中国小球腔菌属三新记录种

从采自黄山、武夷山和九寨沟的真菌标本上分离、鉴定出小球腔菌属3个中国新记录种：布赖顿小球腔菌Leptosphaeria brightonensis,蓍小球腔菌L. millefolii和山萝花小球腔菌L. suffulta。并对它们进行了形态特征描述、图示、比较和讨论。标本均保存在青岛农业大学菌物标本室。     

山东半岛腐生小球腔菌属中国新记录种(英文)

在山东半岛腐生真菌调研过程中,鉴定出生于枯木上的4个小球腔菌属中国新记录种:光洁小球腔菌Leptosphaeriaagnita,灌丛小球腔菌L.dumetorum,嘴状小球腔菌L.eustomoides和茄小球腔菌L.solani。对各菌的形态学特征进行了描述、图解及讨论,并编制了中国小球腔菌属腐生种的检索表。研究标本保存在青岛农业大学菌物学实验室。     

用RAPD技术鉴定小麦属间不对称体细胞杂种

用随机引物扩增多态DNA(RAPD)技术对三种不同组合:小麦(Triticum aestivum)( )簇毛麦(Haynaldia villosa);小麦( )羊草(Leymus chinensis)和小麦( )高冰草(Agropyron elongatum)的属间不对称杂种进行分子鉴定,不同杂种植株的基因组经随机引物扩增后,均出现双亲的多态特异产物,证实它们含有双亲的基因组。将引物OPJ-12扩增的高冰草多态特异产物(分子量为0.77bp的DNA片段)分离纯化并标记作探针,用Southern杂交证明了小麦( )高冰草杂种经OPJ-12扩增的0.77kbp特异片段与高冰草这一片段具有同源性。本文结果证明,RAPD技术可作为小麦属间不对称体细胞杂种的一种快速、简便、有效的分子鉴定方法。     

疫苗

941 060砂眼衣原体主要外膜蛋白在大肠杆菌中的表达〔英〕/Manoiog,D.S。…尹Infeet。Imm住n。-1993,61(10)。一4093~4095〔译自DBA,1993,12(22),93一12728〕 利用含主要外膜蛋白(MOMP)基因。mpl的质粒pTTQ一MOMP,在大肠杆菌DHS一a中表达砂眼衣原体MOMp。将DHS一a/pTTQ一MOMP培     

广西沿海地区红树林根系土壤中放线菌的分离与鉴定

本研究通过分离纯培养,从广西北海及防城港红树林根系土壤中分离出放线菌并提取其总DNA,用放线菌通用引物对获得菌株的16S rDNA进行PCR扩增,对获得的扩增产物进行DNA序列测定及菌株鉴定.研究结果表明,从红树林根系土壤样品中分离出15株典型放线菌菌株.16S rDNA测序比对鉴定结果显示,15株典型放线菌菌株中有12株属于链霉菌属(Streptomyces),是常见菌属;3株属于拟诺卡氏菌属(Nocardiopsis),为稀有放线菌.本研究分离纯化获得15株典型放线菌,初步揭示了广西沿海地区红树林土壤中放线菌的多样性.     

高产紫杉醇内生真菌J11的鉴定

从南方红豆杉(Taxus chinensis var.mairei)的幼茎中分离出一株产紫杉醇内生真菌J11.菌株J11的发酵提取物经高分辨质谱分析,证实J11菌株可产紫杉醇.提取该菌株的基因组DNA,扩增核糖体internal transcribed spacer(ITS)和28S核糖体large subunit rRNA gene(LSU)序列,经测序获得该菌的ITS序列和LSU序列.序列比对和检索结果表明,J11菌株为葡萄座腔菌(Botryosphaeria ssp.)属中的一个新菌株.形态学鉴定符合葡萄座腔菌属特征,高效液相色谱分析表明,J11菌株的紫杉醇含量约为615.1μg/L.本研究首次证实葡萄座腔菌J11是一株高产紫杉醇野生型菌株,具有潜在的应用前景.     

DNA分析与扩增

924297降解2,4一二氯苯氧乙酸(2,4一O)的质粒pJP4的PCR和基因探针检测〔英〕/Neilson,J.W.一/Appl .Environ.Mierobiol一1992,55(4)一1271~1275[译自DBA,1992,11(11),92-06019〕 用PCR和DNA探针灵敏性检测2,4一D降解菌真养产碱菌(Azca不‘夕e,ese:t,o,hos)JMPi34(含质粒pJP4)。甩2个20一聚寡核普酸DNA引物扩增pJP 4 tfdB基因的Zosbp区,并优化扩增条件 (94℃变性1分30秒、72℃退火并延伸1分钟、72℃最后延伸7分钟,共进行25轮)。PCR和5产端标记DNA探针的杂交都是对含pJP4或其衍生质粒pRO103菌株专性的。检测灵敏性为30oocfu…     

DNA分析与扩增

922793用小卫遥盆盆密码作O付几分通的数位方法〔英洲Jeffreys,A.J.…了Nature一1991,354 (6350)一204~209〔译自DBA,1。。2,11(3),92一01260〕 用聚合酶链反应(PCR)作小卫星(Ms)变型重复图是一种新的简单的DNA定型法。2种不同重复单位(a一和t一型)组的Ms等位基因可以一种从第一个重复单位起双线延伸的方式编码。总基因组DNA中可形成等位基因重叠的三元密码。人Ms MS32(DISs)的同感Zobp重复单位序列为多态位点(a一型,可被Haelll裂解)重复子和Hae111抗性(t一型)重复子。32一ATG一A和32一ATG-T是20碱基的不同重复序列。在低引…     

中国大豆疫霉菌遗传多样性的RAPD分析*

采用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术,利用13个引物对75个中国大豆疫霉菌分离物和11个美国分离物进行PCR扩增。在78个RAPD标记中,多态性标记为68个,占87.2%。RAPD指纹聚类分析表明,当以相异距离0.3为阈值,86个分离物被划为12个RAPD遗传组,其中J组有54个分离物,占总数的62.8%,包括44个中国分离物和10个美国分离物。在中国大豆疫霉菌群体内,多数分离物之间遗传相似性较低,在DNA水平上存在显著的遗传变异,具有较丰富的遗传多样性。RAPD分组结果未表明大豆疫霉菌DNA多态性特征与病原菌毒力基因构成之间和分离物地理来源之间存在相关性,证明中国不同地区的大豆疫霉菌群体在与大豆品种的互作中发生了广泛的遗传变异,具有DNA遗传进化方向和毒力基因演变的多样性。美国大豆疫霉菌分离物间遗传距离较近,而中国分离物在总体上与美国分离物的遗传距离较远,表明中国大豆疫霉菌具有比较独特的遗传背景。     

中国大豆疫霉菌遗传多样性的RAPD分析

采用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术,利用13个引物对75个中国大豆疫霉菌分离物和11个美国分离物进行PCR．扩增。在78个RAPD标记中,多态性标记为68个,占87．2％。RAPD指纹聚类分析表明,当以相异距离0.3为阈值,86个分离物被划为12个RAPD遗传组,其中J组有54个分离物,占总数的62．8％,包括44个中国分离物和10个美国分离物。在中国大豆疫霉菌群体内,多数分离物之间遗传相似性较低,在DNA水平上存在显著的遗传变异,具有较丰富的遗传多样性。RAPD分组结果未表明大豆疫霉菌DNA多态性特征与病原菌毒力基因构成之间和分离物地理来源之间存在相关性,证明中国不同地区的大豆疫霉菌群体在与大豆品种的互作中发生了广泛的遗传变异,具有DNA遗传进化方向和毒力基因演变的多样性。美国大豆疫霉菌分离物间遗传距离较近,而中国分离物在总体上与美国分离物的遗传距离较远,表明中国大豆疫霉菌具有比较独特的遗传背景。     

中国大豆疫霉菌遗传多样性的RAPD分析

采用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术,利用13个引物对75个中国大豆疫霉菌分离物和11个美国分离物进行PCR扩增。在78个RAPD标记中,多态性标记为68个,占87.2%。RAPD指纹聚类分析表明,当以相异距离0.3为阈值,86个分离物被划为12个RAPD遗传组,其中J组有54个分离物,占总数的62.8%,包括44个中国分离物和10个美国分离物。在中国大豆疫霉菌群体内,多数分离物之间遗传相似性较低,在DNA水平上存在显著的遗传变异,具有较丰富的遗传多样性。RAPD分组结果未表明大豆疫霉菌DNA多态性特征与病原菌毒力基因构成之间和分离物地理来源之间存在相关性,证明中国不同地区的大豆疫霉菌群体在与大豆品种的互作中发生了广泛的遗传变异,具有DNA遗传进化方向和毒力基因演变的多样性。美国大豆疫霉菌分离物间遗传距离较近,而中国分离物在总体上与美国分离物的遗传距离较远,表明中国大豆疫霉菌具有比较独特的遗传背景。     

固氮作用

862711.巴西固氮特螺菌SP7的glnA基因的克隆和特性〔会,英〕/Fogher,C.…了Abs.6th Internatl.Sym.Nitrogen Fixa-t ion。一1985。一8一12 用广谱寄主范围的装配型质粒pVK100构建了巴西固氮螺菌(A:ospirillom brasi-lense)Sp7的总DNA基因文库。分离T能与该菌谷氨酞胺营养缺陷型突变株7029互补的克隆,称为     

双歧杆菌的分子生物学检测和鉴定方法进展

双歧杆菌传统的检测和鉴定需要分离、培养,这些方法常可影响其结果的正确性.目前,分子生物学的广泛应用为双歧杆菌的检测和鉴定提供了新方法.本文对其中主要的依赖rRNA基因的序列分析、脉冲场凝胶电泳、核糖体分型和随机扩增多态DNA等技术作一综述.     

农业其它

923084分离自Wasabia iaponiea的新的香石竹潜伏病毒组病毒〔专,日〕/Nippon一Mining/Jo 3224一连82:26.01.90一JP一017202(03.10.91)26.01.90 as0 17202.91一355598/46(6页)仁译自DBA,1992,11(3),92一01511口 介绍了一种新的香石竹潜伏病毒组病毒,它不与芜脊花叶病毒的抗血清抗体反应,分离自W。。a-沉a ja尹。。此a,经直接负染色法观察呈串状。这种新病毒可作为抗原制备抗体,用于筛选被侵染或无病毒W.夕。尹。。艺。a组培物。用这种病毒可防止上述植物的退化,并改良其品质。(朱遐)923085促进白云衫体细胞胚的成熟和抗千燥性:非质壁分…     

激素和活性多肽

922142微生物生产的鱼生长激紊〔英〕/Kimura,A。厂Critieal Rev.Bioteehnol一19仑1,11(2)113~127〔译自DBA,1991,10(23),91-13460](李思经)922143借助于皿组杆状病澎使两种类型的子实体促性腺激素“亚基在昆虫细胞中表达〔英〕/Huang,C.J一尹Proe.Natl。Aead.Sei.U.S.A一1991,85(17)一7486~7490〔译自DBA,lggx,10(23),91一13连61〕(李思经)922144里氏木霉中凝乳酶一胰岛素融合物的分泌〔会,英〕/Lawler,5.E.一/Bioehem.Soe.Trans一1991,19(3)一2455〔译自DBA,1991,20 (23),91一13462〕(李思经)922145通过酿酒醉母分泌寡聚物V刻…     

基因诱变、重组、克隆

920441Re几公bac‘e,‘。。saloo丽,a,u二DNA片段的克隆〔英〕/Etehegaray,J.P.…f FEMSMierobiol.Lett。一1991,79(i)一61~64〔译自DBA,1991,10(10),91一05433〕 构建了Ren畜baete于云拙仍召al仍on坛砚ar饥重组基因库,以分离用于检测大马哈鱼肾致病菌基因序列的探针DNA。消除与Sau 3A限制酶切的杀缝气单胞菌(Aeromo.as吕al仍0.‘e云‘a)ATCC33658、Ye,s玄介‘ar留e无er云ATCC29473、Y。了比劣:e八、小肠结肠炎耶尔一森氏菌(Y。e耐e,。-co乙“‘ca)、弗氏志贺氏菌(召h名gella fle劣:e-,云)、伤寒沙门氏菌(Ba乙mooe乙王a切尹而…     

环境保护及农业废物利用

920789采用筛选出的土维中固有细菌增进土镶中烃类的降解〔英〕/Veeehioli,G.I.…2 Environ.Poll-ut一1500,67(s),249~255〔译自DBA,1991,10(12),91一07216〕 采用土壤中分解烃类化合物细菌的混合菌群可促进石油化学废料的生物降解。混合培养物是从土壤中分离出来的。通过将1克土壤加到补充有烃类的无机培养基中可以得到富集的培养物。对混合培养物进行了鉴定,系假单胞菌(尸8e“‘。,口“a约FN了了5一5、假单胞菌FN775一i以及产碱菌(AI-caz‘ge,e。)FN775一2。将芳香烃贮存堆底的残留物与土壤(10%w/w)进行混合。经1个月后,在未接种和…     

鸡肺炎克雷伯菌Ⅲ型菌毛A基因序列测定和分析

根据GenBank中肺炎克雷伯菌Ⅲ型菌毛结构基因A(mrkA)GI:149187的序列设计一对引物,以5株鸡致病性肺炎克雷伯菌临床分离株的基因组DNA为模板,PCR分别扩增出了543 bp的Ⅲ型菌毛结构基因(mrkA),经纯化、连接、转化、筛选得到含阳性质粒的菌株,将酶切鉴定正确的阳性质粒菌株进行DNA测序并分析。结果表明所扩增的片段为鸡肺炎克雷伯菌mrkA基因,其开放阅读框架为543 bp,编码181个氨基酸。     

松口蘑菌丝体的分离和RAPD-PCR分析

针对松口蘑 [Tricholomamatsutake(S .ItoetImai)Sing .]菌丝体分离培养困难和各种相关分离物目前难以用出菇试验鉴定的现实 ,采用 8种培养基配方 ,对 9个不同来源的松口蘑子实体的不同部位及菌根、菌土进行组织分离 ,计接种试管 81 0多支 ,结果从菌褶部位获得 94支慢生型的菌丝体分离菌株 ,从菌柄部位仅获得 1支快生型的菌丝体分离菌株。以马铃薯葡萄糖土壤滤液培养基 (PDAS)、马铃薯葡萄糖麦麸滤液培养基 (PDAW )、BM培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基 (PDA)对菌褶进行组织分离 ,获慢生型菌丝体的成功率依次为 74.4%、35.5%、156%和 8.9%。以各分离菌株的来源松口蘑子实体和中日两国松口蘑研究者提供的分离菌株作为DNA参照样品 ,对从供试子实体、菌根、菌土进行组织分离获得的各种相关纯培养物进行亲菌鉴定。采用筛选的 1 7个随机引物介导 2 5个供试松口蘑子实体及其分离菌体的RAPD(RandomAmplifiedPolymorphicDNA) PCR反应 ,全部获得了清晰而稳定的DNA指纹图谱 ,结果一致表明 :每个松口蘑子实体的菌盖 (含菌褶…     

从新疆哈萨克族2型糖尿病患者粪便中分离的气单胞菌对小鼠的作用研究

目的从新疆哈萨克族2型糖尿病患者粪便中分离培养气单胞菌,并回接到小鼠体内,检测其对小鼠血糖、血脂等2型糖尿病相关中间表型的作用。方法 (1)收集新鲜哈萨克族2型糖尿病患者的粪便样本,用气单胞菌专属培养基进行分离培养,微量生化反应管进行初步鉴定;提取所得菌株的DNA,使用气单胞菌属引物对此DNA进行特异性扩增,结合全自动细菌鉴定仪对菌株进行鉴定;(2)将气单胞菌菌液回接小鼠,采用羰花青素染料(CM-Dil)标记法对菌定植力情况进行检测。(3)检测气单胞菌菌液对小鼠体重、随机血糖(GLU)、空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)的作用,进行葡萄糖耐量(OGTT)、胰岛素耐量(ITT)试验。结果 (1)所得到的菌株经全自动细菌鉴定仪确定为气单胞菌;(2)从小鼠粪便中分离培养后的细菌能检测到荧光标记;(3)与正常饮食组小鼠相比,气单胞菌稀释液、原液、浓缩液组小鼠体重均升高;气单胞菌原液组小鼠GLU升高。小鼠FBG、TC和TG在各组间差异均无统计学意义;气单胞菌菌液组小鼠口服葡萄糖耐量试验血糖曲线下面积增加;气单胞菌原液、浓缩液组小鼠胰岛素耐量试验血糖曲线下面积增加。结论 (1)从新疆哈萨克族2型糖尿病患者粪便中分离培养得到气单胞菌;(2)从糖尿病患者粪便中分离的气单胞菌可定植于小鼠体内,并使小鼠的体重增加,GLU升高,给予气单胞菌稀释液、菌原液、菌浓缩液后第8周,小鼠出现糖耐量受损,胰岛素敏感性下降。