞胞浆主要被纤维丝所占据。电镜下各种平滑肌纤维丝按其大小、形态及组份可划分为三种类型:(1)含有 AT(肌纤蛋白)和 TM(原肌凝蛋白)的细丝,直径为50～80(?)。(2)含有 Ms(肌凝蛋白)的粗丝。通常直径为120～180(?)。粗丝的形态、大小随固定方法不同而有变异。纯化的平滑肌 Ms 分子构型表明它由两种纤维丝组成:一种是短的双极性纤维丝,一种是较长的“侧极性”横桥纤维丝。粗丝沿平滑肌长轴平卧,并被细丝包绕。平滑肌细胞内数量最多的是细丝,粗丝数量则视细胞中 Ms 数量多少而定。(3)由支架蛋白(skeletin)构成的纤维丝。支架蛋白首次由 Lazarides 从小鸡平滑肌细胞中分离出来,曾命名为联系蛋白(desmin),分子量55,000,直径100(?)。平滑肌支架蛋白与肌细胞的致密体共同构成有别于收缩装置的胞浆支架网。     

N-聚糖和O-聚糖在极性化细胞蛋白质分拣中的作用

极性化上皮细胞的质膜因其所含蛋白质、脂质等组分不同,可以分为细胞膜顶端和细胞膜基底侧端两个区域,而新合成的蛋白质向这两个区域的有效分拣是上皮细胞维持其自身极性及正常功能所必需的。细胞膜基底侧端蛋白质的分拣主要由位于该蛋白质胞质区的信号肽所介导,关于这方面的研究是比较深入的;而细胞膜顶端蛋白质的分拣机制目前尚未阐明,因而显得比较复杂。近年来,糖类分子作为生物体内细胞识别和调控过程的信息分子日益受到关注,人们通过干扰聚糖合成、基因突变以及构建糖基化缺陷细胞株等实验方法,逐渐地认识到糖类分子在极性化上皮细胞的蛋白质分拣调节中起重要作用。由于糖分子本身结构非常复杂,而且目前缺乏研究糖类分子的有效手段,使得糖生物学的研究远远落后于蛋白质和核酸的研究。从而导致探讨糖类分子在蛋白质分拣过程的具体机制相对来说比较困难。本综述拟简要概括糖类分子中N-聚糖和O-聚糖在极性化上皮细胞的蛋白质分拣过程中的作用,以及两种聚糖在此过程中行使分拣信号功能的可能机制。     

多肽分子疏水性的电喷雾飞行时间质谱法快速测定

疏水作用是决定生物分子的结构和性质的重要因素,特别是在蛋白质的折叠,药物分子与受体(蛋白质、DNA等)的相互作用中起着关键作用.分子疏水性的强弱决定于分子内非极性基团的含量.在一定的实验条件下,电喷雾所获得的信号与多肽分子内非极性基团的面积呈现良好的相关性.因此,采用电喷雾飞行时间质谱法,在数分钟之内快速测定了不同多肽之间的疏水性,所获得结果与色谱法结果一致.     

朊粒,生命与病原体

朊粒的本质是蛋白质。但能自我复制 ,与环境进行能量交换 ,是一种耗散结构 ,从分子生物学、生物物理学以及热力学的观点来看 ,都表明朊粒具有生命现象。同时朊粒具有传染性、致病性 ,因此它能作为一种独立的病原体存在。     

产朊假丝酵母细胞壁33 ku蛋白的功能研究

通过胰蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶对产朊假丝酵母Candida utilis细胞壁的酶解,发现一种分子质量为33 ku的酵母细胞壁主要结构蛋白. 研究显示,在细胞壁上这种蛋白质与细胞壁绝大多数蛋白质成分不同, 它不被胰蛋白酶水解,但对枯草杆菌蛋白酶的作用敏感.33 ku蛋白存在于酵母菌整个对数生长期的细胞壁中,特别是在对数早期细胞壁中,它是唯一的对胰蛋白酶作用不敏感的蛋白质成分.实验证明,该蛋白质对维系酵母细胞壁骨架成分葡聚糖的相互连接和细胞壁的完整结构,具有重要作用,是一种重要的酵母细胞壁嵌合蛋白.     

高等植物中的收缩蛋白

动物肌肉的收縮已經証明是由一种收縮蛋白——肌动球蛋白与ATP相互作用引起的。动物細胞的运动、鞭毛运动、变形虫运动等也存在着类似肌肉收縮的机制。后来Loewy,Tso等及中島宏通在低等植物粘菌(Myxomycete)的原貭团(Plasmodium)中发現一种对ATP敏感的蛋白质,具有类似肌动球蛋白的性质,Tso等命名为粘菌肌球     

朊毒体研究进展

朊毒体是一种有别于传统病原微生物概念的特殊致病因子。目前公认其化学本质是一种具有蛋白酶抗性的蛋白质分子。朊毒体又称为传染性蛋白颗粒或朊病毒,是人和动物的传染性海绵状脑病的病原体。本文从朊毒体结构特点、感染机制、动物模型及应用、病理变化及疾病诊断、研究前景等方面作一综述。     

一個新的肌肉結構蛋白之抽提与淨化

過去幾年在我們研究原肌球朊的過程里,經常注意到在粗製製劑中,有一在pH7時緩慢電泳的蛋白成份伴隨。這種蛋白質對热不穩定,其一般性質不類已知的肌肉蛋白。我們試驗了一系列的抽提與淨化的方法,企圖分離這種蛋白質,最後找到了一個簡便的製備步驟。其要點即將絞碎的肉末放紗布袋中,用自來水激流冲洗,去除水溶性肌     

甲壳动物横纹肌的收缩蛋白质与调节机制

甲壳动物横纹肌肌原纤维的肌丝陈列,收缩蛋白质和收缩的Ca²⁺依赖性调节机制与脊椎动物横纹肌有不少差异.脊椎动物横纹肌、甲壳动物快肌与慢肌的粗丝与细丝的数量比依次为1:2,1:3和1:6,肌丝阵列各异.甲壳动物粗肌丝由肌球蛋白和副肌球蛋白组成,其分子装配与脊椎动物不同.细肌丝含有肌动蛋白、原肌球蛋白和肌钙蛋白,肌钙蛋白-T分子量较高,肌钙蛋白-C仅1个Ca²⁺结合位点.甲壳动物横纹肌兼有细肌丝调节与粗肌丝调节.     

信号蛋白质14—3—3研究进展

14－3－3信号蛋白质家族是一组高度保守,分布十分广泛的多功能真核生物蛋白质,具有7个亚型,与各种信号肽分子包括激酶、磷酸酶、膜转移受体等结构,参与细胞内信号传导包括有丝分裂信号转导、细胞周期调节、细胞凋亡等,并对朊蛋白病有重要诊断价值。     

鲢鱼骨骼肌肌球蛋白重链基因的cDNA克隆与表达

肌球蛋白分子含有2个约200kD的重链亚基和4个约20kD的轻链亚基,重链亚基由球状的头部(S1)和α-双螺旋的杆部(Rod)组成1。在鱼类肌肉蛋白质的组成中,肌球蛋白约占肌原纤维蛋白的50%以上,并且其基因在生物进化过程中的变异性很大,以致肌原纤维蛋白性质的变化主要是由肌球蛋白的变化引起的2。       

脂筏的结构与功能

脂筏是膜脂双层内含有特殊脂质及蛋白质的微区.小窝是脂筏的一种类型,由胆固醇、鞘脂及蛋白质组成,以小窝蛋白为标记蛋白.脂筏的组分和结构特点有利于蛋白质之间相互作用和构象转化,可以参与信号转导和细胞蛋白质运转.一些感染性疾病、心血管疾病、肿瘤、肌营养不良症及朊病毒病等可能与脂筏功能紊乱有着密切的关系.     

从Na^＋.K^＋在细胞膜上的转运谈肾小管的重吸收

近十余年来,由于分子生物学的高速发展,人们对细胞膜已有了较深刻的认识。它系一种“流体镶嵌”结构,是由双层脂质与蛋白质分子按二维排列构成的复合体。嵌入脂质的膜蚕白其分布有明显的不对称性。由于膜的这种特殊性存在,因而绝大多数分子、离子难以通过细胞膜,仅脂溶性物质和气体以及某些药物易于直接通过,一些阳离子如Na~ 、K~ 、Ca~ 等均为强极性的水化离子,故难以通过细胞膜脂质疏水区。因而阳离子通过细胞膜时必须借助膜上的转运系统,这就是离子通道和离子载体。