花生幼苗下胚轴质膜Ca2+-ATP酶及其对低温胁迫的反应

经６％－１２％ＤｅｘｔｒａｎＴ７０密度梯度离心,获得了纯度较高的７ｄ龄花生幼苗下胚轴质膜制剂,质膜Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ在反应系统不存在Ｍｇ＾２＋时,可正常表现水解ＡＴＰ的活性,但此活性明显低于Ｍｇ＾２＋激活的ＡＴＰａｓｅ,Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ不受Ｎａ３ＶＯ４抑制,不被Ｋ＾＋激活,而被Ｃｌ＾－抑制,Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ的最适,ｐＨ不同于Ｍｇ＾２＋激活的ＡＴＰａｓｅ,低温胁迫显著提高质膜Ｃ     

渗透胁迫下玉米幼叶延伸生长与生长部位质膜H~＋─ATPase的关系

－０．４ＭＰａ和－０．８ＭＰａＰＥＧ６０００对玉米幼叶延伸生长和生长部位Ｈ＋分泌有明显的抑制作用,但对生长部位ＰＭＨ＋－ＡＴＰａｓｅ则有不同程度的激活作用,正常水分条件下,Ｎａ３ＶＯ４和ＤＣＣＤ强烈抑制ＬＥＲ和Ｈ＋分泌,抑制程度ＤＣＣＤ＞Ｎａ３ＶＯ４,二者使膜透性增加的程度很相近。－０．４ＭＰａ　ＰＥＧ胁迫下,Ｎａ３ＶＯ４对ＬＥＲ和Ｈ＋分泌的抑制作用不明显,而ＤＣＣＤ仍显著抑制ＬＥＲ和Ｈ＋分泌;ＤＣＣＤ促进膜透性增加的程度远大于Ｎａ３ＶＯ４。     

盐胁迫下钙对大麦根系质膜和液泡膜功能的保护效应（简报）

盐胁迫下外加钙可增强大麦根系质膜液泡膜Ｈ＾＋－ＡＴＰａｓｅ、液泡膜质子泵和Ｎａ＾＋／Ｈ＾＋逆向运输活性,促进根系对Ｋ＾＋的选择性吸收和运输,降低叶片的Ｎａ＾＋／Ｋ＾＋比。     

苜蓿悬浮细胞对盐胁迫的瓜和适应

苜蓿悬浮细胞能够适应２２０ｍｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌ及其以下盐浓度的胁迫,适应细胞中游离脯氨酸、还原糖和Ｎａ＾＋积累增加。４４０ｍｍｏｌ／ＮａＣｌ对细胞生长明显抑制。细胞对盐胁迫的反应和适应中ＰＭ－ＡＴＰａｓｅ和ＴＭ－ＡＴＰａｓｅ起到重要作用,在适应细胞中两者的活力都明显增加。ＰＭ－ＡＴＰａｓｅ活力的增加可受ＣＨＸ的明显抑制。     

水分胁迫对小麦根质膜H^＋—ATPase活性与H^＋分泌的影响

在渗透势为－０．５和－１．０ＭＰａ ＰＥＧ处理下,不抗旱的郑引一号小麦根ＰＭＨ＾＋－－ＡＴＰａｓｅ活性分别为下降４５％和６５％,抗旱品种陕合六号则增加了１１％和１２％。小麦根组织Ｈ＾＋分泌与ＰＭＨ＾＋－ＡＴＰａｓｅ活性的变化趋势基本一致,即随着胁强增加,郑引一号Ｈ＾＋分泌下降,陕合六号Ｈ＾＋分泌是先升高后略降。Ｎａ３ＶＯ４和ＤＣＣＤ对Ｈ＾＋分泌有不同程度的抑制,品种之间没有明显的差异。外源电子受体     

水分胁迫下钙螯合剂与CPZ抑制剂对棉花根和下胚轴两种ATPase…

水分胁迫下棉花根和下胚轴质膜Ｈ＾＋－ＡＴＰａｓｅ和Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ活力,表现Ｋｍ值以及Ｖｍａｘ降低。－０．３ＭＰａ和－１．１ＭＰａ胁迫下质膜ＡＴ－Ｐａｓｅ活力随时间延长分别呈“Ｖ”字形变化和下降趋势。钙螯合剂、ＣａＭ抑制剂对棉花根和下胚轴质膜ＡＴＰａｓｅ活性有明显的抑制效应,抑制程度为－１．１ＭＰａ大于－０．３ＭＰａ大于对照。     

质膜H~＋－ATP酶在玉米叶片渗透调节中的作用

干早胁迫下,玉米幼叶生长部位质膜Ｈ＋－ＡＴＰ酶活性显著上升,游离脯氨酸、可溶性糖和无机离子亦同时在玉米叶片生长部位大量积累,二者之间呈明显的正相关．质膜Ｈ＋－ＡＴＰ酶的专一性抑制剂Ｎａ３ＶＯ４在干旱胁迫下强烈抑制游离脯氨酸的积累,说明ＰＭＨ＋－ＡＴＰａｓｅ参与了玉米叶片的渗透调节过程．     

小麦根液泡膜H~+-ATPase的解离和重组

ＫＩ诱导小麦根液泡膜Ｈ－ＡＴＰａｓｅ解离地温度敏感,在４℃时比在２０℃时解离更迅速;该过程为Ｍｇ＾２＋和ＡＴＰ的加强。其它阴离子诱导酶活性丧失的有效性依次为“ＳＣＮ〉Ｉ〉ＮＯ３〉Ｂｒ〉Ａｃ〉ＳＯ３＾２－〉ＳＯ４＾２－〉Ｃｌ〉ＨＣＯ３。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ的结果显示酶活性的丧失伴随着Ｖ。与Ｖ１的解离。通过透析去除解离剂可部分恢复泵质子活性和ＡＴＰ水解活性,这表明Ｖ０与Ｖ１进行重新组装。这种解离和重组的能     

玉米细胞质分子伴侣Hsp70的ATPase活性

玉米胚乳细胞中纯化的细胞质Ｈｓｐ７０蛋白有低水平的ＡＴＰａｓｅ活性,它在５０℃、ＰＨ５．８、２０ｍｍｏｌ／Ｌ的ＫＣｌ条件下活性最高,Ｃａ＾２＋和Ｍｇ＾２＋抑制其活性。大肠杆菌ＤｎａＪ蛋白能将玉米细胞质Ｈｓｐ７０的ＡＴＰａｓｅ活性提高６倍,而ＧｒｐＥ蛋白对其影响很小。８种不同的人工合成多肽均能刺激该蛋白折ＡＴＰａｓｅ活性,增加幅度从２．５倍到１０倍痫水性不同的氨基酸对Ｈｓｐ７０的ＡＴＰａｓｅ活性影响     

水分胁迫对小麦根质膜H~＋－ATPase活性与H~＋分泌的影响

在渗透势为－０．５和－１．０ＭＰａＰＥＧ处理下,不抗旱的郑引一号小麦根ＰＭＨ＋－ＡＴＰａｓｅ活性分别下降４５％和６５％,抗旱品种陕合六号则增加了１１％和１２％。小麦根组织Ｈ＋分泌与ＰＭＨ＋－ＡＴＰａｓｅ活性的变化趋势基本一致,即随着胁强增加,郑引一号Ｈ＋分泌下降,陕合六号Ｈ＋分泌是先升高后略降。Ｎａ３ＶＯ４和ＤＣＣＤ对Ｈ＋分泌有不同程度的抑制,品种之间没有明显的差异。外源电子受体Ｆｅ（ＣＮ）６３－的加入促进了小麦根Ｈ＋分泌,陕合六号增加２５％－３９％,郑引一号增加２１％－４５％。与此同时,Ｎａ３ＶＯ４没有表现出对Ｈ＋分泌的抑制作用。     

Na_2SO_3对不同状态CF_1－ATPase活力的促进作用

Ｎａ２ＳＯ３对ＣＦ１－ＡＴＰａｓｅ活力的促进作用与酶所处状态有关。ＣＦ０降低ＣＦ１对Ｎａ２ＳＯ３的亲和力和Ｎａ２ＳＯ３促进的最大反应速率。在Ｎａ２ＳＯ３作用下,膜上ＣＦ１－ＡＴＰａｓｅ的活化能高于游离的。膜上和游离ＣＦ１－ＡＴＰａｓｅ的γ亚基上二硫键的还原可以提高Ｎａ２ＳＯ３对酶活力的促进作用。Ｎａ２ＳＯ３对甲醇活化的ＣＦ１－ＡＴＰａｓｅ活力的促进作用只有在甲醇活化的亚适浓度下才能充分表现出来。Ｎａ２ＳＯ３对Ｍｇ２＋抑制的解除作用因ＣＦ１－ＡＴＰａｓｅ处于不同活化状态而不同。     

小麦根液泡膜H~ -ATPase的解离和重组

ＫＩ诱导的小麦根液泡膜Ｈ＋－ＡＴＰａｓｅ解离对温度敏感,在４℃时比在２０℃时解离更迅速;该过程为Ｍｇ２＋和ＡＴＰ所加强。其它阴离子诱导酶活性丧失的有效性依次为：ＳＣＮ－＞Ｉ－＞ＮＯ３－＞Ｂｒ－＞Ａｃ－＞ＳＯ３２－＞ＳＯ４２－＞Ｃｌ－＞ＨＣＯ３－。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ的结果显示酶活性的丧失伴随着Ｖｏ与Ｖ１的解离。通过透析去除解离剂,可部分恢复泵质子活性和ＡＴＰ水解活性,这表明Ｖｏ与Ｖ１进行重新组装。这种解离和重组的能力在体内Ｖ型Ｈ＋－ＡＴＰａｓｅ的调控和装配上可能有重要意义。     

大豆液泡膜H^＋—ATPase功能与构象关系的初步研究

大豆液泡膜Ｖ型Ｈ＾＋－ＡＴＰａｓｅ是ＡＴＰａｓｅｓ中的一种,它在植物细胞的生长发育中有重要的作用。利用竹红菌乙素（ＨＢ）和ＫＩ这两种分别猝灭蛋白质疏水区域内源荧光和亲水区域内源荧光的荧光猝灭剂,在不同ｐＨ值、温度条件下对纯化的大豆液泡膜Ｖ型ＡＴＰａｓｅ进行荧光猝灭实验,初步探讨了Ｖ型Ｈ＾＋－ＡＴＰａｓｅ的水解活性同其蛋白质折叠状态间的关系。研究表明,通过比较不同ｐＨ值、温度条件下蛋白质疏水区域和亲     

盐生车前根液泡膜ATPase对盐胁迫的响应

用蔗糖密度梯度离心法从对照和盐处理的盐生车前根中分离出液泡膜,并对其ＡＴＰａｓｅ某些特性进行了比较研究,蔗糖连续密度梯度离心后ＮＯ＾－３敏感的ＡＴＰａｓｅ活性主要分布在２２％－３５％蔗糖浓度之间,用不连续密度梯度离心法从２２％－３５％界面收集到的膜主要源于液泡膜。因为,这种膜ＡＴＰａｓｅ活性受到Ｃｌ＾－的促进和ＮＯ＾－３的强抑制,而叠氮化钠和正钡酸钠只抑制酶活性的１０％左右,最适ｐＨ８．０。     

小麦根质膜H^＋—ATPase的部分纯化

以小麦（ＴｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍＬ．）根为材料,采用不连续蔗糖密度梯度离心法制备高纯度质膜微囊。质膜经ＴｒｉｔｏｎＸ１００和ＫＣｌ处理后,再用Ｚｗｉｔｅｒｇｅｎｔ３１４增溶Ｈ＋ＡＴＰａｓｅ,最后用硫酸铵沉淀得到部分纯化的质膜Ｈ＋ＡＴＰａｓｅ。ＳＤＳＰＡＧＥ结果表明,经过上述步骤纯化,分子量为９４ｋＤ的膜蛋白组分得到富集;与质膜相比,其含量提高１５．７倍。部分纯化的质膜Ｈ＋ＡＴＰａｓｅ可以水解ＡＴＰ,受Ｋ＋刺激,并被Ｎ,Ｎ′ｄｉｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌｃａｒｂｏｄｉｍｉｄｅ（ＤＣＣＤ）抑制;ＡＴＰ水解活力被Ｎａ３ＶＯ４抑制９５％,但不被ＮａＮ３、ＮａＮＯ３和Ｎａ２ＭｏＯ４抑制。     

盐胁迫下无花果细胞质膜和液泡膜H+-ATPase活性对脯氨酸积累的影响

盐胁迫降低无花果振荡培养细胞培养液pH ,添加质膜H ATPase活性抑制剂Na3VO4 则抑制盐诱导的培养液pH下降 ,表明盐诱导培养液pH下降主要是细胞质膜H ATPase活性增加的结果。NaCl处理提高活体细胞质膜H ATPase活性 ,而降低膜微囊H ATPase活性。培养液中添加Na3VO4 5 0 μmol/L完全抑制盐胁迫下无花果细胞游离脯氨酸积累 ,但添加更高浓度Na3VO4 ,则提高细胞液泡膜H ATPase活性 ,同时Na3VO4 抑制脯氨酸积累的效应下降 ,暗示盐胁迫下无花果细胞质膜和液泡膜H ATPase共同参与细胞质pH调节 ,影响游离脯氨酸积累。     

三丁基锡对人红细胞膜Na^＋,K^＋—ATPase活性的抑制作用

三丁基锡（ＴＢＴ）是人红细胞膜上Ｎａ＾＋,Ｋ＾＋－ＡＴＰａｓｅ的一种抑制剂。该化合物对Ｎａ＾＋,Ｋ＾＋－ＡＴＰａｓｅ有很强的抑制能力。在正常的反应体系中,ＴＢＴ浓度仅为１０μｍｏｌ／Ｌ时,该酶的活性全部丧失;其抑制Ｎａ＾＋,Ｋ＾＋－ＡＴＰａｓｅ的ＩＣ５０值为２．２μｍｏｌ／Ｌ．Ｋ＾＋能增强ＴＢＴ的这种抑制作用,ＴＢＴ为Ｋ＾＋的反竞争性抑制剂。     

Na2SO3和NaHCO3对叶绿体CF1—ATPase活力作用的机制

Ｎａ２ＳＯ３对热－ＤＴＴ活化的游离ＣＦ１及类囊体膜上ＣＦ１－ＡＴＰａｓｅ活力均有显著的促进作用,ＮａＨＣＯ３亦有明显的促进作用,Ｎａ２ＳＯ３和ＮａＨＣＯ３的促进作用与它们解除Ｍｇ＾２＋的抑制作用有关,从ＮａＨＣＯ３和Ｎａ２ＳＯ３及它们与Ｍｇ＾２＋之间的竞争性关系。表明三者是结合在酶的同一部位上。Ｎａ２ＳＯ３可明显降低热－ＤＴＴ活化的游离ＣＦ－ＡＴＰａｓｅ催化反应的活化能,这可能与促进产物ＡＤＰ的翻     

大豆液泡膜H~+-ATPase泵质子活性的研究

研究了大豆液泡膜Ｈ＋－ＡＴＰａｓｅ泵质子特性。液泡膜Ｈ＋－ＡＴＰａｓｅ泵质子活性受ＮＥＭ、ＮＢＤ－Ｃｌ、ＤＣＣＤ和ＮＯ３－的抑制。泵质子活性由二价阳离子启动,其有效性依次为Ｆｅ２＋＞Ｍｇ２＋＞Ｍｎ２＋,它以ＡＴＰ为最适底物,ＡＤＰ为竞争性抑制剂;最适ｐＨ为７．０,最适温度为５０°Ｃ。     

渗透胁迫对绿豆下胚轴延伸生长及H^＋分泌的影响

－０．９ＭＰａ甘露醇渗透胁迫处理,明显抑制绿豆幼苗下胚轴延伸生长和生长部位Ｈ＾＋分泌,而且随胁迫时间延长抑制程度增大。ＰＭＨ＾＋－ＡＴＰａｓｅ活性在渗透胁迫下先下降而后升高并超过对照水平。