GnRH的研究进展

主要对促性腺激素释放激素的种类、合成与降解,调控机制及应用等方面的最新研究动态作了简要综述。     

卵巢中存在GnRH的mRNA

既往工作表明:促性腺激素释放激素(GnRH)具有多种垂体外作用。它可通过黄体和颗粒细胞上的特异性结合位点调节卵巢功能。由于血液循环中GnRH水平太低不足以与外周位点结合;而且,GnRH拮抗物对去垂体大鼠卵巢功能仍具有调节作用。因此推测卵巢能产生GnRH或GnRH样物质作为旁分泌激素。但是分离纯化这些肽类物质的工作未获得成功。作者在本工作中采用反向转录-聚合酶链锁反应(RT-PCR)     

GnRH拮抗剂在超促排卵中的应用

目的:比较GnRH拮抗剂与GnRH激动剂促排卵方案的临床应用效果.方法:比较GnRH拮抗剂与GnRH激动剂方案及GnRH拮抗剂方案妊娠组与非妊娠组的HCG日子宫内膜厚度及E2水平、受精率、可用胚胎率、着床率、临床妊娠率、流产率等.结果:GnRH拮抗剂与GnRH激动剂方案的临床资料无统计学差异,GnRH拮抗剂方案妊娠组血E2水平及可用胚胎率明显高于非妊娠组,差异具有统计学意义.结论:GnRH拮抗剂方案中卵泡后期血E2上升缓慢或停滞,血HCG日E2明显偏低,提示妊娠结局不良.但是,GnRH拮抗剂是否对子宫内膜及胚胎有影响仍需进一步研究.     

孕酮通过细胞膜机制刺激下丘脑GnRH释放

孕酮刺激下丘脑释放促性腺激素释放激素(GnRH)的分子机制不同于经典的甾体激素两步作用原理,可能通过其它的细胞机制发挥作用。为了探讨孕酮作用于下丘脑细胞可能存在的细胞膜机制,作者将孕酮连接在牛血清白蛋白(BSA)分子上,观察它们在用雌激素维持的去卵巢未成年大鼠的离体视前区-下丘脑前区-下丘脑内侧基底区(POA-AHA-MBA)低冷灌流系统中对 GnRH 释放的影响,结果表明,孕酮-3-羧甲基肟 BSA(P-3-BSA)可使 POA-AHA-MBA 释放 GnRH 逐渐增加,4h 后达到高峰;而孕酮-11α-半琥珀酰-BSA(P-11-BSA)和11-去氧可     

GnRH脉冲模式对FSH分泌的影响

本文目的是进行GnRH脉冲模式对FSH分泌影响的研究。用GnRH以不同的脉冲振幅、不同的频率对GTH细胞进行刺激后,检测FSH的24 h分泌量。结果表明,FSH的24 h分泌量,以频率为120 min、振幅20 nmol/L时的GnRH脉冲模式为最高,并且随着GnRH刺激频率的增快或减慢,FSH的分泌量均呈逐渐减少趋势。所以,GnRH脉冲频率本身就是一个调控信号,不同脉冲频率GnRH对FSH表达有着明显不同的影响,在相同振幅条件下,低频脉冲刺激(120 min间隔)时FSH的分泌达到高峰。     

Pulsatile and Sustained Gonadotropin-releasing Hormone (GnRH) Receptor Signaling: DOES THE ERK SIGNALING PATHWAY DECODE GnRH PULSE FREQUENCY?*

Gonadotropin-releasing hormone (GnRH) acts via G-protein-coupled receptors on gonadotrophs to stimulate synthesis and secretion of luteinizing hormone and follicle-stimulating hormone. It is secreted in pulses, and its effects depend on pulse frequency, but decoding mechanisms are unknown. Here we have used an extracellular signal regulated kinase-green fluorescent protein (ERK2-GFP) reporter to monitor GnRH signaling. GnRH caused dose-dependent ERK2-GFP translocation to the nucleus, providing a live-cell readout for activation. Pulsatile GnRH caused dose- and frequency-dependent ERK2-GFP translocation. These responses were rapid and transient, showed only digital tracking, and did not desensitize under any condition tested (dose, frequency, and receptor number varied). We also tested for the effects of cycloheximide (to prevent induction of nuclear-inducible MAPK phosphatases) and used GFP fusions containing ERK mutations (D319N, which prevents docking domain-dependent binding to MAPK phosphatases, and K52R, which prevents catalytic activity). These manipulations had little or no effect on the translocation responses, arguing against a role for MAPK phosphatases or ERK-mediated feedback in shaping ERK activation during pulsatile stimulation. GnRH also caused dose- and frequency-dependent activation of the α-gonadotropin subunit-, luteinizing hormone β-, and follicle-stimulating hormone β- luciferase reporters, and the latter response was inhibited by ERK1/2 knockdown. Moreover, GnRH caused frequency-dependent activation of an Egr1-luciferase reporter, but the response was proportional to cumulative pulse duration. Our data suggest that frequency decoding is not due to negative feedback shaping ERK signaling in this model.     

新生大鼠下丘脑GnRH免疫反应性神经元的体外发育

应用神经细胞培养、免疫细胞化学、图像分析等技术,研究了新生大鼠下丘脑促性腺激素释放激素（ＧｎＲＨ）神经元的体外发育规律。培养１ｄ即可见ＧｎＲＨ－ＩＲ神经元;１～３ｄ,ＧｎＲＨ－ＩＲ神经元生长最快,胞体和突起的平均生长速度分别为４５．５９μｍ２／ｄ和１９．３９μｍ／ｄ,染色加深;培养７ｄ,ＧｎＲＨ－ＩＲ神经元的胞体截面积、胞体染色强度和突起长度均达最高峰,分别为１７１．２１±４３．１７μｍ２,０．２８９±０．０３４,８７．０１±２２．３３μｍ;培养１４ｄ,ＧｎＲＨ－ＩＲ神经元的胞体大小和突起长度维持在７ｄ时的水平,但染色减弱。结果提示,培养第１周是ＧｎＲＨ神经元体外发育成熟的关键时期,其发育良好状态可维持到第２周末     

GnRH在文昌鱼脑和哈氏窝的分布

用免疫细胞化学方法和抗哺乳动物ＧｎＲＨ抗体研究了ＧｎＲＨ免疫活性细胞在文昌鱼脑和哈氏窝的分布。ＡＰＡ免疫染色法证明了哺乳动物ＧｎＲＨ免疫活性结构分布在文昌鱼端脑前端和靠近中脑的背部,中脑中部,神经管和哈氏窝中。ＧｎＲＨ－ｉｒ胞体有多种类型,一种是大脑胞体,可见在端脑和中脑,另一种为中等和小型胞体,这些胞体聚集在中脑中部（相当于鱼类下丘脑）以及端脑。长的念珠状ＧｎＲＨ－ｉｒ神经纤维从端脑腹外侧面延伸     

GnRH在性成熟高白鲑神经系统及性腺中的分布定位

摘要：应用免疫组织化学方法,系统观察性成熟期高白鲑(Coregonus peled)神经系统及性腺中的促性腺激素释放激素( GnRH)的分布情况。结果表明,GnRH在大脑、小脑、中脑、脊髓、延髓中免疫阳性反应明显,且主要分布在神经元内。GnRH免疫阳性细胞在卵巢和精巢中均有分布,而且其阳性部位在卵巢主要分布于小生长期卵...     

Polygenic expression of gonadotropin-releasing hormone (GnRH) in human?

A non-mammalian lamprey-like gonadotropin-releasing hormone (lGnRH) has been detected in human hypothalami using a combination of immunocytochemistry, high performance liquid chromatography and radioimmunoassay. The hypothalamic distribution of immunopositive lGnRH neurons is similar to that observed for those containing the mammalian gonadotropin-releasing hormone (mGnRH), indicating a possible role for this newly identified peptide in the regulation of pituitary function. Our data suggest the existence of a separate gene for lamprey-like GnRH in humans. Confirmation of the exact nature and role of this newly detected form of GnRH will require future isolation and sequence analysis. The possibility that polygenic expression of a given peptide may be a common phenomenon even in higher mammals is discussed.     

神经激肽B对哺乳动物GnRH脉冲发生器的调节

哺乳动物的生殖功能受体内状态和外部环境综合作用的影响,这种综合作用通过错综复杂的神经内分泌系统最终汇集于促性腺激素释放激素(GnRH)系统从而影响下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴的状态。神经激肽B(NKB)目前被认为是除kisspeptin外,调控GnRH脉冲分泌的又一关键因子。大量研究证实,NKB能够影响GnRH和促黄体激素(LH)的分泌,进而影响青春期的启动和生殖功能。然而,NKB对LH分泌的影响是刺激作用还是抑制作用尚存在争论。此外,NKB如何作用于GnRH神经元的信号通路尚不清楚,性激素是否参与这一生理过程,是目前的研究热点问题之一。本文就NKB及其受体的分布、神经网络结构、NKB对GnRH脉冲发生器的作用进行了系统的阐述,并针对目前尚待解决的一些问题进行了探讨。     

人体内调节ACTH和GnRH释放的阿片受体类型不同

在人体内,无论是垂体—肾上腺轴还是垂体—性腺轴都受到内源性阿片肽紧张性抑制的调节。但是,人们对这两个轴在被调节过程中所涉及到的阿片受体的具体特性还不清楚。因此,Ashley Grossman 等利用阿片类的拮抗剂——纳洛酮作为工具药对这一问题进行了研究。受试对象包括19～36岁的男性和正常月经周期滤泡早期的女性。研究中将受试者分为两组,分别予以静脉注射不同剂量的纳洛酮,其中一组     

排卵,排精前后文昌鱼体内GnRH的研究

利用放射免疫分析法测定了排卵、排精前后青岛文昌鱼体内促性腺激素释放激素（ＧｎＲＨ）的含量变化,并通过高效液相色谱比较了雌、雄文昌鱼性腺及除性腺外体部ＧｎＲＨ的种类和含量的异同。结果表明：１）生殖过程中雌、雄文昌鱼体内ＧｎＲＨ含量的变化规律不同;雌性文昌鱼体内ＧｎＲＨ总含量在排卵时有所下降,排后１２小时政策最为明显,以后逐渐上升到排前水平;雄性文昌鱼仅在排精时有所下降,２小时后即稳定在排水平。２）文     

GnRH相关肽在大鼠垂体前叶的细胞学定位

本研究应用特异性抗GnRH相关肽(GAP)N端11个氨基酸的抗血清和六种垂体前叶激素的抗血清,通过免疫组织化学双重染色技术观察GAP在大鼠垂体前叶细胞的定位。结果发现,GAP样免疫反应性物质存在于LH细胞和FSH细胞,而未见于GH、PRL、TSH和ACTH细胞。本文首次证明GAP存在于正常大鼠垂体促性腺激素细胞,为GAP调节LH和FSH的分泌提供了形态学证据;也支持GAP的功能序列在其分子的N端,或GAP进一步裂解出N端片段而发挥作用。     

GnRH受体与TRAIL在前列腺肿瘤中表达的研究

目的研究促性腺激素释放激素受体(GnRH-R)和凋亡相关蛋白(TRAIL)在前列腺肿瘤中的表达及临床意义.方法采用SABC免疫组化法及原位定量法,对前列腺肿瘤和前列腺增生患者中GnRH-R和TRAIL的表达进行检测及半定量分析.结果在前列腺癌组织高分化的11例,中分化的4例以及低分化的5例中,各种不同分化的癌组织均显示不同程度的GnRH-R和TRAIL阳性免疫反应,原位定量显示GnRH-R与TRAIL的表达均分别随着组织分化程度增高而增高(P<0.05),并且TRAIL较GnRH-R阳性免疫反应强.结论 GnRH-R和TRAIL表达量可能与前列腺恶性肿瘤的发生与发展有关.     

Long-term fertility control in female cats with GonaCon™, a GnRH immunocontraceptive

The uncontrolled reproduction of free-roaming feral cats contributes to overpopulation and associated concerns regarding their welfare and impact on public health and the environment. Nonsurgical fertility control that could be administered to feral cats in the field would be a powerful tool for cat population control. The objective was to test the efficacy and duration of activity of a single-dose GnRH immunocontraceptive vaccine (GonaCon?) on the fertility of adult female laboratory cats. Vaccinated cats (n = 15) received a single injection of vaccine containing a GnRH-KLH conjugate (200 μg) emulsified in a mycobacterial and oil adjuvant on study Day 0. Sham-treated cats (n = 5) received a single injection containing all vaccine components except the GnRH-KLH conjugate. A breeding trial started on study Day 120. Vaccinated cats had a longer time to conception (median 39.7 mo) compared to sham-treated cats (4.4 mo; P < 0.001). A total of 93% of vaccinated cats remained infertile for the first year following vaccination, whereas 73, 53, and 40% were infertile for 2, 3, and 4 y, respectively. At study termination (5 y after a single GnRH vaccine was administered), four cats (27%) remained infertile. The GnRH antibody titers declined more rapidly in short-term responding cats with < 2 y of infertility (n = 4), compared to long-term responding cats that experienced fertility control for >2 y (n = 11) (P < 0.05). Non-painful but persistent late-onset granulomatous injection site masses appeared 2 y after initial vaccination in five cats. We concluded that GnRH immunocontraception is an ideal candidate for further development for feral cat control.     

抗孕53影响大鼠垂体前叶对GnRH的敏感性反应

本实验应用动情前期大鼠垂体前叶组织块离体培养方法,观察了 A 环失碳类甾体化合物—抗孕53对 LH 基础分泌和动员性分泌的影响。实验分为对照组、GnRH 组、抗孕53组、GnRH-抗孕53组。结果表明,GnRH 可显著促进 LH 分泌并产生自激作用。GnRH 的第一次作用后,LH 分泌增加量由对照组的0.7ng/ml 增加到4.3ng/ml,而当 GnRH 第二次作用后,这一效应显著增强,由对照组的0.5ng/ml 增加到6.8ng/ml,GnRH 的两次作用效应相比,差异极显著。抗孕53可部分抑制垂体对 GnRH 的敏感性反应。抗孕53作用后,LH 分泌增加量由 GnRH 第一次作用后的4.3减至2.5ng/ml,由 GnRH 第二次作用后的6.8降至4.1ng/ml。抗孕53不影响 LH 的基础分泌,与对照组相比,两组的 LH 分泌增加量无显著差异。抗孕53对垂体的这一作用可能是通过直接影响促性腺激素细胞的代谢及调节而实现。     

多巴胺能药物对虎纹蛙GnRH和LH分泌活动的影响

利用在体注射实验和放射免疫测定法,研究了多巴胺能药物对性腺处于再发育期虎纹蛙的促性腺激素释放激素（GnRH)及促黄体激素（LH)分泌活动的影响。结果是：多巴胺（DA）及其激素剂阿扑吗啡（APO）可显著降低血浆LH水平;而多巴胺的拮抗剂－地欧酮（DOM）可显著增加垂体LH含量。DA对脑中cGnRH-Ⅱ的合成有抑制作用,而OM对其mGnRH的释放有一定的刺激作用。结果表明：DA可在脑及垂体水平分别抑制虎纹蛙GnRH和LH的释放,DA对LH释放的抑制作用很可能是通过D2受体实现的。     

布氏田鼠GnRH基因克隆及不同组织和发育阶段的基因表达特征

促性腺激素释放激素(GnRH)由GnRH编码,是调节动物繁殖活动的核心神经内分泌物质。布氏田鼠Lasiopodomys brandtii是我国内蒙古东部草原区的害鼠之一,具有明显季节性繁殖特征,但其繁殖调控机制仍未完全明确。本研究克隆了来自布氏田鼠下丘脑的GnRH cDNA序列,使用实时荧光定量技术检测了不同组织、不同年龄阶段GnRH mRNA水平。结果表明,克隆获得GnRH cDNA序列497 bp,包含开放阅读框273 bp,编码90个氨基酸和1个终止密码子的GnRH前体。DNA序列比对和氨基酸序列同源性分析表明,布氏田鼠下丘脑GnRH基因属于Ⅰ型,与橙腹田鼠Microtus ochrogaste GnRH1相似性最高。GnRH mRNA在下丘脑、垂体、睾丸、肾上腺、肠、膀胱均有表达。雄鼠血清睾酮水平和雌鼠血清雌二醇水平在出生后8周、36周、80周处于高水平,显著高于4周龄鼠,但除80周龄鼠下丘脑GnRH表达量处于高水平,8周龄、36周龄鼠GnRH表达量与4周龄鼠差异均无统计学意义。推测4周龄鼠下丘脑GnRH受GnRH调节剂的中心抑制,而8周龄、36周龄鼠下丘脑GnRH受性类固醇介导的反馈抑制调控,当年龄增加至80周龄,性类固醇介导的反馈抑制消失或者应答时间延长。本研究结果为探究布氏田鼠繁殖调控规律提供了更多基础资料。