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钙调素作为Ca ̄(2+)信号的主要胞内受体,在细胞增殖调节中起着重要作用。实验中运用DNA体外重组技术构建了高表达钙调素的真核载体,并将其转染到大鼠正常肾细胞(NRK)中得到钙调素高表达的稳定细胞株。分析表明,高表达钙调素加速细胞生长,促进细胞从G_1期向S期及G_2期向M期的进程,并且使细胞血清依赖性降低,在单层培养中出现接触抑制丧失的岛状生长的现象。基因表达分析表明,原癌基因c-fos、c-myc随钙调素增高而表达加强,这可能是钙调素作用的分子机理之一。 相似文献
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蚕豆下表皮细胞外钙调素的存在及其对气孔运动的调节 总被引:2,自引:0,他引:2
细胞外钙调素可能作为多肽第一信使,调节细胞增殖,花粉萌发,特定基因表达等生理过程,气孔能灵敏地对外界刺激作出反应,快速开闭,本文用免疫电镜和免疫荧光显微镜技术证明保卫细胞及其它表皮细胞胞外都存在钙调素;外源纯化钙调素能促进气孔关闭,抑制气孔开放,最适浓度为10^-8mol/L;不能透过质膜的大分子钙调素拮抗剂W—-agarose和钙调素抗血清都能抑制气孔关闭,促进开放,说明保卫细胞的内源胞外钙调素确实能促进气孔关闭,抑制开放。而且只能在细胞外起作用,推测在自然情况下,保卫细胞内源胞外钙调素可能作为胞外第一信使和其它信号分子一起调节气孔的开关运动,而且可能在环境刺激与细胞响应之间起重要作用。 相似文献
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细胞外钙调素可能作为多肽第一信使,调节细胞增殖、花粉萌发、特定基因表达等生理过程.气孔能灵敏地对外界刺激作出反应,快速开闭.本文用免疫电镜和免疫荧光显微镜技术证明保卫细胞及其它表皮细胞胞外都存在钙调素.外源纯化钙调素能促进气孔关闭、抑制气孔开放,最适浓度为10-8mol/L;不能透过质膜的大分子钙调素拮抗剂W7-agarose和钙调素抗血清都能抑制气孔关闭、促进开放,说明保卫细胞的内源胞外钙调素确实能促进气孔关闭、抑制开放,而且只能在细胞外起作用.推测在自然情况下,保卫细胞内源胞外钙调素可能作为胞外第一信使和其它信号分子一起调节气孔的开关运动,而且可能在环境刺激与细胞响应之间起重要作用. 相似文献
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细胞外钙调素对烟草悬浮培养细胞蛋白质磷酸化作用的影响 总被引:7,自引:0,他引:7
用液体闪烁计数法研究了细胞外钙调素对烟草悬浮培养细胞质蛋白质磷酸化的作用。结果表明:烟草细胞细胞质蛋白质磷酸化活性在细胞培养过程中逐渐增加,达到最高峰后又开始下降。在细胞质蛋白质磷酸化强度高峰时,加入抗CaM血清后,细胞质蛋白质磷酸化活性受到了部分抑制。加抗CaM血清后再补加CaM能够部分解除抗CaM血清对细胞质部分与细胞核部分蛋白质磷酸化的抑制作用。外加纯化钙调素可以引起烟草悬浮培养细胞细胞质蛋白质磷酸化的活性增强,并且这种增强作用具有时间(高峰为70min)与剂量(最适为CaM10^-7mmol/L)依赖性。CaM引起的细胞质蛋白质磷酸化变化与红光所引起的细胞质蛋白质磷酸化变化在时间进程上是不相同的。 相似文献
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烟草愈伤组织的培养细胞中,当钙离子载体将Ca~(2 )导入细胞时,细胞质流停止.CaM拮抗剂试验表明,高钙使细胞质流停止的效应可能与CaM无关,除W7外的多种CaM拮抗剂都明显而且可逆地抑制细胞质流。酶联免疫吸附分析(ELISA)检出培养细胞中存在有CaM。间接酶标免疫组织化学分析进一步证明CaM存在于胞质条纹中。 相似文献
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用液体闪烁计数法研究了细胞外钙调素对烟草悬浮培养细胞质蛋白质磷酸化的作用。结果表明烟草细胞细胞质蛋白质磷酸化活性在细胞培养过程中逐渐增加,达到最高峰后又开始下降。在细胞质蛋白质磷酸化强度高峰时,加入抗CaM血清后,细胞质蛋白质磷酸化活性受到了部分抑制。加抗CaM血清后再补加CaM能够部分解除抗CaM血清对细胞质部分与细胞核部分蛋白质磷酸化的抑制作用。外加纯化钙调素可以引起烟草悬浮培养细胞细胞质蛋白质磷酸化的活性增强,并且这种增强作用具有时间(高峰为70min)与剂量(最适为CaM10-7mmol/L)依赖性。CaM引起的细胞质蛋白质磷酸化变化与红光所引起的细胞质蛋白质磷酸化变化在时间进程上是不相同的。 相似文献
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对不同抗病性的大麦近等基因系受白粉病菌侵染诱导后的钙调素(CaM)变化进行了免疫细胞化学研究。结果表明,钙调素普遍存在于各种不同类型的细胞中,代谢活跃的细胞中CaM标记密度相对较高;CaM分布于细胞核、细胞壁、叶绿体等细胞器中,其中细胞核标记密度最高。在健康叶片中,感病品系Ingrid伴胞中CaM的标记密度明显高于抗病品系mlo—3,而其他细胞中CaM标记密度没有明显差别。病原菌接种后,各种细胞的CaM标记密度均呈现一定程度的上升,但Ingrid上升幅度相对较大。在叶肉细胞中,mlo-3细胞核中CaM增加最明显。并对叶肉细胞和伴胞中CaM的变化进行了讨论。 相似文献
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钙调素拮抗剂的研究动态 总被引:3,自引:0,他引:3
胡卓逸 《生物化学与生物物理进展》1992,19(6):427-431
从钙、钙调素的功能论及钙桔抗剂和钙调素拮抗剂的概念.并着重叙述了国内外钙调素拮抗剂研究中的问题和开发动态。 相似文献
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细胞外钙调素——一种植物中的多肽信使? 总被引:2,自引:0,他引:2
钙调素历来被认为是细胞内钙信号的多功能受体蛋白,国内外10多年的研究已证实,它普遍存在于人、动物细胞外与植物质外体.我们的工作证明了钙调素不仅普遍存在于植物细胞外,而且在胞外位点具有促进悬浮培养细胞及其原生质体的增殖、调节花粉萌发与伸长和促进rbc小亚基基因的光不依赖性表达等多种重要生物学功能.在花粉体系中,还证明了胞外钙调素具有跨膜与胞外信号转导机制,其中包括异三聚体G蛋白、PLC/IP3/IP3R和胞内钙信号等组分的参与.因此,认为细胞外钙调素可能是植物中的一种多肽信使,这对传统上认为植物中不存在进行胞间通讯的多肽信使的观点,提出了新的质疑. 相似文献
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利用胶体金标记技术制备了具有生物活性的植物CaM-BSA-gold探针,并用此探针建立了白芷愈伤组织培养细胞胞外钙调素结合蛋白(CaMBPs)的透射电镜标记方法。标记结果显示,在1mmol/L Ca~(2 )存在下,用EGTA洗涤过的白芷愈伤组织培养细胞壁表面有金颗粒分布,而分别在含有EGTA、TFP、过量未标记的CaM、CaM抗体存在的情况下,用金标CaM探针进行标记.以及用金标羊抗兔抗体替代金标CaM探针进行标记的各对照组,细胞壁表面金颗粒则消失,说明白芷愈伤组织培养细胞壁表面存在着CaM结合位点或CaMBPs。 相似文献
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利用番茄(Lycopersicum esculentum Mill.)县浮培养细胞为材料,以^32P标记的寡核苷酸(40bp)为探针检测了细胞外钙调素对番茄细胞rbcS-3A及rbcS-3C基因表达的影响。当向暗中培养的番茄悬浮细胞(第7天)中加入外源纯化钙调素(10^-7mol/L)并处理24h后,rbcB-3A基因的表达明显增加,而相同深度的S-100蛋白和BSA则没有作用。加入外源钙调素(1 相似文献
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采用GUS标记技术研究钙调素在转基因烟草中的分布 总被引:1,自引:0,他引:1
为了监测钙调素 (Ca M)在植物细胞内的分布并探索其生物学功能 ,将水稻 Ca M和 GU S融合基因 (cam.gus)分别置于 35 S启动子和花粉特异启动子 L AT5 2 - 7控制下 ,构建出载体 p MD/ Ca M.GU S和 p BI/ L AT.Ca M.GU S,转化烟草 (N icotiana tobacum cv.SR ) ,GU S染色结果显示 ,Ca M.GU S融合蛋白广泛分布于植物根、茎、叶等组织 ,根尖生长点细胞、根毛细胞、表皮毛细胞、气孔保卫细胞、维管束细胞的细胞质中融合蛋白含量较多。花粉粒中也分布着 Ca M,并在萌发沟处表现出较高的浓度。保卫细胞和表皮毛细胞中 Ca M分布在相邻细胞连接处细胞模内侧 ,呈现出极性分布。研究结果表明 ,细胞内 Ca M的不均匀分布可能与细胞功能相关。 相似文献
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利用番茄 (LycopersicumesculentumMill.)悬浮培养细胞为材料 ,以3 2 P标记的寡核苷酸 (40bp)为探针检测了细胞外钙调素对番茄细胞rbcS_3A及rbcS_3C基因表达的影响。当向暗中培养的番茄悬浮细胞 (第 7天 )中加入外源纯化钙调素 (10 -7mol/L)并处理 2 4h后 ,rbcS_3A基因的表达明显增加 ,而相同浓度的S_10 0蛋白和BSA则没有作用。加入外源钙调素 (10 -7mol/L)对rbcS_3C基因的表达没有影响。上述结果表明细胞外钙调素对暗中培养的番茄rbcS基因的表达有调控作用 ,并且这种调控作用具有亚型特异性 ,即对番茄rbcS_3A基因的表达有诱导作用 ,而对番茄rbcS_3C基因的表达没有作用。 相似文献
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以拟南芥悬浮培养细胞为实验体系,借助外源荧光及同位素标记钙调素,研究结果表明外源钙调素不能被主动内吞入细胞内,而是主要以完整分子形式结合在细胞外表面;外源纯化钙调素可促进正向型质膜囊泡中的鸟苷酸三磷酸水解酶活性升高,也可引起拟南芥悬浮细胞质游离钙离子浓度的特异升高,表明外源钙调素可能通过细胞表面位点跨膜信号转换为细胞内信号,从而调节生物学活性。 相似文献
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玉米根尖细胞内钙调素的胶体金免疫电镜定位 总被引:3,自引:0,他引:3
钙调素(Calmodulin,简称CaM)抗体是研究CaM的特异性生物探针,常被用来研究CaM的定量和分布.CaM分布的研究不仅对揭示细胞内CaM的作用位点有重要意义,而且还可深入探讨CaM的功能. 相似文献
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华山姜中钙调素基因的克隆及其RNA原位杂交 总被引:2,自引:1,他引:1
本文报道了华山姜中钙调素cDNA的核苷酸序列以及由此推导的氨基酸序列。并用原化杂交的方法检测其在花器官中的时间表达模式。用[^32P]d-CTP标记的小草蔻-Alpinia hainanensis AGAMOUS(AG)cDNA的MADS-domain作为探针筛选华山姜的cDNA文库.得到一个钙调素蛋白相关克隆.命名为AoCAM。华山姜钙调素AoCAM的cDNA全长518bp.有一个包含149个氨基酸的开放读码框.编码区起始于第54个核苷酸,终止于第501个核苷酸。AoCAM与拟南芥、小麦、大豆、矮牵牛、玉米的钙调素氨基酸序列比较同源性高达95%。RNA原位杂交表明钙凋素基因和花瓣、雄蕊、雌蕊细胞中大量表达。钙调素基因的表达强度随不同的发育阶段而变化:花发育早期在花的各器官中部表达强烈,以后逐渐减弱并向特定部位集中.如花粉囊、唇瓣、花柱和胚珠等分生能力较强的细胞中表达较强。 相似文献
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