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1.
一种新型疟疾核酸疫苗生产工艺的初步研究 总被引：1，自引：1，他引：1
疟疾是危害人类健康和生命的主要寄生虫病之一,寻找合适的疫苗一直是该病控制的重要方向。在疟疾核酸疫苗方面作了系列尝试,取得较好研究结果,并最终构建了以胸腺嘧啶合成酶基因为筛选标记的、具有大肠杆菌平衡致死特征的新一代疟疾核酸疫苗pThyAAWTE。对影响工程菌高密度发酵的几个因素进行了分析,所优化程序可使工程菌发酵密度达OD60060以上;此外,还对质粒初步纯化过程中的几个重要参数进行了分析,初步结果表明,悬浮液体积(ml):菌体湿重(g)在2:1以上,对质粒的得率没有明显影响;碱裂解时间在一定范围内不影响质粒的质量;合适的悬浮液体积/裂解液/中和液比能明显提高质粒产量;用优化程序所提取的质粒其产量与试剂盒提取的量相当。为pThyAAWTE的大规模纯化打下了基础。 相似文献
2.
目的:以D型氨基酸替代的方式构建一种能抵抗血管紧张素转化酶(ACE)降解的异构体小肽AcSDKP,并对其抗纤维化活性进行初步研究,以期为AcSDKP在抗纤维化方面的应用提供依据。方法:用HPLC法检测D型氨基酸替代方式构建的AcSDKP异构体抗ACE降解的能力;用MTT法检测AcSDKP异构体对小鼠成纤维细胞L929和原代培养的心脏成纤维细胞增殖的影响;用流式细胞术检测AcSDKP异构体对骨髓干细胞(BMSC)向巨噬细胞分化的影响。结果:AcSDKP异构体均能抗ACE降解,能抑制L929细胞和心脏成纤维细胞增殖,能抑制BMSC向巨噬细胞分化。结论:构建了能抵抗ACE降解,在体外能抑制成纤维细胞增殖、巨噬细胞分化的AcSDKP异构体小肽,为该小肽进一步的体内研究及应用奠定了基础。 相似文献
3.
一种新型免疫PCR基因探针的构建及其在诊断中的初步研究 总被引：5，自引：0，他引：5
利用叶绿素分子 (chlorophyll)作为共价连接蛋白质与核酸的中间分子 ,构建了甲胎蛋白 (α fetoprotein ,AFP)抗体的基因探针 ,并用构建的基因探针通过免疫PCR对AFP进行了诊断的初步研究 .结果表明 ,其检测灵敏度比ELISA高 1 0 4～1 0 5 倍 .基因探针的构建方法完全避免了蛋白质与有机溶剂的接触 ,基本保持了抗体的原有活性 ;并且人为地将蛋白质定向地锚定在dsDNA分子上 ,使PCR扩增不受任何影响 .构建的基因探针采用一定的保藏方法 ,室温中活性保存至少 6个月 .构建方法精简 ,成本低 ,易于推广应用 相似文献