平板菌落计数的改进方法

平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释之后,其中的微生物充分分散成单个细胞,取一定量的稀释样液接种到平板上,经过培养,由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。统计菌落数,根据其稀释倍数和取样结合总量即可换算出样品中的含菌数。传统的平板菌落计数正是基于上述原理而进行的。     

尿液菌落计数在儿童泌尿感染筛查中的应用

目的检验和比较尿液菌落计数在筛选儿童泌尿系统感染中的可靠性。方法收集儿童中段尿液,10μL进行细菌培养和菌落计数,剩余样本进行干化学分析,主要进行沉渣镜检、亚硝酸盐和白细胞酯酶检测。结果共检测中段尿液标本112份,其中32例培养出有意义细菌,阳性率为28.6%。尿沉渣镜检、干化学分析的敏感性分别为68.8%和78.1%,特异性分别为92.5%、90.0%。另有7例培养阳性,干化学分析阴性,假阴性为21.9%;6例沉渣镜检阳性,培养阴性,假阳性率7.5%;沉渣镜检、干化学分析的阳性预示值分别为78.6%和75.8%。结论尿液细菌培养和菌落计数在筛选儿童泌尿感染的敏感性要明显优于尿沉渣镜检和干化学分析,在儿童泌尿系统感染筛查中起到重要作用。尿沉渣镜检和干化学分析因为敏感性不足、结果易受到感染类型影响。尿液菌落计数可作为儿童泌尿系统感染检测的重要指标。     

基于目标颜色基及梯度方向匹配的菌落分割计数算法

【目的】通过菌落测试片提取菌落并计数,在农业、食品业、医疗卫生等领域中是一项常用且重要的工作。目前,菌落自动计数算法大都是以菌落培养皿为主要工作对象,对菌落测试片适用性较差。另外,目前相关技术在常规的粘连物体分割中有着较好的效果,但在菌落分割计数中,由于菌落本身的形态特征,对粘连菌落分割计数的效果尚不够精准。【方法】为解决此类问题,本文提出一种基于目标颜色基及梯度方向匹配的菌落分割计数算法。首先利用图像中菌落的颜色特征作为基,将图像转换到基空间内,以增强菌落与背景之间的差异,其次利用菌落图像的梯度幅值特征对梯度方向进行滤波,然后通过梯度方向进行匹配,进而将粘连的菌落分割,最后利用非极大值抑制的方法筛选出菌落并计数。【结果】经试验,本研究算法的计数精度可达98.00%,能够满足实际需求。【结论】在针对菌落的目标分割计数中,本研究算法不仅计数精度高,而且具有较好的鲁棒性,在对不同厂家的菌落总数测试片菌落分割计数中均有优异效果;然而在对大面积目标的检测分割中算法的准确率会有所下降,因此,该算法更适合于菌落等小目标的检测分割。     

图像处理软件Adobe Photoshop和Adobe Illustrator在昆虫绘图及图像处理中的应用

本文介绍了图像处理软件Adobe Photoshop和Adobe Illustrator在昆虫学中的若干应用技巧及注意事项,从而为该类软件在昆虫学研究工作中的使用及推广提供更多的思路。     

影响检测生活饮用水中菌落总数的相关因素探讨

参考GB 4789.2—2016对GB/T 5750.12—2006生活饮用水中菌落总数的检测方法加以改进,比较了培养基种类、培养温度、实验操作方法等对计数数据的影响.结果发现,使用平板计数琼脂经30℃培养7 d后菌落总数的计数,比营养琼脂相同条件下的计数提高了1倍以上;涂布平板法比倒平板法更易计数;营养修复不能缩短检...     

食品中菌落总数的测定分析

随着我国社会经济的持续发展,国民的物质生活水平显著提升,对食品安全的关注度也日益提高。在此背景下,相关职能部门越来越重视食品中微生物的检测,并将食品中菌落总数测定确立为一项强制性任务,以保障公众的食品安全。对此,文章首先阐述了菌落总数测定的定义和方法,然后分析了食品菌落总数测定中常见的问题,并探讨了主要的测定思路及质量控制措施,以期为保障食品中菌落总数测定工作的顺利开展提供有益参考。     

TTC在螺旋平板法测定冷冻水产品中菌落总数的应用研究

研究以2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)作为指示剂在螺旋平板法测定冷冻水产品中菌落总数的适宜用量。通过对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌三株标准菌株制备的菌悬液在含梯度含量TTC的平板计数琼脂(PCA)中分别进行菌落计数、生长和显色观察实验,初步筛选出适宜的TTC含量范围。以冷冻水产品样品在该用量范围内的菌落计数和显色观察实验,验证在实际应用中的适宜性。验证实验结果显示:在TTC含量为1.5mg/100ml的组与未添加TTC的对照组菌落计数结果经统计学检验无显著性差异,且菌落显色情况良好,有利于计数的准确性。     

保健食品双歧杆菌和乳酸菌计数方法的优化

目的 通过稀释液和培养基的选择对保健食品双歧杆菌和乳酸菌计数方法进行优化。方法 对2个品种6个批次的益生菌类保健食品,分别采用2种稀释液和3种培养基进行双歧杆菌和乳酸菌计数,并比较结果。结果 选择CYS缓冲液为最优稀释液,M-TOS培养基为双歧杆菌计数的最优培养基,BBL培养基为乳酸菌总数计数的最优培养基。结论 优化方法所得菌数均明显优于国标方法,可以用于保健食品的双歧杆菌和乳酸菌计数。     

食品中金黄色葡萄球菌平板计数不确定度的评定

在金黄色葡萄球菌检测过程中,由于样品中金黄色葡萄球菌计数受到样品制备、溶液稀释、向培养基添加样液、培养时间和操作人员技能等因素的影响,使检测结果离散度较大。实验主要研究采用在同一时间段内,应用同一批次的培养基和试剂,按相同的检测过程,对同一批样品进行检测。根据检测过程和检测结果对不确定度的贡献,探讨金黄色葡萄球菌计数的不确定度评定。     

3M Petrifilm快速菌落总数测试片法与食品中菌落总数检测国标方法（GB 4789.2‒2010）的比较

目的 比较3MTM PetrifilmTM快速菌落总数测试片（RAC）法与食品中菌落总数检测国标方法（GB 4789.2‒2010）检测熟肉样品、人工污染熟肉样品中的菌落总数结果的一致性。方法 分别用两种方法对129份熟肉样品和166份人工污染熟肉样品进行菌落总数项目的检测,并对3MTM PetrifilmTM快速菌落测试片法与国标方法的实验结果进行配对资料t检验、线性回归分析以及对数值差值绝对值（|dlog|）汇总分析。结果 第一部分：两种方法检测熟肉样品、人工污染熟肉样品的菌落总数检测结果t=1.5704、P=0.1188,差异无统计学意义;相关系数R2值分别为0.897、0.964;|dlog|≤0.500所占百分比分别为97.7％、100.0％。第二部分：两种方法检测295份样品,t=1.1336,P=0.2586;相关系数R2=0.992;|dlog|≤0.500的结果百分率为99.0％。结论 在检测熟肉样品、人工污染熟肉样品时,3MTM PetrifilmTM快速菌落总数测试片法与国标方法检测结果的一致性较好。     

测定λ原噬菌体诱导频率的新方法

本文报道两种测定λ原噬菌体紫外诱导频率的新方法 - 菌落计数法和平板诱导法.将溶源菌液经紫外诱导暗培养稀释后直接涂布在平板上培养,根据平板上菌落形成单位数计算λ噬菌体紫外诱导频率.另一种是将溶源菌与指示菌混合制备的平板用紫外线诱导,根据平板上噬菌体形成单位确定λ噬菌体紫外诱导频率.这两种方法不仅能准确测定噬菌体紫外诱导频率,而且操作简便,节省时间和用具,重复性好.本研究还将冬虫夏草浸出汁与溶源菌混合后进行紫外辐射,通过几种方法进行比较,结果证明建立的新方法确实可行,易操作;同时也表明冬虫夏草具有较强的抗紫外辐射作用.     

鸟类种群密度调查和估算方法初探

为探讨不同调查方法对鸟类种群密度估计的差异,于2010年12月15~20日,对云南省昆明市嵩明县嘉丽泽地区常见的四种鸟(白脊鹡鸰Motacilla alba、黑喉石駑(嶋)Saxicola torquata、白鹭Egretta garzetta、苍鹭Ardea cinerea)进行调查研究.之后分别采用无距离样线法、固定距离样线法以及可变距离样线法(Distance软件)分析,得出其相对丰富度、种群密度等相关信息.对比三种样线法在鸟类数量估计方面的优劣,认为无距离样线法不能真实地反映鸟类数量的多少,固定距离样线法结合样带计数法往往低估鸟类种群密度,呵变距离样线法结合Distance软件分析是相对更为先进和精准的种群密度估算方法.对如何进一步利用Distance软件的分析结果也进行了初步探讨.     

珞珈山森林土壤原生动物生态学研究及土壤原生动物定量方法探讨

１９９３年１月至１２月,用直接计数法和培养计数法对武昌珞珈山森林土壤原生动物进行了周年定量研究,发现原生动物丰度的周年动态趋势为：春季（３—５月）达到高峰,低谷出现在冬季（１—２月）,夏秋季保持较平稳的变动。原生动物丰度与土壤环境因子间的相关性分析结果表明,原生动物丰度的周年动态与土壤含水量及土壤ｐＨ值的变化呈显著的正相关,与土壤温度的变化无明显相关关系。珞珈山森林土壤原生动物优势种为梨波豆虫（Ｂｏｄｏｅｄａｘ）、球波豆虫（Ｂｏｄｏｇｌｏｂｏｓｕｓ）、卵形隐滴虫（Ｃｒｙｐｔｏｍｏｎａｓｏｖａｔａ）、长尾尾滴虫（Ｃｅｒｃｏｍｏｎａｓｌｏｎｇｉｃａｕｄａ）、线条三足虫（Ｔｒｉｎｅｍａｌｉｎｅａｒｓ）、斜口三足虫（Ｔ．ｅｎｃｈｅｌｙｓ）、长匣壳虫（Ｃｅｎｔｒｏｐｙｘｉｓｅｌｏｎｇａｔａ）、宽口圆壳虫（Ｃｙｃｌｏｐｙｘｉｓｅｕｒｏｓｔｏｍａ）。常见种有梨波豆虫（Ｂｏｄｏｅｄａｘ）、球波豆虫（Ｂ．ｇｌｏｂｏｓｕｓ）、跳侧滴虫（Ｐｌｅｕｒｏｍｏｎａｓｊａｃｕｌａｎｓ）、长尾尾滴虫（Ｃｅｒｃｏｍｏｎａｓｌｏｎｇｉｃａｕｄａ）、小滴虫（Ｍｏｎａｓｍｉｎｉｍｕｍ）、斜口三足虫（Ｔｒｉｎｅｍａｅｎｃｈｅｌｙｓ）、线条三足虫（Ｔ     

一种快速的活菌计数新方法研究

四唑盐（MTT）比色法是一种检测动物细胞活细胞数的方法。通过改变比色反应温度、反应时间和比色波长,建立了一种快速、准确的活菌计数新方法并将其应用于细菌PBW1培养过程中活菌浓度的测定。结果表明,新方法与平板稀释法的测定结果一致,且具有快速 、方便等优点。     

Evaluation of nested PCR assays for the detection of Legionella pneumophila in a wide range of aquatic samples

AIMS: To compare the sensitivities of two nested PCR assays for the detection of Legionella pneumophila to each other and to the plate counting technique (ISO 11731) in a wide range of aquatic samples. METHODS AND RESULTS: The nested PCR assay with the primer set LEG 225-LEG 858 revealed 56% of the 46 analysed aquatic samples as being positive for Legionella spp., while the primer set JFP-JRP yielded 98% positive samples. The detection was confirmed by sequencing the PCR products. These results are considerably higher than the result obtained with the plate counting technique (41%), indicating the higher sensitivity of PCR-based diagnostic methods. As the PCR assay with the LEG 225-LEG 858 primer set resulted in a lower number of positive samples, it is considered not sensitive enough for aquatic samples. Similar results for the respective primer sets were obtained for the detection of the species L. pneumophila, responsible for 90% of all human Legionella infections, in the aquatic samples analysed. Both microbial community analysis by PCR-denaturing gradient gel electrophoresis and the analysis of biotic and abiotic water quality parameters revealed no relation between L. pneumophila-positive and -negative samples and the physico-chemical and bacteriological characteristics of the aquatic samples. CONCLUSIONS: The results show the additional value of the PCR assay with the JFP-JRP primer set compared with the plate counting technique, as well as its applicability in a wide range of aquatic samples. SIGNIFICANCE AND IMPACT OF THE STUDY: This study shows the importance of comparing different primer sets for nested PCR assays for the detection of L. pneumophila in aquatic samples, as well as the lower sensitivity of the widely accepted plate counting technique (ISO 11731).     

基于纳米颗粒的基因突变检测方法研究进展

基因突变是指在分子结构上发生碱基对的组成或排列顺序的改变.它与人类疾病的发生息息相关,一直以来备受关注,开发准确可靠的检测方法,进一步探索核酸功能调控以及相关疾病的早期发现和治疗是研究人员不断努力的方向.近年来,纳米颗粒因其优异的光学、电学和生物相容性,在生物医学领域得到广泛应用.首次系统地论述基于纳米颗粒在基因突变检...     

Discontinuous expansion linked to sector formation in Pseudomonas aeruginosa colonies

Colonies of Pseudomonas aeruginosa exhibit sectors that were shown to be located at specific intervals within the colony. Maxima in the distribution of sectors were observed every 5 mm as measured from the center of the colony. These maxima correlated with changes in the expansion rates of colonies. The absolute average number of sectors per colony was higher for colonies grown at higher temperatures. These results increase our understanding of colony pattern formation. Received: 2 February 1999 / Accepted: 7 April 1999     

Mating system and multilocus associations in a natural population of Pseudotsuga menziesii (Mirb.) Franco

Summary Arrays of open-pollinated seeds were assayed for allozyme polymorphisms at ten loci (Aat2, Est1, G6pd, Idh, Mdh2, Mdh3, Pgm, Sod, 6Pgd1, 6Pgd2) to obtain estimates of the outcrossing rate and assess multilocus association in a natural population of coastal Douglas-fir, Pseudotsuga menziesii (Mirb.) Franco. The allele frequencies in the samples of adult trees and pollen-gamete pool were similar. Maximum-likelihood estimators of the outcrossing rate for individual loci and two multilocus models were derived using counting methods. The single-locus maximum likelihood estimates (MLEs) of the outcrossing rate were significantly heterogeneous; they varied over a more than two-fold range from 0.404 to 0.935, with an average MLE of 0.741. Both multilocus MLEs of the outcrossing rate were 0.887. The sample of trees was in random mating equilibrium when assessed on a pairwise-locus basis using Burrows' composite measure of gametic disequilibrium, with one exception (Mdh2 Sod) that was attributable to a rare gametic class. In the sample of pollen gametes, 5 of the 45 pairwise-locus associations were nominally significant at the 0.05 level: Idh Est1, Mdh2 Sod, Aat2 Est1, Aat2 Mdh3, and Est1 Mdh3. These apparent associations were attributable in most cases to the relative excess of uncommon or rare paternal gametes of discernibly outcrossed embryos. An additional two-locus association was identified for Mdh2 Pgm which was marginally significant for the major partition of the contingency table that excluded paternal gametes with the rare allele Mdh2 ² .     

多菌种酸奶中活性乳酸菌的计数方法研究

利用4种选择性培养基MRS、MRS-山梨醇、MRS-5．2、Elliker,采用平板涂布法和倾注接种法。在蜡烛缸法（缺氧）、封口膜法（微氧）和供氧条件下对4种市售多菌种酸奶中保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、双歧杆菌进行选择性计数方法研究。结果表明：蜡烛缸法较能反映乳酸菌活菌数量的实际情况,封口膜法次之;在不同培养条件下4种选择性培养基对于乳酸菌活菌的计数都是灵敏的;而涂布法和倾注法接种活菌数有显著差异,倾注法要优于涂布法。