微生物学实验教学用鞭毛染色的良好菌种——灿烂类芽孢杆菌的鉴定

对自环境中分离的生有鞭毛的细菌进行了形态学观察、生理生化测定及系统发育分析．结果表明该菌属于类芽孢杆菌属,与已知种一灿烂类芽孢杆菌的各项性状极为相似,最终将此菌鉴定为灿烂类芽孢杆菌。研究中还发现该菌可作为良好的鞭毛染色的示范菌,可替代微生物学实验教学中经常使用的普通变形杆菌(Proteus vulgaris)用于鞭毛染色和细菌的运动性观察。     

观察细菌的形态和运动的好材料——螺旋菌

细菌基本形态的观察是原中学植物学实验必作内容之一。螺旋菌具鞭毛,运动快速,且形态较大,用它作为细菌运动性及鞭毛的观察材料比用杆菌好,还可用于细菌三型的观察,而且螺旋菌的取材方便,不必事先配制培养基培养。具体方法如下。 1.取材取厕所中表面呈白膜状的陈尿,其中含有大量的螺旋菌杆菌和少量球菌。 2.染色液的配制     

一种改良鞭毛染色法

鞭毛染色是一项常用而又难达到预期效果的技术。欲使染出鞭毛结构清晰、形态完整、本底干净需反复摸索染色条件。现有的鞭毛染色方法,有些烦琐且结果不稳定。我们所用的改良鞭毛染色法,方法简便易行,染色效果亦较好。现将具体的染色方法及染色结果报告如下：     

单核细胞增多性李斯特菌谷胱甘肽合成酶调控鞭毛形成研究

[目的] 本试验旨在构建单核细胞增多性李斯特菌谷胱甘肽合成酶基因gshF缺失株和互补株并研究其在细菌运动和鞭毛形成中的调控作用。[方法] 采用同源重组的方法构建得到gshF缺失株后,测定野生株及缺失株的运动性和体外生长能力;同时利用荧光定量PCR方法检测gshF缺失株中鞭毛相关基因转录水平的变化。[结果] 缺失gshF后细菌在体外培养基中的生长能力未受影响,但缺失株的运动性及鞭毛形成能力显著降低。此外,缺失株中鞭毛形成重要调控基因gmaR以及鞭毛结构元件基因flaA的转录水平显著低于野生株,而其他鞭毛相关基因的转录水平变化不明显。[结论] 研究首次表明单增李斯特菌谷胱甘肽合成酶通过调控鞭毛重要基因的转录进而影响细菌的运动性和鞭毛形成,研究有助于深入理解重要食源性胞内菌通过精确调控鞭毛形成以适应外界和宿主环境的分子机制。     

衣藻鞭毛永久装片的简便方法

鞭毛是衣藻在水中的运动器官.衣藻的鞭毛很纤细,不经染色,难以在普通显微镜下观察.观察衣藻的鞭毛,通常用鲁哥氏液染色,虽然这种方法很简便,但用此法染色后,经过脱水,鞭毛的颜色就会复失.为了制成永久装片长期观察,我们认为用以下方法制作手续比较简单,鞭毛的染色效果也较好.具体做法是:     

大肠杆菌鞭毛调控基因flhDC与生物材料植入感染的研究进展

随着生物材料被广泛应用于临床,生物材料植入感染成为令人棘手的常见医院内感染,有报道占院内感染的50%,大肠杆菌是临床以生物材料为中心感染的优势菌种。生物材料表面的细菌生物膜使其膜内细菌能有效抵御抗生素治疗和机体的防御反应,是导致生物材料为中心感染难以控制的根源。大肠杆菌的运动性与细菌生物膜形成密切相关,鞭毛是大肠杆菌的运动器官,鞭毛的生成需要三级基因的表达,操纵子flh DC编码鞭毛生成的一级主调控基因。我们推测:"鞭毛调控基因flh DC的表达→鞭毛的生成→细菌的运动性→细菌生物膜形成"之间存在着一一对应的关系,这为临床防治生物材料植入感染提供新思路。本文就以大肠杆菌鞭毛调控基因flh DC与生物材料植入感染做一简要综述。     

如何做好鞭毛染色

如何做好鞭毛染色王宜磊（山东省菏泽师专生物系２７４０１５）细菌鞭毛染色制片技术是微生物学的重要实验。鞭毛着生的位置和数目是种的特征，对细菌分类具有重要意义。鞭毛是细菌的运动“器官”。细菌的鞭毛极为纤细，一般直径只有１０～２０ｕｒｎ，只有用特殊的鞭毛染...     

结晶紫溶液鞭毛染色法 郭恒彬

细菌的鞭毛是细菌的一种特殊结构,鞭毛染色常用硷性复红乙醇饱和液或结晶紫乙醇饱和液染色。对后者反复试验未能使鞭毛着色,分析染料的溶解度及配制时各染液混合后出现大量结晶紫沉淀物,考虑染液配制过程中损耗大量媒染剂使鞭毛     

细菌的运动性及其在致病初期过程中的作用

主要叙述了细菌的运动性及其在致病(初期)过程中的作用原理。细菌的运动性主要是靠鞭毛的旋转驱动的,可分为游泳运动性和爬行运动性2种方式。编码运动性和趋化性的基因大部分位于染色体上,但也有少数位于Ti质粒上。细菌的运动性、趋化性具有重要的病理学意义,而且主要在侵染初期发挥作用。     

细菌鞭毛的染色

细菌中的弧菌、螺菌及部分杆菌具有鞭毛,而鞭毛的有无及其着生状态又具有种的鉴定意义。细菌鞭毛染色的方法虽然很多,但要得到满意的结果往往不易做到,特别对于初学者就更难以掌握。由于教学科研的迫切需要,我们对细菌鞭毛染色方法进行了一些研究,现介绍如下:     

延长鞭毛染色液使用时间的研究

介绍一种保存细菌鞭毛染色液的简便方法。采用低温、隔绝空气、避光的手段,可以比较稳定地保存鞭毛染色液,适当延长其使用时间。     

三种细菌鞭毛染色法的比较

三种细菌鞭毛染色法的比较济宁医学院２７２１１３刘昌平,陈恩华鞭毛是某些细菌的一种特殊结构,必须通过特殊的染色法,将纤细的鞭毛增粗染色后,才能在一般光学显微镜下观察到,但由于影响因素较多,直接鞭毛染色往往难获成功,为了获得一种实验教学较为满意的染色法,...     

细菌鞭毛染色菌龄初试

细菌鞭毛染色的适宜菌龄,一般在10—24小时之间,但在实践中发现,不同种细菌染色菌龄有不同特点。普通变形菌、铜绿色假单胞菌和大肠埃希氏菌都是无芽孢菌,因而不会由于产生芽孢而使鞭毛脱落,所以染色菌龄较长,从4小时开始,到24、48、72小时均可进行染色,结果也比较理想。可见,这几株菌的鞭毛染色几乎不受菌     

根瘤菌的鞭毛染色

细菌的鞭毛极为纤细,必须用特殊的染色方法才能在普通光学显微镜下观察到。根瘤菌的鞭毛则更为纤细,染色更加困难。特别是根瘤菌的种类较多,同一个种的不同菌株生长速度相差很大,鞭毛出现的时间很不一致。因此,     

细菌鞭毛的致病性及其免疫学应用的研究进展

鞭毛是细菌体表重要的附属结构之一,一直以来仅被简单地当做运动器官。但近几年来,随着对鞭毛结构和致病性作用的深入研究发现:鞭毛及其运动性可促进细菌对于宿主细胞的黏附与侵袭,在细菌生物被膜形成过程中起重要作用,与细菌毒力因子的分泌也密切相关,并且鞭毛素蛋白能通过与细胞上Toll样受体5(TLR5,toll-like receptor 5)结合而诱导机体促炎性反应。同时,鞭毛也因其独特的免疫学效应而被应用于新型免疫佐剂的研发。本文主要就鞭毛的结构、对细菌致病性的影响及其免疫学应用等方面进行综述。     

悬滴法染色观察细菌的运动

细菌中的螺菌、弧菌和部分杆菌具运动器官——鞭毛。能够运动是这些细菌的基本特性之一。欲观察细菌的运动性常采用暗视野和悬滴法,但因生活的细菌在普通显微镜下透明度较高,悬滴法又只能在高倍镜(40×)下观察,这些都给初学者带来困难。我们改用无毒的美兰染色后活体观察,效果较理想,现介绍如下: 材料为培养6—10小时的“7216”(苏云金芽孢杆     

细菌鞭毛的致病性及其免疫学应用的研究进展

摘要:鞭毛是细菌体表重要的附属结构之一,一直以来仅被简单地当做运动器官。但近几年来,随着对鞭毛结构和致病性作用的深入研究发现:鞭毛及其运动性可促进细菌对于宿主细胞的黏附与侵袭,在细菌生物被膜形成过程中起重要作用,与细菌毒力因子的分泌也密切相关,并且鞭毛素蛋白能通过与细胞上Toll样受体5(TLR5,toll-like receptor 5)结合而诱导机体促炎性反应。同时,鞭毛也因其独特的免疫学效应而被应用于新型免疫佐剂的研发。本文主要就鞭毛的结构、对细菌致病性的影响及其免疫学应用等方面进行综述。     

细菌鞭毛染色方法的再改进

对16种细菌进行改进的细菌鞭毛染色,其染色效果较好．     

细菌鞭毛染色中几种制片方法比较

细菌鞭毛染色是微生物学实验教学内容之一,也是对细菌进行分类鉴定的重要实验之一。但由于在染色过程中鞭毛常脱落,而且背景上也堆积了染料沉淀,给镜检观察造成困难。为此,我们采用鞭毛染色实验常用菌种,用几种制片方法进行比较,发现用液体培养菌种或菌悬液为材料,用适当方法制片,然后再进行染色观察,可较好地克服上述困难。具体方法及结果如下：１　材料１．１　菌种　苏云金杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）１．２　鞭毛染色液１）Ａ液：单宁酸：５ｇ;ＦｅＣｌ３：１．５ｇ;蒸馏水：１００ｍｌ;福尔马林（…     

单增李斯特菌二硫键形成蛋白DsbG介导酸耐受及鞭毛运动性调控北大核心

【目的】本研究旨在通过构建单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)二硫键形成蛋白编码基因dsbG缺失株和回补株,探究该蛋白在酸耐受和鞭毛介导的运动性中发挥的生物学功能。【方法】利用同源重组方法构建单增李斯特菌dsbG缺失株和回补株,比较野生株和突变株在不同pH梯度培养基条件下的生长速率和存活率;通过实时荧光定量PCR方法,比较致死酸应激条件下野生株和缺失株酸耐受基因转录水平。通过半固体培养基、荧光定量PCR方法和鞭毛负染色透射电镜观察,比较野生株和突变株的运动能力、鞭毛相关基因转录水平变化和鞭毛形态差异。【结果】与野生株相比,dsbG缺失株的生长能力和速率差异不显著;在pH 3.5(盐酸和柠檬酸)培养条件下,存活率显著降低;精氨酸合成途径基因argD和argF转录水平分别下调2.4和3.7倍。同时,dsbG缺失株的运动能力减弱,且鞭毛形成相关的flaA、flgB和flgD等基因转录水平显著下调(分别为29.7、6.7和6.9倍),鞭毛形成能力减弱。【结论】本研究首次证实了单增李斯特菌二硫键形成蛋白DsbG能感应低pH应激,并形成耐受;证实了DsbG通过调控鞭毛相关基因的转录进而影响细菌的鞭毛形成和运动性。本研究有助于深入了解二硫键形成蛋白家族介导单增李斯特菌环境适应的分子机制,为食源性致病菌的防控提供理论基础。