麦胚凝集素对红细胞膜阴离子通透性的影响

本文研究了ＷＧＡ通过红细胞骨架对Ｂａｎｄ３主要功能－阴离子通透性的影响。采用ＮＯ３＾－测定法和ＮＨ４Ｃｌ等渗膨胀法,发现ＷＧＡ作用使膜阴离子通透性降低,并且这种作用随ＷＧＡ浓度增加而明显。在特定条件下,高浓度ＷＧＡ会引起部分红细胞明显变形。并由此改变ＷＧＡ对膜阴离子通透性效应,此外,还通过ＮＧＡ对ＷＧＡ作用的恢复效应及对红细胞渗和渗透脆性的研究,进一步探讨了ＷＧＡ的作用机制。     

pCMBS对完整红细胞膜阴离子通透性的影响

根据等渗ＮＨ４Ｃｌ溶血动力学,探讨了ｐＣＭＢＳ（对氯汞苯磺酸）对完整红细胞膜阴离子通透性的影响．０．０５ｍｍｏｌ／ＬｐＣＭＢＳ使阴离子通透系数Ｐｃｌ下降为对照的８６．５％;１．０ｍｍｏｌ／Ｌ以上浓度时Ｐｃｌ值反而变大。ｐＣＭＢＳ浓度高于０．３ｍｍｏｌ／Ｌ时,细胞悬浮液在１０ｓ之前光密度下降过快,偏离理论拟合方程且不受ＤＩＤＳ抑制．半胱氨酸对ｐＣＭＢＳ引起的效应有恢复作用。结果表明ｐＣＭＢＳ和股骨架蛋白上特殊－ＳＨ基相互作用,导致ｂａｎｄ３构象改变,致使改变膜时阴离子的通透性。     

精胺对红细胞膜阴离子通透性的影响

本文采用改进的NH_4Cl等渗膨胀法研究了精胺对红细胞膜阴离子通透性的影响.结果表明精胺对膜阴离子通透性有增大作用,并且这种作用随精胺浓度的增加及作用时间的延长而增大.本文还就精按的作用机制进行了探讨.     

O_2~-·与红细胞膜阴离子转运蛋白相互关系的研究

利用４,４′二硫氰２,２′二磺基芪（ＤＩＤＳ）对带３（ｂａｎｄ３）蛋白阴离子转运功能的专一抑制作用,研究了超氧阴离子（Ｏ－２·）进入红细胞对带３蛋白的依赖关系;同时根据红细胞在等渗氯化铵溶液中溶血的ｔ１／２,探讨了细胞外大量产生Ｏ－２·对带３蛋白转运阴离子功能的影响。结果表明：４０μｍｏｌ／ＬＤＩＤＳ完全抑制带３蛋白的阴离子转运功能,但并不影响Ｏ－２·进入细胞,证明Ｏ－２·进入细胞对ｂａｎｄ３蛋白无依赖关系;Ｏ－２·通过氧化修饰红细胞膜蛋白的－ＳＨ,使带３蛋白的阴离子转运能力下降,并可用－ＳＨ还原剂ＤＴＴ与巯基乙醇修复。     

能量补充对红细胞膜通透性的影响

本文报道利用亚硝酸钠(NaNo_2)穿透红细胞膜与血红蛋白(Hb)作用生成高铁血红蛋白(MetHb),测定MetHb可作为红细胞膜通透性的指标,研究在红细胞悬液中补充葡萄糖,萄葡糖-6-磷酸(G-6-P),3-磷酸甘油(3-PG),ATP后红细胞膜通透性的变化。萄葡糖,G-6-P,ATP均可不同程度地提高通透性,而3-PG有一定的抑制作用,可改善由血卟啉衍生物或γ-线(1000 rad)照射小鼠后引起的红血球通透性增加的作用,使恢复到接近正常水平。     

麦胚凝集素作用下膜血型糖蛋白A构象变化研究

为进一步验证麦胚凝集素作用下膜血型糖蛋白Ａ空间构象的变化,本文用傅里叶变换红外技术,定量测定了麦胚凝集素作用下,溶液血型糖蛋白Ａ和脂蛋白体膜血型糖蛋白Ａ的二级结构的改变,发现麦胚凝集素结合于血型糖蛋白Ａ导致血型糖蛋白Ａα—螺旋减少,β—结构增加,麦胚凝集素的抑制剂Ｎ—乙酰葡萄糖胺对麦胚凝集素诱导的血型糖蛋白Ａ二级结构的改变有抑制作用。本文同时用扫描隧道显微术直接观察了麦胚凝集素结合前后膜血型糖蛋白Ａ分子形态的变化。     

脱氧血红蛋白与红细胞膜的相互作用

人红细胞中血红蛋白主要以游离态存在,也有小部分与膜结合。文献报道,脱氧状态下两者相互作用加强,我们研究了这种相互作用的生物学意义,主要测定了脱氧状态下:(1)红细胞的低渗溶血速率;(2)红细胞膜对阴离子的通透性;(3)红细胞的变形性。     

慢性呼吸衰竭病人红细胞膜蛋白和红细胞变形能力的研究

目的：探讨红细胞膜蛋白在红细胞变形性改变中的作用。方法：参照Ｌｅａｍｍｌｉ和Ｐｅａｃｏｃｋ方法,测定了肺心病Ⅰ型呼吸衰竭（Ⅰ组）１８例、Ⅱ型呼吸衰竭（Ⅱ组）１８例和健康对照（ＣＧ）２０例的红细胞膜带３蛋白、膜收缩蛋白二聚体（ＳｐＤ）和四聚体（ＳｐＴ）的相对含量与红细胞变形能力。结果：Ⅰ、Ⅱ组带３蛋白、ＳｐＤ、ＳｐＴ相对含量和红细胞变形指数（ＤＩ）与对照组均有显著差异,且肺心病病人的ＤＩ与带３蛋白相对含量呈显著正相关,与ＳｐＤ／ＳｐＴ比值呈显著负相关。结论：带３蛋白和膜收缩蛋白的异常,可能是导致肺心病人红细胞变形能力降低的重要因素之一。     

稀土离子对带3蛋白阴离子转运活性及血影膜流动性的影响

测定了Ｌａ２＋、Ｇｄ３＋、Ｔｂ３＋及Ｙｂ３＋四种稀土离子对带３蛋白阴离子转运活性及对血影膜脂流动性的影响。结果如下：（１）稀土离子可强烈抑制带３蛋白的阴离子转运活性,抑制程度随稀土离子浓度增加而增加,最高达到６３．７％。（２）不同的稀土离子对带３蛋白的抑制程度不同,抑制程度从大到小的顺序为Ｙｂ＞Ｔｂ＞Ｇｄ＞Ｌａ。（３）稀土离子可显著降低血影膜流动性,并且在脂双层的全部厚度内都降低,降低的程度随稀土浓度的增大而增大。（４）不同的稀土离子对血影膜流动性的影响不同,作用从大到小的顺序与它们对带３蛋白活性抑制程度大小的顺序一致。（５）稀土离子对血影膜流动性的影响特征与稀土离子抑制带３蛋白活性的特征完全相符,带３蛋白中承担阴离子转运功能的部分是贯穿性膜蛋白,并且在阴离子转运过程中要发生显著的构象变化,因此稀土离子可能是通过作用于膜脂再影响带３蛋白活性的。     

红细胞膜对葡萄糖运输的快速测定

介绍了一种快速测定红细胞膜对葡萄糖运输特性的方法.实验表明,介质中红细胞的体积变化可用660nm波长处光密度值的变化来表证,由此得出葡萄糖跨膜通透过程中细胞内葡萄糖量的表达式.根据这种变化率即可计算出葡萄糖的通透特性参数K_m及I_(mdx)~(?)为提高测定精度,改装了仪器并联微机进行实时处理.     

带3蛋白转运吡啶二羧酸根离子的动力学研究

利用ＤＰＡ使Ｔｂ３＋的荧先强度显著增强的原理进行带３蛋白活性的测定,方法简便、灵敏、重复性好,而且能够进行连续荧光扫描测量．应用连续荧光扫描法测定了带３蛋白介导的ＤＰＡ与Ｃｌ－交换的动力学特征参数．结果表明,带３蛋白介导的ＤＰＡ与Ｃｌ－的交换对ＤＩＤＳ非常敏感,受ＤＩＤＳ的强烈抑制,抑制程度大于９０％;ＤＰＡ由内向外转运的米氏常Ｋｍ＝２８．１—３１．２ｍｍｏｌ／Ｌ;带３蛋白的天然底物Ｃｌ－从内侧竞争性抑制ＤＰＡ向外转运,抑制常数ｋｉ＝６０．４±６．９ｍｍｏｌ／Ｌ;膜内侧ＤＰＡ与外侧Ｃｌ－交换的活化能,在４—２５℃范围内为５．８±０．５ｋＣａｌ／ｍｏｌ２５—３７℃范围内为１９．８±１．５ｋＣａｌ／ｍｏｌ;膜内侧ＤＰＡ与外侧Ｃｌ－交换受转运介质ｐＨ（膜内外对称改变）的显著影响,ｐＨ＜７．４时,交换速度显著升高．本实验证明ＤＰＡ确是经带３蛋白而转运的,但转运机制可能与无机离子转运有所不同。     

苯肼对红细胞膜结构和功能的影响

通过对低渗溶血过程、荧光淬灭效应及阴离子跨膜通透性的研究,探讨了苯肼对红细胞膜结构和功能的影响。苯肼浓度0.01mM时,低渗溶血的K_1快过程开始变慢,表明膜脂质流动性的降低。苯肼浓度增至0.1mM后,膜和变性血红蛋白的结合大为增强,这种膜结构的变化提高了阴离子的跨膜通透性。     

不同状态血红蛋白对红细胞膜功能的影响

用荧光猝灭法测定了不同状态游离血红蛋白和红细胞血影膜间的相互作用,观察到和氧合血红蛋白相比,脱氧血红蛋白和膜上高亲和位点的作用加强,而高铁血红蛋白和低亲和位点的作用加强。本文用低渗溶血速率、阴离子通透性、变形性等三个参量测定了这种相互作用的变化对红细胞膜功能的影响,并讨论了脱氧状态下这种改变的生理意义。     

db-cAMP对转化细胞钙调素基因表达与细胞骨架的影响

转化的C_3H_(10)T_(1/2)细胞表现增殖速度加快、表面微绒毛增加,细胞变圆,叠层生长,ConA受体呈帽状分布,微管、微丝、纤粘蛋白分布明显减少。与增殖有关的癌基因c-fos表达增强,同时发现与细胞增殖、转化和细胞骨架调节有关的钙调素(CaM)基因表达加强。用1mmo/Ldb-cAMP处理转化细胞,观察到CaM基因和原癌基因c-fos的表达分别在处理后1小时和2小时急剧下降。处理后4—5天,转化细胞表型趋正常化,大部分细胞恢复单层生长。细胞表面微绒毛和泡状物减少,ConA受体帽状分布消失,恢复分散分布在细胞膜上的特点。细胞生长明显被抑制,用优先在G_1期表达的4F_1 cDNA为探针进行分子杂交,证实了经db-cAMP处理后的细胞被阻抑在G_1期。经db-cAMP处理6天的转化细胞中微管、微丝、纤粘蛋白基本恢复正常分布。实验表明CaM的表达增强与转化细胞表型变化和细胞骨架组装减弱密切相关,db-cAMP作用后CaM表达下降是抑制转化细胞增殖并使细胞表型和细胞骨架分布趋于正常的关键事件之一。     

竹红菌甲素对红细胞膜上几种酶光敏失活作用的研究

本文比较了竹红菌甲素对人红细胞膜AchE,GPDH,Na~ -K~ ATPase和Ca~(2 )-Mg~(2 )ATPase的光敏失活能力,结果表明甲素对Ca~(2 )-Mg~(2 )ATPase作用最强,Na~ -K~ ATPase次之,GPDH再次之,AchE最不敏感,甲素还引起膜蛋白巯基氧化,膜脂质过氧化。其中,巯基氧化可能是ATPase光敏失活的主要原因,而脂质过氧化对ATPase活力损伤作用不大。游离GPDH不如与膜结合的GPDH敏感。GSH,NAD分别对ATPase,GPDH有保护作用。膜蛋白的电泳及内源荧光证据表明:在GPDH活力受到严重损伤时,酶结构并未发生剧烈改变。     

竹红菌甲素对红细胞膜内脂双层的微扰

本文以荧光探针为手段,以人红细胞膜为材料,测量了膜偏振度的改变,荧光探针能量转移,荧光峰的蓝移和甲素激发峰的分裂。结果表明在有竹红菌甲素存在时,红细胞膜偏振度增加,探针荧光强度减小,荧光峰蓝移。甲素浓度增加时,上述现象更加明显,即它们之间有正的相关关系。同时,甲素激发光谱的a带发生分裂。据此,我们认为甲素对红细胞膜内脂双层产生明显微扰,甲素与红细胞膜间存在着相互作用。在甲素浓度较大时,它主要是渗入到红细胞膜脂双层的深层部位(膜脂肪酸链的12—16位)。